Kaempferol soulaje domaj LD-mitokondriyo pa ankouraje otofaji: Enplikasyon nan maladi Parkinson Pati 1

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

Résumé:Prèv émergentes endike ke depo inatandi ti gout lipid (LD) ak peroksidasyon ka akselere estrès òganèl epi li jwe yon wòl enpòtan nan patojèn nan maladi neurodegenerative (NDDs).Nan etid anvan nou an, nou konfime ke kaempferol (Ka), yon ti molekil flavonoid natirèl. , ekspoze efè neuroprotective sou sourit ak LPS-induit maladi Parkinson la (PD). Anplis de sa, etid anvan yo te montre ke otofaji jwe yon wòl enpòtan nan règleman an nan depo selilè LD. Nan etid aktyèl la, nou te montre ke Ka pwoteje kont TH plis pèt newòn ak defisi konpòtman nan sourit PD MPTP / p-induit, akonpaye pa estrès oksidatif lipid redwi nan substantia nigra pars compacta (SNpc) .Nan selil newòn kiltive, Ka ekspoze. yon seri konsantrasyon relativman an sekirite ak siyifikativman siprime akimilasyon LD ak apoptoz selilè pwovoke pa MPP plis. Pli lwen etid endike ke efè pwoteksyon Ka a te depann sou otofaji, espesyalman lipofaji. Kritikman, Ka ankouraje otofaji medyatè degradasyon LD nan lizozòm, ki Lè sa a, soulaje depozisyon lipid ak peroksidasyon ak domaj mitokondriyo ki kapab lakòz, kidonk diminye lanmò newòn. Anplis de sa, AAV-shAtg5-medyatè Atg5 knockdown aboli efè neropwotektif Ka kont oksidasyon lipid nan sourit PD. Travay sa a demontre ke Ka anpeche koripsyon newòn dopaminèrjik nan PD atravè anpèchman nan domaj mitokondriyo peroksidasyon lipid-medyatè pa fè pwomosyon lèv-otofaji epi li bay yon potansyèl nouvo estrateji terapetik pou PD ak NDD ki gen rapò.

Tanpri klike la a pou w konnen plis

1. Entwodiksyon

Maladi Parkinson (PD) se yon maladi neurodegenerative komen (NDD) ki patolojikman karakterize pa pèt pwogresif newòn dopaminèjik (DA) nan substantia nigra pars compacta (SNpc)[]. Malgre ke etyoloji egzak la ak kou natirèl maladi sa a poko klarifye nèt, anpil pwosesis ak malfonksyònman sistèm nan nivo, ki gen ladan fonksyon mitokondriyo, omeyostaz dopamine, neroenflamasyon, ak otofaji, yo te enplike nan patojèn nan PD [1, 2]. Dènye rapò te revele ke lipotoksisite ki gen rapò ak ti gout lipid (LD) ta ka patisipe nan patoloji PD [3,4]. LD yo se òganèl trè dinamik ki sòti nan manbràn retikul endoplasmik (ER) epi nòmalman sèvi kòm sit entraselilè nan depo net lipid [5]. Dènyèman te montre LD yo jwe yon wòl pi laj pase depo asid gra (FA) epi patisipe nan anpil maladi. Pou egzanp, selil myeloid, ki gen ladan macrophages, leukocytes, ak eozinofil, fòme LD an repons a enflamasyon ak estrès, ak LD yo se sit pwodiksyon ak depo cytokine enflamatwa epi yo plis patisipe nan prezantasyon antijèn ak clearance patojèn [6]. Sa ki enpòtan, nan ateroskleroz, selil kim LD ki rich yo te demontre yo dwe danjere nan tout etap maladi a [7].

Cistanche ka ede amelyore iminite

Sepandan, LD yo pa te etidye anpil nan sistèm nève santral la (CNS), ak kèk papye rapòte prezans histolojik nan LD nan tisi nan sèvo imen [8,9]. Menm si sa, LD yo ka gen fonksyon enpòtan nan sèvo a, kòm etid resan konfime ke LDs total nan glia akselere neurodegeneration nan yon modèl Drosophila [10]. Yo te rapòte dènyèman ke nan sourit, lwil oliv wouj O-pozitif lipid-chaje selil, ki gen ladan newòn, glial fibrillary asid pwoteyin (GFAP) plis astwosit ak ionize kalsyòm-obligatwa molekil adaptè -1 (IBA-1 ) microglia, yo prezan nan anpil rejyon nan sèvo epi yo montre yo patisipe nan pwosesis ki asosye ak laj [11]. Travay anvan nou an te demontre tou ogmante akimilasyon LD nan sèvo a nan yon modèl sourit PD [12]. Ansanm, etid sa yo sijere ke LD yo ka patisipe nan patojèn nan PD, osi byen ke lòt NDDs.

Nòmalman, LDs entraselilè yo degrade nan lizozòm epi yo delivre FAs nan mitokondri pou konsomasyon yo kòm yon sous enèji altènatif pandan peryòd rediksyon eleman nitritif [13]. Sepandan, newòn yo gen yon kapasite ki ba pou konsomasyon mitokondriyo FA pou pwodiksyon enèji [14]. Karakteristik sa a fè newòn yo patikilyèman sansib nan akimilasyon LD ak peroksidasyon. Anplis de sa, akimilasyon nan LDs amelyore to a oksidasyon FA ak enpoze presyon ki pèsistan sou chèn transpò elèktron mitokondriyo a, ki ogmante pwodiksyon espès oksijèn reyaktif (ROS) pa konplèks chèn transpò elektwon Iand II [15] pou anplifye estrès oksidatif. Surcharge lipid tou mennen nan pwodiksyon ROS pa sous ekstramitokondriyo tankou nikotinamid adenine dinucleotide fosfat (NADPH) oksidaz ak lòt anzim oksidatif. Konbine ak ekspresyon diminye nan anzim antioksidan ak kapasite ki ba pou konsomasyon FA nan newòn, akimilasyon LD medyatè estrès oksidatif epi li ka mennen plis nan domaj mitokondriyo, malfonksyònman lizozomal, otofaji defo, ak aktivasyon an nan repons enflamatwa [16,17]. Sòf si LD yo akimile yo ka anpeche oswa retire, newòn trè aktif sibi fizyoloji, ki bay monte nan neurodegeneration [17]. Prèv endike ke pwosesis katabolik lizozom ki te medyatè yo rele otofaji jwe yon wòl esansyèl nan kenbe omeyostazi LD selilè nan tisi miltip [17,18]. An detay, LD yo ka selektivman sekrete nan autophagosomes epi delivre nan lizozom pou degradasyon pa lipas asid lizozomal, yon pwosesis ke yo rekonèt espesyalman kòm lipofaji [19]. Se poutèt sa, vize LD yo ak chemen yo retire otofaj yo ta ka reprezante yon apwòch roman nan jere neurodegeneration.

Etid la nan pwodwi natirèl ak ajan dyetetik kòm sous pou tretman potansyèl NDD ak estrateji te genyen yon enterè menmen nan dènye ane yo [20]. Kaempferol (Ka) se yon ti molekil polifenolik natirèl ki ka jwenn nan yon kantite remèd fèy Chinwa ak sous dyetetik [21]. Yo te rapòte ke Ka fè egzèsis efè anti-bakteri, anti-aje, ak imunomodulatwa, osi byen ke aktivite antioksidan ak neuroprotective [20,22,23]. Précédemment, Ka yo te rapòte yo anpeche enflamasyon nan selil microglial BV2 nan vitro [24] ak ogmante rezistans nan newòn DA nan neroenflamasyon nan vivo [25]. Sepandan, efè Ka sou LD nan PD poko te envestige.

Bay enpòtans LD yo ak koneksyon entim ant LDs, mitokondri, ak otofaji [16], ki tout patisipe nan PD, nou ipotèz ke Ka anpeche peroksidasyon LD ak anpeche DA neurodegeneration nan PD. Nan etid la prezan, nou demontre ke Ka siyifikativman pwoteje kont neurodegeneration nan yon modèl murin PD pa anpeche akimilasyon LD. Pli lwen etid revele ke Ka deklanche otofaji ak redwi akimilasyon nan LDs oksidize soulaje malfonksyònman mitokondriyo ak pwodiksyon mitokondriyo ROS (mtROS), kidonk anpeche lanmò apoptotik newòn. Konklizyon yo jwenn nan etid sa a ka ede dirije desizyon klinik konsènan itilizasyon molekil natirèl Ka a nan NDD tankou PD.

2. Materyèl ak metòd

2.1. Bèt eksperimantal

Sourit C57BL/6J (gason, 4-mwa) yo te jwenn nan Nanjing Medical University Animal Core (Nanjing). Sourit yo te kenbe ak elve nan Sant Resous Animal nan Fakilte Medsin, Nanjing Medical University ak nan etablisman bèt nan Nanjing Drum Tower Hospital. Sourit yo lib pou jwenn manje ak dlo nan yon chanm ki gen yon tanperati anbyen 22 degre ± 2 degre ak yon sik limyè/fè nwa nan 12:12 h. Tout pwosedi bèt yo te fèt an akò strik ak gid Gid Enstiti Nasyonal Sante pou swen ak itilizasyon bèt laboratwa yo.

2.2. Reyaktif

MPTP (M0896),3-MA (M9281), penicillin-streptomycin (V900929), sodium pentobarbital, and probenecid were purchased from Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Kaempferol (HPLC>95%)for in vivo treatment was purchased from Nanjing Jingzhu Biotechnology Co., Ltd (Nanjing, China), kaempferol(HPLC>99.0 pousan ,96,353)pou eksperyans in vitro yo te jwenn nan Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). BODIPY 493/503 (D3922), BODIPY 581/591 C11 (D3861), DHE (D11347) yo te achte nan men Thermo Fisher Scientific. Pou eksperyans bèt, Ka te fonn nan yon solisyon 10 pousan DMSO nan 16 pousan SBE- -CD nan saline esteril. Pou eksperyans selil, Ka te prepare nan DMSO (Sigma-Aldrich) ak PBS (konsantrasyon final DMSO se 0.01 pousan), pH 7.4.

2.3. Endiksyon ak tretman metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) - pwovoke PD modèl sourit

Pou evalye efè Ka nan modèl PD MPTP/p-toksisite, sourit (gason, ki gen laj 4-5 mwa) yo te owaza divize an gwoup trete saline, gwoup trete MPTP, MPTP plis ka trete. gwoup, ak Ka pou kont li trete gwoup. Nan gwoup MPTP-trete, sourit yo te resevwa MPTP kwonik administrasyon ak yon pwotokòl ki sanble ak sa ki te dekri deja [26]: MPTP te fonn nan saline epi yo te enjekte anba lar nan 25 mg / kg ki te swiv pa 250 mg / kg probenecid (fonn nan sulfoksid dimethyl) piki intraperitoneally (ip) nan entèval 1 èdtan chak 3.5 jou sou yon peryòd de 5 semèn. Sourit kontwòl yo te resevwa piki saline ak probenecid. Nan gwoup la MPTP plis Ka-trete, sourit te resevwa Ka (50 mg/kg, yon sèl piki/jou pandan eksperyans, Jingzhu Biotechnologie, Nanjing, Lachin) intraperitoneally (.p.) chak jou 3d anvan tretman ak MPTP ak plis pase 5 la. Semèn piki MPTP. Yon semèn apre dènye piki MPTP, sourit yo te sibi tès konpòtman avèg pou gwoup yo. Apre, tout sourit yo te anestezi ak 40 mg / kg sodyòm pentobarbital ak sakrifye pou deteksyon pwoteyin nan sèvo ak imuno-istochimi oswa analiz qPCR.

2.4. Operasyon estereyotaksik in vivo ak tretman eksperimantal

Operasyon estereotaksik anba anestezi pentobarbital sodyòm (40 mg/kg, ip) te fèt jan sa dekri [25]. Sourit Atg5 ak kontwòl shRNA te transfekte ak vektè anbalaj (AAV-U6-CMV-shR-NA-EGFP) pou jenere AAV. Pou mikro-enjeksyon, sourit anestezi yo mete nan yon aparèy estereyotaksik. Yo te enjekte ak 1μLAAV a pa elektwòd vè ki vize DG(AP:-0.3 mm; ML:±0.13 mm; DV:{-0.45 mm) nan yon vitès. nan 0.25 μL / min. Lè sa a, zegwi a te kenbe pou plis 2-min.2 semèn apre viris microinjection, sourit yo te sibi MPTP-induit PD modèl kondiksyon ak (oswa) Ka tretman.

Atg5 shRNA te jwenn nan Hanbio Biotechnology (Shanghai, Lachin) Co., Ltd. Pou silans Atg5 la, yo te montre primè yo nan Tablo Siplemantè 1.

2.5. Analiz konpòtman

Yon semèn apre piki final la nan MPTP oswa saline, tès la rotarod ak tès poto yo te fèt jan sa dekri anvan [27]. Pou tès rotarod la, sourit yo te aklimate ak rotarod la nan de esè (6 min ak yon vitès akselere de 12-20 rpm) pou chak jou pandan 2 jou youn apre lòt anvan yo kòmanse eksperyans la. Lè sa a, sourit yo te teste nan 20 rpm pou 300 s pou lòt 3 jou youn apre lòt. Latansi a tonbe te anrejistre lè l sèvi avèk Rotarod Analiz System (Jiliang, Shanghai, Lachin). Pou tès poto a, sourit yo te mete tèt anlè sou tèt yon poto an bwa vètikal (ki graj sifas, wotè 50 cm, dyamèt 1 cm). Tout sourit yo te abitye ak aparèy la 2 jou anvan tès la ak Lè sa a, teste pou twa fwa nan twazyèm jou a. Tan total la (T-total, jiskaske sourit la rive nan etaj la ak kat grif li yo) ak tan an vire (T-vire, pou sourit la vire tèt nèt anba) yo te anrejistre. Eksperyans lan te avèg nan gwoup sourit pou chak tès konpòtman epi yo te fè tès la twa fwa.

2.6. Koleksyon echantiyon nan sèvo

Apre final tès konpòtman yo, sourit yo te anestezi ak pentobarbital sodyòm (40 mg/kg, ip). Pou qPCR, Western blotting, ak segondè-pèfòmans likid chromatography (HPLC) analiz, tout sèvo yo te rapidman ekstrè soti nan bèt yo Lè sa a, midbrain la ak tisi striatum yo te byen vit diseke, pre-jele pa nitwojèn likid. Tout echantiyon yo te estoke nan -80 degre jiskaske analiz yo.

Pou analiz imunohistochimik, sourit yo te perfused trans-cardially ak 4 pousan paraformaldehyde (PFA). Sèvo yo te ekstrè, post-fiks, dezidrate, entegre nan OCT (Tissue-Tek), ak seksyon seri nan sèvo yo te krioseksyone (30 um pou chak tranch) atravè chak strat antye ak mitan sèvo lè l sèvi avèk yon mikrotom jele (Leica CM1950, Nussloch, Almay). ). Tout seksyon yo te kolekte nan sis seri separe epi yo te estoke tranch nan sèvo nan 50 pousan gliserin epi yo te jele nan -20 degre jiskaske analiz.

Pou TEM, sourit yo te melanje ak 2.5 pousan glutaraldehyde ak 2 pousan paraformaldehyde jan sa dekri 【12】. Yon ti pòsyon （<1 mm³）="" of="" the="" mesencephalon="" was="" carefully="" sectioned="" and="" incubated="" in="" the="" same="" fixative="" for="" 2="" h="" at="" 4°c.="" specimens="" were="" postfixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide,="" stained="" in="" aqueous="" uranyl="" acetate,="" and="" then="" dehydrated="" and="" embedded="" in="" epoxy="" resin.="" ultrathin="" sections="" were="" stained="" using="" lead="" citrate="" and="" examined="" with="" a="" transmission="" electron="" microscope(jem-1010,="" tokyo,="">

2.6. Analiz imunohistochimik

Tranch nan sèvo yo te rense nan PBS ki te swiv pa 3 pousan H2O2 pou 10 min Lè sa a, enkubasyon ak 0.3 pousan Triton X{-100 nan PBS konplete ak 5 pousan BSA pou 1 èdtan. Apre sa, glisad yo te enkube ak antikò prensipal yo nan 4 degre lannwit lan nan PBS ki gen 5 pousan BSA nan 4 degre lannwit lan, Lè sa a, lave ak enkubate nan antikò segondè pou 1 èdtan nan tanperati chanm, ki te swiv pa enkubasyon ak diaminobenzidine (DAB) oswa aliye nan. DAPI (Life Technologies, Cat P36931) kòm tach imunofluoresan pou 5 min. Pou Nisslstaing, glisad yo te fizyone nan kresyl vyolèt (CV) solisyon (0.1 g kresyl vyolèt, 99 ml H2O ak 1 pousan asid acetic 1 ml) pou 30 min nan tanperati chanm Lè sa a, dezidrate ak alkòl ak ksilèn. Yo te obsève imaj epi yo te pran foto anba yon mikwoskòp Olympus BX52 (Olympus America Inc., Melville, NY, Etazini). Kantite total newòn TH-pozitif ak Nissl-pozitif nan SNpc la te jwenn serolojik lè w itilize metòd fraksyonè optik ak lojisyèl MicroBrightField Stereo-Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, USA).

2.7. High-pèfòmans likid chromatography (HPLC) analiz

Echantiyon striatal sourit yo te omojènize ak {{0}}.1 M asid pèklorik (1 mg tisi nan 100 μL asid pèklorik) ak 0.1 mM EDTA, trete pa

2.17. Sitometri koule

Selil yo te dijere epi rense ak D-hank a Lè sa a, tache ak Annexin V-FITC （5 ul dilye nan 500ul PBS）/PI（0.1 ul dilye nan 500 ul PBS) twous apoptoz (CA1020, Solarbio, Beijing, Chian) selon pwotokòl manifakti a. Apre, selil apoptotik yo te analize lè l sèvi avèk sitometri koule (guava easyCyteTM 8, Millipore, USA). Mitokondriyo ROS ak mezi potansyèl manbràn mitokondriyo yo te fèt jan yo te pibliye 【12】.Selil SH-SY5Y yo te tache ak MitoSOX （2.5 μM, Invitrogen, USA） oswa ak JCl（10 ug/ml, T-3168, Invitrogen, USA. ） nan 37 ·C pou 30 min. Apre yo fin lave ak PBS de fwa, selil yo te resuspend nan PBS frèt ki gen 1 pousan FBS pou analiz sitometrik koule. Done yo te analize ak lojisyèl FCS Express (Guava Easy CyteTM8, Millipore, Hayward, CA, USA).

2.18. Esay respirasyon Seahorse

Fonksyon respiratwa mitokondriyo nan selil SH-SY5Y vivan yo te mezire lè l sèvi avèk analizeur Seahorse ekstraselilè (XFe96) (Agi-lent, Santa Clara, USA) atravè chanjman nan pousantaj konsomasyon oksijèn (OCR). Selil SH-SY5Y ki simen nan 3 × 103 selil/byen yo te pèmèt yo konfòme yo ak plak kilti selil Seahorse yo epi yo rive nan apeprè 80 pousan konfluyans nan moman eksperyans la. Nan denmen, selil yo te pretrete ak Ka epi yo te ekspoze a MPP plis pou yon lòt 24 èdtan. OCR te detekte nan kondisyon fondamantal ki te swiv pa adisyon sekans nan 1 μM oligomycin, 1 μM FCCP, osi byen ke 1 μM rotenone ak antimycin A.

2.19. Analiz estatistik

Done yo te prezante kòm mwayen ± SEM. Siyifikasyon diferans lan te detèmine pa t-tès Elèv la, analiz De-fason nan divèjans, oswa analiz yon sèl-fason nan divèjans (ANOVA) ki te swiv pa tès post hoc Tukey la. Diferans lan te konsidere kòm enpòtan nan P<>

3. Rezilta yo

Rezilta 1. Ka retabli malfonksyònman motè ak ogmante nivo dopamine nan striatum sourit modèl MPTP/p PD.

Pou envestige efè neuroprotective patojèn Kaon PD, 4-mwa sourit gason C57BL/6 yo te sou fòm piki ak neurotoxin MPTP pou etabli modèl MPTP/p PD epi yo te trete ak Ka (Fig. la). Apre endiksyon modèl, tès rotarod ak tès poto yo te itilize pou evalye pèfòmans motè ak konpòtman sourit nan diferan gwoup yo. Jan yo montre, tan an pèfòmans rotarod te siyifikativman redwi nan sourit MPTP-trete, ak efè sa a te anpeche pa Ka (Fig.1b). Ka tou retabli defisi konpòtman ki pwovoke pa MPTP, jan sa endike nan rediksyon yo nan tan an vire ak tan total nan tès la poto (Fig.lc ak d), san yo pa afekte pwa kò yo nan sourit yo (Fig.1e). Anplis de sa, analiz HPLC te montre ke nivo dopamine nan striatum a te siyifikativman diminye nan sourit MPTP / p-challenged, e nivo sa a te retabli pa tretman Ka (Fig. 1f). Ka tretman tou soulaje MPTP / p-induit rediksyon nan dihydroxy-phenyl asid acetic (DOPAC, yon metabolit nan dopamine) nivo nan striatum la (Fig.1g). Rezilta sa yo sijere ke Ka retabli malfonksyònman motè ak ogmante nivo dopamine nan striatum a nan sourit PD MPTP-induit.

Rezilta 2. Ka soulaje pèt newòn DA nan SNpc sourit modèl MPTP/p PD.

Apre sa, pou evalye plis efè neuroprotective Kaon MPTP/p-induced DA newòn andikap, nou egzamine tyrosine hydroxylase (THD plis newòn nan murin SNpc la pa imunostaining. Jan yo montre nan Fig. 2a ak b, MPTP/p pwovoke yon rediksyon enpòtan. nan kantite TH plis newòn, ki te soulaje pa tretman Ka. Anplis de sa, konte estereolojik nan total newòn nan SNpc a, jan Nissl defini.

Fig. 1. Ka tretman soulaje malfonksyònman motè ak ogmante nivo dopamine nan striatum nan sourit modèl MPTP / p PD.

(a) Dyagram chema konsepsyon eksperimantal la. (b) Tan sou baton an te mezire pou tès rotarod la sou twa jou youn apre lòt. (cd) Yo te anrejistre tan yo te pran pou vire (tan vire) epi desann yon poto (tan k ap monte) pou tès poto a. (e)Pwa kò sourit yo te mezire nan fen etid la, (fg) Dopamine (DA) ak asid dihydroxy-phenyl acetic (DOPAC) nan striatum la te analize pa segondè-pèfòmans likid chromatografi. Done yo eksprime kòm mwayen ± SEM.n =9-10 pou chak gwoup nan (b, C, d); n=6-8 pou chak gwoup nan(f,g).ns, pa enpòtan,*P<><><0.001, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" mptp,="" 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine;="" ka,="">

tach, verifye ke pèt la nan selil THt te reflete lanmò selilè men se pa downregulation nan ekspresyon TH epi li te montre ke tretman Ka retabli diminisyon nan kantite newòn Nissl-pozitif nan SNpc nan sourit MPTP-trete soti nan 43.3 pousan a 25.4 pousan ( Fig.2c ak d) .Anplis de sa, Ka siyifikativman amelyore rediksyon an MPTP-induit nan ekspresyon pwoteyin TH ak DAT, jan yo mezire pa Western blotting (Fig.2e-g). Prèv sa a konfime efè neuroprotective Ka sou modèl sourit PD la.

Rezilta 3. Ka diminye akimilasyon vakuol LD ak estrès oksidatif nan SNpc sourit MPTP/p-trete.

Ogmante prèv te montre patisipasyon LD yo nan NDDs [10], toujou, travay anvan nou an te idantifye ogmante LD nan SNpc nan sourit PD MPTP-induit [12]. LD yo ka fasilman idantifye epi montre estrikti wonn ki ba-dansite ak kontni omojèn amòf [28]. Nòmalman, LD yo ka degrade atravè otofaji pou evite akimilasyon [29]. Pou mennen ankèt sou si wi ou non Ka ka kontwole LD nan PD, akimilasyon LD yo te analize pa mikwoskopi elektwonik transmisyon (TEM) nan SNpc nan kontwòl, MPTP/p, ak MPTP/p plis Ka sourit. Jan yo montre nan travay anvan nou an [12], kantite ak gwosè LD yo te ogmante nan sourit MPTP / p konpare ak kontwòl saline trete (Fig.3a ak b) epi yo te siyifikativman redwi nan sourit Ka-trete (Fig.3c-). e). Anplis, nan sourit Ka-trete yo, LD yo te obsève pi souvan tou pre, fèmen nan, oswa degrade pa otolysosomes, ki te defini kòm granules lipofuscin elèktron-dans. Pli lwen tach histolojik nan TH plis newòn ak BODIPY, yon lank ki espesyalman mete etikèt sou lipid net epi ki souvan itilize pou detekte LDs [30], te montre ke tou de kantite ak gwosè BODIPY plis LDs nan SNpc a te pi wo nan sourit PD pase nan kontwòl. , epi yo te siyifikativman diminye pa tretman Ka (figi 3f-h).

Si LD yo pa ka degrade nan yon fason apwopriye, LD yo akimile ka sibi peroksidasyon ak kontribye nan estrès mitokondriyo ROS-medyatè [4], ki anplifye nerotoksisite ak pwogresyon maladi. Pakonsekan, nou plis egzamine pwofil ekspresyon jèn ki asosye ak pwoteksyon kont toksisite gratis FA (Gpx8), netralize espès oksidatif, radikal superoksid (Sod3) ak oksijene idwojèn (Cat), ak metabolis FA (Acsbg1 ak Dbi) jan yo rapòte [31] , tout nan yo ki te frapan diminye nan SNpc nan sourit MPTP-trete konpare ak kontwòl, ak efè sa yo te amelyore nan Ka-trete sourit PD (Fig. 3i). Menm jan an tou, MPTP/p ogmante nivo ekspresyon mRNA yo

nan subunits NADPH oksidaz tankou Nox1, Nox2, ak Nox4 nan SNpc nan sourit MPTP / p, ki te plis blunted pa tretman Ka (Fig.3j). Ansanm, done sa yo sijere ke Ka soulaje MPTP / p-induit akimilasyon LD, peroksidasyon, ak estrès ROS-medyatè.

Atik sa a soti nan lis kontni ki disponib nan paj dakèy jounal ScienceDirect Redox Biology: www.elsevier.com/locate/redox