Nouvo engredyan antioksidan ki soti nan sous-pwodwi Brasri pou fòmilasyon kosmetik

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

Résumé:Objektif travay sa a se te evalye kontni fenol total ak aktivite antioksidan diferan kalite byè atizanal (Ego, Alter, IFiat Lux, Triplo Malto, Ubi, ak Maior), osi byen ke materyèl yo kòmanse (malt, oublions, ak ledven), pwodwi entèmedyè yo, ak pwodwi dechè yo (malte depanse, oublions, ak ledven), nan gade nan itilizasyon yo nan fòmilasyon inovatè kosmetik. Ekstraksyon nan kòmanse ak depanse echantiyon yo te pran nan dlo oswa alkòl 70 degre. Kontni an total de fenol (Folin Ciocalteau Essay) nan tout pwodwi yo enplikasyonJwi depann sou pwodwi a espesifik anba envestigasyon. Valè ki pi wo yo te jwenn nan kòmanse oublions (sòti nan apeprè 93 a 155 mg GAE / g, dapre sòlvan an ekstraksyon), sa yo entèmedyè nan kòmanse malte ak kòmanse ledven, ak valè ki pi ba yo nan wort la. Kontni an total fenol nan byè final yo soti nan fenol yo ki te ekstrè nan engredyan yo diferan, sètadi malt yo kòmanse, oublions, ak ledven, men valè ki pa neglijab yo te toujou obsève nan pwodwi depanse. Metòd yo itilize pou evalyasyon aktivite antioksidan, kapasite antioksidan ekivalan Trolox (LPPH), paramèt antioksidan rediksyon ferrik-ion (FRAP), ak aktivite pou retire kasyon radikal ak rediksyon pouvwa (ABTS) te enfliyanse anpil rezilta yo. An jeneral, rezilta yo te reflete tandans ki te obsève pou kontni total de phénol: ke byè yo pwogresifman anrichi pa fenol ki soti nan tout engredyan yo kòmanse, e ke pwodwi depanse toujou posede aktivite antioksidan ki pa neglijab.kolestewòl cistancheLi se enteresan sonje ke dechè ledven souvan te montre pi wo valè pase sa yo ki nan materyèl la kòmanse; li ka dedwi ke ledven se kapab absòbe fenol nan byè a pandan enplikasyonJwi. Lè nou konsidere enterè nan eksplwate fatra ki sòti nan pwosesis manje, yo te evalye aktivite byolojik nan fatra pwodwi brasri Alter sou kilti selil keratinosit (pwodwi malte, hop, ak ledven). Preliminè tès in vitro nan selil keratinosit HaCaT yo te pote soti pou evalye potansyèl byoaktivite nan ekstrè depanse. Pami ekstrè yo depanse, ekstrè yo hop ak ledven te montre kapasite nan amelyore aktivite mitokondriyo ak anpeche estrès oksidatif nan selil HaCaT, de karakteristik nan aje po, An konklizyon, etid sa a ofri prèv ki montre fatra nan byè atizanal ka yon sous enteresan nan fenol pou preparasyon pwodui kosmetik po anti-aje.

Mo kle:byè atizanal; pwodwi enplikasyonJwi; kontni total fenol; aktivite antioksidan; sitotoksisite; anti-aje

1. Entwodiksyon

Craftbeer te vin de pli zan pli popilè nan peyi Etazini ak Ewòp [1,2], ak konsekans enpòtan pou ekonomi an [3]. Siksè sa a te alimenté pa enterè konsomatè nan goute nouvo byè ak diferan gou ak arom [2] ak atansyon sou benefis sante ki genyen nan konsomasyon byè modere [4].

Tanpri klike la a pou w konnen plis

Kontrèman ak byè komèsyal yo, byè atizanal yo pa filtre epi yo pa pasterize, e konsa karakteristik sansoryèl yo rete san okenn chanjman nan pwosesis enplikasyonJwi a. Anplis de sa, sibstans ki benefisye pou sante, tankou antioksidan, ka epaye tou.

