Nano Lèt Pwoteyin-Mucilaj Konplèks: Karakterizasyon ak Efè Antikansè Pati 1

Pou plis detay, kontaktetina.xiang@wecistanche.com

Résumé: laantikansèaktivite konpoze natirèl dènyèman te atire rechèch miltidisiplinè. Nan etid sa a, yo te envestige konplèks pwoteyin lèt (MP) ak Isabgol husk mucilage (IHM) ak Ziziphus Spina Christi mucilage (NabM). Nan kontèks sa a, yo te mezire pwopriyete fizikochimik nan konplèks mucilaj pwoteyin lèt (MPMC) ki gen ladan pH, endèks Carr, solubilite dlo, ak endis absòpsyon dlo, epi yo te etidye konpòtman koule a. Anplis de sa, pwofil la asid amine, dijèstibilite pwoteyin, ak fenolik akflavonoidkontni MPMC yo te eksplore, epi yo te vizyalize mikwostrikti konplèks yo lè l sèvi avèk mikwoskospi elektwonik transmisyon. Laantioksidanak pisans antikansè MPMC kont de liy selil kansè yo, kansè fwa imen HEPG-2 ak kansè nan tete MCF-7, an konparezon ak de liy selil nòmal, sètadi, Bj-1 ak MCF{{ 3}}F, yo te teste lè l sèvi avèk tès absòpsyon wouj net. Rezilta yo te revele ke MPMC te gen aktivite scavenging kont DPPH, ABTS, ak radikal HS. Anplis, MPMC gen potansyèl pou anpeche domaj ADN pwovoke pa estrès oksidatif nan reyaksyon Type-Fenton la. Rezilta yo nan tès net wouj la te montre siyifikatif anpèchman kwasans tou de HEPG-2, MCF{-7, tandiske pa gen okenn efè sitotoksik enpòtan yo te detekte kont Bj-1 ak MCF-12F. Rezilta RT-qPCR yo endike MPMC ankouraje apoptoz jan yo revele pa ogmantasyon nan makè jèn pro-apoptoz Caspase -3, p53, Bax. Pandan se tan, anti-apoptoz Bcl-2 jèn yo te downregulated. Sepandan, pa gen okenn diferans enpòtan yo te obsève nan liy selil nòmal trete ak MPMC.An konklizyon, MPMC ka konsidere kòm yon antite pwomèt antikansè ki ka itilize nan devlopman nan terapetik nouvo kansè ak aktivite konparab ak efè segondè minimòm konpare ak chimyoterapi kansè konvansyonèl yo. .

Mo kle: pwoteyin lèt; Isabgol mucilage kale; Nabeq mizilaj; pwoteyin lèt konplèks mizilaj; aktivite antikansè

Klike pou aprann plis sou pwodwi yo

1. Entwodiksyon

Kansèse kòz prensipal mòtalite atravè mond lan ak apeprè 10 milyon lanmò nan 2020 [1]. Dyagnostik bonè ak devlopman nan terapetik roman se sèl espwa pou defèt kansè. Tretman kansè konvansyonèl tankou chimyoterapi ak radyasyon yo relativman chè epi yo akonpaye pa efè segondè enpòtan.

Se poutèt sa, enterè syantifik ak rechèch gen tandans pou itilizasyon natirèl com-pounds (sa vle di, pwoteyin, polisakarid, ak polifenol) ki soti nan sous yo ki gen potansyèl antikanserojèn paske yo konsidere yo gen mwens efè segondè toksik konpare ak tretman konvansyonèl yo.

PolisakaridDènyèman, soti nan sous plant yo te resevwa ogmante atansyon akòz pwopriyete byoaktif yo [2,3]. Anpil etid yo te enterese nan izole polisakarid byoaktif ak polifenol ki soti nan sous natirèl plant tankou fwi, legim, sereyal, ak remèd fèy akòz efè farmakolojik benefisye [4].

