4. Analiz estatistik

Estatistik deskriptif yo te fèt pou tout varyab epi yo te eksprime kòm mwayen ak devyasyon estanda. Relasyon ki genyen ant sLHCGR nan serom ak espèm oswa dechaj ak varyab rezilta (òmòn, kòmansman pibè, gwosè testikil, laj, ak BMI) te fèt lè l sèvi avèk analiz regresyon. Distribisyon Gaussian varyab nimerik yo te evalye pa simit rezidyèl pp pou asire validite modèl regresyon yo. Kòm yon rezilta, sLHCGR nan serom ak pipi yo te itilize kòm varyab depandan nan tout kòwòt, sLHCGR nan espèm oswa dechaj jèn gason an sante yo te itilize kòm varyab depandan, epi sLHCGR nan espèm oswa serom yo te transfòme kòm varyab depandan an. analiz konbine. Mezi òmòn ak sLHCGR ki pi ba pase limit deteksyon yo te mete nan mwatye limit deteksyon an. Nan gwo kòwòt la, sLHCGR te plis divize an katil epi Kruskal-Wallis te fèt lè l sèvi avèk tès post hoc Dunn-Bonferroni pou ajiste pou plizyè konparezon. Mezi lonjitidinal nan pibète, rezilta nan entèvansyon klinik yo, ak konparezon nan sLHCGR nan diferan likid kò nan menm gason an te analize lè l sèvi avèk tès la Wilcoxon pè. Lè plizyè tès pè yo te fèt, nivo siyifikasyon miltip tès yo te korije lè l sèvi avèk metòd Bonferroni. Rapò sa yo te kalkile ak analize nan modèl regresyon endepandan: inhibin B / FSH, testostewòn / LH, ak testostewòn / estradyol. Nan tout ti gason prepibètè yo, analiz testostewòn ak estradyol (ki gen ladan rapò) yo te inyore paske tout men de mezi yo te pi ba pase limit deteksyon an. Pou tout analiz, p <0.05 te konsidere kòm yon diferans estatistik enpòtan. Tout analiz kalite espèm oswa dechaj prezante yo te ajiste pou dire abstinans ejakulatwa.

Klike la a pou w konnenbenefis ki genyen nan Cistanche pou ren

Rezilta yo

1. Plizyè izofòm LHCGR yo eksprime nan tèstikul epi yo detekte nan serom

Yo te idantifye plizyè izofòm LHCGR nan tisi repwodiktif yo lè l sèvi avèk primè pou ekson 2-4. De gwoup fò apeprè 100 ak 200 pè baz yo te detekte nan echantiyon tèstik imen ak RNA ovè epi konfime kòm LHCGR pa sekans dirèk. ekson 11 te eksprime tou nan testikil la ak òvèj. LHCGR te detekte nan tisi tèstikul imen ak de echantiyon serom; echantiyon serik gason sLHCGR segondè ak echantiyon serik gason sLHCGR ki ba pa ELISA lè l sèvi avèk teknik Western blotting (WB) ak antikò kont OASG04237.WB te montre de gwoup 50 ak 75 kDa nan tèstikul la, pi piti gwoup gwosè menm jan an nan tou de echantiyon serom ak serom. echantiyon Yon gwoup sikilè apeprè 75 kDa te domine nan echantiyon serik la. De gwoup 50 ak 75 kDa yo te detekte tou lè l sèvi avèk antikò LHR029 ki mare nan pòsyon ekstraselilè LHCGR la, byenke entansite a te pi ba nan tou de echantiyon serom konpare ak tèstikul la, epi yo te yon bann 75 kDa ankò detekte nan echantiyon serom yo. Antikò SC-26341 la te detekte yon pati enkoni nan domèn estriktirèl ekstraselilè LHCGR, ki montre nan tout echantiyon yo apeprè 50 ak 75 kDa bann, ak gwoup 75 kDa la te pi fò nan tèstikul pase nan echantiyon serom yo. Miyò, nivo mikwoglobulin kontwòl -2 nan serom yo te siyifikativman pi ba pase te espere konpare ak tisi testikil, ki anpeche itilizasyon quantitative ak konparezon nivo LHCGR nan tisi ak serom. Etid la montre lekti densitometrik bann ak tach ki pa koupe yo. Imunohistochimi tisi tèstikul ki soti nan yon gason adilt ki gen timè selil jèm in situ ak ipèrplasi selil Leydig lejè lè l sèvi avèk menm antikò (LHR029) kòm tès ELISA a te montre obligatwa manbràn ak ekspresyon sitoplasmik LHCGR nan pifò selil Leydig yo.

