Konsomasyon oral nan peptides kolagen nan zo poul anti-po aje nan sourit pa reglemante degradasyon kolagen an ak sentèz, anpeche enflamasyon ak aktive lizozom Pati 1.

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

Résumé:Efè a nan rejim alimantè sou aje po te vin tounen yon sijè rechèch enteresan. Etid anvan yo te sitou konsantre sou efè benefik nan peptides kolagen an ki sòti nan òganis maren sou po a aje lè yo administre oralman, pandan y ap efè yo benefisye nan peptides kolagen an ki sòti nan bèt volay sou po aje yo te raman rapòte. Nan etid sa a, peptides kolagen an te prepare soti nan zo poul pa idroliz anzimatik, ak efè a ak mekanis nan aksyon nan peptides kolagen an oral administre sou soulaje aje po pwovoke pa UV konbine avèk D-galaktoz. Rezilta yo te montre ke kolagen an zo poul te gen karakteristik tipik nan kolagen an, ak peptides kolagen zo poul (CPs) yo te sitou ti peptides molekilè ak yon pwa molekilè nan<3000 da.="">ekstansyon lavi cistancheEksperyans vivo yo te montre ke CP yo te gen yon efè soulajman enpòtan sou po aje, ki endike nan chanjman ki fèt nan konpozisyon an ak estrikti nan po a aje, amelyorasyon nan nivo antioksidan po a, ak anpèchman nan enflamasyon; efè a soulaje te pozitivman korelasyon ak dòz la nan CPs. Plis envestigasyon te montre ke CP yo premye diminye nivo oksidasyon po a, anpeche ekspresyon kle faktè transkripsyon AP -1 (c-Jun ak c-Fos), epi aktive chemen siyal TGF-/Smad pou ankouraje sentèz kolagen an. , anpeche ekspresyon MMP-1/3 pou anpeche degradasyon kolagen an, ak anpeche enflamasyon po pou soulaje aje po nan sourit. Anplis, transcriptome po a te jwenn ke lizozom aktive apre administrasyon oral nan CP yo ka yon chemen enpòtan pou CP nan aje anti-po, epi li merite pou plis rechèch. Rezilta sa yo sijere ke CP yo ta ka itilize kòm yon eleman nitrisyonèl fonksyonèl anti-aje.

Tanpri klike la a pou w konnen plis

Mo kle:peptides kolagen an; anti-aje; transcriptom po; sentèz kolagen an; lizozòm

1. Entwodiksyon

Epòk Sante, avèk presizyon swiv yon rejim alimantè ki an sante, detèmine wòl nan nitrisyon nan aje po, ak deside ki sa yo manje yo kenbe po jèn ak sante yo se pwoblèm difisil. Po se pi gwo ògàn nan kò a, ki konpoze de epidèm, dèrm, ak kouch lar. Li aji kòm yon baryè pou pwoteje kò a kont faktè ekstèn epi tou li jwe yon wòl nan sante ak bote[1]. Po aje se yon pwosesis konplèks, ki se divize an kwonolojik aje ak foto-aje epi ki afekte pa tou de faktè entèn ak ekstèn. Karakteristik prensipal yo enkli akimilasyon nan domaj makromolekilè nan selil la, n bès nan fonksyon selil souch (pwomosyon renouvèlman tisi), ak pèt gradyèl nan entegrite fizik la nan po a [2]. Pwensipal mekanis molekilè ki lakòz aje po gen ladan estrès oksidatif, mantèg telomè, domaj ADN, mitasyon jenetik, règleman mikwo-RNA, akimilasyon avanse glisyasyon fen-pwodwi, ak enflame-aje [3]. Foto-aje se ipèrplasi epidèm po, siye, ak degradasyon matris ekstraselilè pwovoke pa radyasyon iltravyolèt.cistanche nzKòz prensipal foto-aje se espès oksijèn reyaktif (ROS) ki te pwodwi pa radyasyon iltravyolèt ki medyatè ekspresyon nan metaloproteinas matris (MMPs) ak kalite-I pro-kolagen an atravè chemen siyal tankou siyal kinaz pwoteyin mitogen-aktive (MAPK). chemen, konsa ki mennen nan degradasyon an nan matris la ekstraselilè (ECM) nan po a ak apoptoz la nan fibroblast [4]. Nan dènye ane yo, kenbe sante po ak retade aje te vin popilè, ak jwenn engredyan natirèl tankou peptides byoaktif ak polifenol ak fonksyon antioksidan ak anti-aje vin tounen yon otspo rechèch [5].