Plantago ovata (Psyllium oswa Isabgol) ak Ziziphus Spina-Christi (Nabeg oswa Sidr) se sous li te ye nan polisakarid byaktif. IHM ak NabM yo te chwazi kòm materyèl bioaktif pwomèt. Etid anvan yo te endike ke IHM ak NabM konplèks ak pwoteyin lèt amelyore fonksyon fwa ak diminye risk pou maladi kadyovaskilè [5]. Isabgol kal te pwouve yo dwe efikas pou tretman dyare, konstipasyon, kolit ilsè, sendwòm entesten chimerik, ipèkolesterolemi, ak dyabèt. Anplis, efè antikansè isabgol kal kont kansè kolorektal te atribiye nan kontni fib li yo, ki aji diminye efè li yo lè yo diminye tan transpò piblik. Sa a ap mennen nan diminye metabolis kòlè pa mikroflor nan zantray, dilution nan asid kòlè yo pa bulking poupou, chanjman nan metabolis asid kòlè mikwòb akòz fèmantasyon fib, rediksyon nan pH la ak pwodiksyon nan chenn kout asid gra, oswa pa obligatwa dirèk nan la. asid bile yo e pakonsekan anpeche metabolis yo [6]. Konpozan prensipal yo biyolojik aktif nan Ziziphus Spina-Christi se vitamin C, fenolik, flavonoid, ak asid triterpenik. Byoaktivite li yo gen ladan aktivite antikansè, anti-bakteri, antidyabetik, antiproliferatif ak antioksidan [7. Isabgol husk ak Nabeq fwi yo itilize pou pwodiksyon Isabgol husk mucilage (IHM) ak Nabeq mucilage (NabM), respektivman [5].

Nan lòt men an, terapi ki baze sou pwoteyin pou kansè yo te vin ogmante enterè akòz karakteristik kle tankou sitotoksisite ki ba, espesifik espesifik, ak fasilite nan modifikasyon [8]. Anplis de sa nan bay bezwen nitrisyonèl nan asid amine esansyèl, pwoteyin lèt yo se pami makromolekil byolojik ki gen anpil pwopriyete fonksyonèl tankou pwopriyete antioksidan, imunomodulatwa, antidyabetik, antimikwòb, ak antikansè [9,10]. Pou egzanp, aktivite antikansè nan peptides ki sòti nan letye (sa vle di, -Casomorphins izole nan -kazein ak 1-frajman kazein 90-95 ak 90-96[Arg90-Tyr-Leu -Gly-Tyr-Leu95-(Glu96)]) idantifye nan lèt bovine sipòte sipozisyon an ke pwoteyin lèt yo pa sèlman nan valè nourisan, men tou gen potansyèl pou prevansyon kansè ak tretman [11,12]

Konpleksasyon ant pwoteyin lèt ak polisakarid, tankou pwoteyin lèt-chitosan konplèks, te deja pwodwi kòm yon tantativ amelyore pwopriyete yo fonksyonèl nan eleman natirèl yo [13]. Akòz disponiblite a ak fasilite nan preparasyon, konplèks sa yo gen potansyèl la yo dwe itilize nan devlopman nan mwens chè terapi antikansè. Terapi sa yo pral mwens chè epi yo montre aktivite ki konparab ak chimyoterapi yo itilize kounye a.

Liaison ki pa kovalan atravè entèraksyon idrofob ak elektwostatik se faktè prensipal nan asosyasyon pwoteyin lèt akpolisakarid[14]. Anplis, pwoteyin montre rezistans etone nan direksyon entèraksyon ak lòt konpozan nan yon seri pH soti nan 2 a 11. Nan yon pH espesifik, reyaksyon an sifas nan pwoteyin ogmante atravè dewoulman nan estrikti pwoteyin [15].