2. sLHCGR detekte nan likid kò men li pa detekte nan serom nan sourit Xenograft

Pa gen okenn sLHCGR detekte nan sera sourit toutouni avèk oswa san timè xenograft TCam-2 trete an vivo ak vektè, LH, oswa hCG.

Sepandan, mwayen selil TCam-2 kiltive te montre nivo sLHCGR ki ba men detekte, epi konbinezon de a te demontre ke ELISA imen an pa t reyaji kwaze ak okenn nan pwoteyin sourit nan serik la. sLHCGR pa te detekte tou nan mwayen san kondisyone ki gen serom fetis bovin.

sLHCGR te detekte nan pipi gason an sante ak ipogonadal nan nivo konparab (mwayèn {{0}}.{024 pmol/mL kont {{20}}.{{ 28}}21 pmol/mL). Nivo pipi yo te an mwayèn apeprè plis pase 100 fwa pi ba pase serom (vle di 2.21 pmol/mL, ipogonadism vle di 1.80 pmol/mL), sijere ke eliminasyon ren pa asosye ak ipogonadism epi li pa afekte pa diferans laj sou 10 ane. Anplis de sa, konsantrasyon ki ba nan pipi sijere ke sLHCGR, tankou lòt pwoteyin, pa filtre oswa elimine nan kantite ki depase kapasite reabsòpsyon ren. Miyò, konsantrasyon serik mwayèn sLHCGR nan uit gason ki te retire tou de tèstikul yo te konparab ak jèn gason yo (mwayèn 2.04 pmol/mL kont 2.21 pmol/mL), ak gason ipogonadal (mwayèn 2.04 pmol/mL kont mwayèn). 1.80 pmol/mL). Anplis de sa, nivo sLHCGR yo te detekte nan tou de tisi fetis adrenal imen ak tisi ren fetis imen (vle di 0.15 pmol/mL ak 0.14 pmol/mL, respektivman) (Figi 1E), ki te pi wo pase nivo sLHCGR ki te pibliye nan TCam {{23} } selil an vitro (vle di 0.03 pmol/mL). Yo te mezire sLHCGR total nan serik twa gason ak twa fanm apre menopoz nan faz atè ak venn fwa, ren ak ekstremite pi ba yo. nan tout echantiyon, yon gason ak de fanm te gen nivo pi wo pase limit deteksyon an, pandan rès la te gen nivo endeslabl. Nou pa t 'detekte okenn diferans enpòtan nan sLHCGR soti nan bò atè a nan bò venn nan nenpòt ògàn ak Se poutèt sa eskli ògàn sa yo kòm sit orijin (t-tès: p-valè tout> 0.31)

Cistanche ekstrè

3. LC-MS/MS sou serom imen

Sera ki soti nan gason nòmal (n: 2), pasyan ki gen tèstikul jèm selil kansè (1 seminom, 1 nonseminoma), ak fanm ansent (n: 2) yo te itilize pou elektwoforèz jèl pwoteyin apre albumin ak globilin rediksyon. Kat gwoup 75, 60, 50, ak 35 kDa yo te ekstrè soti nan sera gwosès la ak analize pa ba-sansiblite LC-MS / MS paske siyal la te pi fò isit la. Okenn nan LC-MS/MS pa detekte peptides triptik nan LHCGR. Apre yo fin retire IgG ak albumin, peptides ki gen pi gwo kontni pwoteyin yo se albumin, konpleman C3, -1-antitripsin, ak vitamin D pwoteyin, epi tout pwoteyin detekte yo se pwoteyin plasma.

4. Serom sLHCGR. Varyasyon Jounal, Estabilite, Repwodiksyon, Friz, ak Dekonjle

Nou te itilize twa pakèt diferan nan twous LHCGR ki soti nan tès NBCL ELISA ak CV 16 ak 19 pousan ak konsantrasyon 0.4 ak 1.7 pmol/mL, respektivman. sezon nan ane a oswa lè nan jounen an nan pran echantiyon san pa te gen okenn efè sou nivo sLHCGR (swa nivo espèm oswa dechaj). 18 granmoun Klinefelter sendwòm pasyan Gason ki gen sLHCGR yo te mezire kontinyèlman pandan 4-40 mwa, ak yon ti varyab andedan endividyèl. Nivo sLHCGR yo te estab nan tout gason eksepte de. Anplis de sa, mezi seri sou 16-30 mwa nan 23 gason ki te retire tèstikul yo te montre ke nivo serik sLHCGR yo te siyifikativman elve nan yon sèl gason pandan peryòd sa a, pandan ke pa te gen okenn diferans jeneral nan nivo serik sLHCGR nan 22 ki rete yo. gason. Plizyè friz-dekonjle redwi konsantrasyon sLHCGR a ~40 pousan.