Sepandan, kolagen an gen yon gwo pwa molekilè epi li difisil yo dwe dirèkteman absòbe ak itilize, tandiske ti peptides kolagen an molekilè apre idroliz kolagen an gen pi fò aktivite byolojik ak yon to absòpsyon segondè [6]. Pandan se tan, aplikasyon an lajè nan kolagen an nan manje, medikaman, jeni tisi, pwodui kosmetik, ak lòt jaden te fè peptides kolagen an ki gen pi ba pwa molekilè, pi wo efikasite absòpsyon, ak pi fò aktivite byolojik yon nouvo pi renmen nan manje fonksyonèl ak rechèch medikal [{{1 }}]. Peptid kolagen yo piti, ki gen 2-20 rezidi asid amine yo jwenn apre idwoliz kolagen an. Yo itilize yo kòm yon sipleman dyetetik pou tretman pou aje po akòz fonksyon potansyèl anti-enflamatwa ak antioksidan yo ak règleman iminitè ak efè antioksidasyon ak pwopagasyon sou fibroblasts po [10].

Cistanche ka anti-aje

Apre administrasyon oral, peptides kolagen yo absòbe nan fòm ti peptides epi yo byen vit transpòte nan san an, epi evantyèlman, nan ren yo, po, jwenti, ak lòt tisi yo dwe estoke ak itilize. Apre 14 jou, nivo radyoaktivite yo te rete wo nan po sourit yo te gavage ak peptides kolagen ki gen etikèt C14-. Peptides kolagen an ka prèske konplètman absòbe ak itilize pa kò a, tandiske absòpsyon ak to itilizasyon kolagen an se sèlman 50-60 pousan [6,11-13]. Nan dènye ane yo, idrolysates kolagen an soti nan po pwason, echèl pwason, zo bèf, po bèf, ak po kochon yo te lajman rapòte yo gen efè benefisye sou soulaje aje po epi yo te resevwa atansyon konsiderab nan men chèchè. Pa egzanp, peptides kolagen ki izole nan po carp an ajan ankouraje sentèz pro-kolagen an epi anpeche ekspresyon pwoteyin AP-1, MMP{-1, ak MMP-3 lè yo aktive chemen TGF-/Smad pou anpeche degradasyon kolagen an ak repare selil po ki gen foto aje [14]. Administrasyon oral peptides kolagen an ka amelyore detant po a, ogmante kontni kolagen an ak aktivite anzim antioksidan, repare fib kolagen an, ak nòmalize rapò kolagen an nan po a nan sourit ki aje [15]. Sepandan, peptides kolagen an ki soti nan diferan sous gen efè diferan. Kantite ak estrikti peptides trè aktif nan san an apre administrasyon oral peptides kolagen an depann de sous kolagen an [10]. Efè pwoteksyon peptide kolagen an ekstrè soti nan po poul kont blesi fibroblast pwovoke UVA te siperyè pase peptide kolagen an ekstrè soti nan po kochon, bèf oswa tilapia, ak efè li te ekivalan a tripeptide ki sòti nan kolagen an (Gly-Pro). -Hyp) [16]. Kwayans relijye ak enkyetid maladi (tankou maladi bèf fache) te mennen moun yo piti piti chanje direksyon devlopman kolagen an ak pwodwi li yo soti nan mamifè tèrès yo nan bèt volay ak òganis maren [17]. Kòm prensipal pa-pwodwi nan pwosesis bèt volay, zo poul se yon sous pwomèt pwodwi kolagen an. Li pa sèlman diminye gaspiyaj resous ak polisyon nan anviwònman an, men tou li pèmèt itilizasyon efikas nan sous-pwodwi yo. Se poutèt sa, nan etid sa a, nou te itilize poul zo kolagen peptides kòm matyè premyè, ak sourit toutouni trete ak D-galaktoz ak UV pwovoke aje po, kòm modèl la evalye efè a nan administrasyon oral nan peptide kolagen an sou soulaje aje po nan sourit epi detèmine mekanis ki enpòtan an.

2. Materyèl ak Metòd

2.1. Materyèl, pwodui chimik, ak bèt

Fèm poul yo nan Yunnan Agricultural University (Kunming, Lachin) te bay poul yo depanse, ki te separe, seche, ak kraze pou jwenn repa nan zo poul. Su-peroksid dismutase (SOD), katalaz (CAT), ak glutathione peroxidase (GSH-PX) twous yo te achte nan men Soleibao Biotechnology co, Ltd.(Beijing, Lachin). Hydroxyproline (HYP), interleukin-1 (IL-1), matris metaloproteinase-1/3 (MMP{-1/3), tip I pro-kolagen, ak asid hyaluronik ( HA) anzim-lyed immunoassay (ELISA) kits yo te achte nan Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, Lachin). Sourit san cheve BALB/C fanm ki an sante (18± 2g, sis semèn) yo te achte nan men Nanjing Junke Bioengineering Corporation, Ltd.(Nanjing, Lachin) ak nimewo pèmi: SCXK(SU)2016-0010. Pepsin ak papain te achte nan men Aladdin Biochemical Technology Co, Ltd.(Shanghai, Lachin), ak lòt pwodwi chimik yo te nan klas analyse. Tout sourit yo te okipe swiv Règleman Swen Animal Laboratwa nan pwovens Yunnan ak apwouve pa Komite Swen ak Itilizasyon Animal University Agrikòl Yunnan (ID apwobasyon: YAUACUC01).

2.2. Preparasyon kolagen an ak konpozisyon asid amine

Ekstraksyon ak konpozisyon asid amine nan kolagen an zo poul te swiv metòd ki dekri pa Lieut al. [18] ak modifikasyon ti tay. Yo te brase poud zo poul la epi tranpe nan 0.05 M NaOH, 10 pousan n-hexane, ak 0.25 MEDTA solisyon (pH 7.5) nan yon rapò de 1/10 (m/o). Nan chak etap, echantiyon an te trete pou 36h, epi yo te chanje solisyon an tranpe chak 6h pou anfle poud zo a epi retire pwoteyin ki pa kolagen an, grès, ak mineral nan poud zo a. Yo te lave echantiyon an ak dlo pi pou netralite apre chak etap. Yo te trete repa zo poul la pre-trete ak 0.5 M asid acetic glacial ki gen 0.1 pousan (w/v) pepsin nan yon rapò solid-a-likid nan 1:10 (wo/v) ak kontinyèlman brase ak ekstrè nan 4 degre pou 48h. Lè sa a, li te filtre, epi yo te filtrate a santrifuje nan 15, 000 × g pou 15 min at4 degre.gwosè penis cistancheSipènatant la te ajiste a 7.5-7.8 ak solisyon NaOH, epi NaCl te ajoute nan yon konsantrasyon final 1.5 M. Apre yo te fin kenbe melanj lan san deranje pou 12 èdtan nan 4C pou sale soti, presipite kolagen an te santrifuje. nan 15,000×g pou 15 min nan 4 degre, Lè sa a, fonn ak 0.5 M asid acetic, dialyzed nan dlo pi, friz-seche, ak pwodwi a fini te kolagen an zo poul.

Konpozisyon asid amine nan kolagen an zo poul te detèmine pa Sykam S433D analizeur otomatik asid amine (Munich, Almay). Yo te pran yon sèten kantite echantiyon kolagen an pou teste nan yon tib sele, yo te ajoute ak 10mL6 M HCl, epi yo te idrolize a 110 degre pou 24 èdtan. Idwoliz la te konsantre pa mouche nitwojèn ak re-fonn nan 20 mL tanpon asid asid. Apre mikrofiltrasyon ak yon manbràn mikwopore 0.22 μm, yo te pran 20 μL idrolysat pou analiz spectre asid amine. Kontni asid amine nan echantiyon an te eksprime an pousantaj.