Nan kontèks sa a, gwoup nou an te dènyèman konsantre sou wòl nan fonksyonèl nan konplèks pwoteyin lèt sou sante moun. Sepandan, konplèks pwoteyin lèt ak IHM oswa NabM, te ekspoze pwopriyete antihyperlipidemic ak pwoteksyon fwa [9]. Kidonk, ki baze sou etid anvan yo, li te postule ke konplèks pwoteyin-polysakarid lèt ta ka gen aktivite antikansè enteresan. Anplis de sa, pa gen okenn piblikasyon ki te fè yon etid sou aktivite a kansè nan konplèks pwoteyin lèt ak IHM ak NabM. Se poutèt sa, objektif prensipal yo nan etid sa a se te karakterize pwopriyete yo fizikochimik nan konplèks yo ki fèk pwodui pwoteyin lèt ki gen ladan, pwofil la asid amine ak pwopriyete fonksyonèl nan konplèks sa yo. Anplis de sa, yo te envestige aktivite antikansè nan konplèks pwoteyin lèt ak IHM ak NabM mucilage kont de selil kansè imen (MCF7 ak HEPG2) an konparezon ak liy selil ki pa kansè (Bi-1 ak MCF-12F). ). Nou menm tou nou fè limyè sou mòd aksyon an nan konplèks mizilaj pwoteyin lèt yo pwodui.

2. Rezilta ak Diskisyon

2.1. Fourier-transfòme enfrawouj (FTIR) Spectroskopi

Spectre enfrawouj IHM, MP, ak MP/IHM yo ilistre nan Figi 1A. Spectre IHM te montre bann karakteristik arabinoksilan yo nan 100-1200 cm{-1 ak gwoup yo pou gwoup amid I ak amid II nan 1550 ak 1650 cm-1, respektivman. Spectre MP a montre bann nan 1700-1600 ak 1200-900 cm-I ki koresponn ak amid I (sitou C=O etann pwoteyin) ak idrat kabòn lèt, respektivman [16]. Pik yo mansyone pi wo a nan IHM ak MP yo te rezève nan spectre a nan konplèks la IHM / MP. Menm jan an tou, bann karakteristik asid galakturonik nan NabM yo te kenbe nan spectre konplèks NabM/MP (Figi 1B). Sa a ta endike absans la nan entèraksyon chimik ant polisakarid mucilage ak MP e konsa konfime mekanis yo pwopoze a nan atraksyon elektwostatik ant MP ak polisakarid (IHM ak NabM). Obsèvasyon sa yo nan liy ak sa yo ki nan Vukic et al, ki te rapòte fòmasyon konplèks ant pwoteyin laktoserom lèt ak pèktin atravè entèraksyon elektwostatik ak idrofob ki te lakòz yon konsistans bon nan konplèks la [17].

2.2. Pwopriyete fizik ak fonksyonèl MP ak MPMC

Valè dansite esansyèl (BD), dansite tiyo (TD), Endèks Carr, ak mezi pH yo ki nan lis nan Tablo 1. BD ak TD nan MP yo te pi wo pase IHM, epi IHM te gen pi ba en ak dansite tapped nan echantiyon yo teste yo. . Menm jan an tou, MP/IHM konplèks te gen anpil (p<0.05) lower="" bulk="" and="" tapped="" density="" compared="" to="" mp/nabm.="" the="" obtained="" results="" indicated="" that="" the="" distribution="" and="" solubility="" of="" mp="" have="" been="" improved="" by="" complexation="" with="" the="" ihm.="" carr's="" index="" is="" frequently="" used="" as="" an="" indication="" of="" the="" flowability="" of="" powders.="" the="" results="" in="" table="" 1="" show="" that="" carr's="" index="" of="" mpmc="" was="" significantly="" lower="" than="" ihm="" which="" indicated="" that="" nabm="" improved="" the="" flowability="" of="" mp.="" this="" was="" probably="" due="" to="" the="" lower="" carr's="" index="" value="" of="" mp(30.6±="" 0.10%)="" compared="" to="" ihm="" and="" nabm="" (57.58±0.14="" and="" 53.97±0.11%,="" respectively)which="" are="" vicious.ihm="" is="" alkaline="" (7.79="" ph)="" while="" mp="" and="" the="" complexes="" with="" polysaccharide="" mucilage="" were="" slightly="" acidic="" which="" came="" in="" accordance="" with="" previously="" reported="" results="">

WSI ak WAI se karakteristik fonksyonèl enpòtan nan teknoloji manje. Tablo 1 montre ke WSI ak WAI nan MP ogmante siyifikativman apre konplèks ak IHM ak NabM. Sa a te gen plis chans paske materyèl ki baze sou Isabgol yo trè idrosolubl ak yon efè epesman apre adisyon a nan kantite bon jan dlo [19]. Anplis de sa, Qaisrani et al. rapòte ke arabinoxylans nan Isabgol koki gen yon kapasite kenbe dlo jiska dis fwa nan pwa sèk yo [20]. Anplis, MP/IHM gen pi wo WSI ak WAI pase MP/NabM depi IHM gen pi wo WSI ak WAI pase NabM. Anplis de sa, ogmantasyon nan pousantaj WSI pou MPMC konpare ak MP te mennen nan yon ogmantasyon nan dispèsibilite nan eleman aktif sib yo lè w ap itilize yo nan pwoblèm terapetik [21]. Sa a te klè nan rezilta yo antikansè ki demontre ke konplèks sa yo gen yon efè sitotoksik pase MP.

2.3. Konpozan byoaktif

2.3.1. Konpoze fenolik nan PHM ak NabM

Manje gen konpoze bioaktif trè enpòtan (sa vle di, fenolik ak flavonoid) ki aji kòm antioksidan ak pisans antikansè. Analiz HPLC konfime ak quantifye prezans nan anpil konpoze fenolik nan Nab ak IHM jan yo montre nan Figi 2. Rezilta yo montre kontni an wo nan divès kalite konpoze byolojik aktif tankou asid galik (177.96 mg/Kg), catekol (13.87 mg/Kg) p-Hydroxy asid benzoik (24.02 mg/Kg), Catechin (5.93 mg/Kg) ak rutin (123.70mg/Kg) nan ekstrè PHM ak Catechol (410.72mg/Kg) p-Idroksi asid benzoik (426.71mg/Kg) Chlorgenic (72.05 mg/Kg) Rutin (1750.57 mg/Kg), ak rosemarinic (1771.72 mg/Kg) nan NabM (Figi 2A, B). Kontni an nan konpoze sa yo trè enpòtan pou benefis sante. Efè antikansè konpoze fenolik yo te deja rapòte. Efè sa a te sitou atribiye nan efè a antioksidan nan konpoze sa yo.

2.3.2. Total fenolik, flavonoid, ak aktivite antioksidan nan MP ak MPMC

Plizyè rapò te endike ke konpoze ki montre pwopriyete antioksidan sitou montre aktivite antikansè [22]. Total phenolic (TP) ak total flavonoid (TF) kontni yo te detèmine nan NabM, IHM, MP, ak konplèks yo (Figi 3A, B). Rezilta yo te endike ke TP ak TF te pi wo nan NabM ak MP/NabM konpare ak IHM ak MP/IHM. Sepandan, TP ak TF kontni yo te siyifikativman pi ba nan MP konpare ak MPC. Rezilta sa yo te vin an akò ak done Singh et al rapòte.[23] ki te jwenn ke TP ak TF nan NabM yo te 1.6 GAE mg / 100 g pwa sèk ak 47 mg CE / 100g pwa sèk, respektivman. Konplèks MP/NabM ak MP/IHM te montre yon ogmantasyon enpòtan nan 309 pousan ak 59 pousan nan TP ak 476 pousan ak 123 pousan nan TF konpare ak MP, respektivman. Konjigezon nan MP ak IHM ak NabM te mennen nan pèt la nan 23 pousan ak 36 pousan nan TPC korespondan IHM ak NabM, respektivman. TF te redwi pa 44 pousan nan IHM ak 46 pousan nan NabM lè konplèks ak MP. Sa a te pi pwobableman akòz TP ki ba ak TF nan MP.

Figi 3C-E ilistre aktivite radikal potansyèl MP/IHM ak MP/NabM konpare ak MP lè l sèvi avèk DPPH, ABTS, ak HS. Done yo jwenn nan twa aktivite antioksidan yo te gen yon tandans menm jan an ki endike ke NabM parèt pi wo aktivite antioksidan pase IHM e sa a se nan yon kontèks rezilta yo nan fenolik ak

kontni flavonoid. Kapasite antioksidan MP te ogmante apre konplèks ak NabM ak IHM. Ak eksepsyon de tès ABTS, aktivite antioksidan NabM ogmante pa konjigezon ak MP. Aktivite antioksidan an te endike ke MPMC te gen pi wo aktivite antioksidan konpare ak MP. Ipotèz nou an montre yon entèraksyon posib ant MP ak polisakarid ki mennen nan jwenn aktivite antioksidan potansyèl jan Li et al dekri. [24]. Li te deja rapòte ke gen yon korelasyon pozitif ant kapasite nan scavenging ak kontni fenolik / flavonoid 5]. Sepandan, nou pa ka eskli ke nouvo peptides bioaktif ki rich ak asid amine souf ki gen ladan yo pwodui, ki eksplike aktivite antioksidan segondè nan MPMC konpare ak eleman yo san konplèks. Anplis, ti peptides yo lage nan fraksyon laktoserom ki enfliyanse pwopriyete antioksidan segondè [4]. Finalman, kontni fenolik ak flavonoid afekte diferan selil kansè yo. Anplis de sa, pandan tès kilti selil in vitro, yo te obsève aktivite ak mekanis sa yo. Aktivite antioksidan ak antikansè nan fenolik yo atribiye nan lyezon doub ak sibstitisyon idroksil sou bag aromat yo [25].

2.4.Amino Asid Profile MP ak MPMC

Des asid amine MP, NabM, MP/IHM, ak MP/NabMare ilistre nan Figi 4. Pa te gen okenn diferans enpòtan nan pwofil asid amine MP ak konplèks li yo ak IHM ak NabM. Sa a te endike ke entèraksyon an ki pa kovalan nan MP ak polisakarid mucilaj pa t 'chanje konpozisyon an nan pwoteyin lèt. Rezilta yo montre kontni an wo nan asid glutamik nan MP ak MPMC (Figi 4) [26].

2.5. Pwopriyete reolojik MP ak MPMC yo

2.5.1.Aparan Viskozite

Figi S1 montre viskozite echantiyon pwoteyin nan diferan valè rpm. IHM ak NabM te gen gwo viskozite nan wotasyon dousman, men viskozite a diminye anpil kòm vitès wotasyon an ogmante. Konklizyon sa yo te an akò ak Chen ak Che ki te anrejistre viskozite aparan nan mucilaj dlo-idrosolubl nan lavè vèt (Monostroma iridium) diminye lè yo ogmante to a taye [27].

Rezilta yo nan Figi S1 montre tou ke konpleksasyon MP ak IHM ak NabM te lakòz yon ogmantasyon siyifikatif (p mwens pase oswa egal a 0.05) nan viskozite aparan MP. Sa a ta ka atribiye a pwopriyete yo inik nan IHM (materyèl idrokoloid) ki gen yon efè viskozite-amelyore [28].

2.5.2.Konpòtman koule

Figi S2 montre konpòtman sikilasyon an (koub estrès taye/koub to taye) nan pwoteyin lèt ak konplèks yo. Avèk ogmantasyon pousantaj taye, estrès taye ogmante. Transfòme estrès taye ak done to taye nan ekwasyon pouvwa-lwa a, valè endèks konsistans koule (K) ak endèks konpòtman koule (n) yo montre nan Tablo S1.IHM ak MP/IHM te gen endèks konsistans koule ki pi wo a. Sa a ta ka akòz gwo viskozite nan dlo-idrosolubl mucilage nan IHM akòz gwo kapasite li yo pou kenbe dlo ak gelling nan yon mwayen akeuz. Rezilta yo te demontre tou ke IHIM, NabM, ak MP/IHM te gen konpòtman taye-eklèsi (likid ki pa Newtonyen) ak yon valè n ba ki sòti nan 0.25 a 0.64. Rezilta sa yo te vini an akò ak Thanatcha ak Pranee ki te etidye pwopriyete fizikochimik Ziziphus mauritiana [29]. Nan lòt men an, n valè MP a te apeprè 1(0.99) ki endike koule Newtonyen. Menm jan an tou, n valè pou konplèks MP/NabM la te 0.95 jan yo montre nan Tablo S1.

2.6.Differential Scanning kalorimetri MP ak MPMC

Yo te itilize kalorimetri diferansyèl optik pou mennen ankèt sou estabilite tèmik MP ak konplèks li yo ak IHIM ak NabM. Tèmogram MP ak MPMC yo ilistre nan Figi S3, epi paramèt DSC yo bay nan Tablo 2. Yo te obsève ke pa te gen okenn pik andotèmik klè sou tèmogram MP la, men te gen yon pik endotèmik enpòtan pou MP/IHM ak yon gwo pik andotèmik pou MP/NabM. Sa a se pwobableman akòz eliminasyon an gradyèl nan dlo gratis, pwen an k ap fonn nan NabM, jelasyon dousman, ak denaturasyon pwoteyin [30].

Li te tou te note ke MPMC te plis chalè ki estab pase pwoteyin san konplèks jan yo obsève pa tanperati a denaturasyon ki ba nan MP (101.44 degre) konpare ak MP / IHM ak MP / NabM (148.24 ak 121.4 degre, respektivman) jan yo montre nan Tablo 2. Anplis, tanperati degradasyon MP an te anrejistre 302.3 degre, tandiske pa gen okenn degradasyon MPMC obsève ak yon ogmantasyon tanperati jiska 350C. Konklizyon sa yo te an akò ak plizyè etid, ki te jwenn ke estabilite nan tèmik nan pwoteyin lèt ogmante pa entèraksyon an ak konpoze fenolik ki anpeche agrégation pwoteyin [2,31].

Chalè ki pase nan oswa soti nan sistèm nan pandan yon reyaksyon se enthalpy a (AH). Entalpi ki pi wo nan MP/IHM ak MP/NabM konpare ak MP ki pa konplike a ta ka akòz reyaksyon chimik potansyèl ant pwoteyin lèt (laktoserom ak kazein) ak ant pwoteyin lèt ak polisakarid nan tanperati ki wo (reaksyon Maillard). 31.

2.7.Transmisyon mikwoskopi elektwonik (TEM) nan MP ak MPMC

Figi 5 montre mikwostrikti IHM, NabM, MP, ak MPMC. Yo te jwenn ke gwosè patikil MPMC te nan ranje nano (114-250 nm), epi li te pi piti pase gwosè patikil MP (191-300 nm). Anplis de sa, TEM nan MPMC (Figi 5D, E) revele modèl la branche nan konplèks yo fòme. Sa a ta ka atribiye a atraksyon elektwostatik ant pwoteyin lèt ak polisakarid Goh, et al. [32]. Anplis, pi gwo estrikti branch MP / IHM konpare ak MP / NabM ta ka responsab pou pi wo viskozite li yo jan yo montre nan Figi S1.

2.8. Etid byolojik sou MP ak MPMC

2.8.1. Aktivite Antikansè MP ak MPMC

Efè sitotoksik divès kalite konsantrasyon (1, 5, 10, ak 20 ug/mL) MP ak MPMC sou selil HepG-2 ak MCF-7 konpare ak MCF-12F ak Bij{ {7}} selil nòmal yo ilistre nan Figi 6 ak 7. MPMC te montre efè antikansè sou selil HepG-2 ak MCF-7 Figi 6A, B, respektivman. Koub dòz-reponn a montre yon rediksyon nan viabilite selil an repons a pi wo konsantrasyon. Nan lòt men an, pa gen okenn efè sitotoksik enpòtan nan MP ak MPMC sou Bj -1 ak MCF -12 F selil nòmal yo te obsève (Figi 6C, D). Rezilta nou yo te endike tou ke MP/NabM te gen pi gwo aktivite antikansè kont liy selil kansè HepG-2 ak MCF{-7, ak valè IC50 5.13 ak 10.07 ug/mL, respektivman. Anplis de sa, MP / IHM te montre yon efè sitotoksik modere kont liy selil kansè yo konpare ak kontwòl respektif yo. Ansanm, done cytotoxik nou yo sijere ke konpleksasyon MP ak IHM ak NabM amelyore siyifikativman aktivite antikansè a konpare ak pwoteyin lèt san konplèks, jan yo montre nan Tablo 3. Li te evidan tou ke selil Hep G-2 yo te pi sansib a MP ak MPMC. konpare ak selil MCF-7 jan yo manifeste pa pi ba valè IC50 yo.

Yo te deja rapòte efè antikansè nan peptides antitumor ki sòti nan pwoteyin lèt. Nan kontèks sa a, Jeong ak Hong [33] te obsève ke trypsin hydrolysates nan -lactalbumin te gen yon efè sitotoksik sou kansè nan zo imen SJSA -1, kansè kolorektal imen HCT 116, ak kansè nan gastric imen NCI-N87 selil selil. Li te jwenn ke o-lactalbumin, reyaji ak modulateur sifas selil yo ak chanje pousantaj kwasans selil, kalsyòm intraselilè, ak pousantaj transpò kalsyòm [34]. Li se vo anyen ke laktoferrin bovins pwovoke apoptoz nan selil MCF7 nan yon fason ki depann de dòz [35]. Anplis, kazein ak fraksyon pwoteyin laktoserom nan lèt te montre efè antitumoral nan yon modèl bèt ak aktivite antiproliferatif nan vitro [36]. Anplis de sa, Elzoghby et al.[37] rapòte ke kazein nanopartikul yo ka itilize yo ankapsule dwòg antikansè idrofob la, flutamid, kontwole liberasyon dwòg la, amelyore aktivite anti-timè li yo, ak diminye epatotoksisite li yo.

Efè antikansè IHIM ak NabM te deja rapòte [6,38]. Efè cytotoxik MP ak MPMC ta ka atribiye a prezans asid amine tankou glutamin, arjinin, ak sistein ki rapòte yo montre aktivite antikansè kont kansè kolorektal [39]. Rezilta sa yo an akò ak kontni segondè nan asid glutamik MPMC (Figi 5).

2.8.2. Detèminasyon Nivo Pwoteyin p53, Bax, Caspase-3, ak Bd-2

Yo nan lòd yo mennen ankèt sou mekanis sitotoksisite MPMC, yo te detèmine nivo pwoteyin makè apoptoz p53, Bax, Caspase-3, ak Bcl-2 nan HepG-2, MCF-7 , Bj-1, ak MCF-12F liy selil yo trete ak ICs0 nan MPMC (Figi 8). Nivo makè pro-ak anti-apoptotik ki asosye ak endiksyon apoptoz nan liy selil kansè yo [40,41]. Rezilta yo endike ke MP/NabM ak MP/IHMenhanced apoptoz nan HepG-2 ak MCF-7, men se pa nan liy selil MCF{-12F ak Bj{-1. Nivo caspase -3, p53, Bax siyifikativman ogmante konpare ak kontwòl respektif yo (Figi 8), tandiske Bcl-2 pwoteyin te redwi nan tout tretman yo. Enteresan, MP te montre tou yon chanjman enpòtan nan makè pwoteyin apoptoz. Sa a te konsistan ak rezilta yo nan etid la antikansè epi yo ta ka refere yo kòm efè a cytotoxik nan yon kantite peptides pwoteyin lèt ki sòti jan yo diskite pi wo a (Seksyon 2.8.1).

2.8.3.DNA Pwoteksyon Domaj pa MPMC kont klivaj oksidatif nan plasmid RNH1

ADN plasmid RNH1 a gen twa fòm sou elektwoforèz jèl agarose ki òdone depi anwo jouk anba kòm ADN sikilè louvri, lineyè, ak supercoiled sikilè. Estrès oksidatif pa reyaktif Fenton a pwovoke domaj ADN. Imedyatman, nivo fòm ADN yo chanje. Sepandan, fòm sikilè ak lineyè louvri endike domaj ADN ak ADN sikilè supercoiled endike plis potansyèl pwoteksyon. Nan tès sa a, nou teste si MP ak MPMC nan IC50 yo ka pwoteje kont degradasyon fòm sikilè supercoiled an repons a estrès oksidatif. Kòm yon rezilta, tou de MP/NabM ak MP/IHM te montre gwo kapasite pwoteksyon menm jan ak kontwòl ADN (liy 3 ak 4, Figi 9A). Nan lòt men an, pa gen okenn diferans enpòtan obsève nan ADN trete ak MP konpare ak kontwòl ADN ak ADN trete ak reyaktif Fenton a sèlman (liy 5).

2.8.4.DNA Pwoteksyon Domaj pa MPMC kont klivaj oksidatif nan ADN jenomik

Sèvi ak teknik PCR la, yo te egzamine pwopriyete pwoteksyon MPMC sou domaj ADN jenomik pwovoke pa reyaksyon Fenton an. An jeneral, domaj ADN diminye kantite kopi sèten jèn, kidonk pwodwi pi ba entansite gwoup nan elektwoforèz jèl. Bann dansite MTHFR jèn nan san jenomik ADN enkubasyon ak reyaktif Fenton ak ak san IC5s0 MP, MP/NabM, ak MP/IHM yo te teste. Li te jwenn ke MP/NabM ak MP/IHM (liy 3 ak 4, Figi 9B) anpeche domaj ADN, epi imedyatman pwoteje sit la koupe modèl MTHFR. Se poutèt sa, pi wo PCR pwodwi bann entansite nan jèl elektwoforèz la konpare ak kontwòl respektif yo te pwodwi (Figi 9B). Rezilta sa yo endike ke aktivite antioksidan MPMC inibit pwodiksyon radikal gratis ki medyatè domaj ADN.

2.8.5. Ekspresyon jèn

An akò ak done makè pwoteyin apoptoz yo te jwenn, rezilta RT-qPCR te revele ke enkubasyon selil HepG-2, MCF-7 ak MP, MP/NabM, ak MP/IHM te pwovoke yon regilasyon enpòtan nan pro- makè mRNA apoptotik, sètadi, Casp3, p53, ak Bax, tandiske nivo ekspresyon nan makè anti-apoptotik Bcl-2 te siyifikativman desann-reglemante (Figi 10A-D). Caspases yo se pwoteyin aktè ki jwe yon wòl enpòtan anpil nan inisyasyon ak soutni apoptoz. Sepandan, upregulation nan pwoteyin caspase 3 endike egzekisyon prensipal chemen intrinsèque apoptoz la (Figi 10A, B) ki karakterize pa tonbe nan manbràn mitokondriyo a ak Bax-induit cytochrome c liberasyon, ak aktivasyon nan caspase 9 ki mennen nan la. angajman ki vin apre nan caspase 3 [42]. Regilasyon Casp3, p53, ak Bax, ansanm ak rediksyon nan ekspresyon Bcl-2 revele ke MP, MP/NabM, ak MP/IHM deklanche apoptoz. Nan sans sa a, regilasyon p53 ankouraje ekspresyon Bax, ki an vire, pral pwovoke lage cytochrome c, ki te swiv pa kapase -9 ak -3 aktivasyon. Sepandan, Bcl-2 kòm yon anti-apoptoz li te ye pou anpeche lage cytochrome c [43], tretman an te lakòz rediksyon enpòtan nan nivo transkripsyon mRNA nan jèn makè anti-apoptoz Bcl-2 akòz MP / NabM ak MP / IHM tretman, ki fasilite san opozisyon Bax-induit cytochrome c liberasyon ak apoptoz ki vin apre. Nan etid sa a, MP / NabM gravman medyatè apoptoz konpare ak MP / IHM ak MP jan yo obsève nan (Figi 10). Obsève efè anti-kansè nan MP/NabMor MP/IHM montan atravè modulasyon nan chemen apoptoz depandan ap53-piske tou de pwoteyin li yo ak nivo transkripsyon mRNA li yo te siyifikativman kontwole.

Klike sou lyen an pou w ka jwenn plis enfòmasyon:https://www.xjcistanche.com/news/nano-milk-protein-mucilage-complexes-characte-55049190.html