5. Serom ak pipi LHCGR yo enfliyanse pa tretman ak gonadotropin Chorion imen

Piki 5000 IU hCG redwi serik sLHCGR apre 8 èdtan (Wilcoxon paired test p=0.031), epi rediksyon an te ogmante plis apre 24 èdtan (Wilcoxon paired test p=0 .016, Bonferroni korije, p <0.025). Se sèlman de gason ki gen pi gwo valè sLHCGR debaz yo detekte nan serom 24 èdtan apre piki. Efè rapid hCG sou nivo sikilasyon sLHCGR te evidan tou nan pipi, kote nivo sLHCGR urin te tonbe anba limit deteksyon ki pi ba nan tout gason apre 24 èdtan (Wilcoxon paired test p=0.0078). Serik debaz sLHCGR anvan piki hCG pa t 'korelasyon ak pipi debaz-sLHCGR, testostewòn serik oswa nivo LH serik, oswa ak δ testostewòn serik oswa δ nivo LH serik. sLHCGR urin pa t 'koreliye ak swa laj oswa òmòn repwodiktif serik. hCG pwovoke yon ogmantasyon nan testostewòn serik soti nan 19.6 nmol / L (3.3 SD) a 28.2 nmol / L (4.4 SD) apre 24 èdtan (tès pè Wilcoxon: p= 0.001) ak 43.9 nmol / L (8.6). SD) apre 72 èdtan, pandan y ap 24 LH siyifikativman diminye apre 24 èdtan (Wilcoxon pè tès: p= 0.43 nan 8 èdtan, p= 0.001 nan 24 èdtan, p= 0. 001 nan 72 èdtan).

Standardize Cistanche

6. Mezi Longitudinal nan Timoun yo montre yon bès nan sLHCGR pandan pibète sèlman nan ti gason ki an sante

Pou detèmine kijan epizòd pibètè ogmante sekresyon gonadotropin afekte sLHCGR, 36 ti gason nòmal yo te swiv longitudinal, ak epizòd pibè yo te evalye lè l sèvi avèk Tanner Staging.

Nivo sLHCGR endividyèl apre-pibètè yo te siyifikativman pi ba pase nivo pre-pibètè (pre-pibète ak pòs-pibètè tès Wilcoxon pè: vle di (1.36 (2.2 SD) pmol/mL vs. 0}.6{{10} } (0.89 SD) pmol/mL p=0.0001). Sa sipòte ke sLHCGR ka diminye ak ogmante gonadotropin serik, men nivo òmòn repwodiktif, BMI, laj, oswa gwosè testikil yo pa te asosye ak sLHCGR nan nenpòt moman. pandan devlopman pibète.Se konsa, nou pa jwenn okenn asosyasyon ant sLHCGR ak pipi LH oswa FSH alantou pibète.Kòm yon konparezon, 7 ti gason KS yo te swiv longitudinal san yo pa testostewòn pwovoke pibète.

Ti gason nan gwoup KS la pa t montre yon bès menm jan an nan sLHCGR pandan pibète kòm ti gason san aberasyon kwomozòm. Tout ti gason KS (eksepte yon sèl) te fè eksperyans pik konsantrasyon sLHCGR nan kòmansman pibète a men yo pa t rive nan siyifikasyon estatistik. Ti gason Klinefelter yo te fè eksperyans tou yon ogmantasyon nan gonadotropin, men pou rezon enkoni, yo pa t 'fè eksperyans menm diminisyon nan sLHCGR, sijere ke sLHCGR segondè ka asosye ak fonksyon gonad ki gen pwoblèm. Nivo sLHCGR serik yo te yon ti kras pi ba nan jèn gason KS yo konpare ak jèn gason ki an sante (0.92 pmol/mL kont 2.21 pmol/mL, p=0.031, Tablo 1 ak 3). Kat gason KS yo ki gen pi wo nivo serik sLHCGR yo pa t diferan nan fenotip ak rès gason KS yo.

7. Serum sLHCGR asosye ak rapò Gonadal Marker Inhibin/FSH ak Estradiol nan gason ki an sante.

Karakteristik debaz 148 gason nan popilasyon jeneral la. Serik sLHCGR te korelasyon negatif ak rapò gonadal inibin B/FSH ({1}}.004, p=0.027, ak retire de ekstrèm dwat yo pa t chanje korelasyon an. : -0.003, p=0.018). Nan stratifikasyon katil slicer ki vin apre a, yo te jwenn yon tandans anba siyifikatif, ak gason nan katil sLHCGR ki pi ba a ki gen yon rapò siyifikativman pi wo nan inhibin B / FSH konpare ak gason nan katil ki pi wo sLHCGR apre ajisteman pou konparezon miltip. Sepandan, serik sLHCGR pa te asosye ak okenn lòt òmòn oswa kalite espèm oswa dechaj, laj, BMI, oswa gwosè testikil. Pou konparezon, 297 gason ki pa fètil san komorbidite grav yo te sibi egzamen kwa-seksyonèl epi yo te gen yon sLHCGR serik mwayèn nan 1.05 pmol / mL (SD 3.15), ak 117 nan 297 gason yo ki gen menm nivo sLHCGR detektab. Nan kòwòt sa a, nou pa t jwenn yon asosyasyon ant sLHCGR ak rapò inhibin B/FSH (-0.0010, p=0.28) oswa nenpòt òmòn mezire, gwosè testikil, BMI, oswa laj. Pa te gen okenn diferans nan rapò inhibin B / FSH lè gason yo te divize an katil sLHCGR (Kruskal-Wallis p=0.56). Nou rasanble tout gason ki gen kwomozòm sèks nòmal ak kòmansman pibè nan kòwòt yo itilize a. Sa a te ogmante kantite total ka ak sLHCGR serik ki disponib (n=488), ogmante laj laj (11.7-58.0 ane) ak IMC span (16.3-56.3 ane). ). Serom sLHCGR te korelasyon negatif ak estradiol ({31}}.009, p {33}}.020), laj ({35}}.060, p {37}}.11 × {39}} ), ak BMI (-0.072, p=0.004), men se pa ak lòt òmòn poukont yo. Yo te jwenn menm korelasyon negatif la pou rapò inhibin B/FSH (-0.003,p=0.045) lè yo te analize sèlman gason ki an sante nan tout kòwòt ki anwo yo.

Sipleman Cistanche

Konklizyon

An konklizyon, etid sa a montre ke sLHCGR lage nan serom ak kèk likid kò. Nivo serik sLHCGR yo asosye ak devlopman pibè ak fonksyon gonadal epi yo tanporèman siprime pa nivo segondè nan serik hCG. Serom sLHCGR ka gen valè pronostik kòm yon makè nan fonksyon gonadal. sLHCGR lage nan serom atravè tèstikul yo ak lòt ògàn, ki ka sijere yon wòl ekstragonadal pou LH oswa hCG nan ti gason ak gason.

Sispannse yon sipleman ekselan pou moun ki soufri maladi ren oswa ki vle amelyore sante ren yo. Kapasite li nan amelyore fonksyon ren, pwoteje kont estrès oksidatif, diminye enflamasyon, ak gen yon efè dyurèz twò grav fè li yon zouti valab nan batay la kont kondisyon ki gen rapò ak ren. Menm jan ak nenpòt sipleman, li esansyèl pou konsilte yon pwofesyonèl swen sante anvan ou kòmanse pran Cistanche.

REFERANS

1. Bukovsky, A.; Indrapichate, K.; Fujiwara, H.; Cekanova, M.; Ayala, ME; Dominguez, R.; Caudle, MR; Wimalsena, J.; Granmoun, RF;Copas, P.; et al. Plizyè reseptè òmòn luteinizan (LHR) varyant pwoteyin, reyativite entè-espès nan script anti-LHR mAb 3B5, lokalizasyon subselilè LHR nan plasenta imen, etaj basen, ak sèvo, ak yon wòl posib pou LHR nan devlopman nan gwosès nòmal.Repwodiksyon. Biol. Endocrinol.2003, 1, 46.

2. Bozon, V.; Couture, L.; Pajot-Augy, E.; Richard, F.; Remy, J.-J.; Salesse, R. Sekou nan entracellularly bloke reseptè lutropin exodomain pa endodomain ak rekonstitisyon nan yon reseptè manbràn fonksyonèl: Entèraksyon ant exo- ak endodomains. Pwoteyin Ekspr. Purif.2002, 25, 114–123.

3. Funaro, A.; Sapino, A.; Ferranti, B.; Horenstein, AL; Castellano, I.; Bagni, B.; Garotta, G.; Malavasi, F. Fonksyonèl, estriktirèl, ak distribisyon analiz de reseptè gonadotropin koryonik lè l sèvi avèk antikò monoklonal murin.J. Clin. Endocrinol. Metab.2003, 88, 5537–5546.

4. Rivero-Müller, A.; Chou, Y.-Y.; Ji, mwen .; Lajic, S.; Hanyaloglu, AC; Jonas, K.; Rahman, N.; Ji, TH; Huhtaniemi, I. Sekou nan fonksyon reseptè ki defektye G pwoteyin makonnenan vivopa koperasyon entèmolekilè.Pwosedi. Natl. Acad. Sci. USA2010, 107, 2319–2324.

5. Dickinson, RE; Stewart, AJ; Myers, M.; Millar, RP; Duncan, WC Diferans ekspresyon ak karakterizasyon fonksyonèl nan varyant episur reseptè òmòn luteinizing nan selil luteal imen: Enplikasyon pou luteolysis.Andokrinoloji2009, 150, 2873–2881.

6. Yamashita, S.; Nakamura, K.; Omori, Y.; Tsunekawa, K.; Murakami, M.; Minegishi, T. Asosyasyon reseptè follitropin imen (FSH) ak yon variant splicing nan reseptè lutropin / choriogonadotropin imen kontwole negatif ekspresyon de reseptè FSH imen.Mol. Endocrinol.2005, 19, 2099–2111.

7. Korol, P.; Jaranowska, M.; Pawlikowski, M. Immunohistochemical demonstrasyon nan LH / CG reseptè nan korèks adrenal moun ki pa neoplastik ak timè adrenocortical.Folia Histochem. Cytobiol.2019, 57, 23–27.

8. Dunkel, L.; Raivio, T.; Laine, J.; Holmberg, C. Inibitè reseptè òmòn luteinizing sikile (yo) nan ti gason ki gen ensifizans renal kwonik.Kidney Int.1997, 51, 777–784.

9. Rao, CV; Lei, ZM Pasan, prezan, ak avni aksyon LH/hCG ki pa gonadal nan byoloji repwodiktif ak medikaman.Mol. Selil. Endocrinol.2007, 269, 2–8.

10. Abdallah, MA; Lei, ZM; Li, X.; Greenwold, N.; Nakajima, ST; Jauniaux, E.; Rao, CV Tisi nongonadal fetis imen yo genyen reseptè gonadotropin koryonik imen / òmòn luteinizan.J. Clin. Endocrinol. Metab.2004, 89, 952–956.

Li Juel Mortensen¹, Mette Lorenzen¹, Anne Jørgensen², Jakob Albrethsen², Niels Jørgensen²,Søren Møller^3,4, Anna-Maria Andersson², Anders Juul^2,4ak Martin Blomberg Jensen^1,5

1. Gwoup andokrinoloji Skeletal, Mineral, ak Gonadal, Depatman Kwasans ak Repwodiksyon Inivèsite, Rigshospitalet, 2100 Copenhagen, Denmark; li.juel.mortensen@regionh.dk (LJM); mette.lorenzen.01@regionh.dk (ML)

2. Depatman Kwasans ak Repwodiksyon ak Sant Entènasyonal pou Rechèch ak Fòmasyon Rechèch nan Dezòd andokrin nan Repwodiksyon Gason ak Sante Timoun (EDMaRC), Rigshospitalet, University of Copenhagen, Blegdamsvej 9, 2100 Copenhagen, Denmark; Anne.Joergensen.02@regionh.dk (AJ); Jakob.Christian.Albrethsen@regionh.dk (JA); Niels.Joergensen@regionh.dk (NJ); Anna-Maria.Andersson@regionh.dk (A.-MA); Anders.Juul@regionh.dk (AJ)

3. Sant pou Imaging Fonksyonèl ak Dyagnostik ak Rechèch, Depatman Fizyoloji Klinik ak Medsin Nikleyè 260, Hvidovre Hospital, 2650 Copenhagen, Denmark; Soeren.Moeller@regionh.dk

4. Depatman Medsin Klinik, Fakilte Syans Sante, Copenhagen University, 2200 Copenhagen, Denmark

5. Divizyon Rechèch Zo ak Mineral, Harvard School of Dental Medicine/Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA