PATI 1 Phenylethanol Glycoside Liposome an anpeche PDGF-induit HSC Aktivasyon atravè Règleman nan chemen an siyal FAK/PI3K/Akt.
Mar 06, 2022
Shi-Lei Zhang 1, Long Ma 1, Jun Zhao 2, Shu-Ping You 1, Xiao-Ting Ma 1, Xiao-Yan Ye ak Tao Liu 1,*
1 Depatman Toksikoloji, Lekòl Sante Piblik, Inivèsite Medikal Xinjiang, Rejyon Otonòm Xinjiang Uyghur, Xinyi Road No.393, Urumqi 830011, Lachin
2 Kle Laboratwa pou Medsin Ouyghur, Enstiti Materia Medica nan Xinjiang, Rejyon Otonòm Xinjiang Uyghur, Distri Tianshan, Xinhua South Road No 140, Urumqi 830004, Lachin
Pou plis enfòmasyon tanpri kontakte:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola gen anpil efè, klike isit la pou konnen plis
Résumé: Cistanche tubulosase yon medikaman tradisyonèl Chinwa èrbal ki lajman itilize pou kontwole iminite, akglikozid feniletanoid(CPhGs) se yo ki pami eleman prensipal ki responsab aktivite sa a. Sepandan, aplikasyon CPhG yo afekte negatif pa absòpsyon pòv yo ak itilizasyon oral ki ba. Livrezon vize dwòg se yon direksyon devlopman enpòtan pou pharmaceutique. Etid anvan yo te endike ke CPhG yo te kapab bloke kondiksyon nan chemen siyal yo nan TGF-p1/smad ak anpeche aktivasyon nan selil epatik stellate (HSCs). Objektif etid sa a se te evalye efè anti-epatik fibwoz lipozom CPhG lè yo anpeche deklanchman HSC, ankouraje apoptoz, bloke sik selil la, siprime kondiksyon chemen siyal nan fokal Adhesion kinase (FAK)/phosphatidylinositol -3- kinaz(PI3K)/pwoteyin kinaz B(Akt), epi detèminen yo se aktivite epatoprotective nan vitro. Etid lage nan vitro te demontre ke lipozom CPhG gen yon efè lage soutni konpare ak CPhG dwòg. Pwopagasyon HSC te anpeche apre tretman ak lipozom CPhG (29.45,14.72, 7.36 ^g / mL), ak valè IC50 nan 42.54 Rg / mL nan tès MTT la. Konsantrasyon diferan nan lipozom CPhG yo ka anpeche pwopagasyon HSC, ankouraje apoptoz, ak bloke sik selilè a. Metòd MTT la te montre yon anpèchman evidan nan pwopagasyon HSC apre lipozom CPhG ak tretman Faktè kwasans-BB(rrPDGF-BB) Rat Recombinant Platelet. Nivo kolagen an-1, inibitè metalopeptidaz 1 (TIMP-1), aktin nan misk lis (a-SMA), ak fosforilasyon PI3K/Akt yo te reglemante, ak metaloproteinaz matris-1 (MMP{). {23}}) te upregulated, pa pretreatment ak diferan konsantrasyon liposomes CPhG. Anplis, 29.45 Rg/mL nan lipozom CPhG ta ka diminye ekspresyon nan pwoteyin FAK ak fosforilasyon PI3K ak pwoteyin Akt en nan FAK pa ekspresyon jèn FAK la. Eksperyans sa a sijere ke lipozom CPhG yo ka anpeche aktivasyon HSC yo lè yo anpeche FAK ak Lè sa a, diminye ekspresyon fosforil Akt/PI3K, kidonk bay nouvo lide sou aplikasyon CPhGs pou fibwoz fwa.
Mo kle: glikozid feniletanoidlipozom; selil stellate epatik; pwopagasyon; apoptoz; sik selilè; FAK/PI3K/Akt,
faktè, tankou TGF-p1, alkòl, toksin, ak steatosis, ka lakòz deklanchman HSC yo. PDGF a ka mennen tou nan aktivasyon an nan HSCs [4]. Kounye a, estrateji terapetik ki vize HSC yo pou anpeche fibwoz fwa gen ladan anpèchman deklanchman HSCs, pwopagasyon, ak sik selilè, osi byen ke eksitasyon HSCs apoptoz [5].
Cistanche tubulosa(fanmi Orobanchaceae), yon plant parazit, lajman grandi nan rejyon sid Xinjiang nan peyi Lachin.C. tubulosayo te montre yo prezante divès aktivite, tankou amelyore iminite òganis, amelyore andirans òganis, nouri ren yo, trete enpotans, ak ogmante entèlijans;
1. Entwodiksyon
li gen tou anti-oksidasyon ak pwopriyete anti-aje [6]. Plant sa a gen glikozid phenylethanoid (CPhGs), iridoids, ak polisakarid, ki CPhG yo se kèk nan prensipal espès bioaktif aktif [7]. Nan yon etid anvan, nou te jwenn ke CPhG yo te kapab bloke kondiksyon nan chemen siyal yo nan TGF-p1 / smad, anpeche aktivasyon HSCs, ak egzèse efè prevantif sou fibwoz epatik serom albumin bovine nan rat [7,8]. Sepandan, CPhGs gen bon solubility dlo ak pòv lipid solubility epi yo afekte pa faktè ekstèn tankou asidite ak dekonpozisyon anzim, ki diminye estabilite ak efikasite nan CPhGs [9]. Apre administrasyon entragastric, CPhG yo enstab nan aparèy gastwoentestinal rat yo, epi idroliz lyezon glikozid yo ka fasilman rive. Byodisponibilite oral rat yo te sèlman 0.83 pousan, kidonk li difisil pou detèmine wòl terapetik li yo [10]. Se poutèt sa, nou dwe jwenn yon dwòg ki an sekirite, efikas, soutni, ak vize pou HSC yo amelyore efikasite terapetik yo. Nanoparticle sistèm livrezon dwòg bay yon estrateji altènatif simonte defisyans sa yo akòz avantaj yo, ki gen ladan yon gwo kapasite chaj dwòg ak sikilasyon san long [11]. Yo gen yon gwo afinite nan fwa a epi yo ka dirèkteman delivre dwòg nan selil yo atravè andositoz ak fizyon. Lipozom ki pa modifye yo distribye sitou nan tisi oswa ògàn yo devlope pa sistèm reticuloendothelial (RES) epi yo gen fonksyon pou yo vize pasif fwa a [12]. Se poutèt sa, lipozom CPhG yo te prepare pa dispèsyon manbràn ak enkapsulasyon segondè pou bay yon efè anti-fibwoz. Nan etid sa a, nou vize mennen ankèt sou efè lipozom CPhG sou pwopagasyon HSC, apoptoz, ak sik selilè, osi byen ke mekanis li yo.
2. Rezilta yo
2.1. Pwopriyete fizik lipozom CPhG
Pwopriyete fizik liposomes CPhG yo te prepare yo te jan sa a: gwosè patikil la te (216.7 ± 3.47) nm, potansyèl Zeta a te (-55.6 ± 1.3) mV. Jan yo montre nan Figi 1, patikil yo te tankou wonn, kouvwi ak yon epesè inifòm sou sifas la, ak distribisyon an gwosè patikil te inifòm. Chajman dwòg la ak efikasite enkapsulasyon nan lipozom CPhG yo te (3.71 ± 0.32) pousan ak (38.46 士 7.85) pousan.
2.2. In Vitro Release soti nan CPhG Liposomes yo ak CPhGs
Yo te kalkile pousantaj lage kimilatif estime a ak trase kòm yon fonksyon tan pou liposòm CPhG ak CPhGs (Figi 2). Nan etid la prezan; to lage nan CPhG yo apre 12 h te nòmalize a 100 pousan, pandan y ap sa yo ki nan liposom yo CPhG te fèmen nan 100 pousan apre 24 h, ak pousantaj la lage nan CPhGs yo te ogmante ak tan. Done yo te analize lè l sèvi avèk diferan modèl adapte pou mekanis lage kontwole, ki gen ladan ekwasyon zewo-lòd, premye lòd ak Higuchi. Yo montre ekwasyon yo ak koyefisyan korelasyon pou twa modèl lage yo nan Tablo 1.
Modèl ki pi bon pou CPhGs ak lipozom CPhG yo se Higuchi ak ekwasyon premye lòd yo. Etid lage in vitro nan lipozom CPhG yo pa t montre okenn efè pete. Fonksyon distribisyon ki pi bon an te chwazi pou kalkile paramèt disolisyon T50 (disolisyon 50 pousan). Rezilta yo montre ke tan an mwayèn retansyon nan lipozòm CPhG yo pi long pase sa yo ki nan CPhG yo, ak T50 nan lipozòm yo CPhG se 9.39 h. Konpare ak 1.69 h pou CPhG yo, lipozom CPhG yo montre yon efè evidan soutni-lage (Tablo 2).
Nou premye envestige efè cytotoxic liposomes CPhG yo sou HSC yo ak yon tès MTT an vitro. HSC yo te ekspoze a diferan konsantrasyon nan lipozom CPhG yo, sòti nan 0 rive nan 117.79 卩g/mL pou 24 èdtan. Liposomes CPhG yo diminye viabilite HSC yo nan yon fason ki depann de dòz la, ak valè IC50 yo te 42.535 (eg/mL. Efè lipozom CPhG yo (29.45, 14.72, ak 7.36 ^g/mL) sou selil yo nan 24, 48 ak 72 h yo montre nan Figi 3. Apre tretman ak lipozom CPhG yo, pwopagasyon HSC yo te siyifikativman anpeche nan diferan pwen tan (Figi 3).
Laktat dehydrogenase (LDH) liberasyon HSC yo te detekte apre 24 èdtan nan tretman ak konsantrasyon diferan nan lipozom CPhG la. Rezilta yo montre nan tablo 3. HSCs trete ak liposomes CPhG yo pa te gen okenn efè enpòtan sou lage LDH.
2.4. CPhG Liposomes pwovoke HSCs Apoptoz ak arete sik selil la
HSC yo te ekspoze a lipozom CPhG (29.45,14.72,7.36 卩g/mL) pou 24 èdtan, epi yo te pote doub tach annexin-V-FITC/PE pou detekte apoptoz pa sikometri koule, jan yo montre nan Figi 4a. Apoptoz total selil yo ogmante estatistikman konpare ak gwoup kontwòl la (p < 0.05).="" apre="" 24="" èdtan="" nan="" tretman="" sou="" hscs="" pou="" chak="" gwoup="" dòz,="" lipozom="" cphg="" yo="" (29.45="" ^="" g="" ml)="" te="" kapab="" pwovoke="" apoptoz="" an="" reta="" nan="" hscs="" yo,="" ak="" pousantaj="" nan="" selil="" yo="" an="" reta="" apoptotik="" te="" pi="" wo="" pase="" sa="" yo="" ki="" nan="" selil="" yo="" apoptotik="" bonè.="" pwopòsyon="" selil="" apoptotik="" bonè="" yo="" te="" pi="" wo="" pase="" selil="" apoptotik="" an="" reta="" nan="" gwoup="" lipozòm="" cphg="" (14.72="" ak="" 7.36="" |^g/ml)="" trete.="" rezilta="" sa="" yo="" klèman="" endike="" ke="" lipozom="" cphg="" pwovoke="" apoptoz="" epatosit,="" espesyalman="" nan="" fen="" etap="" hsc="" yo.="" anplis="" de="" sa,="" apoptoz="" total="" ogmante="" ak="" dòz="" la="" nan="" lipozom="" cphg="" yo.="" rezilta="" sa="" yo="" sijere="" ke="" lipozom="" cphg="" ka="" anpeche="" aktivasyon="" hsc="" yo="" ak="" fibwoz="" epatik="" lè="" yo="" pwovoke="" apoptoz="" hsc="">
Pou detèmine efè lipozom CPhG yo sou sik selil HSC yo, HSC yo te trete ak lipozòm CPhG nan konsantrasyon 29.45, 14.72, ak 7.36 昭/mL pou 24 èdtan, epi analize pa sikometri koule (Figi 4b). Rezilta yo te montre pwopòsyon selil nan faz G0/G1 siyifikativman ogmante (p <{{10}}.05), pandan="" ke="" pousantaj="" selil="" nan="" faz="" s="" la="" te="" siyifikativman.="" redwi="" (p=""><0.05). anplis,="" pwopòsyon="" selil="" yo="" nan="" faz="" g2/m="" yo="" te="" siyifikativman="" redwi="" lè="" yo="" konpare="" ak="" gwoup="" kontwòl="" la=""><0.05). taken="" together,="" these="" results="" exhibit="" the="" cell="" cycle="" modulatory="" activity="" of="" the="" cphg="" liposomes="" in="" hscs,="" which="" may="" relate="" to="" their="" anti-proliferative="" and="" apoptosis-inducing="">
2.5. Etid sou Mekanis (yo) Aksyon C PhG Liposomes In Vitro
2.5.1. Lipozom CPhG anpeche pwoliferasyon HSC pa stimulation rrPDGF-BB
Pou plis envestige efè lipozom CPhG yo sou pwopagasyon rrPDGF-BB HSC yo te ankouraje yo, yo te fè yon tès MTT pou mezire rantabilite HSC yo te trete ak konsantrasyon prereglaj lipozom CPhG yo pou 24, 48, ak 72 èdtan. Figi 5).
Apre 24 èdtan nan tretman ak HSCs ankouraje pa rrPDGF-BB ak 29.45,14.721 ak 7.36 昭/mL nan lipozom yo CPhG, pousantaj yo siviv nan selil yo nan chak gwoup dòz yo te 67.5 pousan, 75.3 pousan, ak 89, respektivman. Apre 48 èdtan, pousantaj siviv yo te 49.2 pousan, 58.6 pousan, ak 73.5 pousan, respektivman, nan selil yo.
nan chak gwoup dòz. Apre 72 èdtan nan tretman an, pousantaj siviv selil yo nan chak gwoup dòz yo te 45.3 pousan, 59.2 pousan, ak 79.2 pousan, respektivman. Rezilta yo te montre ke lipozom CPhG yo te gen yon efè inhibition enpòtan sou HSCs ankouraje pa rrPDGF-BB, ak efè inhibition sa a te vin pi evidan kòm dòz la te ogmante. Li sigjere ke efè inhibition liposomes CPhG yo sou HSC yo kontribye nan aktivite anti-proliferasyon CPhGliposomo.
2.5.2. Lipozom CPhG yo anpeche Aktivasyon HSC nan Vitro
HSC nan espas Disse pwodui eleman ECM tankou kolagen -1, (s-SMA, ak kolagen III. Lòt faktè ki kontwole devlopman ECM, tankou MMP ak TIMP, yo pwodui tou pa HSC [5]. Pou plis envestige mekanis rrPDGF-BB-induit nan HSC yo, nou evalye ekspresyon de pwoteyin ki gen rapò ak ECM, ki gen ladan kolagen an-1, Cosma, kolagen an III, MMP-1, ak TIMP{{8} }. Figi 6a montre ke gwoup CPhG liposomes (29.45,14.72, 7.36 4g/mL) te kapab redwi nivo ekspresyon mRNA kolagen an-1, a-SMA, ak TIMP{{18} } epi ogmante nivo ekspresyon mRNA MMP-1 plis pase gwoup rrPDGF-BB.
Figi 6. Efè lipozom CPhG yo sou ekspresyon kolagen -1, a-SMA, TIMP-1, ak MMP-1 nan HSC yo. (a) Ekspresyon mRNA kolagen an-1, a-SMA, TIMP-1, ak MMP-1 nan HSCs (RT-PCR assay). (b) Ekspresyon pwoteyin kolagen an{{10}} ak a-SMA. A, gwoup kontwòl la; B, gwoup la trete rrPDGF-BB; C, rrPDGF-BB plis CPhG liposome 29.45 g / mL gwoup trete; D, rrPDGF-BB plis CPhG lipozom 14.72(_ig/mL gwoup trete; E, rrPDGF-BB plis CPhG lipozom 7.3 6 卩g/m L gwoup trete; Done yo eksprime kòm vle di 土 SD . ** p <0.01, siyifikativman="" diferan="" konpare="" ak="" gwoup="" hscs="" rrpdgf-bb-aktive.="" #="" p="">< 0.05,="" siyifikativman="" diferan="" coirtpared="" ak="" gwoup="" kontwòl="" la.="" 6-aktin="" te="" itilize="" kòm="" yon="" kontwòl="">
Lipozom CPhG yo te ogmante nivo mRNA MMP-1 tou. Nivo a-SMA ak kolagen -1 yo te eksprime anpil nan HSC aktive rrPDGF-BB. Kontrèman, lipozòm CPhG yo diminye nivo a-SMA ak kolagen an -1 (Figi 6b). Espesyalman nan yon gwo konsantrasyon (29.45 ^g/mL), lipozom CPhG redwi ogmante kolagen an -1 ak ekspresyon a-SMA atravè rrPDGF-BB.
2.53 CPhG lipozom anpeche chemen siyal PI3K/Akt.
PI3K/Akt se yon chemen transdiksyon siyal enpòtan medyatè pa reseptè tirozin kinaz. Chemen siyal PI3K / Akt la aji kòm yon Capteur an repons a stimuli ekstraselilè ak medyatè siyal selilè yo, kidonk jwe yon wòl enpòtan nan apoptoz selil ak pwopagasyon lè li afekte aktivite molekil efè en [13]. Yo nan lòd yo verifye si chemen PI3K/Akt patisipe nan efè anti-proliferasyon lipozom CPhG yo sou HSC yo, yo te egzamine ekspresyon ak nivo fosforilasyon PI3K/Akt pa analiz Western blot. Rezilta yo te montre ke nivo p-PI3K ak p-Akt toujou diminye nan HSC apre 24 èdtan tretman ak lipozom CPhG yo, ki endike ke efè anti-proliferasyon lipozom CPhG kont HSC yo gen rapò ak dezaktivasyon chemen PI3K/Akt. , jan yo montre nan Figi 7.
2.5.4. Liiposomes CPhG yo ka kontwole ekspresyon PI3K / Akt Pathway Pwoteyin nan HSC nan Plasmid Overexpression FAK rrPDGF-BB-medyatè.
FAK se yon jèn kritik ki kontwole chemen siyal PI3K/Akt. Aktive FAK ka fosforil PI3K, ki pi lwen mennen nan fosforilasyon Akt. FAK medyatè transdiksyon siyal reseptè kinaz tirozin-pwoteyin, entegrin, ak lòt chemen ki mennen nan selil yo, ki se junction ak sant plizyè chemen intraselilè pandan deklanchman HSC yo. Se poutèt sa, nou te espekile
ke lipozom CPhG yo ta ka siprime aktivite chemen siyal PI3K/Akt lè yo afekte deklanchman FAK. Nou imedyatman konfime ipotèz sa a lè nou demontre twòp ekspresyon jèn FAK la.
(pEX {{0}} NC) plis CPhG lipozom 29.45 Lg/mL gwoup diminye anpil (p <0.01).
eksteryè blotting ak antikò prensipal espesifik. ** p < 0.01,="" siyifikativman="" diferan="" konpare="">
eksitasyon rrPDGF-BB plis gwoup pEX-3-FAK. plis p <0.05, siyifikativman="" diferan="" konpare="" ak="" gwoup="" trete="" rrpdgf-bb.="" &="" p=""><0.01, siyifikativman="" diferan="" konpare="" ak="" eksitasyon="">
plis gwoup pEX-3-NC. -aktin te itilize kòm yon kontwòl entèn.
cistanche ka anti-kansè
3. Diskisyon
CPhG yo te montre yo gen yon varyete aktivite byolojik, ki gen ladan aktivite anti-enflamatwa [14,15], aktivite anti-osteyopowoz [16,17], yon efè sedatif [18] , aktivite antifatig [19], yon efè neuroprotective [ 20], ak aktivite epatoprotective [21,22]. Yang et al. te jwenn ke yon ekstrè nanC. tubulosate kapab siyifikativman retade pwogrè nan fibwoz fwa chimik eksperimantal pa anpeche sentèz kolagen an ak diminye estrès oksidatif [22]. Sepandan, efikasite nan CPhGs kòm
Pwoteksyon chalè yo limite pa pèmeyabilite pòv yo ak byodisponibilite ki ba [23]. Se poutèt sa, li nesesè pou elaji aplikasyon CPhGs pa devlope yon sistèm livrezon efikas simonte kontretan sa yo.
Nan dènye ane yo, tou de rechèch dwòg ak rechèch klinik te konfime ke itilizasyon nanopartikul kòm transpòtè dwòg ka amelyore efikasite dwòg nan vivo. Lipozom yo se kèk nan nanopartikil ki pi enpòtan [24].
Lipozom yo ka itilize kòm transpòtè dwòg pou delivre avèk siksè dwòg anti-enflamatwa, dwòg antikansè, antibyotik, dwòg antifonjik, ak lòt kategori diferan nan dwòg [25]. Liposomes kapab tou amelyore estabilite dwòg, ogmante solubility dwòg, ak ankouraje byokonpatibilite [26]. Nan lòt men an, etid yo te montre ke sistèm livrezon dwòg nan nanopartikil solid (nan seri a nan 10-1000 nm) ka konsantre 80 pousan nan dòz dwòg la nan fwa a, ki pèmèt dwòg la antre. selil fwa yo [27]. Jing Zhu et al. te jwenn ke galanin-liposomes posede bon efè vize fwa [28]. Se poutèt sa, efè vize pasif nan medikaman nano-Chinwa ka itilize pou trete maladi fwa oswa lòt maladi. Gwosè patikil lipozom CPhG yo prepare nan etid prezan an, ki gen yon sèten degre vize fwa, se (216.7 ± 3.47) nm. Konpòtman lage dwòg se yon pwopriyete enpòtan nan sistèm livrezon nano-dwòg. Paske CPhG yo gen bon solisyon dlo, yo itilize yon solisyon tanpon PBS (pH=6.0) kòm mwayen lage. Soti nan koub lage a, li ka wè ke anvan 2 èdtan, pousantaj nan liberasyon an nan lipozom CPhG te mwens pase 40 pousan, pa gen okenn lage toudenkou ki te fèt, e te gen yon sèten efè soutni-lage konpare ak liberasyon an nan CPhGs. Soti nan ekwasyon koub lage ekipe a, liberasyon lipozom CPhG yo nan solisyon tanpon fosfat nan pH=6.0 konsistan avèk ekwasyon Higuchi.
sistanchkapabanti-apoptoz
Nan maladi fwa kwonik, aktivasyon kontinyèl HSCs mennen nan fibwoz fwa [29]. Se poutèt sa, anpeche aktivasyon, pwopagasyon, ak sik selil HSCs, oswa pwovoke HSC apoptoz, ka yon nouvo pwen depa pou terapi vize nan fibwoz fwa [30-33]. Anpil etid yo te jwenn ke apoptoz se kle nan ranvèse fibwoz epatik pa ankouraje apoptoz [34]. Devlopman fibwoz fwa depann de aktivasyon HSC yo, ki ka ofri potansyèl pou anpeche aktivasyon HSC ak pwovoke apoptoz pou anpeche oswa trete fibwoz fwa [35,36]. LDH se yon anzim nan cytosol selilè, ki lage nan medya kilti yo lè manbràn selilè a domaje. Pou rezon sa yo, nou te fè etid an vitro sou pousantaj viabilite selil yo, kontni LDH nan selil yo, ak apoptoz ak sik selil HSC yo ekspoze a lipozom CPhG yo. Rezilta yo te montre ke liposomes CPhG yo fòtman anpeche viabilite ak pwopagasyon HSC yo epi ogmante pousantaj selil apoptotik nan yon fason ki depann de konsantrasyon. Anplis, rezilta sik selilè yo endike ke lipozom CPhG yo ka pwovoke arèstasyon sik selilè nan faz G1 la. Rezilta yo montre ke kle pou lipozom CPhG yo anpeche ak trete fibwoz epatik se kontwole pwopagasyon selil, apoptoz, ak sik selil. Konpare ak gwoup kontwòl vid la, kontni LDH ant chak gwoup gen yon tandans piti piti ogmante. Sepandan, pa te gen okenn diferans enpòtan (p> 0.05), ki endike ke byenke aktivite a diminye pou HSC ki afekte nan lipozom CPhG yo, pi fò nan manbràn selilè yo rete entak. Anpèchman pwopagasyon HSC pa lipozom CPhG yo pa akòz toksisite dwòg yo nan selil yo.
PDGF se faktè ki pi kritik ki afekte pwopagasyon HSC yo. PDGF-reseptè yo (PDGF-Ra ak -p) fè pati fanmi reseptè tirozin kinaz la. PDGF-AA mare sèlman nan PDGF-Ra, pandan y ap chenn PDGF-B mare ak dimerize ak tou de PDGF-Ra ak -p [37]. Apre ligand nan PDGF-R a, reseptè yo dimerize, ki imedyatman mennen nan fosforilasyon nan yon rezidi tirozin entèn ak nan aktivasyon an nan plizyè chemen siyal en, finalman pwovoke pwopagasyon ak migrasyon nan HSC aktive. Pwosesis sa a lakòz twòp pwodiksyon ak depozisyon kolagen an ak lòt ECM, kidonk ankouraje devlopman ak pwogresyon fibwoz fwa [38]. Breitkopf et al. te montre ke surekspresyon epatik PDGF-BB rezilta nan pwopagasyon HSC ak fibwoz fwa [39]. Nan etid nou an, nou te itilize rrPDGF-BB kòm yon stimulateur pou aktive HSCs, ak chak gwoup lipozom CPhG ki dòz te kapab anpeche pwopagasyon HSC yo epi prezante yon relasyon dòz-efè aparan. Li sigjere ke efè inhibition nan lipozom CPhG yo sou HSC yo kontribye nan aktivite anti-proliferasyon lipozom CPhG yo.
Aktivasyon HSC yo asosye ak anpil chanjman nan modèl ekspresyon jèn selil yo. An patikilye, chanjman nan ekspresyon jèn nan kolagen -1 ak a-SMA yo pi korelasyon ak pwopriyete fibwoz HSC aktive [40]. MMP yo se endopeptidaz depandan zenk ki jwe yon wòl enpòtan nan degradasyon tout eleman pwoteyin ECM nan kondisyon fizyolojik ak patolojik. MMP yo ak TIMPs medyatè sentèz la ak degradasyon nan ECM la, respektivman. MMP yo ka ankouraje degradasyon ECM. Balans delika ant MMP yo ak TIMP yo detèmine ensidan fibwoz fwa [29]. Konpare ak gwoup rrPDGF-BB a, ekspresyon TIMP-1, a-SMA, ak kolagen-1 nan gwoup lipozom CPhG yo ogmante anpil, pandan y ap ekspresyon MMP-9 diminye. Tretman lipozom CPhG a miyò ranvèse ekspresyon nòmal yo pwovoke pa rrPDGF-BB nan HSC yo. Done sa yo endike ke lipozom CPhG yo kapab anpeche jenerasyon ECM lè yo retabli balans ant MMP ak TIMP, kidonk ogmante nivo MMP-1 ak diminye ekspresyon TIMP-1, a-SMA, ak Kolagen-1 ak potansyèlman ankouraje degradasyon matris ekstraselilè.
FAK se yon kalite konplèks adezyon fokal. PDGF ka aktive FAK tou lè li kominike avèk pwoteyin ECM nan entegrin [41]. Konplèks adezyon fokal la bay yon Capteur dirèk pou entegrite anviwònman ekstraselilè a. Aktivasyon nan FAK rezilta nan aktivasyon an nan PI3K. Yo montre PI3K patisipe nan pwopagasyon plizyè kalite selil [42]. Wòl enpòtan li nan HSC yo te montre nan itilizasyon inibitè PI3K-espesifik LY294002 ak wortmannin pou bloke mitogenesis PDGF-induit ak chemotaxis san yo pa afekte otofosforilasyon reseptè PDGF [43]. PI3K rekrite nan reseptè PDGF fosforilize dimerize, ki aktive pwoteyin kinaz C (PKC), Akt, ak p70S6 kinaz (p70S6K) [44]. Yo te rapòte ke yon FAK dominan-negatif (Ad-FAKCD) te itilize pou bloke aktivite FAK ak anpeche aktivasyon PI3K pwovoke pa pwopagasyon PDGF ak HSCs apre tretman PDGF [45]. Se poutèt sa, nou te sipoze ke chemen FAK/PI3K/Akt se yon sib posib pou lipozom CPhG yo.
Rezilta nou yo montre ke konpare ak eksitasyon rrPDGF-BB plis gwoup X-3-FAK, nivo ekspresyon pwoteyin FAK, fosforil PI3K, ak fosforil Akt yo te desann nan eksitasyon rrPDGF-BB plis X-3-FAK. plis CPhG lipozom 29.45 Lg/mL gwoup. Rezilta sa yo montre ke tretman CPhG lipozom 29.45 Lg/mL ta ka diminye ekspresyon pwoteyin FAK ak pwoteyin fosforilées PI3K ak Akt en FAK.
Ak grandisan rechèch la sou chimi ak famasi medikaman tradisyonèl Chinwa yo, yo te jwenn ak konfime pi plis ak plis engredyan aktif nan medikaman tradisyonèl Chinwa. Paclitaxel, artemisinin, ak lòt dwòg yo te lajman rekonèt kòm medikaman premye liy tretman pou maladi ki gen rapò atravè mond lan. Sepandan, an menm tan an, li jwenn ke byenke efè a famasi in vitro nan anpil engredyan medikal Chinwa trè fò, yo gen pòv solubility dlo, yon mwatye lavi kout, estabilite pòv, byodisponibilite ki ba, efè segondè toksik, ak anpil. lòt pwoblèm ki limite anpil aplikasyon medsin ak klinik yo. Sistèm livrezon nano-dwòg la se yon nouvo sistèm livrezon dwòg ki gen gwo potansyèl pou devlopman e li se yon pwen otèl nan rechèch pharmaceutique modèn. Aplikasyon li nan rechèch ak devlopman nan nouvo fòm medikaman tradisyonèl Chinwa pa sèlman amelyore fòm tradisyonèl yo nan medikaman Chinwa, men tou amelyore efè a guérison nan medikaman tradisyonèl Chinwa nan yon sèten limit ak ogmante estabilite nan dwòg nan vivo. Anplis, lipozom ki pa modifye yo sitou absòbe RES la, tou depann de gwosè patikil yo, pwopriyete sifas yo, ak lòt faktè. Yo tou pasif vize nan fwa a. Yo nan lòd yo amelyore efikasite nan vize fwa nan lipozom òdinè, konsantrasyon nan tisi sib la ka ogmante pa konekte ligand espesifik oswa gwoup fonksyonèl espesifik.
Se poutèt sa, nan rechèch nan lavni, nou ta dwe mete enpòtans nan pwopriyete fizik ak chimik nan ekstraksyon CPhG ak pirifikasyon, tankou solubility, estabilite, asidite, ak alkalinite, osi byen ke etid la nan biopharmaceutique ak pharmacokinetics. Nou ta dwe etabli yon teyori konsepsyon fòmilasyon inik, platfòm teknoloji preparasyon, ak metòd evalyasyon kalite pou CPhGs epi tou devlope yon varyete de sistèm nano-dwòg-chajman pou CPhGs, asire CPhG yo itilize osi byen ke posib. Fè tout itilizasyon avantaj sa yo pral direksyon rechèch nan lavni nou an.
