Melanocyte Aktivasyon Mekanis ak Rasyonèl Tretman Terapetik nan Lentigos Solè

Résumé:Pou karakterize patobiyoloji solè lentigos (SLs), analiz pa semiquantitative RT-PCR, Western blotting, ak imunohistochimi revele ekspresyon an upregulated nan endothelin (EDN) -1/endothelin B reseptè (EDNBRs), faktè selil souch (SCF). )/c-KIT, ak faktè necrosis timè (TNF) nan epidèm blesi a, ki te contraste ak ekspresyon an downregulated nan interleukin (IL) 1 . Konklizyon sa yo sipòte anpil ipotèz ki montre anvan ekspoze UVB repete deklanche keratinosit yo kontinye pwodui TNF. Lè sa a, TNF stimul sekresyon EDNs ak pwodiksyon SCF nan yon mòd otokrin, ki mennen ale nan deklanchman melanogenic kontinyèl nan melanosit vwazen, ki lakòz SLs. Yon etid klinik sou 36 pasyan ki gen SL pandan sis mwa ki te trete ak yon ekstrè M. Chamomilla ak yon kapasite ki pisan pou elimine ogmantasyon EDN1-pwovoke nan sentèz ADN ak melanizasyon melanosit imen nan kilti a te revele yon amelyorasyon siyifikatif nan nòt pigman. ak diferans koulè eksprime kòm valè L. Yon lòt etid klinik lè l sèvi avèk yontirozinazinibitè L-ascorbate-2-fosfat 3 Na (ASP) te demontre ke valè L nan po trete (6 pousan APS) te trete siyifikativman ogmante nan SL yo ak nan po ki pa blesi ak yon valè ∆L siyifikativman pi wo nan SL lè konpare ak po ki pa blesi. Sòm la nan konklizyon sa yo fòtman sijere ke konbine tretman aktualite ak bloke siyal EDN aktirozinazinhibiteurs se yon chwa terapetik dezirab pou SL yo.

Mo kle: lentigo solè; andotelin; faktè selil souch; faktè kwasans keratinosit; entèleukin-1; faktè nekwoz timè; siyal entraselilè; mobilizasyon kalsyòm; siyal bloke; M. chamomilla; ascorbate-fosfat Na; ajan blanchiman; inibitè tirozinaz

Cistanche se yon inibitè tirozinaz.

Klike sou efè cistanche pou anpeche tirozinaz

1. Entwodiksyon

Maladi ipèpigmantè epidèm ki parèt pi souvan nan po Azyatik se lentigos solè (SL), ki jeneralman rive sou figi a ak sou do men yo. Kontrèman ak UVB-induit hyperpigmentation (UVB melanosis), ki, tou depann de laj la nan sijè a, disparèt nan de semèn nan kèk mwa apre sispann nan ekspoze a UVB, SL yo devlope sou po ki ekspoze solèy, espesyalman figi a, ak pa janm disparèt akòz domaj ADN posib nan keratinosit yo pwovoke pa repete iradyasyon UVB nan epidèm nan blesi. An jeneral, maladi ipèpigmantè yo jeneralman vize pa ajan anti-pigmantè epi yo enkli UVB-melanosis, SLs, ak melasma. Dapre frekans nan dyagnostik final la pou pasyan ki gen divès maladi pigmantè nan Japon, SL yo gen ensidans ki pi wo a, ki rive nan apeprè 60 pousan nan tout pasyan ki gen maladi ipèpigmantè, pandan y ap melasma ak ipèpigmantasyon pòs-enflamatwa (ki gen ladan UVB-melanoz) rive nan. osi ba ke 5.2 pousan ak 3.3 pousan nan pasyan yo, respektivman [1]. Sa a sijere ke SL yo se yon sib dominant nan ajan anti-pigmantasyon pou po Azyatik. Sepandan, te gen kèk papye pibliye sou efè klinik ajan anti-pigmantasyon sou SL yo paske anpil ajan anti-pigmantasyon sèvi kòmtirozinazinibitè epi li pa antisipe satirozinazanpèchman ta dwe ase pou amelyore ipèpigmantasyon SL yo. Anplis de sa, li sanble difisil pou konsepsyon rasyonèl yon tretman aktualite ki ka geri efikas pou SL paske yo konnen ti kras sou mekanis aktivasyon melanosit nan epidèm lezyonèl la. Nan atik revizyon sa a, nou karakterize patobioloji SL yo dapre tretman aktualite pou SL paske yo konnen ti kras sou mekanis aktivasyon melanosit nan epidèm blesi a. Nan atik revizyon sa a, nou karakterize patobioloji SL yo dapre rezo sitokin parakrin melanojèn yo li te ye, epi baze sou mekanis aktivasyon melanosit yo dekouvri nan epidèm lezyonèl SL yo, nou prezante apwòch klinik rasyonèl pou tretman aktualite SL yo pou amelyore ipèpigmantasyon an. nivo.

2. Karakteristik nan klinik

Klinikman SL yo devlope kòm plak po plat ki byen sikonskri ak koulè ak gwosè varye, souvan parèt sou figi a ak sou do men yo (Figi 1a) [2]. Istochimi blesi SL ki tache ak Hemoxylin & Eosin te revele yon ti kras akantoz ak pigmantasyon sou kouch selil fondamantal la (Figi 1b) [2]. Gen de modèl an tèm de karakteristik istopatolojik SL yo sou figi a: youn pattern te demontre yon epidèm aplati ak melanoz fondamantal, ak lòt modèl la te montre ipèdèm ipèrplasi ak rive long ki konpoze de selil basaloid ki pigman anpil [3].

3. Mekanis Aktivasyon Melanosit nan Lentigo Solè ki baze sou Rezo Melanogenic Paracrine Cytokine

3.1. Nimewo Melanosit ak Ekspresyon Tirozinaz

Malgre ke te gen kèk agiman sou ogmantasyon kantite melanosit nan SLs, analiz imunohistochimik lè l sèvi avèk makè melanosit espesifik MART-1 revele yon kantite melanosit ogmante nan lentigo solè [5-7]. Sepandan, dansite aktyèl la nan melanosit yo sou fwontyè ki genyen ant dèrm yo ak epidèm nan SL yo sanble ak sa ki nan po kontwòl perilesional akòz pwopagasyon ogmante nan keratinosit [7]. Imunohistochimi lè l sèvi avèk anti-tirozinazrevele satirozinaz- melanosit pozitif yo te ogmante siyifikativman pa 2-pliye nan epidèm blesi nan SLs [4]. Analiz jenetik pa semiquantitative RT-PCR te revele ke nivo ekspresyon mRNA tirozinaz la siyifikativman regilasyon pa 2.3-pliye nan epidèm lezyonèl la [4]. Konklizyon ki anwo yo sipòte posiblite pou gen yon eksitasyon tou de pwopagasyon ak melanizasyon nan melanosit SL lesional. Se poutèt sa, nou te ipotèz ke keratinosit yon ti kras pwopagasyon nan SL yo deklanche deklanchman nan melanosit vwazen pa sekrete sitokin melanosit-stimulan.

3.2. Melanogenic Paracrine Cytokine Networks

Nou menm ak lòt gwoup yo te elucide ke genyen plizyè enpòtan mélanogenic paracrine cytokine rezo ant po cellules (Figi 2). Sitou, sa yo enkli endothelin (EDN) -1 [8-15], faktè selil souch manbràn (mSCF) [16], proopiomelanocortin (POMC) [17-20], prostaglandin E2 [21], macrophage granulosit. Faktè eksitasyon koloni (GM-CSF) [22], faktè kwasans fibroblast debaz [23], onkogen ki gen rapò ak kwasans [24] ak faktè kwasans keratinosit (KGF) [25,26] ki enplike nan entèraksyon keratinosit / melanosit ak SCF soluble [27] ], faktè epatocytegrowth (HGF) [8,10,27-29] ak KGF [30] ki enplike nan entèraksyon fibroblast / melanosit. Ki baze sou rezo melanogenic paracrinecytokine ki gen ladan reseptè korespondan yo, li enpòtan pou detèmine ki rezo melanogenic paracrine cytokine ki enplike epi ki espesyalman aktive nan vivo nan mekanis ipèpigmantasyon nan epidèm lezyonèl SL yo.

3.3. Gwo Sitokin Parakrin ak Reseptè Responsab pou Aktivasyon Melanosit nan SL yo

Pami cytokines melanogenic ki anwo yo ak reseptè korespondan yo, nou premye detèmine wòl faktè kwasans fibroblast debaz (bFGF) ak onkogene ki gen rapò ak kwasans (GRO) nan epidèm SL yo. FGF debaz yo te jwenn twòp eksprime nan UVB-ekspoze keratinosit imen, ki gen omojèn te gen potansyèl distenk nan estimile melanogenesis ak pwopagasyon nan melanosit imen nan kilti, byenke kofaktè ki gen kapasite nan ogmante nivo siklik AMP yo esansyèlman obligatwa pou eksitasyon melanogenic [23]. ]. Gwoup rechèch nou an te idantifye GRO kòm yon sitokin melanojèn ki jwe yon wòl esansyèl nan ipèpigmantasyon phenylazo-naphtol-induit apre reyaksyon alèjik li nan po kochon mawon jòn [24,31]. Semiquantitative RT-PCR te revele ke pa te gen okenn chanjman nan nivo ekspresyon jèn bFGF ak GRO nan epidèm SL lezyonèl lè yo konpare ak epidèm ki pa blese [2]. Konfòm ak nivo ekspresyon mRNA nan bFGF ak GRO, imunohistochimi te revele ke pa te gen okenn diferans nan entansite imunostaining la ak anti-bFGF (Figi 1c, d) ak anti-GRO (Figi 1e, f) ant SL lesional ak ki pa lesional. epidèm [2]. Konklizyon sa yo pa endike okenn patisipasyon bFGF oswa GRO kòm cytokin melanogenic intrinsèques pou mekanis aktivasyon melanosit nan SL yo.

Nan mekanis byolojik ipèpigmantasyon UVB pwovoke, ekspresyon EDN1, yon peptide vazokonstriktè orijinal izole nan selil endothelial kochon [32], ak mSCF [16] yo reglemante nan yon mòd otokrin pa aksyon an nan liberasyon entèleukin ki ankouraje UVB. IL)-1 atravè jenerasyon espès oksijèn reyaktif (ROS) [15]. Sitokin sa yo lakòz melanosit vwazen yo ogmante ekspresyon yo nan anzim sentèz melanin kritik tirozinaz [14,33], EDNBR [34], ak pwoteyin matris melanozòm PMEL17 [34] ansanm ak anzim ki gen rapò ak pwopagasyon tankou cyclic dependent kinase (CDK)2. [34], ki mennen nan hyperpigmentation nan UVB-ekspoze po. Baze sou pi gwo cytokines melanogenic ki esansyèlman patisipe nan UVB-melanosis, nou pwochen detèmine wòl EDN1 nan mekanis melanocyteactivation nan epidèm SL yo. Karakterizasyon nivo ekspresyon mRNA EDN1 nan epidèm la pa analiz semiquantitative RT-PCR te montre ke te gen yon ogmantasyon make nan ekspresyon pa yon mwayèn de 3.2-pliye nan epidèm blesi SL a lè yo konpare ak epidèm ki pa blesi. [4]. Konfòm ak nivo ekspresyon jèn ogmante nan EDN1, te gen ogmante imunostaining ak anti-EDN1 nan tout epidèm SL lesional (Figi 1g, h) [4].

Anplis EDN1, nou pwochen detèmine wòl reseptè EDN nan mekanis aktivasyon melanosit ki kache SL yo. Liaison EDN nan reseptè li yo se premye etap nan gwo liy parakrin ant keratinosit ak melanosit ki kontwole pigmantasyon po [11,14,35,36]. Reseptè EDN yo se sèt-transmembrane G-pwoteyin makonnen reseptè ak de izoform (A ak B) ki kominike espesyalman ak EDN1 ak tout fòm EDNs (EDN1, EDN2, ak EDN3), respektivman [37]. Konsènan efè inhibition nan antagonist reseptè EDN sou pwopagasyon EDN-stimile nan melanosit imen nan kilti, yon efè inhibition enpòtan ki te fèt sèlman nan prezans BQ 788, antagonist anendothelin B reseptè (EDNBR), men se pa nan BQ123 oswa BQ610, yon endothelin. Yon antagonist reseptè (EDNAR) [9], ki endike ke siyal reseptè EDN1/EDN se medyatè atravè EDNBR. Semiquantitative RT-PCR analiz de ekspresyon EDNBR mRNA revele ke pami divès kalite selil po yo, melanosit yo se sèl kalite sibstansyèl selil ki eksprime EDNBR. Depi nou te deja demontre ke EDN1 sekrete pa keratinosit deklannche deklanchman nan pwoteyin kinaz entraselilè C (PKC) atravè EDNBR [35], nou detèmine si nivo ekspresyon EDNBR te aksantu tou nan melanosit nan epidèm SL lesional. Semiquantitative RT-PCR analiz de EDNBRmRNA nan epidèm SL yo te demontre yon ekspresyon siyifikativman ogmante pa yon mwayèn 6.8-pliye nan epidèm SL lesional [4]. Konfòm ak ekspresyon an ogmante nan EDNBR mRNA, te gen ogmante imunostaining ak anti-EDNBR lokalize nan melanosit nan epidèm SL lesional (Figi 1i, j) [4]. Sòm konklizyon sa yo fòtman sijere ogmantasyon kowòdone nan ekspresyon EDN1 ak lyen reseptè li yo nan epidèm lezyonèl SL yo.

Ki baze sou pi gwo sitokin melanogenik ki enplike nan UVB-melanosis, nou pwochen detèmine wòl SCF nan mekanis aktivasyon melanosit nan epidèm SL lesional. Nou te deja rapòte ke ekspoze UVB nan keratinosit kiltive imen kòm byen ke epidèm imen siyifikativman stimul ekspresyon SCF nan tou de nivo jèn ak pwoteyin [15,16]. Semiquantitative RT-PCR analiz de SCF mRNA nan epidèm SL yo te demontre ekspresyon an siyifikativman ogmante pa yon mwayèn de 3.9-pliye nan epidèm SL lezyonèl konpare ak epidèm ki pa blesi [2]. Western blotting pou SCF nan po a nan sis pasyan ki gen SL yo te demontre ke te gen yon ogmantasyon siyifikatif pa yon mwayèn de 1.6-pliye nan pwoteyin SCF nan epidèm SL lezyonèl konpare ak epidèm ki pa blesi [2].

Konfòm ak nivo ekspresyon jèn ak pwoteyin ogmante nan SCF, te gen ogmante imunostaining ak anti-SCF nan tout epidèm SL lesional (Figi 1k, l) [2]. Te gen yon agiman sou si wi ou non SCF a upregulated nan nivo pwoteyin nan lesionalepidermis la se kalite a idrosolubl oswa kalite a manbràn. Si sousòl manbràn-pèmeyab-idrosolubl SCF se upregulated nan epidèm la, selil mast ki prezan nan dèrm yo ta dwe aktive pwopagasyon ak ogmante nan kantite. Piske tach ble toluidin nan SL yo pa t montre okenn ogmantasyon nan kantite mast selil yo nan dèrm SL lezyonèl [2], li posib ke kalite SCF ki te kontwole nan SL yo se kalite manbràn.

Anplis de SCF, nou pwochen detèmine wòl SCF reseptè c-KIT la nan mekanis aktivasyon melanosit ki kache SL yo. Nou te deja rapòte ke ekspoze UVB nan kiltive melanosit imen kòm byen ke epidèm imen siyifikativman stimul ekspresyon nan c-KIT nan tou de nivo jèn ak pwoteyin [15,38]. Anplis de sa, nan pigmantasyon UVB-ankouraje nan po kochon Gine mawon jòn, yon antikò bloke nan c-KIT siyifikativman abroge kantite a ogmante kantite melanosit dopa-pozitif osi byen ke ipèpigmantasyon nan yon faz bonè nan pwosesis la pigmantasyon UVB-induit [16] , ki fòtman endike ke obligatwa nan SCF nan c-KIT jwe yon wòl enpòtan nan UVB-induced activation nan melanosit, ki mennen nan hyperpigmentation. An menm tan an ak ekspresyon SCF ogmante nan nivo jèn ak pwoteyin, nivo ekspresyon jèn reseptè c-KIT li yo te ogmante tou pa yon mwayèn de 2.14-pliye nan epidèm SL lesional [2]. Konfòm ak ekspresyon an ogmante nan c-KIT mRNA, te gen ogmante imunostaining ak antikò a c-KIT lokalize nan melanosit nan epidèm SL lesional (Figi 1m, n) [2]. Sa a sijere ke gen yon ogmantasyon kowòdone nan ekspresyon SCF ak reseptè c-KIT li yo nan epidèm SL lesional.

Nan lòt men an, lòt gwoup yo te ipotèz ke faktè kwasans keratinocyte (KGF) / KGF reseptè (KGFR) jwe yon wòl enpòtan nan inisyasyon fòmasyon SL ak nan ogmante pigmantasyon sèlman nan epidèm nan premye etap SLs [25]. Nan epidèm nan blesi [30] ak / oswa dèrm [25] nan SLs, ekspresyon KGF se upregulated sèlman nan nivo iminitè-tach byenke plis etid sou ekspresyon jèn ak pwoteyin li yo oblije pou nenpòt konklizyon final sou li kòm yon sitokin intrinsèque ki lakòz. SL yo. Pandan ke IL-1 yo konnen ki lakòz keratinosit estimile pwodiksyon an nan KGF, li rete klè sou ki jan ekspresyon KGF se upregulated nan epidèm nan blesi kote ekspresyon IL-1 se pito downregulated [2]. Natirèlman, li ta dwe detèmine si TNF (ki se upregulated nan epidèm nan blesi) gen yon kapasite tostimulate pwodiksyon KGF. Depi ekspresyon KGF nan po a se prensipalman limite nan fibroblasts po, li posib ke ekspresyon an ogmante nan KGF pa fibroblasts po nan dèrm la lezyonèl nan SLs [25] ki asosye ak tou de pwopagasyon an ogmante nan keratinocytes ak melanogenesis la ankouraje. Kidonk, li posib ke fibroblasts po yo pèsistans aktive pa ekspoze UV ​​lage KGF, ki aji dirèkteman oswa endirèkteman bon jan keratinosit pou modile ekspresyon SCF, kontribye nan hyperpigmentation SL [25].

Apre sa, nou te detèmine mekanis byolojik ki pèmèt sekresyon EDN1 reglemante nan epidèm lezyonèl SL yo. Li se byen konnen ke faktè byolojik ki asosye ak eksitasyon nan sekresyon EDN pa keratinosit imen gen ladan IL-1, faktè necrosis timè (TNF), ak anzim konvèti endothelin (ECE)-1. Konklizyon nou yo sou eksitasyon cytokine otokrin ki asosye ak melanoz UVB te demontre ke regilasyon IL-1 prensipalman responsab pou ankouraje pwodiksyon EDN1 ak SCF nan keratinosit imen UVB ki ekspoze [12,16]. Kidonk, IL-1 ak yo te jwenn ki pisan stimulateur nan sekresyon EDN ak yon pik reta nan keratinosit imen nan kilti ki sanble ak modèl la nan sekresyon EDN ki pwovoke UVB [11]. Li se byen konnen tou ke UVB iradyasyon siyifikativman estimile lage IL-1 men se pa IL-1 nan kiltive keratinosit imen e ke yon antikò bloke nan IL{-1 siyifikativman anile sekresyon an ogmante nan EDN1. [11], ki endike ke ipèpigmantasyon UVB-pwovoke medyatè atravè aktivasyon nan melanosit epidèm ki soti nan yon sekresyon ogmante nan EDN1 pa keratinosit ki ekspoze UVB. Anplis de sa, yo te jwenn ekspresyon nan pwoteyin mSCF siyifikativman ankouraje pa tretman ak IL-1 nan keratinosit imen nan kilti [16]. Se poutèt sa, nou te detèmine si wi ou non IL-1 te ogmante tou pou ankouraje ekspresyon EDN1 ak/oswa SCF nan epidèm lezyonèl SL yo. Enteresan, analiz semiquantitative RT-PCR te revele ke ekspresyon IL-1 mRNA se pito desann-reglemante nan epidèm blesi a [16]. Konfòm ak analiz RT-PCR sa a, imunohistochimi ak yon antikò IL-1 te revele yon tach imuno ki pi fèb nan epidèm nan blesi pase nan epidèm ki pa blesi (Figi 1o, p) [2], ki sijere ke IL{ {33}} pa responsab pou ogmante ekspresyon EDN1 ak SCF nan epidèm lezyonèl SL yo.

Konsènan mekanis ki kache ekspresyon an ogmante nan EDN1 nan SL yo, anplis IL-1, TNF nan 10 ng/mL te rapòte pa Tsuboiet al. yo dwe yon stimulateur ki pisan (pa 10-pliye) nan sekresyon EDN pa keratinosit kiltive imen [39]. Kòm pou mekanis ki kache ekspresyon an ogmante nan SCF nan SLs, nou pwochen egzamine efè yo nan TNF sou ekspresyon SCF nan kiltive keratinosit imen. Western blotting lè l sèvi avèk antikò anti-SCF demontre ke TNF siyifikativman stimul pwodiksyon an nan mSCF [15]. Se poutèt sa, nou pwochen detèmine si wi ou non TNF se upregulated nan estimile ekspresyon nan EDN1 ak / oswa SCF nan epidèm nan blesi nan SLs. Enteresan, semiquantitative RT-PCRanalysis revele ke ekspresyon an nan TNF mRNA se siyifikativman upregulated nan lezyonèl SL epidèm la [2]. Konfòm ak analiz RT-PCR la, imunohistochimi ak yon antikò anti-TNF te revele imunostaining pi fò nan epidèm SL lesional pase nan epidèm ki pa blesi (Figi 1q, r) [2]. Kidonk, li te posib ke ekspresyon an upregulated nan TNF se sitou responsab pou ekspresyon an ogmante nan EDN1 ak SCF nan epidèm nan blesi nan SLs.

Kòm pou mekanis ki enplike nan ekspresyon an ogmante nan EDN1, nou pwochen detèmine si ECE-1 se upregulated nan epidèm SL nan lezyonèl. Kòm pa gen okenn etid ki dekri ekspresyon ECE-1 nan keratinosit imen nan moman sa a, nou karakterize ECE-1 nan keratinosit kiltive imen konpare ak selil andothelial. Analiz de aktivite ECE-1 nan divès kalite selil po yo te revele ke keratinosit imen ak melanosit imen pa genyen aktivite ECE-1, ki rive nan yon pi piti limit pase nan selil andotelyal [40]. Western blotting, lè l sèvi avèk antikò nou te prepare pou ECE-1 , te demontre ke ECE-1 pwoteyin egziste nan selil andotelyo imen, fibroblast imen, ak keratinosit imen, men se pa nan melanosit imen [40]. Egzamen aktivite ECE-1 nan supernatant apre iminopresipitasyon ak antikò ECE-1 te demontre ke selil andotelyal yo ak keratinosit imen yo gen aktivite detektab nan ECE-1 nan pH 6.8, ki korelasyon byen ak ECE-1. {15}} imunoprecipitated ak antikò nou pou ECE-1 [40]. Analiz semiquantitative RT-PCR nivo ECE-1 mRNA te revele ke IL-1, men se pa TNF, te gen yon ti efè stimulation sou ekspresyon jèn ECE{-1 nan keratinosit kiltive moun [40]. Dapre analiz RT-PCR la, Western blotting te revele ke IL-1, men se pa TNF, ankouraje ekspresyon pwoteyin ECE-1 nan keratinosit kiltive moun [40]. Finalman, nou te detèmine si ECE-1 se reglemante tou pou ankouraje ekspresyon EDN1 nan epidèm blesi nan SL yo. Konfòm ak mank de yon efè stimulation nan TNF, ki se upregulated nan SLs, pa te gen okenn diferans nan nivo ekspresyon mRNA nan ECE-1 ant lesional ak epidèm ki pa blesi nan SLs [2], ki sijere ke ECE-1 pa responsab pou ogmante sekresyon EDN1 nan SL yo.

Figi 3 montre yon rezime eksitasyon otokrin nan keratinosit imen nan kilti. Kòm pou mekanis byolojik ki mennen nan deklanchman kaskad siyal EDN ak SCF [9], syans en vitro nou yo sijere yon kontras enteresan ki pandan y ap regilasyon nan IL-1 prensipalman responsab pou estimile pwodiksyon EDN1 ak SCF nan UVB- melanoz, se regilasyon TNF sitou ki asosye ak pwodiksyon an ankouraje nan de cytokin sa yo nan SL yo.

3.4. Sinèrjetik efè stimulation nan konbinezon an nan EDN1 ak SCF

Nou te deja rapòte ke gen yon sinèrji nan sentèz ADN stimulé nan kiltive melanosit imen jan yo mezire pa enkòporasyon 14C-thymidine nan ko-prezans nan SCF ak EDN1 [41]. Te gen tou yon sinèrji menm jan an nan eksitasyon nan sentèz melanin kòm mezire pa enkòporasyon 14C-thiouracil nan kiltive melanosit imen nan ko-prezans nan SCF ak EDN1 [41]. Kontrèman, pa te gen okenn sinerji sa yo ant EDN1 ak granulocyte macrophage koloni stimulatory factor (GM-CSF) oswa HGF [13,42]. Kòm pou mekanis siyal ki enplike nan efè sinèrji sa yo, nou te jwenn ke diskisyon an kwa ant SCF ak EDN1 siyal te inisye atravè tirozinfosforilasyon nan c-KIT ki ankouraje endirèkteman pa aktive PKC, ki amelyore fòmasyon nan Shc-Grb { {18}}Konplèks SOS ki mennen nan vire nan deklanchman sinèrjik nan bouk kinaz Ras/Raf-1/MEK/MAP [41].

3.5. Entèaksyon mityèl ant EDN/EDNBR ak SCF/c-KIT

Apre sa, nou te detèmine si pwodiksyon an ogmante nan SCF deklanche ekspresyon EDNBR oswa afinite li nan ligand EDN a nan melanosit imen anplis efè stimulation li sou pwopagasyon yo. Analiz Western blotting te revele ke SCF ka ankouraje ekspresyon pwoteyin EDNBR nan melanosit imen kiltive [43]. Lè yo te evalye afinite EDNBR ak ligand li yo nan melanosit imen kiltive lè l sèvi avèk yon tès ligand ligand, yo te jwenn siyifikativman ogmante de jou apre enkubasyon ak SCF [43]. Ansanm, rezilta sa yo endike ke SCF ki eksprime nan faz bonè a ka amelyore ekspresyon EDNBR, ki lakòz Melanocytes vin pi sansib nan sekresyon EDN1 pita. Nan lòt men an, lè kiltive melanosit imen yo te trete pou 48 èdtan ak EDN1 nan 10 nM, tès la ligand obligatwa lè l sèvi avèk 125I-SCF revele ke EDN1 klèman amelyore afinite a obligatwa nan SCF nan c-KITreceptor la [43].

4. Rezime Patobioloji SL yo

Tablo 1 montre yon rezime rezo cytokine parakrin ki rive nan divès maladi ipèdèm ipèpigmantè. Avèk respè rezo sa yo, SL yo sanble anpil ak UVB-melanosis eksepte pou cytokins ki lakòz yo tankou TNF pou ogmante pwodiksyon EDN1 ak SCF.

Kòm pou mekanis byolojik ki mennen nan aktivite ogmante nan kaskad siyal EDN ak SCF, etid in vitro nou yo te sijere ke pandan y ap regilasyon nan IL-1 se sitou responsab pou eksitan pwodiksyon EDN1 ak SCF nan UVB-melanosis, upregulation la. nan TNF ki asosye ak pwodiksyon an ankouraje nan sa yo menm de sitokin nan SL yo. Figi 4 montre yon rezime relasyon konplèks ant lyen SCF ak EDN1 nan epidèm SL yo. Sa gen ladann sinèrjism ant SCF ak EDN1 ak aktivasyon EDNBR ak c-KIT pa SCF ak pa EDN1, respektivman. Liberasyon TNF keratinosit yo simule pwodiksyon SCF ak EDN nan yon mòd otokrin, tou de nan yo ki montre yon efè sinèrjetik sou aktivasyon melanosit kòm byen ke yon efè stimulation sou ekspresyon de reseptè korespondan yo, c-KIT ak EDNBR. Entèraksyon sa yo sinèrjik ak entèraksyon entèselilè fasilite deklanchman melanosit nan yon pi gwo limit nan epidèm lezyonèl SL yo pase nan epidèm UVB ki ekspoze a, ki mennen nan ipèrpigmantasyon an pi entansif nan SL yo.

Ansanm, rezilta nou yo sijere ke de kaskad siyal, EDN1/EDNBR ak mSCF/c-KIT, jwe yon wòl intrinsèque ak kowòdone nan aksantye mitogenesis ak melanogenesis melanosit nan epidèm hyperpigmented SL yo. Figi 5 montre sekans byolojik pou mekanis ipèrpigmantasyon ki enplike nan SL, kote faktè tumigenik enkoni akòz domaj ADN kimilatif nan sot pase yo byen lwen lakòz keratinosit yo pwodui ak sekrete TNF. Kidonk, TNF lakòz keratinocytes overproduce melanogenic cytokines tankou SCF ak EDN1 nan yon mòd otokrin, deklanche melanosit adjasan yo estimile sentèz melanin, ki mennen nan ipèrpigmantasyon epidèm.

5. Apwòch tretman aktualite ki ka geri ou

Ki baze sou rezo parakrin melanojenik kowòdone ak mekanis siyal aktive ki mennen nan deklanchman melanosit nan epidèm lesionalSL la, bloke esansyèl melanogenic siyal entraselilè se yon apwòch terapetik dezirab pou reyalize efè anti-pigmantasyon sou SL yo. Yon apwòch konsa ta ka lakòz ipopigmantasyon, men li pa ta dwe efikas nan po ki pa blesi, kote kaskad siyal sa yo pa aktive nan melanosit. Nan lòt men an, anpeche aktivite tirozinaz se yon lòt apwòch pou amelyore ipèpigmantasyon nan SL, byenke li ta ka lakòz ipopigmantasyon epi li ta ka efikas tou nan po ki pa blesi.

5.1. Bloke Esansyèl Melanogenic Siyal Entraselilè

Piske prèske tout mitasyon ki mennen nan maladi ipopigmantè jenetik yo rive nan aks EDN1/EDNBR ak SCF/c-KIT [44] e depi genyen yon efè stimulation sinèrjetik nan EDN1/SCF sou pwopagasyon selil ak melanizasyon nan melanosit kiltive imen, li posib ke bloke. swa EDN1/EDNBR oswa SCF/c-KIT siyal ta ka anpeche ipèpigmantasyon akòz ekspresyon an kowòdone ogmante nan EDN1 ak SCF paske yon efè stimulation sinèrjetik echwe rive. Se poutèt sa, nou te eseye reyalize efè anti-pigmantasyon sou SL pa bloke liy siyal EDN / EDNBR la.

Chemen siyal entraselilè ki aktive EDN a konsiste de lye ak EDNBR, aktive PKC, kaskad kinaz MAP, ak kaskad cAMP/PKA [34,35,41]. Kidonk, aksyon selilè sa yo inisye pa lyezon EDN1 ak EDNBR ki makonnen G-pwoteyin, ki te swiv pa pwosesis siyal sekans ki fòme sitou nan PKC ak MAPK. Apre obligatwa nan reseptè li yo, EDN1 deklannche idroliz la nan polifosfoinozitid pa aktive fosfolipas C, ki jenere inositol-trisfosfat (IP3) ak dyacilglycerol, mobilize entraselilè Ca plis ak aktive PKC, respektivman. Aktivasyon PKC reyalize pa translokasyon li soti nan sitosol nan manbràn plasma a epi aktive Raf-1 atravè fosforilasyon. Kidonk, Raf-1 parèt yon pwen konvèjan ant chemen PKC ak MAPK. Aktivasyon Raf-1 mennen nan deklanchman yon seri entèmedyè MAPK ki gen ladan MEK, ERK, ak RSK.Phosphorylated Raf-1 aktive MEK pa fosforilasyon epi aktive MEK fosforil ERK. Lè sa a, ERK aktive a fosforil faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF) nan seri 75, ki mennen nan rekritman yon ko-aktivatè pou kontwole ekspresyon jèn plizyè faktè melanojèn [41]. An menm tan, MAPK aktive rezilta nan aktivasyon RSK, ki fosforil CREB, ki mennen ale nan transkripsyon MITF. Nan lòt men an, aktive PKC gen kwa-pale ak kaskad adenyl cyclase yo pwodwi cAMP[8], ki mennen nan aktivasyon an nan PKA, ki tou aktive CREB pa fosforilasyon, ki mennen nan ekspresyon an ogmante nan MITF. Nivo ogmante nan pwoteyin MITF stimul ekspresyon jèn melanosit espesifik ki gen ladan tirozinaz, PMEL17, EDNBR, c-KIT, ak CDK2.

Depi plizyè chemen siyal entraselilè mennen nan melanogenesis stimulé nan melanosit, epi kaskad siyal EDN a espesyalman asosye ak chemen PKC a, ki enplike mobilizasyon kalsyòm soti nan retikul andoplasmik [13], nou te itilize yon tès mobilizasyon kalsyòm pou tcheke antagonist EDNBR nan yon varyete. nan ekstrè èrbal. Mobilizasyon kalsyòm ki soti nan retikul endoplasmik la fèt apre jenerasyon IP3 ak diacylglycerol akòz idroliz polifosfoinozitid atravè fosfolipas C aktive. Lè melanosit imen yo trete nan kilti ak EDN1, mobilizasyon kalsyòm ki detekte pa reyaktif fura-2AM pwodui fliyoresans apre li fin konekte ak kalsyòm ki lage, jan yo wè aparans rapid nan yon koulè jòn ki ka mezire an tan reyèl pa mikwoskopi dijital imaj. Soti nan tès depistaj anpil ekstrè èrbal, nou te jwenn ke pre-enkubasyon ak yon ekstrè Matricaria chamomilla entèwonp mobilizasyon kalsyòm pwovoke pa EDN1 [1], ki sijere ke li ka sèvi kòm yon antagonist efikas kont EDNBR. M. chamomilla, souvan ke yo rekonèt kòm kamomiy, se yon plant anyèl nan fanmi konpoze Asteraceae. M. chamomilla se sous ki pi popilè nan kamomiy pwodwi èrbal, byenke lòt espès yo tou itilize kòm kamomiy.

Baze sou efè inhibition echantiyon fraksyon nan M. chamomilla ekstrè sou mobilizasyon kalsyòm EDN{{0}}pwovoke nan melanosit kiltidòm, nou idantifye spiroether kòm konpoze aktif li yo ak yon kapasite pisan pou entèwonp mobilizasyon kalsyòm (Figi 6). ) [1]. Gen de izomè nan spiroether (E ak Z), ak spiroether E-izomè a ka konplètman aboli mobilizasyon kalsyòm nan konsantrasyon ki gen plis pase 1 µM. Tretman ak spiroether E-izomè a nan 0.2 ak 1.0 pousan konsantrasyon siyifikativman redwi pigmantèr UVB-induit nan po kochon Gine mawon jòn jan evalye pa valè ∆L a, ki endike ke bloke EDN-medyatè kaskad siyal la. se efikas nan anpeche UVB-induit hyperpigmentation. Sa a se yon prèv enpòtan nan vivo ki montre patisipasyon intrinsèques nan kaskad EDN nan UVB-melanosis.Nan lòt men an, jan yo espere, lè pre- oswa ko-enkube nan kilti melanosit, M. chamomilla ekstrè a te gen yon kapasite ki pisan pou aboli. Ogmantasyon EDN1-pwovoke nan sentèz ADN (jan yo mezire pa enkòporasyon 14C-timidin) ak sentèz melanin (jan yo mezire pa enkòporasyon 14C-thiouracil) pa kiltive melanosit imen. Nan yon etid paralèl ki itilize keratinosit kiltive imen, nou verifye ke ekstrè M.chamomilla pa te gen okenn efè inhibition sou sekresyon IL-1 -pwovoke nan EDN1 [1]. Anplis de sa, lè l sèvi avèk tirozinaz ki sòti nan humanmelanocytes, nou konfime ke M. chamomilla ekstrè a pa te gen okenn efè inhibition sou aktivite tirozinaz nan vitro kontrèman ak efè yo distenk inhibition pa ajan yo blanchi byen li te ye, asid kojik ak arbutin [1]. Lè ekstrè M. chamomilla te aplike chak jou nan po kochon jòn mawon pou de semèn imedyatman apre iradyasyon UVB, entansite pigmantasyon UVB-induit te diminye anpil lè yo konpare ak tretman ak 10 pousan arbutin oswa machin sèlman [1].

Nan yon etid klinik imen, aplikasyon an aktualite nan M. chamomilla ekstrè yo nan UVB-ekspoze po avanbra imen pou sis semèn imedyatman apre iradyasyon an te jwenn siyifikativman anpeche ipèpigmantasyon UVB-pwovoke jan yo mezire pa yon mèt diferans koulè ak eksprime kòm yon ∆ L valè.

Sèvi ak yon M. chamomilla ekstrè ki gen sir kalite baton, nou egzamine efè klinik yo sou pigmantè inSLs. Nan etid klinik sa a, yo te egzamine chak tach pigman pou chanjman koulè epi yo te evalye degre nan amelyorasyon klinik ak validite. Yon evalyasyon klinik ki te fèt nan Tokyo Women's Medical University te revele ke tretman pou de mwa ak ekstrè M.chamomilla a te lakòz 48 pousan nan sijè ki montre yon amelyorasyon ki make ak 40 pousan ak yon ti amelyorasyon [1]. Nan chanjman nan nivo pigmantasyon ki mezire pa valè ∆L, tout pasyan ki gen SL yo te gen yon ogmantasyon distenk pase de nan valè ∆L yo, yon nivo vizib rekonèt, apre tretman pou 2 ~ 3 mwa. Te gen yon diminisyon enpòtan nan nivo pigmantasyon an jan yo mezire pa valè ∆L ant 0, 1, ak 2 mwa apre tretman an (Figi 7). An jeneral, evalyasyon klinik la pou twa mwa te revele ke tretman ak M. chamomilla ekstrè a te lakòz 42 pousan nan sijè ki montre yon amelyorasyon ki make, 12 pousan ak yon amelyorasyon modere, ak 25 pousan ak yon ti amelyorasyon. Yon lòt esè klinik ki fèt nan de lopital ki gen rapò ak dèrmatolojik nan Tokyo te demontre ke tretman ak M. chamomilla ekstrè piti piti redwi pigmantasyon an epi apre sis mwa, te lakòz apeprè 70 pousan nan sijè ki montre plis pase ti amelyorasyon ki gen ladan 10 pousan ak disparisyon ak 15 pousan ak amelyorasyon ki make. . Te gen de ka kote SL yo te konplètman disparèt apre apeprè sis mwa tretman, ak valè ∆L ogmante jiska 8.4 ak 6.9 apre sis mwa tretman (Figi 8) [1].

An konklizyon, konsènan apwòch ki ka geri pou SL yo lè yo bloke siyal entraselilè melanojèn esansyèl, etid klinik ki anwo yo sijere ke bloke siyal ki asosye ak EDN1/EDNBR se yon tretman efikas pou SL yo san okenn efè ipopigman.

5.2. Anpeche Aktivite Tirozinaz

Anpeche aktivite tirozinaz se yon lòt apwòch pou amelyore ipèpigmantasyon nan SL ki gen dezavantaj posib nan ipopigmantasyon, men benefis potansyèl pou yo te efikas tou nan po ki pa blesi. Kòm ajan blanchi yo jeneralman fèt pou trete UVB-melanosis, pa te gen yon etid klinik doub-avèg pou efè potansyèl anti-pigmantasyon ajan blanchiman sou SL yo. Nou te fè yon etid mwatye figi doub-avèg sou 27 volontè Japonè fi ki gen SL yo. Nan etid klinik sa a, yo te aplike losyon ak oswa san 6 pousan L-ascorbate-2-fosfat 3 Na (APS) (losyon tès/losyon plasebo, respektivman) de fwa pa jou sou figi a pandan 24 semèn [45]. Foto reprezantatif vizaj sijè yo nimewo 012 ak nimewo 016 anvan ak apre tretman an te demontre ke nivo pigmantasyon nan tès losyon-trete SL yo te parèt yon ti kras diminye nan konsè ak yon ti diminisyon nan tès la losyon-trete po ki pa blesi. 45]. Kontrèman, nivo pigmantasyon nan SL yo trete losyon plasebo ak po ki pa blesi a te parèt san okenn chanjman. Lè nou konsidere ke valè L nan SL yo te trete avèk losyon yo te ogmante siyifikativman apre 24 semèn nan tretman an, valè L nan SL yo te trete ak losyon plasebo yo te rete san chanjman (Figi 9) [45].Konparezon valè oL anvan ak apre tretman yo te revele yon siyifikativman pi wo. Valè oL nan SL ki te trete avèk losyon yo pase nan SL ki te trete ak losyon plasebo yo (Figi 9). Konklizyon sa yo sijere ke losyon tès ki gen APS la te gen yon efè anti-pigmantasyon siyifikativman pi fò sou SL pase losyon plasebo a. Lè nou konsidere ke valè L nan po ki pa blesiman trete ak losyon tès la te ogmante siyifikativman apre tretman an pou 24 semèn, valè L nan po ki pa blesiman ki te trete ak losyon plasebo a te rete san okenn chanjman. Konparezon valè oL yo anvan ak apre tretman yo te revele yon valè oL siyifikativman pi wo nan po ki pa blesi yo trete ak losyon tès la pase nan po ki pa blesi yo trete ak losyon plasebo [45]. Konklizyon sa yo sijere ke losyon tès la te gen yon efè blanchiman siyifikativman pi fò sou po ki pa blesi pase losyon plasebo a. Konparezon efè anti-pigmantasyon ant SL yo ak po ki pa blesi yo te revele ke pandan ke te gen valè oL siyifikativman pi wo ant anvan ak apre tretman ak losyon tès la nan SLs pase nan po ki pa blesi, valè oL yo te fèt nan yon nivo menm jan an. nan SL yo ak po ki pa blesi, san okenn diferans enpòtan ant yo [45].

Cistanche inibit aktivite tirozinaz.

Relasyon ki genyen ant valè L yo ak endis melanin pou tout mezi pandan etid klinik sa a revele yon korelasyon enpòtan ant yo tou de. Rezilta sa a te endike ke yon valè 2.0 ∆L te apeprè ekivalan a yon 20 ∆ endèks melanin ak yon 10-pliye pi wo sansiblite nan endèks melanin la pase valè L la. Yon konparezon ant valè L yo ak endis melanin pou chak mezi nan semèn 0 ak 24 sou SL yo revele korelasyon enpòtan. Konparezon sa yo ant valè L yo ak endis melanin yo te endike ke te gen yon chanjman distribisyon ki make nan direksyon yon koulè pi lejè tankou yon pi gwo valè L ak yon pi piti endèks melanin nan SL yo te trete avèk losyon yo alòske te gen yon chanjman distribisyon diferan nan losyon plasebo a. -trete SLs [45].

An konklizyon, konsènan yon apwòch terapetik pou SL yo lè l sèvi avèk yon inibitè tirozinaz, sòm rezilta ki anwo yo endike fòtman ke APS gen yon efè anti-pigmantasyon fèb men enpòtan sou SL yo ak yon efè blanchiman enpòtan menm sou po nòmal ki gen koulè sante, san okenn efè ipopigman.

6. Konklizyon

An konklizyon, konsènan mekanis aktivasyon melanosit yo ak tretman aktualite ki ka geri SL yo, ki baze sou rezilta ki anwo yo nan mekanis aktivasyon melanosit nan SL yo ak efikasite klinik yo jwenn lè l sèvi avèk yon bloke siyal EDN ak yon inhibitor tirosinase, li sigjere ke tretman konbine nan yon bloke siyal EDN ak yon inibitè tirozinaz se yon tretman dezirab pou SL yo.

tablèt cistanche

Pou plis enfòmasyon, tanpri klike sou foto a.