Byè komèsyal ak pwodwi dechè yo te deja evalye pou pwopriyete antioksidan yo. Zhao et al. [5] detèmine pwofil fenol yo ak aktivite antioksidan ki koresponn nan 34 byè komèsyal epi li jwenn diferans remakab nan kontni fenol total ak endividyèl ak aktivite antioksidan. Konpoze fenolik ki pi abondan yo se asid galik ak ferulik. Nan menm peryòd la, Ribeiro Tafulo et al. [6] detèmine aktivite antioksidan 27 lòt byè komèsyal yo, lè l sèvi avèk plizyè metòd espektrofotometrik. Menm ane sa a, Piazzon et al., 2010 [7] te evalye aktivite antioksidan ak kontni fenolik diferan kalite byè komèsyal (abbey, ale, bock, ble, lager, pilsner, ak dealcoolized), e li te jwenn anpil varyete nan mitan yo. Nan yon etid sou byè endijèn, Farcas et al. [8] detèmine kontni total polifenol ak aktivite antioksidan pandan tout pwosesis pwodiksyon an, kòmanse nan matyè premyè (malt ak hop) epi fini ak fatra yo refè. Yo te montre ke yon inisyal pi wo kontni total de polifenol ak aktivite antioksidan nan matyè premyè yo te akòz prezans nan malte ak ke kontni an total de polifenol fòtman diminye lè yo pase nan byè ak depanse malte nan pwodwi byè final la ak nan malte a depanse. Leven pa te analize.

Cistanche ka anti-aje

Zhao ak kòlèg travay yo [9] te pwouve konpoze antioksidan ki sòti nan malte, ki te montre aktivite antioksidan ak kontni fenol total nan plizyè varyete lòj malte. Lòt otè te idantifye karannsèt konpoze fenol ki soti nan kat kalite byè komèsyal yo, lè l sèvi avèk likid kwomatografi makonnen ak yon ibrid ionizasyon electrospray lineyè iyon-pèlen quadrupole Orbitrap mas spectrometri teknik [10]. Dènyèman, yo te reyalize nan analiz HPLC-ESI-MS/MS idantifikasyon fenolik ak nitwojèn ki pa gen anpil pwa nan byè atizanal [11]. Otè yo te eseye diferansye kalite byè yo, tankou IPA, Lager, ak Weiss, dapre konpoze fenolik ak nitwojèn, men yo pa jwenn okenn diferans enpòtan nan konpoze sa yo nan mitan divès kalite byè yo.

Plis resamman [12], 20 konpoze fenolik, pou egzanp, asid galik, katechin, asid kafeyik, quercetin, xanthohumol, ak humulone, yo te chwazi ak kantite nan diferan byè atizanal, wot, engredyan kòmanse enplikasyonJwi (malte lòj, hop, ak ledven). ) ak sous-pwodwi (kalse lòj, hop depanse, ak ledven depanse). Soti nan etid sa a, yo te jwenn ke diferans enpòtan te egziste nan mitan tout echantiyon yo e ke konpozisyon byè a depann sou resi a ak pwosesis enplikasyonJwi. Konpoze fenolik byè sitou soti nan malte lòj, epi, enteresan, ledven te kapab absòbe konpoze fenolik ki soti nan lòt sous.

Se konsa, evalyasyon an nan antioksidan nan pwodwi yo dechè nan pwodiksyon byè ka gen gwo enpòtans si yon moun konsidere kwasans rapid nan mache byè atizana atravè lemond.

Eksplwatasyon sou-pwodwi brasri pou devlope pwodwi sante tankou pwodui kosmetik ak/oswa sipleman ta ede ogmante dirabilite pwodiksyon byè. Etid sa a gen plizyè objektif: evalye kontni fenol total ak aktivite antioksidan diferan kalite byè atizanal Italyen (lager, amber, triple malt, wouj ak nwa), epi evalye entèmedyè pwodiksyon yo, osi byen ke dechè yo. Se konsa, aktivite byolojik nan ekstrè fatra nan brasri Alter te evalye sou keratinosit imen. Sa a ouvè nouvo opòtinite enteresan pou eksplwate nouvo engredyan ki soti nan sous-pwodwi brasri pou fòmilasyon kosmetik.