2.3. Preparasyon ak Distribisyon Pwa Molekilè Peptid Kolagen (CPs)

Dapre rezilta yo nan pwosesis optimize anvan nou an, CP yo te prepare lè l sèvi avèk papain nan yon rapò anzim-a-substra nan 1: 4 0 (rapò mas). Apre ajiste pH la a 7 ak idroliz anzimatik nan 63 degre pou 5 èdtan, anzim la te inaktive nan yon beny dlo bouyi pou 15 min. Yo te desalize anzim idwoliz la ak lyofilize, re-fonn nan 0.1 pousan solisyon asid fòmik, epi santrifuje pou jwenn supernatant la. AQ Exactive HF Orbitrap High-Rezolisyon Mass Spectrometer-OE-HF (Thermo Fisher, Waltham, MA, USA), ekipe ak ionizasyon electrospray (ESI), yo te itilize pou analize idrolysat kolagen an nan mòd nan eskanè konplè nan 350-1800 m/z, ak rezilta yo te rekipere ak analize lè l sèvi avèk Proteome Discoverer la

2.1 lojisyèl

2.4.Tès bèt

Sourit fi BALB/Chairless (n {{0}}) yo te kenbe nan yon chanm anba kondisyon kontwole tanperati (24±1 degre), imidite (6{0±5 pousan), ak yon 12. h sik lajounen-lannwit pou yon semèn. Yo te ba yo aksè ad libitum pou manje ak dlo. Apre yon semèn nan adaptasyon, sourit yo te owaza divize an senk gwoup sa yo (n =11 pou chak gwoup): (i). Gwoup nòmal (N): UV san ekspoze; administrasyon oral 0.4 mL saline chak jou. (ii). Gwoup modèl (M): UVexposed plis D-galaktoz (0.2 mL); administrasyon oral 0.4 mL saline chak jou. (mwen). Gwoup peptides kolagen an dòz ki ba (LCPs): UVexposed plis D-galaktoz (0.2mL); oral

administrasyon 0.4 mL CPs (dòz: 200 mg kg-1 pwa kò) chak jou. (iv). Mwayen dòz kolagen peptides gwoup (MCPs): UV ekspoze plis D-galaktoz; oral

administrasyon 0.4 mL CPs (dòz: 500 mg:kg-1 pwa kò) chak jou.

(v). Gwo dòz kolagen peptides gwoup (HCPs): UV ekspoze plis D-galaktoz; administrasyon oral 0.4 mL CPs (dòz: 1000 mg·kg-1 pwa kò) chak jou.

Tretman D-galaktoz te fèt pa piki lar 0.2 mL nan 10 pousan solisyon D-galaktoz nan do kou sourit la (dòz: 1.0g/ kg-1pwa kò) chak jou. Irradiation UV te fèt ak yon 40 W UVA-340 LAMP (O-panel, Cleveland, USA, pik longèdonn: 340 nm), distans ki genyen ant lanp lan ak do sourit yo te 30 cm (230 m J/). cm-), ak iradyasyon an te dire pou 30 min chak jou pou sèt semèn (49 jou). Entansite radyasyon an te mezire pa yon radyomèt UVA365-(Xinbao Keyi Electronic Technology Co., Ltd., Xi'an, Lachin). Yon èdtan apre tretman D-galaktoz ak UV, sourit yo te administre 0.4 mL CPs oral chak jou. Apre dènye iradyasyon an, yo te anestezi sourit yo, yo te peze yo epi yo te pran echantiyon tisi yo pou analiz ki vin apre yo.

2.5.Imidite po, endèks vissral, ak pran pwa kò

Imidite po a te detèmine pa ISO 1442, epi yo te kalkile endèks visceral la ak ekwasyon sa a: endèks visceral (g/kg)=pesè visceral/pwa kò.

2.6.Oxidatioe Estrès, HA, ak kontni HYP nan po a

Echantiyon po yo te homogenized ak nèf fwa kantite saline nòmal (w/w) nan yon beny glas ak yon homogenizer tisi (TGrinder OSE-Y30, Tiangen Biochemical Technology Co, Ltd, Beijing, Lachin), ak Lè sa a, santrifuje nan 2000. ×g ak 4 degre pou 10min. Aktivite superoksid dismutase (SOD), katalaz (CAT), glutatyon peroksidaz (GSH-PX), ak sa ki nan asid hyaluronik (HA) ak idroksiprolin (HYP) nan sipènatant kolekte yo te detèmine dapre metòd ki dekri nan enstriksyon yo. ki koresponn ak twous respektif yo.

2.7. Istolojik po

Echantiyon po sourit yo te fikse nan 4 pousan solisyon paraformaldehyde pou 24 èdtan, dezidrate, entegre nan parafin, epi tranche. Seksyon po yo te tache ak ematoksilin ak eozin (HE) epi yo te obsève ak yon mikwoskòp fluoresans ECLIPSE CI-E (Nikon, Japon). Epesè epidèm po a ak dèrm yo te evalye lè l sèvi avèk lojisyèl Halcon 13.0.1.1 (MVTec, Minik, Almay).

2.8.Skin Transcriptome Sekans

2.8.1. Ekstraksyon RNA, Konstriksyon Bibliyotèk, ak Sekans Transcriptome

Total RNA te extrait nan po sourit yo itilize RNeasy Mini Kit (Tiangen Biochemical Technology Co, Ltd., Beijing, Lachin) selon enstriksyon manifakti a. Pite ak konsantrasyon RNA a te tcheke lè l sèvi avèk kaiaoK5500Spectrophoto-mèt la (Kaiao, Beijing, Lachin); Yo te evalye entegrite RNA lè l sèvi avèk RNA Nano 6000 Assay Kit ak sistèm Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA). Se Biolinker Technology Company Limited (Kunming, Lachin) ki te fè analiz transcriptional sekans chak echantiyon.cistanche poudYon ti tan, gwoupman echantiyon yo kode endèks yo te fèt sou yon sistèm jenerasyon gwoup cBot lè l sèvi avèk HiSeq PE Cluster Kit v4-cBot-HS (Illumina) dapre enstriksyon manifakti a. Apre jenerasyon gwoup, bibliyotèk yo te sekans sou yon platfòm Illumina, epi yo te pwodwi 150 bp lekti pè.

2.8.2. Bioinformatics analiz de done RNA-sekans

Gene Ontology (GO) ak Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) analiz anrichisman de diferan eksprime jèn (DEGs) te fèt lè l sèvi avèk pakè analizeur gwoup lang R. Lè p-valè a te mwens pase 0.05, atik yo ak chemen anrichi pa GO ak KEGG yo te konsidere kòm enpòtan.

2.8.3. Ranvèse transkriptaz-polymerase chèn reyaksyon (qRT-PCR)

QRT-PCR te fèt jan sa te dekri anvan [19].

2.9.Wester1 Blot

Dapre metòd ki dekri pa Park et al. [20], Western blot (WB) analiz te fèt pou quantifier ekspresyon pwoteyin ki gen rapò ak aje po nan sourit. Konsantrasyon pwoteyin nan lysate po a nan chak gwoup tretman te quantifye lè l sèvi avèk twous BCA a, separe pa SDS-PAGE (10 pousan jèl akrilamid), transfere nan yon manbràn PVDF, bloke ak 5 pousan lèt ekreme, ak enkubasyon ak yon kantite apwopriye nan primè. antikò (TGF-b1, c-Fos, c-Jun, Samd2/3, ak -aktin) nan 4 degre lannwit lan. Apre lave ak TBST, echantiyon yo te melanje ak antikò segondè epi yo te enkube nan tanperati chanm pou 1 èdtan. ChemiDoc XRS plis chemiluminescence jèl imager (BioRAD, Hercules, CA, USA) te itilize pou detekte pwoteyin espesifik. Imaj ] lojisyèl te itilize pou quantifier ekspresyon de protéines sib nan chak gwoup tretman, Et rezilta yo te repwezante pa valè dansite nòmalize pou -actin protéines.

2.10.ELISA

Nivo ekspresyon MMP-1, MMP-3, Kalite I pro-kolagen, ak IL-1 nan likid liz po yo te detèmine pa yon tès imino-anzim ki lye. Yo te fè tès la dapre enstriksyon yo te bay ak twous la.

2.11. Analiz estatistik

Tout rezilta yo te analize lè l sèvi avèk lojisyèl SPSS 21 (IBM Inc., Armonk, NY, USA) atravè analiz yon sèl-fason nan divèjans (ANOVA) ak tès miltip ranje Duncan a, ak nivo siyifikasyon an mete sou p.<0.05. originpro="" 2017="" (originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±standard="" deviation="">

3. Rezilta ak Diskisyon

3.1.Konpozisyon asid amine nan kolagen an

Konpozisyon asid amine nan kolagen an zo poul yo montre nan Tablo 1. Gly se te prensipal asid amine nan echantiyon yo, kontablite pou prèske yon tyè (27.86 pousan) nan total asid amine yo, ak Hyp te la. espesyal asid amine nan kolagen an, kontablite pou 9.83 pousan. Karakteristik prensipal yo nan molekil kolagen an yo te repete Gly-XY sekans ak estrikti inik trip-helikal ki konpoze de twa chenn c. Gly te konte pou apeprè yon tyè nan total asid amine yo, X ak Y yo te souvan prolin ak idroksiprolin, oswa ta ka nenpòt rezidi [21]. Konpozisyon asid amine echantiyon an te sanble ak kolagen an zo poul te rapòte nan etid anvan yo e li te gen karakteristik tipik kolagen an [22].

3.2. Distribisyon pwa molekilè nan CPs

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da(Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da,65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 Da, 72 pousan). Sepandan, konpayi Gelita Alman an te montre atravè plizyè etid klinik ke efè kolagen an peptides sitou detèmine pa degre matche li yo ak pwopriyete yo nan peptides kolagen an apre degradasyon nan kolagen an imen, olye ke pwa molekilè nan peptides kolagen an. Yo te jwenn ke pwodwi VERISOL⑧ ak yon pwa molekilè mwayèn 2000 Da gen efè ki pi enteresan sou fibroblasts po, pandan y ap pwodwi FortigelTM ak yon pwa molekilè mwayèn 3000 Da gen yon efè espesyal sou reparasyon Cartilage [25-27].

3.3. Efè CP oral yo soulaje aje po

3.3.1. Pwa kò ak Endèks ògàn

Endèks pwa kò a ak endèks ògàn yo enpòtan epi yo reflete estati sante sourit yo. Pwa sourit yo nan chak gwoup ogmante nòmalman pandan peryòd tès la (Tablo 2). Pran pwa an mwayèn nan gwoup M a te pi ba pase sa yo ki nan gwoup N a, ak sa yo ki nan gwoup tretman CP yo te pi wo pase sa yo ki nan gwoup M a, sijere ke CPs pa te gen okenn efè segondè sou sourit. Nan rapò anvan yo, dòz la nan sourit kolagen peptide-trete te sitou ant 100-1000 mg/kg.bw·d, ak dòz la san danje nan tilapia peptides kolagen an te rive nan 4.07 g/kg.bw·d [{{6} }].extrait salsa cistanche Similarly, the growth of skin-aged mice after gavage with tilapia scale collagen peptides (dose: 500 and 1000 mg/kg.bw·d)was also similar to our results [29]. The spleen plays an important role in humoral and cellular immunity, thus, the spleen index is often used to evaluate immune system function. The liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups(p>0.05). Rezilta yo te sanble ak sa yo nan etid anvan yo [30], ki endike ke CP yo an sekirite epi yo ta ka yon ti kras amelyore iminite a nan sourit.

3.3.2. Konpozisyon po

Tretman UV ak D-galaktoz (gwoup M) redwi siyifikativman imidite, HA, ak kontni Hyp nan po a, konpare ak sa yo ki nan gwoup la, pa 13.36 pousan, 24.08 pousan, ak 15.83 pousan, respektivman (p).<0.05)(table 2).the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

Chanjman nan kontni imidite po lakòz ondilasyon ak afesman po epi yo afekte pa eleman matris tankou kolagen an po ak HA [31]. Hydroxyproline se yon asid amine ki estab, rich ak espesyal nan kolagen an, ak kontni li yo ka endirèkteman reflete kontni an nan kolagen an nan po a, osi byen ke aje po. Anplis de sa, HA, ki trè eksprime nan ECM po, jwe yon wòl enpòtan nan kontwole balans dlo po, presyon osmotik, retansyon imidite, ak elastisite kòm yon sistèm depo dlo ak eleman estriktirèl nan po [32]. Nan etid sa a, kontni an nan imidite, HYP, ak HA nan po a ogmante anpil apre konsomasyon CP, ki ta ka gen rapò ak pwomosyon nan kolagen an ak sentèz HA pa CPs. Anplis, ogmantasyon nan HYP ak HA ogmante kontni imidite a.

3.3.3. Chanjman Istolojik Po

Chanjman istolojik nan po dèyè sourit apre sèt semèn tretman kontinyèl yo montre nan Figi 2. Po aje nan gwoup M a te montre karakteristik sifas ki graj, epidèm epè, dèrm eklèsi, ak selil ra, konpare ak po a nan gwoup N. Sepandan, kondisyon an nan po aje nan sourit amelyore apre administrasyon oral nan CPs, kenbe yon estrikti lis, lòd, ak konplè ki sanble ak sa ki nan sourit yo nan gwoup N la. Kidonk, dèrm po a te siyifikativman pi mens, epi epidèm la te siyifikativman pi epè nan gwoup M pase nan gwoup N (p).<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).="" the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously[4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,="" loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" into="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4.Po antioksidan ak nivo enflamatwa

Detèmine aktivite anzim antioksidan se metòd ki pi souvan itilize pou evalye nivo antioksidan nan kò a [28]. Jan yo montre nan Figi 3, aktivite CAT, SOD, GSH-Px, ak MDA kontni nan gwoup M yo te siyifikativman pi ba pase sa yo nan gwoup N (p).<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-px="" activities,="" and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activates="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrix="" collagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

Anplis de sa, repons lan enflamatwa selilè ki te koze pa ROS tou kontribye nan aje po. Apre tretman UV ak D-galaktoz (gwoup M), kontni IL-1 nan po sourit yo ogmante siyifikativman konpare ak gwoup N (Figi 3D), ki endike ke po a te montre yon repons enflamatwa enpòtan. (p<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05), indicating="" that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the="" o2="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4.Mekanis aksyon nan CP dyetetik nan soulaje aje po

3.4.1.Analiz ak Validasyon Done RNA-Seq

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GO enrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A)and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B).The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group(Figure 4A,B).Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs, 4303 genes were significantly expressed in the mice's skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" six="" genes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes(including="" fos,="" jun,="" cxcl1,="" and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated(figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

analiz anrichisman ak analiz anrichisman baz done KEGG te bay sipò pou plis envestige fonksyon byolojik DEG yo. Analiz GO te montre ke DEG yo te siyifikativman rich nan pwosesis byolojik tankou replikasyon ADN, règleman emopoyez, règleman aktivite idrolaz, ak pwodiksyon sitokin; nan eleman selil, ki enkli vakuol litik ak lizozom, ki gen kolagen an ak lòt jèn ki gen rapò yo te siyifikativman rich; an tèm de fonksyon molekilè, aktivite reseptè-ligand, aktivite sitokin, ak lòt jèn ki gen rapò yo te siyifikativman anrichi (Figi 5). Analiz anrichisman KEGG nan 20 premye chemen siyal yo siyifikativman chanje pa DEG yo montre nan Figi 5. Entèraksyon cytokine-reseptè, lizozom, entèraksyon neuroaktif ligand-reseptè, sik selilè, lupus sistemik eritematos, ak TGF-chemin (p).<0.05)were closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" differentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors="" [40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging="" [14].="" gene="" functional="" enrichment="" analysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41.="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2. Verifikasyon Mekanis Aksyon nan CPs nan soulaje aje po

Pou verifye wòl chemen siyal TGF a ak entèraksyon cytokine-reseptè nan soulaje aje po pa CP oral yo, yo te fè analiz WB pou verifye TGF- ak faktè transkripsyon Smad2/3 nan chemen siyal TGF-, osi byen ke kle a. faktè transkripsyon AP-1(c-Fos ak c-Jun) ki kontwole cytokines. ELISA te detèmine kontni MMP-1, MMP-3, Kalite I pro-kolagen, ak I-1. Rezilta analiz WB la te montre ekspresyon TGF-, Smad2, ak Smad3 nan gwoup M te siyifikativman pi ba pase sa nan gwoup N(p).<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased="" significantly=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" m="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

Pwoteyin AP-1 se yon konplèks dimerik nan pwoteyin fanmi Jun ak Fos epi li se yon regilatè enpòtan nan enflamasyon po ak ekspresyon sitokin. Anjeneral, konplèks la ki konpoze de c-Jun ak c-Fos montre pi gwo aktivite transcriptional nan po a [41, A42]. ROS ki pwodui nan selil po ki aje yo premye aktive AP-1 pwoteyin epi answit kontwole cytokines en (tankou IL-1 ), MMPs, ak chemen siyal TGF nan transkripsyon ak tradiksyon, konsa fasilite aje po [43 ,44]. Reyaksyon siyal TGF-/Smad la se yon chemen sentèz kolagen an klasik, ak faktè transkripsyon Smad se nan nwayo chemen transdiksyon siyal sa a. TGF- deklanche fosforilasyon an ak aktivasyon nan en Smad2 ak Smad3 pa obligatwa nan reseptè a, kidonk ogmante sentèz la nan COLI [14].

Anplis de sa, rezilta ELISA yo te montre ke kontni MMP-1, MMP-3, ak IL-l nan po a nan gwoup M a te siyifikativman pi wo pase sa nan gwoup N a, ak kontni an nan Kalite. Mwen pro-kolagen an te siyifikativman pi ba (p<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,="" mmp-3,="" and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group="" (p=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mmps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1α="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

Anplis de sa nan chemen ki anwo yo, nan etid sa a, jèn yo kontwole apre tretman CP yo te siyifikativman rich nan chemen an lizozom, ki endike ke tretman CP aktive lizozom nan po a (Figi 5). Etid anvan yo endike ke lizozom aktive klè total ak elve aktivasyon an nan senesan selil souch neral pandan aje [45]. Anplis de sa yo, fonksyon an ogmante nan lizozom ka diminye konsantrasyon nan ROS entraselilè pou anpeche andòmi selilè. Menm jan an tou, nenpòt diminisyon nan fonksyon lizozom ka amelyore konsantrasyon ROS intraselilè ki finalman ankouraje andòmi selilè [46]. Malgre ke nou pa te sistematik verifye li nan papye sa a, rezilta sa yo ak rapò anvan yo vle di ke aktivasyon an nan fonksyon lizozomal yo ka fason prensipal la pou CP yo soulaje aje po, epi nou pral kontinye vize verifye li.

Se poutèt sa, etid sa a te montre ke CP dyetetik te kapab soulaje aje po pwovoke pa UV ak D-galaktoz nan yon fason ki depann de dòz. CPs soulaje aje po a lè yo bese nivo oksidasyon po yo, anpeche ekspresyon faktè kle transkripsyon AP-1(c-Jun ak c-Fos), aktive chemen siyal TGF-/Smad pou ankouraje sentèz kolagen an, anpeche ekspresyon de. MMP-1 ak MMP-3(ki anpeche degradasyon kolagen an), ak anpeche enflamasyon po pou soulaje aje po (Figi 8). Anplis, konklizyon nou yo nan aktyèl la

4. Konklizyon

An rezime, etid sa a te konfime ke sipleman dyetetik nan peptides kolagen nan zo poul ka siyifikativman soulaje aje po pwovoke pa radyasyon iltravyolèt ak D-galaktoz atravè plizyè chemen, ki gen ladan pwomosyon sentèz pro-kolagen an, anpeche degradasyon kolagen an, amelyore nivo antioksidan po, ak anpeche. enflamasyon; soulajman an te depann de dòz ak CPs. Yon ankèt detaye te montre ke CP yo premye diminye nivo oksidasyon po a, anpeche ekspresyon kle faktè transcription AP-1(c-Jun ak c-Fos), epi aktive chemen siyal TGF-/Smad pou ankouraje. sentèz kolagen an, anpeche ekspresyon MMP-1 ak MMP-3 pou anpeche degradasyon kolagen an, ak anpeche enflamasyon po pou soulaje aje po nan sourit. Anplis de sa, aktivasyon an nan lizozòm kapab tou chemen prensipal la pou CPs soulaje aje po, ki merite pou yo swiv rechèch ak verifikasyon. Rezilta sa yo bay yon baz teyorik pou mete ann aplikasyon peptides kolagen an pou soulaje aje po ak elaji sijè ki abòde lan pou itilizasyon konplè sou pwodwi bèt nan manje fonksyonèl.

Kontribisyon otè: CC te fèt, mezire, epi ekri maniskri a; ZXand HT te fèt ak revize maniskri a; YL te bay konsèy metodolojik; CG ak YW te revize maniskri a. Tout otè yo te li epi yo te dakò ak vèsyon ki te pibliye maniskri a.

Atik sa a soti nan Nutrients 2022, 14, 1622. https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients