Konplèks Manganèz (II) ankouraje iminite antitumoral atravè domaj ADN ki agrave epi aktive chemen CGAS-STING.

Aktive siklik GMP-AMP synthase-stimulator nan chemen an entèferon jèn (cGAS-STING) se yon estrateji imunoterapi pwomèt pou tretman kansè. Konplèks Manganèz(II) MnPC ak MnPVA (P=1, 10-phenanthroline, C=klò, ak VA=asid valproik) yo te jwenn aktive chemen cGAS-STING. . Konplèks yo pa sèlman domaje ADN, men tou, anpeche histon deacetylases (HDACs) ak polyadenosine diphosphate-ribose polymerase (PARP) pou anpeche reparasyon domaj ADN, kidonk ankouraje flit fragman ADN nan sitoplasm. Fragman ADN yo te aktive chemen cGAS-STING, ki te inisye yon repons iminitè natirèl ak kominikasyon nan de-fason ant selil timè yo ak selil iminitè vwazen yo. Aktive cGAS-STING la ogmante plis pwodiksyon entèferon tip I ak sekresyon sitokin pro-enflamatwa (TNF-a ak IL-6), ranfòse enfiltrasyon timè nan selil dendritik ak makrofaj, osi byen ke eksitan selil T sitotoksik. pou touye selil kansè nan vitro ak nan vivo. Akòz kapasite amelyore ADN ki domaje a, MnPC ak MnPVA te montre pi pisan imunokonpetans ak aktivite anti-tumeur pase iyon Mn2+, kidonk demontre gwo potansyèl kòm ajan chemoimmunotherapeutic pou tretman kansè.

Benefis cistanche tubulosa-Antitumor

Entwodiksyon

Rekirans, metastaz, ak rezistans dwòg timè yo poze gwo defi pou dwòg konvansyonèl antitumoral yo.1 Iminoterapi se yon estrateji efikas pou elimine selil timè yo lè yo itilize oswa ranfòse sistèm iminitè pasyan yo.2,3 Nan deseni ki sot pase a, plizyè imunoterapi kansè ki gen ladan yo. Yo te aplike inibitè pòs iminitè yo, viris onkolitik, ak selil reseptè antijèn chimerik T (CAR-T) yo te aplike nan pratik klinik pou amelyore iminite adaptive antitumoral. sib antijèn yo souvan mine efikasite imunoterapi.7,8 Iminite adaptif antitumoral la depann anpil de iminite natirèl ki solid.8 Anplis modle ak soutni iminite adaptive antitumoral la, sistèm iminitè natirèl la kòm baryè rès la pou defann selil lame yo pran responsablite prensipal la. rekonesans selil timè yo.9 Malerezman, pandan pwogresyon timè yo, selil malfezan yo souvan evade siveyans iminitè a epi finalman devlope nan timè "frèt". repons a timè ak amelyore efè a terapetik nan imunoterapi. Siklik GMP-AMP sintetaz-stimulateur nan jèn entèferon (cGAS-STING) konstitye eleman enpòtan anpil nan iminite natirèl, ki te parèt kòm objektif pwomèt pou iminoterapi kansè.12,13 Aktivasyon nan chemen an cGAS-STING deklanche yon seri de en. evènman siyal, ki gen ladan eksitasyon ak rekritman nan TANK-obligatwa kinaz 1 (TBK1) ak entèferon faktè regilasyon 3 (IRF3), ki pwovoke lage ak sekresyon nan entèferon tip I (IFN-Is) ak faktè proinflammatory IL-6 ak TNF-a. 13,14 IFN yo imedyatman ankouraje spirasyon ak migrasyon selil dendritik (DCs), amelyore efè cytotoxik nan selil asasen natirèl (NK), ak selil T espesifik timè kwa-premye yo, konsa orchestre iminite natirèl la ak adaptasyon pou kontwole konpòtman an. nan timè agresif yo.15,16 Kounye a, pwosesis terapetik ti molekil agonist oral MSA-2,17 agonist natirèl dinukleotid siklik (CDNs),18 ak kèk nano-sistèm19-23 yo te teste nan modèl timè murin yo. entèvni nan chemen cGAS-STING la. Manganèz (Mn) se yon eleman tras nitrisyonèl ki jwe yon wòl enpòtan nan anpil pwosesis fizyolojik ki gen ladan repons iminitè anti-tumeur.24,25 Dènyèman, yo te dekouvri iyon Mn2+ pou amelyore sansiblite yon Capteur ADN doub strand (dsDNA). cGAS ak deklanche pwodiksyon yon mesaje segondè cGAMP, kidonk ogmante aktivite STING nan ogmante afinite lyezon cGAMP-STING.12,26 Anplis, iyon Mn2+ endirèkteman anpeche pwogresyon timè pa ankouraje fonksyon CD8+ Selil T atravè pwovoke pwodiksyon IFN nan vivo. 27 Men, administrasyon dirèk nan iyon Mn2+ in vivo pa ka garanti konsantrasyon efikas nan mikroanvironman timè a23 ak twòp iyon Mn{2+ ka pwovoke toksisite sistèm, tankou nerotoksisite irevokabl ak toksisite kadyovaskilè.28 Konplèks Mn yo pi plis. ki estab ak inaktif nan byomolekil akòz efè a abri nan ligand yo e pakonsekan ka soulaje toksisite nan Mn2+ iyon. Sepandan, pa gen okenn konplèks Mn ki te itilize pou aktive chemen cGAS-STING la byen lwen tèlman. Modifikasyon epijenetik revèsibman chanje ekspresyon jèn yo, ki ka kontribye nan inisyasyon ak pwogresyon kansè yo ak repwesyon iminite antitumoral. Nati revèsib modifikasyon epigenetik pèmèt selil malfezan yo retounen nan yon eta nòmal.29,30 Histone deacetylases (HDACs) medyatè asetilasyon pwoteyin, dinamik chromatin, woulman pwoteyin, ak repons domaj ADN. Inibitè HDAC yo se yon klas modulateur epijenetik ki pisan, ak chromatin kòm sib yo, ki aji sou pifò oswa sou tout kalite timè.31 Anpèchman HDAC yo omwen an pati kontribye nan asetilasyon histon, sa ki lakòz fòmasyon chanje ak reparasyon nan kraze ADN doub-strand. DSB),32,33 ki ka kontribye nan aboli rezistans dwòg nan selil kansè yo.34 Estrikti kwomatin rilaks pwovoke pa inhibiteurs HDAC ka ankouraje ajan chimyoterapi pou jwenn aksè nan ADN pi fasil, kidonk agrave domaj ADN,35 ki benefisye pou aktivasyon an. chemen cGAS STING la. Gen kèk inibitè HDAC-tankou asid valproik (VA)-afèkte HDAC klas I ak II (HDAC1/2), ki sansibilize selil kansè yo nan terapi ki domaje ADN.36

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

Polyadenosine diphosphate-ribose polymerases (PARPs) se pwoteyin esansyèl ki enplike nan rezistans kansè nan chimyoterapi. Anzim sa yo enpòtan anpil pou repare kraze ADN sèl-seksyon (SSB),37 epi patisipe nan plizyè pwosesis selilè, tankou apoptoz, repons iminitè, transkripsyon jèn, ak enflamasyon.38–40 Inibitè PARP anpeche reparasyon blesi ADN, ki mennen ale nan anrichisman nan ADN cytosolic, ki se rekonèt pa cGAS aktive chemen an cGAS-STING. 44 Isit la nou rapòte pwopriyete imunostimulan ak antitumoral de konplèks MnII MnPC ak MnPVA. Estrikti chimik ak kristal konplèks yo montre nan Fig. 1. Nan konplèks sa yo, 1,10-phenanthroline (P) se yon entèrkalateur ADN ki pa toksik, ak VA se yon inibitè nan HADCs.31 VA ta ka ankouraje asetilasyon an. nan pwoteyin histon ki konjige ak ADN, amelyore aksè nan ADN nan kwomatin dekontrakte, epi reaktive jèn timè ki andòmi. konplèks yo ak aktivite antiproliferatif pa pwovoke domaj ADN ak eksitan iminite antitumoral. Yon seri de eksperyans te montre ke MnPC ak MnPVA efektivman domaje ADN, aktive chemen an cGAS-STING nan timè ak selil iminitè, ak ogmante sekresyon nan IFN ak sitokin pro-enflamatwa. An patikilye, MnPVA anpeche aktivite HDAC1/2 ak PARP1, kidonk aktive chemen cGAS-STING la pi efikas pase MnPC. Tout rezilta yo te konfime tou de nan vitro ak nan vivo. Dapre sa nou konnen, MnPC ak MnPVA se rès konplèks MnII miltifonksyonèl ki siprime selil timè yo sitou atravè aktive iminite antitumoral atravè chemen cGAS-STING ki inisye domaj ADN.

Fig. 1 Chimik ak estrikti kristal nan MnPC ak MnPVA. Atòm idwojèn yo omisyon pou klè.

Rezilta ak diskisyon

Pwopriyete chimik ak fizik

MnPC ak MnPVA yo te prepare dapre metòd literati45,46 ak konplètman karakterize pa analiz elemantè, spectroskopi IR (figi S1†), sonorite elèktron paramayetik (figi S2,† EPR), ak kristalografi radyografi. Paramèt estrikti kristal ak longè ak ang seleksyone yo prezante nan Tablo S1 ak S2 (gade ESI†). Atòm Mn nan konplèks sa yo montre yon jeyometri oktaedrik defòme ak yon nimewo kowòdone 6. MnPC kristalize nan sistèm kristal monoklinik ak gwoup espas P21/c la; MnII te fòme kat lyezon Mn–N ak de lyezon bidentate 1,{{10}}fenantrolin ak de lyezon Mn–Cl. Longè kosyon Mn–N yo varye ant 2.281 ak 2.369 Å, se sa ki, longè kosyon Mn–N1, Mn–N2, Mn–N3, ak Mn–N4 se 2.369(4), 2.281(3), 2.341(3). ), ak 2.287(3) Å, respektivman, ak ang N1–Mn–N2, N1–Mn–N4, ak N2–Mn–N3 se 71.15(11) degre , 97.86(11) degre , ak 89.00(11) degre , respektivman. Estrikti sa a se yon ti jan diferan de sa ki rapòte pa Abbas et al., 45 kote MnPC kristalize nan sistèm nan kristal triklinik ak gwoup la espas P1. An konsekans, longè ak ang korespondan yo diferan nan ka sa yo. Menm jan ak yon estrikti rapòte,46 MnPVA kristalize nan sistèm kristal monoklinik la ak gwoup espas C2/c la, ki gen yon seri donatè N2O4. MnII kowòdone ak de atòm N ki soti nan 1,10-fenantrolin, ak kat atòm O ki soti nan yon molekil dlo ak de ligand VA, respektivman. Youn nan VA a te reyaji kòm yon ligand monodentate, pandan ke lòt la te yon ligand bidentate. Longè kosyon Mn–N1 ak Mn–N2 se 2.265(19) ak 2.298(2) Å, respektivman, ak sa ki nan Mn–O1, Mn–O2, Mn–O3, ak Mn–O5 se 2.2476(19), 2.260 (2), 2.0639 (18), ak 2.1471 (17) Å, respektivman. Kòm yon fò N, Nchelating ligand, 1,10-phenanthroline estabilize konplèks Mn kont demetalasyon. Estabilite nan MnPC ak MnPVA nan saline fosfat-tanpon (PBS, ak 0.5% v / v DMSO, pH 7.4, ak 37 degre) ak medya kilti selil (ki gen 10% FBS) te envestige pa UV spectroskopi vizib (Fig. S3†) ). Spectre UV ki depann de tan yo montre ke konplèks sa yo estab nan 72 èdtan.

Tablo 1 Valè IC50 (mM) MnPC ak MnPVA kont liy selil diferan nan 72 èdtan, ak MnCl2, VA, CDDP, ak P kòm referans. Done yo montre kòm mwayen ± devyasyon estanda (SD, n=3)

Aktivite antiproliferatif

Aktivite antiproliferatif konpoze yo kont kansè nan tete imen trip-negatif (MDA-MB-231), kansè nan pankreyas imen (PANC-1), kansè imen epatoselilè (HepG2), kansè nan tete sourit (4T1) liy, ak liy selil epitelyal nòmal ren imen (HK-2) yo te evalye pa tès MTT la. MnCl2, VA, cisplatin (CDDP), ak 1, 10-phenanthroline (P) yo te itilize kòm konpoze referans. Demi-maksimòm konsantrasyon inhibition (IC50) nan 72 h yo ki nan lis nan Tablo 1. MnPC ak MnPVA te montre gwo aktivite antiproliferatif nan direksyon tout liy selil kansè yo teste, patikilyèman nan MDA-MB-231 ak PANC-1 selil ki ensansib a CDDP, ki montre apeprè 8- ak 11-fwa pi wo aktivite, respektivman. Aktivite antiproliferatif MnPC ak MnPVA kont HepG2 ak 4T1 sanble ak CDDP. Enteresan, tou de MnPC ak MnPVA te montre yon diminye toksisite nan direksyon pou selil HK-2, ak valè IC50 yo te yon ti kras pi wo pase sa yo ki nan CDDP. Kontrèman, MnCl2, VA, ak P te prèske pa toksik nan liy selil sa yo, ki an akò ak literati a.13,36 Dapre rezilta sa yo, envestigasyon sa yo te konsantre sou aksyon MnPC ak MnPVA sou MDA-MB. -231 selil yo.

Absorption selilè ak domaj ADN

Akimilasyon konplèks yo nan selil MDA-MB-231 an tèm de Mn te mezire pa ko-enkubasyon ICP-MS pou 24 èdtan. Jan yo montre nan Fig. 2A, akimilasyon an swiv yon lòd nan MnPVA> MnPC> MnCl2, kenbe nan liy ak aktivite anti-proliferative yo. ICP-MS nou te detèmine pi lwen Mn ki konekte ak ADN nan selil MDA-MB-231 yo. Jan yo montre nan Fig. 2B, MnPC ak MnPVA montre pi gwo kapasite ADN obligatwa pase MnCl2 petèt akòz pi wo absorption selilè yo. Phosphorylated hisstone g-H2AX se yon makè sansib nan ADN doub-strand breaks (DSBs).47 Pou evalye domaj ADN pwovoke pa konplèks Mn yo, nou detekte ekspresyon gH2AX pa imunoblot. Jan yo montre nan Fig. 2C, MnPC ak MnPVA ogmante ekspresyon g-H2AX nan selil MDA-MB-231 nan 24 èdtan. Li konnen ke konplèks metal nan P yo se entèrkalateur ADN efikas;48,49 sepandan, P pou kont li diman lakòz domaj ADN (Fig. S4†). Ekspresyon g-H2AX nan tisi timè sourit 4T1 ki gen timè yo te envestige tou pa iminitè prezans ak tretman ak chak konpoze (1.3 mg Mn pou chak kg) yon fwa chak 2 jou pandan 16 jou. MnPC ak MnPVA efektivman domaje ADN nan tisi timè a, pandan y ap MnCl2 ak PBS apèn afekte g-H2AX (Fig. S5†). Yo te detèmine dsDNA ki soti nan selil MDA-MB- 231 nan sipènatant mwayen kilti yo lè l sèvi avèk yon tretman ELISA pou twous ak konplèks Mn yo. Jan yo prezante nan Fig. 2D, kontni an nan dsDNA nan mwayen kilti selil MnPC- oswa MnPVA-trete te evidan pi wo pase sa nan lòt gwoup yo. Rezilta yo sijere ke MnPC ak MnPVA ka elve enstabilite ADN jenomik ak nivo ADN sitosolik. Nati domaj ADN yo te premye etidye lè w mezire chanjman fluoresans nan yon sistèm timis ti towo bèf ADN-etidyòm bromur (EB). EB se yon entèrkalateur ki bay yon ogmantasyon siyifikatif nan fluoresans lè mare nan ADN, pandan y ap fluoresans la diminye lè li deplase. nan siyon ADN yo pou ranplase EB ki mare akòz estrikti planè P. Sepandan, entèraksyon an se pa yon lyezon kovalan gaya. Gen kèk konplèks Mn ki ka jenere espès oksijèn reyaktif intraselilè (ROS) ak pwovoke estrès oksidatif,51 e nou pa ka detekte ROS nan selil MDA-MB-231 pa imaj konfokal lè l sèvi avèk 2′,7′-dikloro-fluorescein diacetate ( DCFH-DA) kòm yon sond ROS fluoresans apre ekspoze a konplèks Mn pou 18 èdtan. Jan yo montre nan Fig. 3, MnPC ak MnPVA entansifye entraselilè ROS fluoresans an konparezon ak kontwòl la oswa MnCl2, espesyalman MnPVA, sijere ke yo ka lakòz domaj oksidatif nan ADN selilè. Domaj nan ADN pa sèlman kontribye nan aksyon an touye nan selil kansè yo, men tou stimul iminite antitumoral pa aktive chemen an cGAS-STING.14,52.

Fig. 2 ICPMS detèmine absorption selilè (A) ak ADN-bound Mn (B), ekspresyon makè domaj ADN g-H2AX detèmine pa Western blotting (C), ak dsDNA ekstraselilè detèmine lè l sèvi avèk twous ELISA (D) apre Selil MDA-MB-231 yo te trete ak MnCl2, MnPC, MnPVA, ak VA (6 mM) respektivman pou 24 èdtan.

Arestasyon sik selilè ak apoptoz

Repons domaj ADN selilè (DDR) asosye ak siyal ki mennen nan pwen kontwòl sik selil yo.53 Enpak konplèks Mn sou sik selil MDA-MB-231 selil yo te analize pa simetri low. Jan yo montre nan Figi 4A, MnPC, ak MnPVA yon ti kras ogmante arestasyon faz G1 pandan y ap lakòz yon efondreman konplè nan faz G2 la konpare ak kontwòl la ak MnCl2. Rezilta yo endike ke domaj ADN pwovoke pa MnPC ak MnPVA seryezman bloke etap la pita nan sentèz ADN. Pakonsekan, mekanis antiproliferatif nan MnPC ak MnPVA diferan de sa ki nan MnCl2. Mòd lanmò selil MDA-MB-231 yo te envestige pa sitometri koule apre tretman ak konplèks yo pou 72 èdtan ak tach ak anexin V-FITC ak yòd propidium (PI). Jan yo montre nan Figi 4B ak S7,† an konparezon ak kontwòl la ak MnCl2, pousantaj apoptoz (bonè + an reta) pwovoke pa MnPC ak MnPVA rive nan 84.0% ak 87.4% respektivman. Rezilta yo endike ke MnPC ak MnPVA gen gwo kapasite pro-apoptotik, ki korelasyon byen ak aktivite antitumoral yo.

benefis sipleman cistanche-ogmante iminite

Potansyèl manbràn mitokondriyo

Mitokondri yo se patisipan santral nan iminite natirèl, ak ADN mitokondriyo (mtDNA) rekonèt kòm yon agonist nan sistèm iminitè natirèl la.54 Yo te rapòte ke tou de ADN cytosolic ak mtDNA mare nan reseptè rekonesans modèl ak deklanche chemen an siyal cGAS-STING. 55 Pou eksplore posiblite liberasyon mtDNA nan mitokondri nan prezans MnPC ak MnPVA, nou tcheke entegrite manbràn mitokondriyo a pa imaj konfokal lè l sèvi avèk JC-1 kòm yon sond fluoresan, ki fòme total epi montre fliyoresans wouj nan mitokondri nòmal ak yon DJm segondè, pandan y ap egziste kòm yon monomè epi li bay fluoresans vèt nan moun ki domaje ak DJm ki ba. 56 Jan yo montre nan Fig. 5, MnPC ak MnPVA redwi anpil entansite wouj fluoresans nan selil MDA-MB-231 ki tache ak JC-1. Rapò "vèt (G) ak wouj (R)" fluoresans pou selil trete MnPC ak MnPVA se 4.91 ak 5.66, respektivman, siyifikativman pi wo pase sa ki pou kontwòl (2.35) ak selil trete MnCl2-( 1.75). Obsèvasyon yo sijere ke entegrite nan manbràn mitokondriyo a te domaje pa MnPC ak MnPVA, ki ka fasilite flit la nan mtDNA nan sitosol la deklanche chemen an cCAS-STING.

Fig. 3 D 'konfokal fliyoresan nan ROS ki te pwodwi pa konplèks Mn yo (12 mM) nan selil MDA-MB -231 apre enkubasyon pou 18 èdtan ak tach ak DCFH-DA (10 mM) pou 30 min.

Fig. 4 Arestasyon sik selil selil MDA-MB-231 apre enkubasyon ak diferan konpoze (6 mM) pou 24 èdtan (A), ak analiz apoptotik selil MDA-MB-231 pa sikometri koule apre enkubasyon. ak diferan konpoze (6 mM) pou 72 h (B).

Aktivite ak ekspresyon HDACs

Inibitè HDAC sansibilize selil kansè yo nan terapi ki domaje ADN lè yo chanje estrikti chromatin la ak anpeche reparasyon ADN.33,35 Kòm yon inibitè HDAC klas I, VA selektif vize HDAC1 ak HDAC2 anzim yo, modil domaj ADN siyal pou detwi estabilite jenomik ak anpeche timè. pwopagasyon nan vivo. 31 Enkòporasyon VA nan MnPVA ka ranfòse anpèchman HDAC ak endiksyon DDR pi efikas. Se poutèt sa, nou detèmine efè konplèks Mn sou aktivite total HDAC nan selil MDA-MB-231 apre koinkubasyon pou 48 èdtan. Jan yo montre nan Fig. 6A, MnPVA siyifikativman inibit aktivite HDAC total la, ak aktivite inhibitory yo te apeprè 1.5 fwa pi wo pase sa yo ki nan VA. Nou te etidye plis ekspresyon HDAC1/2 pwoteyin nan selil MDA-MB-231 pa imunoblot. Jan yo montre nan Figi 6B ak C, MnPVA evidamman downregulated ekspresyon HDAC1 ak HDAC2 kòm konpare ak kontwòl la. Malgre ke MnPC inibit aktivite HDAC, li diman enfliyanse ekspresyon HDAC1/2 pwoteyin. San atann, VA kòm yon inibitè HDAC li te ye pa t 'montre anpèchman evidan sou HADC1/2 nan konsantrasyon sa a (6 mM), kidonk mete aksan sou wòl esansyèl nan kowòdinasyon Mn nan entansifye anpèchman nan VA sou HADC. Rezilta yo endike ke MnPVA se yon inibitè efikas nan HDAC1/2, ki ta ankouraje DDR ak deklanche chemen an cGAS-STING, kidonk ankouraje iminite antitumoral. Nou plis detekte ekspresyon HDAC nan tisi timè sourit ki gen timè 4T1 pa imino-fluoresans apre tretman ak chak konpoze. Jan yo montre nan Fig. 6D, MnPVA evidan diminye ekspresyon HDAC1, pandan y ap MnPC ak MnCl2 sèlman yon ti kras oswa apèn afekte HDAC1.

Benefis cistanche tubulosa-Antitumor

Ekspresyon PARP1 ak pwoteyin apoptotik

PARP yo jwe yon wòl kle nan reparasyon blesi ADN yo. Inibitè PARP anpeche reparasyon ADN, ki mennen nan ekspòtasyon fragman ADN nan sitosol la, ki deklanche yon repons iminitè natirèl kGAS-medyatè. ADN, konsa vin tounen yon sib enpòtan pou terapi kansè. Aktivasyon kaspas yo, espesyalman caspase-3, te kapab kòmanse apoptoz atravè klivaj PARP1, ki konsidere kòm yon mak apoptoz. Selil MDA-MB-231 yo te egzamine pa Western blotting. Jan yo montre nan Fig. 7, MnPC ak MnPVA konsiderableman ogmante ekspresyon caspase -3 ak fendo PARP1 an konparezon ak kontwòl la ak lòt konpoze. Klivaj PARP1 pa aktive caspase-3 ta separe domèn ki konekte ADN ak domèn katalitik la, kidonk anpeche deklanchman PARP ak reparasyon blesi ADN yo. Anplis de sa, anpèchman PARP1 ka ogmante nivo timè-enfiltre lenfosit T ak kontwole repons iminitè natirèl yo. Malfonksyònman ADN-reparasyon gen potansyèl pou kòmanse aberasyon ADN mondyal, ki ta ka deklanche apoptoz. Proapoptotic Bax ak antiapoptotic Bcl-xL pwoteyin jwe wòl esansyèl nan apoptoz.38 Se poutèt sa, nou te detekte ekspresyon yo nan selil MDAMB-231 apre tretman ak diferan konpoze pou 48 èdtan lè l sèvi avèk Western blot. MnPC ak MnPVA ansibleman ogmante ekspresyon de Bax ak desann-reglemante ekspresyon de Bcl-xL. Rezilta yo endike ke MnPC ak MnPVA ka ankouraje apoptoz atravè reglemante pwoteyin apoptotik kòm yon efè kaskad ki gen rapò ak PARP 1-. Malgre ke VA ka pwovoke apoptoz selil timè pa anpeche ekspresyon HDAC1/2 nan dòz segondè,58 li pa t afekte pwoteyin apoptotik sa yo anpil nan kondisyon sa a, ki vle di siperyorite konplèks Mn.

Fig. 5 Imaj fliyoresan selil MDA-MB-231 apre enkubasyon ak MnCl2, MnPC, ak MnPVA (6 mM) respektivman pou 36 èdtan ak tach ak sond fliyoresan JC-1.

Aktivasyon chemen cGAS-STING la

Li konnen ke inibitè a PARP1 ka pwovoke yon repons kaskad siyal cGAS-STING nan selil kansè yo.40,59 cGAS se yon Capteur iminitè natirèl ki rekonèt yon seri divès kalite dsDNA cytosolic, ki gen ladan ADN ak viral, apoptotik, èzozomal, mitokondriyo, mikronuclei. , ak orijin retroelement.60,61 Anrichisman ADN cytosolic pwovoke pa MnPC ak MnPVA te kreye yon sikonstans favorab pou aktive chemen cGAS-STING la, ki ta imedyatman kòmanse evènman siyal ennan atravè rekritman ak aktivasyon TBK1 ak IRF3.12,59. Se poutèt sa, nou te detekte ekspresyon pwoteyin sa yo nan selil MDA-MB-231 pa iminoblotting apre ekspoze a chak konpoze pou 24 èdtan. Jan yo montre nan Figi 8A, MnPC, ak MnPVA siyifikativman elve ekspresyon de cGAS, p-STING, p-TBK1, ak p-IRF3. Anplis de sa, nou te envestige efè konplèks yo sou chemen cGAS-STING nan selil lesemi monositik imen THP-1 pa imunoblot. Jan yo montre nan Fig. 8B, MnPC ak MnPVA pwovoke yon ogmantasyon siyifikatif nan cGAS, p-STING, p-TBK1, ak p-IRF3, espesyalman MnPVA, manifeste ke yo aktive chemen an cGAS-STING, ki ta kòmanse iminite natirèl yo bloke. timè chape epi ankouraje iminite adaptasyon, san yo pa domaje selil THP-1 yo (Tablo S3†). Kontrèman, MnCl2 sèlman ogmante nivo p-STING oswa p-TBK1 ak apèn afekte ekspresyon cGAS ak p-IRF3 an konparezon ak kontwòl la, ki ka akòz enkapasite li pou pwovoke domaj ADN ak klivaj PARP1 nan konsantrasyon ki ba. , e konsa se pa kapab deklanche evènman siyal en tankou deklanchman p-IRF3. Dapre rezilta sa yo, nou konkli ke MnPC ak MnPVA pwovoke domaj ADN nikleyè ak mitokondriyo nan selil timè yo epi yo lage fragman ADN yo nan sitoplasm la, ki Lè sa a, aktive chemen an cGAS-STING. CGAS-STING aktive a te kapab dirèkteman aktive senescence ak apoptoz siyal chemen nan selil kansè yo, 62 ki mennen nan yon repons iminitè antitumoral bidireksyon. Men, ekspresyon STING, TBK1, ak IRF-3 nan selil MDA-MB-231 ak THP-1 te apèn afekte (Fig. S8†).

Fig. 6 (A) aktivite HDAC, (B) ekspresyon HDAC1/2 pwoteyin, ak (C) kontni pwoteyin korespondan an parapò ak GAPDH nan selil MDA-MB-231 apre enkubasyon ak chak konpoze (6 mM) pou 48 h detèmine lè l sèvi avèk twous ELISA ak Western blotting respektivman; (D) imaj imunofluoresan ekspresyon HDAC1 nan tisi timè 4T1 yon sourit apre tretman ak chak konpoze (1.3 mg Mn pou chak kg) yon fwa chak 2 jou pou 16 jou. *p < 0.05, **p < 0.01, ak ***p < 0.001.

Entèferon ak sitokin pro-enflamatwa

Aktivasyon TBK1 ak IRF3 ka pwovoke ekspresyon ak sekresyon IFN ak sitokin proenflamatwa, tankou IFN-b, TFN-a, ak IL-6. Selil {8}} ak IFN-b, TNF-a, ak IL-6 ki te pibliye pa selil MDAMB-231 yo te mezire pa tès ELISA apre enkubasyon ak diferan konpoze pou 24 èdtan. Jan yo montre nan Fig. 9, MnPC ak MnPVA dramatikman amelyore sekresyon IFN-I parapò ak kontwòl la, MnCl2, ak VA. An menm tan an, yo tou deklanche sekresyon IFN-b ak TNF-a. Sepandan, nivo IL-6 te sèlman modere ogmante. IFN-I (IFN-a ak IFN-b) jwe plizyè wòl iminostimulasyon nan iminite antitumoral, tankou ankouraje spirasyon ak prezantasyon antijèn DC yo ak selil T spesik timè yo pou touye selil timè yo lè yo fè yon pon iminite natirèl ak adaptasyon.13 TNF. -a patisipe nan necrosis kansè egi ak dinukleotid siklik (CDN) medyatè ak ajisteman nan iminitè inlate.59 Rezilta yo vle di ke MnPC ak MnPVA ta ka ankouraje repons iminitè antitumoral yo epi sijere ke yo ka simonte rezistans nan dwòg nan timè pa yon mekanis chemoimmunotherapeutic.

Matirite selil ki sòti nan mwèl zo yo (BMDCs)

BMDC yo reprezante selil etewojèn ki gen orijin myeloid ki fòme ak progenitors myeloid ak makrofaj frelikè, granulosit, ak selil dendritik (DC); yo patisipe nan repons iminitè a lè yo siprime aktivasyon selil T ak aktivasyon makrofaj ki asosye ak timè (TAM). 22

Fig. 7 Ekspresyon pwoteyin ki gen rapò ak reparasyon ADN ak apoptoz nan selil MDA-MB-231 apre yo fin ekspoze a diferan konpoze (6 mM) pou 48 èdtan, ak kontni pwoteyin ki koresponn ak a-tubulin. *p < 0.{{10}}5, **p < 0.01, ak ***p < 0.001.

Fig. 8 Ekspresyon pwoteyin ki enplike nan chemen cGAS-STING detèmine pa Western blot apre selil MDA-MB-231 (A) ak THP-1 (B) yo te trete ak 6 ak 3 mM nan diferan konpoze. pou 24 h, respektivman, ak kontni an pwoteyin korespondan an parapò ak GAPDH. *p < 0.{{10}}5, **p < 0.01, ak ***p < 0.001.

Fig. 9 Sekresyon (A) IFN-I nan selil THP-1, (B) IFN-b, (C) IL-6, ak (D) TNF-a nan MDA-MB{{ 7}} selil apre tretman ak diferan konpoze (6 mM) pou 24 èdtan. Done yo montre kòm mwayen ± SD (n {{10}}); *p < 0.05, **p < 0.01, ak ***p < 0.001.

DC ki gen matirite ak aktive ka prezante yon antijèn espesifik nan lenfosit T epi kòmanse yon repons adaptasyon kont timè.65 Pou teste si chemen cGAS-STING aktive MnPC ak MnPVA ka pwovoke spirasyon BMDC yo, nou teste makè sifas yo sou BMDC yo pa sitometri koule ak tretman ak supernatant selil MDA-MB-231 enkubasyon ak diferan konpoze pou 24 èdtan. Jan yo montre nan Fig. 10A, an konparezon ak kontwòl la, MnPC ak MnPVA miyò elve ko-ekspresyon nan makè spirasyon CD 86 ak CD80, rive nan 36.62% ak 43.15%, respektivman. Sepandan, MnCl2 sèlman modere depase sa ki nan kontwòl la. Anplis de sa, gwo konplèks istokonpatibilite klas II (MHC-II) se konstititifman eksprime pa APCs, ki prezante peptides antijenik nan selil T. Kòm yon rezilta, repons iminitè adaptab yo inisye, kenbe, ak reglemante.8 Jan yo montre nan Fig. 10B ak C, MnPC, ak MnPVA ogmante ekspresyon MHC-II a apeprè 1.5-pliye sa ki nan kontwòl la. . Done yo sijere ke konplèks sa yo anpil pwovoke spirasyon nan BMDCs, ki ka deklanche repons iminitè yo nan lenfosit T sitotoksik.

Fig. 10 (A) Ko-ekspresyon CD86 ak CD80, (B) analiz quantitative CD11c+CD86+CD80+ nan BMDCs, (C) ekspresyon MHC-II sou sifas BMDC yo, ak (D) vle di entansite MHC-II detèmine pa sikometri koule apre tretman ak supernatant nan selil MDA-MB-231 enkubasyon ak diferan konpoze (6 mM) pou 24 èdtan.

Ko-kilti selil kansè yo ak PBMC yo

Pou evalye plis efè iminomodulatwa konplèks yo, yo te evalye viabilite selil MDA-MB-231 nan prezans selil mononukleè periferik moun (PBMC) ki aktive ak dwòg nan tès MTT dapre yon metòd literati.66 Selil kansè oswa selil kansè ki gen PBMC yo te mete kòm kontwòl. Jan yo montre nan Fig. 11, nan absans PBMCs, MnPC ak MnPVA siprime viabilite selil la nan 64.98% ak 62.02%, respektivman. Ko-kilti selil yo ak PBMC yo san yo pa yon konplèks Mn sèlman te montre sitotoksisite fondamantal ak yon rantabilite selil mwayèn 81.49%. Sepandan, nan prezans PBMCs, MnPC ak MnPVA siprime viabilite selil la a 38.19% ak 36.98%, respektivman. Nan konsantrasyon sa a (6 mM), pifò PBMC yo toujou vivan (figi S9†). Rezilta yo demontre ke MnPC ak MnPVA ka aktive repons iminitè PBMC yo pou fè efè sitotoksik sou selil MDA-MB-231 yo, kidonk montre yon efè sinèrji enpòtan kont selil kansè yo.

Toksisite egi ak aktivite antikansè in vivo

Toksisite egi konplèks MnII yo te evalye sou sourit fi Balb/c. Yo te detèmine dòz medyàn letal (LD50) ak chanjman pwa kò apre yo fin piki chak konplèks nan venn. LD50 MnPC ak MnPVA te 16.08 ± 2.16 ak 25.16 ± 3.19 mg kg-1, respektivman (figi S10†), ki pi wo pase sa. nan CDDP (4.{{60}}6 ± 1.02 mg kg-1).67 Pa gen okenn chanjman enpòtan nan pwa kò yo te obsève nan sourit yo MnPC- ak MnPVA-trete. Rezilta yo endike ke MnPC ak MnPVA yo ba toksik pou mamifè yo. Enteresan, tethering VA nan konplèks la Mn diminye toksisite jeneral la oswa ogmante byokonpatibilite a. Anplis de sa, modèl sourit ki pote kansè nan tete 4T1 yo te etabli pou evalye aktivite antikansè MnPC ak MnPVA nan vivo. Jan yo montre nan Figi 12, apre yo fin trete sourit yo ak PBS, MnCl2, MnPC, ak MnPVA (1.3 mg Mn pou chak kg) respektivman pou 16 jou, MnPC ak MnPVA te montre pi efikas anpèchman sou kwasans timè a pase MnCl2. Nan jou 16, volim timè an mwayèn (A, B) te diminye a 554.78 ± 43.76 ak 348.01 ± 39.61 mm3, respektivman, pou sourit MnPC- ak MnPVA-trete, pandan y ap sa pou PBS- ak MnCl 2- sourit trete yo te 1182.01 ± 95.87 ak 784 ± 64.93 mm3, respektivman. Pwa timè mwayèn (C) te 1.41 ± 0.13, 0.95 ± 0.19, 0.82 ± 0.19, ak 0.59 ± 0.1 g pou PBS-, MnCl2-, MnPC-, ak MnPVA-trete sourit yo, respektivman. Li evidan, efè inhibition timè nan MnPVA te siperyè ak sa yo ki nan MnPC ak MnCl2, ki ka akòz anpèchman efikas nan ekspresyon HDACs pa MnPVA. Anplis de sa, pa gen okenn anòmal patolojik aparan oswa blesi sou pwa kò a (D), siviv, ak anatomi ògàn brit yo te obsève (Fig. S11†). Rezilta sa yo sijere ke konplèks MnII yo se kandida dwòg pwomèt pou terapi kansè.

Fig. 11 Mwayèn viabilite (%) selil MDA-MB-231 apre ko-enkubasyon ak PBMC aktive konpoze (6 mM) pou 48 èdtan. Done yo montre kòm mwayen ± SD (n=3); **p < 0.01 ak ***p < 0.001.

Repons iminitè antikansè in vivo

Yo te teste kapasite nan iminitè-stimulan nan konplèks MnII yo sou sourit Balb/c ki pote timè 4T1. Yo te analize estati selil iminitè yo nan timè, larat, ak gangliyon lenfatik yo (LNs) ki drenaj timè yo pa cytometry.21 Selil T CD8+ yo esansyèl pou mete restriksyon sou inisyasyon kansè ak pwogresyon malfezan nan sistèm iminitè a, ak endiksyon lenfosit T sitotoksik (CTLs) mande pou deklanchman DC ki pa gen matirite nan youn ki gen matirite,8,9 ki te endike kòm CD11c+ CD80+ CD{86+ selil yo.68 Jan yo montre nan Fig. 13A ak B. , nan sourit yo trete MnPVA yo, pousantaj DCs ki gen matirite endike pa ekspresyon de reseptè ko-stimulatory CD80+ ak CD86+ (ref. 69) te pi wo (45.59%) nan LNs pase sa. trete ak PBS, MnCl2, ak MnPC, respektivman. Makwofaj yo se pati entegral nan sistèm iminitè a, ki modile mikwo-anviwònman timè a.70 Dapre fonksyon yo, makrofaj yo ka klase nan eta deklanchman fenotip M1 ak protumoral M2.71 Makrofaj M1 yo make pa TNF-a, IL-12 , CD80, CD86, ak touye dirèk nan selil timè yo,70 pandan ke M2-tankou TAM yo karakterize pa ekspresyon segondè nan macrophage mannoz reseptè 1 (MMR oswa CD206) ak pwomosyon nan kwasans selil timè, kòm byen ke montre gwo aktivite imunosuppressive. Yo konnen ke inibitè HDAC yo ka potansye chanjman pro-an-mouvman nan polarizasyon makwofaj ak amelyore fenotip M1 anplis anpeche reparasyon ADN. apre tretman ak konplèks Mn yo. Jan yo montre nan Fig. 13C–E ak S12A–C,† fenotip M2 ki make pa CD206+ te siyifikativman siprime epi fenotip M1 ki make pa CD86+ te konsiderableman ogmante nan sourit MnPVA-trete yo. Rezilta yo endike ke MnPVA efektivman pwovoke polarizasyon nan makrofaj soti nan M2 a fenotip M1. MnCl2 ak MnPC te ogmante ekspresyon CD86 tou, men se sèlman yon ti kras enfliyans CD206 konpare ak PBS. Pandan se tan, IFN-b, IL-6, ak TNF-a sekrete pa DC ki gen matirite ak makrofaj yo te mezire pa ELISA. Jan yo montre nan Figi 13F ak G, MnPVA amelyore nivo IFN-b ak TNF-a pi efikas pase PBS, MnCl2, ak MnPC, ki ka lakòz selil T yo touye selil timè yo. Sepandan, yo pa te obsève okenn chanjman enpòtan nan IL-6 (Fig. S13†).

Fig. 12 Efè terapetik MnPC, MnPVA, ak MnCl2 sou sourit 4T1 ki gen timè, lè l sèvi avèk PBS kòm yon kontwòl. (A) Imaj timè elimine, (B) volim timè, (C) pwa timè, ak (D) pwa kò sourit yo apre yo fin trete ak PBS, MnCl2, MnPC, ak MnPVA, respektivman, nan 1.3 mg Mn pou chak kg yon fwa. chak 2 jou pou 16 jou. **p < {{10}}.01 ak ***p < 0.001.

Fig. 13 DC ki gen matirite (CD80+CD{86+ gated sou CD11c+) ak analiz quantitative sou gangliyon lenfatik ki drenaj timè yo (A ak B), polarizasyon makwofaj yo (CD206+CD{ {7}} fèmen sou CD11b+) nan tisi timè 4T1 yon sourit (C–E) detèmine pa sikometri koule, ak analiz ELISA nan IFN-b (F) ak TNF-a (G) nan serom nan sourit apre tretman ak chak konpoze (1.3 mg Mn pou chak kg) yon fwa chak 2 jou pou 16 jou. Done yo prezante kòm mwayen ± SD (n=3). *P < 0.05; **P < 0.01; ***P <0.001.

Lè MnPC ak MnPVA aktive chemen cGAS-STING nan DCs ak makrofaj yo, IFNs-I ak cytokines proinamatory yo te kapab prepare lenfosit sitotoksik yo.59 Se poutèt sa, nou te evalye plis deklanchman selil T citotoksik yo (CD8+). ) ak selil T asistan (CD4+) nan tisi timè ak tisi larat, respektivman. Jan yo montre nan Fig. 14A ak S12D-F†, CD8+ selil T yo (kare ble) nan timè yo te efektivman aktive (9.18%) nan sourit ki trete MnPVA yo konpare ak sa yo ki te trete ak PBS (3.53%). ), MnCl2 (4.48%), ak MnPC (6.05%); CD4+ selil T (kare wouj) yo te aktive tou yon ti kras, ak rezilta yo te opoze ak sa yo ki nan larat la apre tretman ak konplèks yo. Fig. 14B montre ke frekans selil T CD8+ aktive (CD69+) ki enfiltrasyon timè yo te ogmante dramatikman. Tout rezilta sa yo endike ke MnPVA te kapab ankouraje repons iminitè fò nan vivo akòz aktivasyon an nan chemen an cGAS-STING.

Fig. 14 Selil CD8+ (kare ble) ak CD4+ T (kare wouj) (A) ak pousantaj CD69+ nan mitan selil CD8+ T yo ( B) nan tisi timè 4T1 yon sourit apre tretman ak chak konpoze (1.3 mg Mn pou chak kg) yon fwa chak 2 jou pou 16 jou detèmine pa sikometri koule.

Mekanis aksyon

aksyon pou konplèks Mn yo jan yo montre nan Figi 15 yo te pwopoze. Nan selil timè yo, MnPC oswa MnPVA domaje ADN nikleyè ak / oswa mitokondriyo, ki mennen nan regilasyon an moute nan g-H2AX; pandan se tan, konplèks la inibit aktivite HDAC1/2 ak PARP1, kidonk afekte kapasite reparasyon ADN ak entansifye domaj ADN. Fragman ADN akimile yo te lage nan nwayo a ak/oswa mitokondri yo nan sitoplasm epi li rekonèt pa cGAS pou aktive STING la. STING nan vire ankouraje fosforilasyon TBK1 ak IRF3 ak translokasyon nan nwayo a, pwovoke pwodiksyon IFN, IL-6, ak TNF-a. Lè sa a, IFN sa yo ak cytokin pro-inamatory te sekrete soti nan nwayo a nan sitosol la ak pi lwen nan mikroanvironman timè a, kote yo te ankouraje spirasyon an ak prezantasyon antijèn nan DCs ak makrofaj, ak plis aktive selil T cytotoxik yo touye selil kansè yo. Evènman menm jan an te fèt tou nan selil iminitè tankou makrofaj ak chemen cGAS-STING-TBK1 te aktive. Aktivasyon chemen cGAS-STING la inisye repons iminitè natirèl ak kominikasyon nan de-fason ant selil timè yo ak selil iminitè vwazen yo pou amelyore efè touye sou timè yo.21 Konsekans, konplèks Mn yo te montre gwo aktivite antitumoral akòz sinèrji ki genyen ant chimyoterapi ak imunoterapi. . Pifò nan pwosesis sa yo te pwouve nan vitro oswa nan vivo.

Fig. 15 Mekanis aksyon pwopoze pou konplèks Manganèz.

Konklizyon

Ogmante prèv yo montre ke anpil konplèks metal kominike avèk tou de selil timè ak selil iminitè yo pou remodele mikro-anviwònman imunosuppressive anplis egzèse yon efè sitotoksik dirèk sou selil timè yo.73 Nan etid sa a, nou prezante de konplèks MnII MnPC ak MnPVA kòm potansyèl imunoterapi chimyo pou anpeche kansè nan eksitan. repons iminitè natirèl kòm byen ke kraze ADN doub fil. Konplèks multifonksyonèl sa yo touye selil kansè yo pa sèlman domaje ADN, men tou lè yo reaktive repons iminitè andòmi yo. Premyèman, yo aji kòm kasè ADN, pwovoke domaj ADN oksidatif ak pwodwi fragman ADN; dezyèmman, yo aji kòm inibitè HDACs ak PARP1, anpeche reparasyon domaj ADN ak ranfòse blesi ADN; Twazyèmman, yo aji kòm agonist nan chemen cGAS-STING, pwovoke sekresyon IFN ak sitokin proenflamatwa pou ankouraje spirasyon DCs ak makrofaj, ak plis estimile selil T espesifik timè pou touye selil timè yo.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Enhance Immunity

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

An tou, MnPC ak MnPVA efektivman aktive chemen cGAS-STING la epi kenbe kwasans selil kansè nan vitro ak nan vivo. Tethering VA nan konplèks MnII a te pote anpil anpèchman sou HDAC yo ak ranfòse aktivite antiproliferatif nan konplèks la, ak fòmasyon nan konplèks Mn bay yon lavi enpòtan nan aktivite a antiproliferatif nan MnCl2 ak 1,10-phenanthroline. Depi lè Jiang et al. premye rapòte aktivite enteresan Mn2+ nan chemen cGAS-STING,12 pa gen okenn pwopriyete sa yo te dekouvri nan konplèks Mn. Etid sa a demontre ke kapasite eksitan MnPC ak MnPVA nan chemen cGAS-STING la pi wo pase MnCl2 oswa Mn2+ nan tou de selil timè ak iminitè paske yo pwovoke plis fragman ADN nan sitoplasm pou aktive cGAS la. -STING chemen. Konklizyon yo vle di ke agonist cGAS-STING ki pi pisan yo ta ka jwenn nan konstwi konplèks MnII ak ligand ki domaje ADN oswa ki bloke ADN-reparasyon.

Referans

1 SL Shiao, AP Ganesan, HS Rugo ak LM Coussens, Genes Dev., 2011, 25, 2559–2572.

2 A. Ribas ak JD Wolchok, Syans, 2018, 359, 1350–1355.

3 P. Sharma ak JP Allison, Syans, 2015, 348, 56–61.

4 M. Yi, D. Jiao, H. Xu, Q. Liu, X. Han ak K. Wu, Mol. Kansè, 2018, 17, 129.

5 O. Hemminki, JM Dos Santos ak A. Hemminki, J. Hematol. Oncol., 2020, 13, 84. 6 S. Yu, A. Li, Q. Liu, T. Li, X. Han ak K. Wu, J. Hematol. Onkol., 2017, 10, 78.

7 P. Sharma, S. Hu-Lieskovan, JA Wargo and A. Ribas, Cell, 2017, 168, 707–723.

8 A. Li, M. Yi, S. Qin, Y. Song, Q. Chu ak K. Wu, J. Hematol. Onkol., 2019, 12, 35.

9 A. Saeed, X. Ruan, J. Su ak S. Ouyang, Adv. Sci., 2020, 7, 1902599.

10 LL van der Woude, MAJ Gorris, CG Figdor ak IJM de Vries, Trends Cancer, 2017, 3, 797–808.

11 DS Chen and I. Mellman, Nature, 2017, 541, 321–330.

12 C. Wang, Y. Guan, M. Lv, R. Zhang, Z. Guo, X. Wei, X. Du, J. Yang, T. Li, Y. Wan, X. Su, X. Huang ak Z Jiang, Iminite, 2018, 48, 675–687.

13 Y. Song, Y. Liu, HY Teo, ZB Hana, Y. Mei, Y. Zhu, YL Chua, M. Lv, Z. Jiang ak H. Liu, Cell. Mol. Immunol., 2021, 18, 1571–1574.

14 Q. Chen, L. Sun ak ZJ Chen, Nat. Immunol., 2016, 17, 1142–1149.

15 F. McNab, K. Mayer-Barber, A. Sher, A. Wack ak A. O'Garra, Nat. Rev. Immunol., 2015, 15, 87–103.

16 H. Liu, H. Zhang, X. Wu, D. Ma, J. Wu, L. Wang, F. Liu, D. Yan, C. Chen, Z. Mao ak B. Ge, Nature, 2018, 563 , 131–136.

17 BS Pan, SA Perera, JA Piesvaux, H. Woo, DF Wyss, S. Xu, DJ Bennett ak GH Addona, Syans, 2020, 369, 935.

18 RD Luteijn, SA Zaver, BG Gowen, SK Wyman, NE Garelis, L. Onia, SM McWhirter, GE Katibah, JE Corn, JJ Woodward ak DH Raulet, Nature, 2019, 573, 434–438.

19 L. Hou, C. Tian, ​​Y. Yan, L. Zhang, H. Zhang ak Z. Zhang, ACS Nano, 2020, 14, 3927–3940.

20 M. Gao, YQ Xie, K. Lei, Y. Zhao, A. Kurum, S. Van Herck, Y. Guo, X. Hu ak L. Tang, Adv. Ther., 2021, 4, 2100065.

21 Q. Luo, Z. Duan, X. Li, L. Gu, L. Ren, H. Zhu, X. Tian, ​​R. Chen, H. Zhang, Q. Gong, Z. Gu ak K. Luo, Adv . Fonksyon. Mater., 2021, 32, 2110408.

22 H. Tian, ​​G. Wang, W. Sang, L. Xie, Z. Zhang, W. Li, J. Yan, Y. Tian, ​​J. Li, B. Li ak Y. Dai, Nano Jodi a, 2022, 43, 101405.

23 C. Wang, Z. Solèy, C. Zhao, Z. Zhang, H. Wang, Y. Liu, Y. Guo, B. Zhang, L. Gu, Y. Yu, Y. Hu ak J. Wu, J. Divilgasyon Kontwole, 2021, 331, 480–490.

24 H. Haase, Iminite, 2018, 48, 616–618.

25 KJ Horning, SW Caito, KG Tipps, AB Bowman ak M. Aschner, Annu. Rev. Nutr., 2015, 35, 71–108.

26 X. Solèy, Y. Zhang, J. Li, KS Park, K. Han, X. Zhou, Y. Xu, J. Nam, J. Xu, X. Shi, L. Wei, YL Lei ak JJ Moon, Nat. Nanotechnol., 2021, 16, 1260–1270.

27 M. Lv, M. Chen, R. Zhang, W. Zhang, C. Wang, Y. Zhang, X. Wei, Y. Guan, YC Liu, Q. Mei, W. Han ak Z. Jiang, Cell Res ., 2020, 30, 966–979.

28 SL O'Neal ak W. Zheng, Curr. Anviwònman. Rep. Sante, 2015, 2, 315–328.

29 E. Li, Nat. Rev. Genet., 2002, 3, 662–673.

30 M. Guo, Y. Peng, A. Gao, C. Du ak JG Herman, Biomark. Res., 2019, 7, 23.

31 A. Duenas-Gonzalez, M. Candelaria, C. Perez-Plascencia, E. Perez-Cardenas, E. de la Cruz-Hernandez ak LA Herrera, Trete kansè. Rev., 2008, 34, 206–222.

32 HV Diyabalanage, ML Granda ak JM Hooker, Cancer Lett., 2013, 329, 1–8.

33 T. Robert, F. Vanoli, I. Chiolo, G. Shubassi, KA Bernstein, OA Botrugno, D. Parazzoli, A. Oldani, S. Minucci ak M. Foiani, Nature, 2011, 471, 74-79.

34 JH Lee, ML Choy, L. Ngo, SS Foster ak PA Marks, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2010, 107, 14639–14644.

35 KL Jin, JY Park, EJ Noh, KL Hoe, JH Lee, JH Kim ak JH Nam, J. Gynecol. Oncol., 2010, 21, 262–268.

36 M. Gottlicher, S. Minucci, P. Zhu, A. Schimpf ak S. Giavara, EMBO J., 2001, 20, 6968–6978.

37 JS Brown, B. O'Carrigan, SP Jackson and TA Yap, Cancer Discovery, 2017, 7, 20–37.

38 AN Weaver ak ES Yang, Front. Oncol., 2013, 3, 290.

39 FJ Bock ak P. Chang, FEBS J., 2016, 283, 4017–4031.

40 S. Cerboni, N. Jeremi, M. Gentili, U. Gehrmann, C. Conrad, S. Amigorena, F. Rieux-Laucat ak N. Manel, J. Exp. Med., 2017, 214, 1769–1785.

41 C. Pantelidou, O. Sonzogni, M. De Oliveria Taveira, AK Mehta, AJL Guerriero, GM Wulf ak GI Shapiro, Dekouvèt kansè, 2019, 9, 722–737.

42 J. Shen, W. Zhao, Z. Ju, L. Wang, Y. Peng, M. Labrie, TA Yap, GB Mills ak G. Peng, Cancer Res., 2019, 79, 311–319.

43 NA Yusoh, H. Ahmad ak MR Gill, ChemMedChem, 2020, 15, 2121–2135.

44 F. Mendes, M. Groessl, AA Nazarov, YO Tsybin, G. Sava, I. Santos, PJ Dyson ak A. Casini, J. Med. Chem., 2011, 54, 2196–2206.

45 S. Abbas, F. Rashid, E. Ulker, S. Zaib, K. Ayub, S. Ullah, MA Nadeem, S. Yousuf, R. Ludwig, S. Ali ak J. Iqbal, J. Biomol. Estrikti. Dyn., 2021, 39, 1068–1081.

46 L. Tabrizi, P. McArdle, M. Ektefan ak H. Chiniforoshan, Inorg. Chim. Acta, 2016, 439, 138–144.

47 H. Zhang, T. Yang, Y. Wang, Z. Wang, Z. Zhu, ZJ Guo ak XY Wang, Dalton Trans., 2021, 50, 304–310.

48 R. Jastrza˛b, M. Nowak, M. Skroba´ nska, A. Toli´nska, M. Zabiszak, M. Gabryel, L. Marciniak and MT Kaczmarek, Coord. Chem. Rev., 2019, 382, ​​145–159.

49 Y. Cheng, L. Lv, L. Zhang, Y. Tang ak L. Zhang, J. Mol. Struct., 2021, 1228, 129745. 50 Z. Zhu, Z. Wang, C. Zhang, Y. Wang, H. Zhang, Z. Gan, ZJ Guo ak XY Wang, Chem. Sci., 2019, 10, 3089–3095.

51 C. Slator, Z. Molphy, V. McKee ak A. Kellett, Redox Biol., 2017, 12, 150-161.

52 TJ Hayman, M. Baro, T. MacNeil, C. Phoomak, TN Aung, T. Sandoval Schaefer, BA Burtness, DL Rimm ak JN Contessa, Nat. Komin., 2021, 12, 2327.

53 RM Chabanon, M. Rouanne, CJ Lord, JC Soria, P. Pasero and S. Postel-Vinay, Nat. Rev. Kansè, 2021, 21, 701–717.

54 AP Wes ak GS Shadel, Nat. Rev. Immunol., 2017, 17, 363– 375.

55 AP West, W. Khoury-Hanold, M. Staron, MC Tal, CM Pineda, SM Lang, M. Bestwick, BA Duguay, N. Raimundo, DA MacDuff, SM Kaech, JR Smiley, RE Means, A. Iwasaki ak GS Shadel, Nature, 2015, 520, 553–557.

56 S. Jin, Y. Hao, Z. Zhu, N. Muhammad, Z. Zhang, K. Wang, Y. Guo, ZJ Guo ak XY Wang, Inorg. Chem., 2018, 57, 11135–11145.

57 NJ Curtin ak C. Szabo, Nat. Rev. Drug Discovery, 2020, 19, 711–736.

58 J. Chen, FM Ghazawi, W. Bakkar ak Q. Li, Mol. Kansè, 2006, 5, 71.

59 SM Harding, JL Benci, J. Irianto, DE Discher, AJ Minn ak RA Greenberg, Nature, 2017, 548, 466–470.

60 EJ Sayour ak DA Mitchell, J. Immunol. Res., 2017, 17, 3145742.

61 BJ Francica, A. Ghasemzadeh, AL Desbien, D. Theodros, KE Sivick, AB Sharabi, ML Leong, SM McWhirter, TW Dubensky Jr, DM Pardoll ak CG Drake, Cancer Immunol. Res., 2018, 6, 422–433.

62 C. Vanpouille-Box, S. Demaria, SC Formenti ak L. Galluzzi, Cancer Cell, 2018, 34, 361-378.

63 SR Woo, MB Fuertes, L. Corrales, S. Spranger, MJ Furdyna, MY Leung, KA Fitzgerald, ML Alegre ak TF Gajewski, Immunity, 2014, 41, 830–842.

64 C. Belli, D. Trapani, G. Viale, P. D'Amico, BA Duso, P. Della Vigna, F. Orsi ak G. Curigliano, Trete kansè. Rev., 2018, 65, 22–32.

65 BU Schraml, J. van Blijswijk, S. Zelenay, PG Whitney, A. Filby, SE Acton, NC Rogers, N. Moncaut, JJ Carvajal ak C. Reis e Sousa, Cell, 2013, 154, 843–858.

66 AA van de Loosdrecht, E. Nennie, GJ Ossenkoppele, RHJ Beelen ak MMAC Langenhuijsen, J. Immunol. Methods, 1991, 141, 15–22.

67 S. Zhang, X. Zhong, H. Yuan, Y. Guo, D. Song, F. Qi, Z. Zhu, XY Wang ak ZJ Guo, Chem. Sci., 2020, 11, 3829–3835.

68 Y. Li ak E. Seto, Cold Spring Harbor Perspect. Med., 2016, 6, a026831.

69 C. Chen, Y. Tong, Y. Zheng, Y. Shi, Z. Chen, J. Li, X. Liu, D. Zhang ak H. Yang, Ti, 2021, 17, e2006970.

70 A. Mantovani, F. Marchesi, A. Malesci, L. Laghi ak P. Allavena, Nat. Rev Clin. Oncol., 2017, 14, 399–416.

71 B. Ruffell and LM Coussens, Cancer Cell, 2015, 27, 462–472.

72 W. Li, N. Kapate, CW t. Shields ak S. Mitragotri, Adv. Drug Delivery Rev., 2020, 17, 251–266.

73 B. Englinger, C. Pirker, P. Heffeter, A. Terenzi, CR Kowol, BK Keppler ak W. Berger, Chem. Rev., 2019, 119, 1519– 1624.