2. Eksperimantal

2.1. Materyèl

11-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH),2,4,6-Tris(2-pyridyl)-s-triazine (TPTZ), (±)-6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxylic acid (TROLOX), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt(98%TLC)(ABTS), gallic acid, sodium carbonate monohydrate ACS reagent, sodium acetate and ethanol(ethanol absolute grade) were purchased from Sigma-Aldrich(Steinheim, Germany). Manganese (IV)oxidize activated(>90 pousan) ak reyaktif fenol Folin-Ciocalteu a te achte nan men Fluka (Buchs, Swis). Yo te achte acetate sodyòm anidrid ak klori anidrid fè (III) nan JT Baker (Center Valley, PA, USA) ak kabonat sodyòm anidrid te achte nan men Carlo Erba (Milan, Itali). Tout solvang ak reyaktif yo te nan klas analyse. Dlo ultrapur te pwodwi pa Gradient Milli-Q (Millipore, Molsheim, Frans). Birrificio Collesi (Apecchio, Itali) te bay materyèl demaraj, byè atizanal, mo ak dechè yo.

Karakteristik detaye byè yo envestige nan etid la prezan yo bay nan Tablo 1. Kalite malt ak oublions kòmanse detèmine diferans prensipal yo nan mitan tout byè yo. Senk diferan malt kòmanse ka itilize, souvan nan melanj ak nan pwopòsyon diferan. Oubliyon Perle ak Saaz yo itilize nan diferan pwopòsyon pou arom diferan yo. Menm ledven an, Saccharomyces Cerevisiae, te itilize pou tout byè yo, ki te tout kalite fèmantasyon wo. Konbinezon divès kalite bay diferan kalite byè (lager, amber, trip malt, wouj, ak nwa) ak kontni alkòl ki varye ant 6.0 ak 9.0 pousan V/V.

2.2. Preparasyon echantiyon

Anvan analiz yo, materyèl yo kòmanse (malt, oublions, ak ledven), byè, mo, ak fatra (malte depanse, hop, ak ledven) yo te sibi pwosesis diferan selon eta fizik yo, ki ta ka seche solid, imid. likid solid, oswa twoub (Tablo 2).

Solid imid ak likid yo te premye sibi lyofilizasyon nan yon tanperati {{0}} degre ak yon presyon nan 0.03 bar (FreeZone 1 Liter Benchtop Series77400 friz-secheur, LABCONCO, Kansans City, MO, USA). Solid sèk yo te sibi fraisage nan yon moulen kouto. Apre sa, tout echantiyon yo te sibi fè ekstraksyon. Yon kantite echantiyon te peze ak anpil atansyon epi gaye nan 100 mL sòlvan (dlo oswa etanòl 70 degre). Likid ki te lakòz yo te mete nan flacon Erlenmeyer, ki te fèmen ak anpil atansyon. Echantiyon yo te brase mayetik pou 24 èdtan nan tanperati chanm, Lè sa a, santrifuje a 12, 000 rpm nan 20 degre pou 10 minit yo retire patikil ki pa fonn (Zetalab CNZ-140HE, Padova, Itali). Echantiyon yo te lyofilize epi estoke nan -20 degre nan flakon 50 mL an polietilèn ak yon bouchon vis (BD Falcon TM, BD Biosciences, Bedford, MA, USA) yo nan lòd yo asire kondisyon depo optimal.

2.3. Detèminasyon kontni total fenol

Kontni Phenol Total (TPC) echantiyon yo te detèmine dapre metòd espektrofotometrik Folin-Ciocalteu [13] ak kèk modifikasyon [14]. An brèf, yo te itilize tout pwodwi friz yo pou prepare solisyon limpid nan yon konsantrasyon 10 mg mL-1. Yon aliquot 50 μL nan solisyon sa a te ajoute nan 150 μL reyaktif fenol Folin-Ciocalteu a, dilye 1:4 ak dlo. Lè sa a, yo te ajoute 50 uL Na, CO3 solisyon satire. Apre enkubasyon nan tanperati chanm pou 10 minit, yo te detèmine absorpsyon chak pi nan 765 nm lè l sèvi avèk yon lektè mikroplak (FLUOstar Omega, BMG Labtech GmbH, Ortenberg, Almay). Mezi a te konpare ak yon solisyon estanda kalibrasyon nan asid galik (GA), ak rezilta yo te eksprime kòm miligram nan ekivalan asid galik (GAE) pou chak gram nan by-pwodwi (mg GAE / g).

2.4. Evalyasyon aktivite antioksidan

Yo te evalye aktivite antioksidan byè atizanal la ak sous-pwodwi yo lè yo mezire 11-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)) aktivite dechaj radikal, 2,2'-Azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)(ABTS*)radical cation scavenging capacity, and Ferric-Reducing Antioxidant Capacity (FRAP).cistanche dosage redditTrolox(6-Idroksi-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-asid carboxylic) te itilize kòm estanda kalibrasyon. Valè yo te eksprime kòm mmol Trolox ekivalan/g nan echantiyon an kòm yon fonksyon nan IC50, defini kòm konsantrasyon nan materyèl la teste oblije lakòz yon diminisyon 50 pousan nan inisyal DPPH, ABTS oswa konsantrasyon fè.

2.5. Evalyasyon Kapasite Antioksidan Ekivalan Trolox (DPPH)

Yo te evalye aktivite DPPH radikal gratis atravè yon analiz analitik mikroplak dapre metòd pibliye deja [15] ak kèk modifikasyon [16]. An brèf, yon aliquot 50 μL nan echantiyon an (konsantrasyon 10 mg mL-') ak estanda a te ajoute nan 150 μL DPPH nan etanòl absoli nan yon 96-plak mikrotitre byen （BD FalconTM) Apre enkubasyon nan 37 degre pou 20 min, yo te detèmine absorbans chak pi nan 517 nm lè l sèvi avèk yon lektè mikroplak. Aktivite antioksidan an te kalkile ak eksprime kont kantite lajan Trolox selon Ekwasyon (1) [17] kote Ag ak A se absòbe solisyon radikal DPPH● nan 517 nm nan prezans echantiyon kontwòl la ak echantiyon ekstrè yo, respektivman.

2.6. Aktivite pou retire kasyon radikal ak rediksyon pouvwa (ABTS)

Yo te fè tès ABTS la apre pwosedi anvan yo [18] epi yo te aplike nan yon analiz plak 96-byen mikrolit. ABTS* plus solisyon an (5 mM) te prepare nan oksidasyon ABTS ak MnO, nan dlo pou 30 minit nan fè nwa a. Yon aliquot 50 μL nan diferan konsantrasyon echantiyon ak estanda （Trolox） te ajoute nan 150 μL solisyon ABTS* nan yon 96-plak mikrotitre byen (BD FalconTM).benefis extrait cistancheApre enkubasyon nan tanperati chanm pou 10 min, yo te detèmine absorbans chak pi nan 734 nm lè l sèvi avèk yon lektè microplate. Valè yo te kalkile ak eksprime kont kantite Trolox dapre Ekwasyon (2) [17] kote Ag ak A se absòbe solisyon radikal OHe a nan 734 nm nan prezans echantiyon kontwòl la ak echantiyon ekstrè yo, respektivman.

2.7. Ferric-long-Reducing Antioksidan Paramèt (FRAP)

Valè FRAP byè atizanal/sous-pwodwi yo te detèmine dapre yon metòd pibliye deja [19], ak kèk modifikasyon [20]. Reyaktif FRAP la te prepare nan melanje twa solisyon sa yo:

1. 50mL0.3M tanpon acetate pH3.6(1.23g acetate sodyòm nan 50 mL dlo asidifye

ak asid acetic);

2. 5mLofstock solisyon 5mMTPTZ(2,4,6-Tripyridyl-s-triazine)(15.6mg) nan 40 mM HCl;3. 5 mL 5 mM FeCl3:6 H2O (16.2 mg) nan 40 mM HCl.

Reyaktif FRAP la te chofe nan 37 degre C anvan ou itilize. Yo te ajoute alikòt nan yon echantiyon 25 μL (solisyon nan konsantrasyon 10 mg mL-1) an twa fwa nan pwi yon 96-plak byen （BD Falcone）. Yo te kòmanse tès la lè w ajoute 175 μL reyaktif FRAP nan chak pi. Plak la te imedyatman souke nan yon lektè plak FLUOstar Omega pou 30s epi yo te pèmèt reyaksyon an kouri pou 10 min apre sa yo te li plak la sou yon lektè plak (593 nm). Yon solisyon referans nan Trolox te kouri an menm tan ak itilize jenere koub kalibrasyon an pa regresyon lineyè. Koub estanda a te lineyè ant 25 ak 800μM Trolox（TE）. Rezilta yo te eksprime nan μM Trolox ekivalan （TE） gI echantiyon.

2.8. Kilti selil yo

Liy selil keratinosit imen, HaCaT, yo te grandi regilyèman nan mwayen Eagle's Medium (DMEM) Dulbecco a, ki te konplete ak 10 pousan serom fetal bovine (FBS), 2 mM L-glutamin, 50 U/mL penisilin, ak 50ug/mL streptomycin a 37 degre nan. yon enkibatè imidite ak 5 pousan CO. Pou evalye sitotoksisite, aktivite mitokondriyo, ak fòmasyon ROS intraselilè, selil HaCaT yo te simen nan 96-plak byen nan 2 × 10 * selil / pi. Tout eksperyans yo te fèt apre 24 èdtan nan enkubasyon nan 37 degre nan 5 pousan CO,. Pou eksperyans yo ak selil HaCaT, solisyon stock nan ekstrè depanse yo te prepare nan dlo nan 60 mg / mL. Lè sa a, solisyon stock yo te dilye nan yon mwayen konplè pou jwenn konsantrasyon yo vle nan ekstrè depanse.

2.9. Sitotoksisite ak aktivite mitokondriyo

Vitabilite selil yo te evalye pa rediksyon {{{{10}}}}(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl -2H-tetrazolyom bromur (MTT) nan formazan ensolubl li yo, jan yo dekri deja 21]. An brèf, selil HaCaT yo te trete pou 24 èdtan ak konsantrasyon diferan nan ekstrè (0.003-3 mg/mL) nan 37 degre nan 5 pousan CO. Imedyatman, mwayen tretman an te ranplase ak MTT nan Hank's Balanced Salt Solution ( HBSS) (0.5 mg/mL) pou 2 h at37 degre nan 5 pousan CO. Apre lave ak HBSS, kristal formazan yo te fonn nan izopropanol. Nivo formazan yo te mezire (570 nm, filtè referans 690 nm) lè l sèvi avèk lektè plak milti-etikèt VICTORTM X3 (PerkinElmer, Waltham, MA, USA). Viabilite selil la te eksprime kòm yon pousantaj nan selil kontwòl yo.

Aktivite mitokondriyo te detèmine pa MTT, jan sa dekri deja, ak modifikasyon ti tay [22].efè segondè cistanche deserticolaAn brèf, selil HaCaT yo te trete pou 4 èdtan ak swa DMEM 10 pousan FBS (mwayen eleman nitritif) oswa Dulbecco a fosfat-tanpon saline (solisyon saline san eleman nitritif) nan prezans 0.03 mg / mL ekstrè nan 37 degre nan 5. pousan CO. Imedyatman, tretman an te ranplase ak MTT pou 2 h nan 37 degre nan 5 pousan CO2. Apre lave ak HBSS, kristal formazan yo te fonn nan izopropanol. Nivo formazan ki gen rapò ak aktivite mitokondriyo yo te mezire (570 nm, filtè referans 690 nm) lè l sèvi avèk lektè plak multilabel VICTORTM X3 (PerkinElmer). Aktivite mitokondriyo a te eksprime kòm yon pousantaj nan selil kontwòl yo.

2.10. Fòmasyon ROS Entraselilè

Yo te evalye fòmasyon espès oksijèn reyaktif (ROS) pa sond fliyoresan 2'-7'dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCF-DA), jan sa dekri deja [23](selil HaCaT yo te trete pou 2 èdtan ak 0.{ {23}}3 mg/mL ekstrè nan 37Cin 5 pousan CO2. Apre sa, yo te retire mwayen tretman an epi yo te ajoute 100 μL H2DCF-DA (10ug/mL) nan chak pi. Apre 30 min enkubasyon nan tanperati chanm, la. Solisyon H2DCF-DA te ranplase ak yon solisyon H2O2（100 μM） pou 30 min.Yon seri paralèl selil HaCaT te trete ak H2O, ak ekstrè 0.03 mg/mL pou 30 min.cistanche genghis khanFòmasyon ROS yo te mezire an tèm de Inite Abitrè nan Fluoresans, AUF (eksitasyon nan 485 nm ak emisyon nan 535 nm), lè l sèvi avèk lektè plak multilabel VICTORTM X3 (PerkinElmer). Done yo eksprime kòm yon ogmantasyon pliye nan fòmasyon ROS kont selil ki pa trete (sa vle di, AUF nan selil trete ak H, O, / AUF nan selil ki pa trete).

Atik sa a soti nan Cosmetics 2021, 8, 96. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040096 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics