Konpoze fenolik soti nan fèy ak flè nan Hibiscus Roseus: Aplikasyon potansyèl kosmetik po a nan yon espès ki poko envestige

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

Résumé:Itilize nan ekstrè plant nan pwodui kosmetik swen pou po se yon tandans modèn akòz richès yo nan polifenol ki aji kòm molekil anti-aje. hibiscus rose se yon espès perennial natiralize nan peyi Itali, ak bèl flè mou woz; konpozisyon fenolik li yo ak aktivite byolojik yo poko etidye. Objektif etid sa a se te karakterize ak quantifier fenolik yo ak evalye antioksidan, faktè pwoteksyon solèy (SIPF), ak aktivite anti-kolagenaz nan ekstrè etanolik nan fèy H. roseus (HL) ak flè (HE).p- Koumarik, chlorogenic, ak trans-ferulic asid dérivés, osi byen ke quercetin ak kaempferol flavonoid, yo te konpoze prensipal yo detekte fenolik. Catechin, epicatechin, kaempferol-3-O-rutinoside, kaempferol-3-O-glucoside, kaempferol-7-O-glucoside, salidroside, oenin, ak peonidin-3-O-glucoside te detekte sèlman nan HF, pandan y ap phloridzin te eksklizif nan HL, ki te montre tou pi gwo kantite dérivés asid hydroxycinnamic. HF te pi rich nan flavonoid ak fenolik total, tou montre pi gwo kapasite antioksidan.bioflavonoidSPF ak aktivite anti-kolagenaz tou de ekstrè yo te sanble ak konparab ak sa yo ki nan estanda sentetik. Rezilta yo an jeneral demontre ke H. roseus ekstrè yo se sous pwomèt nan konpoze bioaktif fenolik ki ta ka potansyèlman aplike kòm ajan anti-aje nan pwodui kosmetik swen pou po.

Mo kle:anti-kolagenaz; antioksidan; flavonoid; flè; pwodui kosmetik èrbal; asid idroksicinamik; LC-MS/MS-MRM; fèy; swen pou po; pwoteksyon solèy

1. Entwodiksyon

Itilizasyon pwodui kosmetik yo se ansyen, e istwa li fòme an paralèl ak limanite [1,2]. Kosmetik swen pou po yo se kèk nan pwodwi ki pi enpòtan yo, se kategori nan pi gwo nan endistri sa a [1,3]. Se poutèt sa, enterè nan swen pou po te vin gaye toupatou, deklanche demann pou pwodwi efikas ki sòti nan sous natirèl [2].

Tanpri klike isit la pou konnen plis

Konsyantizasyon ki sot pase a sou anviwònman an, swen sante, ak itilizasyon minè nan pwodui chimik sentetik te mennen nan yon enterè ogmante nan pwodui kosmetik ki baze sou plant, ki kounye a reprezante yon tyè nan tout sektè kosmetik la [1A]. Kidonk, itilizasyon ekstrè plant ak fitokonstitiyan yo kòm engredyan aktif se yon apwòch modèn "pro-ekolojik" [5,6]. Demann nan ogmante pou pwodwi sa yo ka akòz efè segondè redwi yo, gwo spectre aksyon yo konbine avèk yon efikasite segondè, ak pri jeneralman ba yo [7,8].

Plant yo rich nan plizyè klas konpoze bioaktif, yo se youn nan sous ki pi abondan nan nouvo engredyan ki responsab pou trete anpil maladi [9,10]. Anplis de sa, plant yo tou sous idratan natirèl, arom, ak pigman, ki fè yo trè enteresan pou aplikasyon kosmetik po [5]. Finalman, ekstrè plant yo jeneralman konsidere kòm san danje epi satisfè kondisyon otorite regilasyon yo [10,11].

Pami konpoze ki prezan nan ekstrè plant yo, fenolik yo te genyen atansyon espesyal kòm engredyan aktif [12,13], sitou paske yo kanpe deyò kòm ajan anti-enflamatwa, antimikwòb, ak antioksidan [14,15]. Pwopriyete sa yo fè yo ideyal prevantif ak geri molekil pou maladi po, yo te aplike nan kosmetoloji ak dèrmatoloji [16]. Aktivite antioksidan aparan nan fenolik se tou pasyèlman responsab pou efè anti-aje yo, ki se petèt akòz kapasite yo nan diminye degradasyon kolagen an ak nan bay pwoteksyon UV [16]. Se poutèt sa, yo te envestige ak ankouraje itilizasyon ekstrè natirèl fenolik ki rich ak gwo kapasite antioksidan pou ranplasman antioksidan sentetik nan pwodwi po [12].

Cistanche ka anti-aje

Pwodwi natirèl ki soti nan plant nan fanmi Malvaceae yo itilize atravè lemond, epi genus Hibiscus te pran anpil atansyon pou plizyè aktivite famasi ekstrè yo ak pou gwo abondans fenolik yo [17-19]. Hibiscus spp. gen apeprè 240 espès remèd fèy, touf, oswa pye bwa flè anyèl oswa kontinuèl, ki distribye nan diferan rejyon nan mond lan [20]. Ekstrè Hibiscus yo te aplike nan medikaman tradisyonèl kòm amolyan pou tretman anpil maladi po ak boule [19,21].achte cistancheDapre done literati sa yo, ekstrè soti nan Hibiscus sp. plant yo ta ka enteresan engredyan aktif pou po fòmilasyon kosmetik, pwoteje selil yo kont estrès oksidatif, degradasyon kolagen an, ak efè danjere nan radyasyon UV.

Malgre ke genus Hibiscus genyen anpil espès, mwens pase 10 pousan nan yo te envestige jiskaprezan [17]. Hibiscus roseus Thore(syn. H.palustris L., H.moscheutos subsp. palustris (L.) RT Clausen.) se yon espès herbaceouspernnial natiralize nan peyi Itali [22,23]Idantifikasyon ak deskripsyon H. roseus toujou anba deba[ 20,23]. Dapre literati a, espès H. moscheutos subsp. palustris te prezante byen bonè an Ewòp tandiske an Frans, Thore te dekri li kòm yon nouvo espès, H. roseus, nan 1807 [23]. Espès sa a pa te karakterize pou konpozisyon fenolik li yo ak etidye pou aktivite byolojik li yo, ki fè li yon sous potansyèl unrevealed nan konpoze byoaktif pou pwodwi swen pou po.

Itilizasyon popilè nan tretman po ak gwo spectre byoaktivite espès Hibiscus jistifye enpòtans nouvo etid ki konsantre sou genus plant sa a [17]. Se poutèt sa, objektif etid sa a se te karakterize konpozisyon fenolik la ak evalye kapasite antioksidan, pwoteksyon solèy, ak aktivite anpèchman kolagenaz nan ekstrè etanolik fèy ak flè H. roseus. Rezilta nou yo prezante la pou premye fwa konpozisyon fenolik ak anti-aje ki gen rapò ak byoaktivite nan H. roseus, ki endike potansyèl la nan espès anba-ankèt sa a nan aplikasyon yo medsin ak kosmetik kòm yon aditif antioksidan ak anti-aje.

2. Rezilta ak Diskisyon

2.1.Phenolic Karakterizasyon ak Quantification

Yon analiz sib, ki baze sou LC-MS/MS-MRM (kwomatografi likid makonnen ak espektrometri mas tandem k ap travay nan mòd siveyans reyaksyon miltip), yo te fèt pou idantifye konpoze fenolik yo prezan nan ekstrè etanolik H. roseus depi konpozisyon fenolik nan espès sa a pa te toujou rapòte nan literati a. Yo te itilize diznèf konpoze fenolik deja dekri nan genus Hibiscus kòm estanda (Tablo Siplemantè S1) pou devlope metòd MRM, ak seleksyon pi bon tranzisyon yo te fèt pa optimize paramèt enstrimantal yo ak done literati [24].

The main classes of compounds detected in H.roseus leaf and flower extracts were chlorogenic, p-coumaric, and trans-ferulic acids derivatives and flavonoid derivatives (Figure 1,Table 1), similarly to the previous phytochemical characterization of other Hibiscus species[25-29]. Although the phenolic profile was quite similar, some qualitative differences were observed between flowers (HF) and leaves (HL)(Figure 1 and Table 1). While leaves showed richness in p-coumaric acid derivatives (Figure 1, blue line, peaks with Rt from 2 to 9 min), flowers were especially rich in flavonoid derivatives such as catechins, dihydrochalcones, and anthocyanins (Figure 1, red line, Rt>9.3min, Tablo 1).

Trèz nan diznèf konpoze fenolik sib yo te idantifye otantikman nan ekstrè yo analize pa LC-MS / MS nan mòd nan MRM (Tablo 1).sistanchMRM a se yon fason pwisan pou detèminasyon similtane plizyè konpozan, ki baze sou rapò mas-a-chaj (m/z) nan molekilè ion (((MH]) ak ion pitit fi korespondan li yo. Li pèmèt amelyorasyon nan selektivite. ak sansiblite nan analiz LC-MS/MS [30]Metodoloji sa a trè serye ak apwopriye pou analiz ekstrè plant yo ak lòt melanj konplèks ki mennen nan pi wo espesifikasyon, sansiblite ekselan, ak yon kapasite ekstrèm multiplexing gras a posibilite pou distenge konpoze ki genyen. iyon paran yo menm men fragman diferan [31, 32]. Sèvi ak metòd sa a, nou te jwenn yon rediksyon enpòtan nan kouri kwomatografik, pi wo espesifik ak presizyon bay yon separasyon bon nan konpoze detekte ak tranzisyon yo menm, pandan y ap evite yon pèt nan sansiblite. nan ka diferan konpoze ko-elution oswa pou konpoze ki prezan nan konsantrasyon ki ba anpil [24,334].

Pami 13 konpoze fenolik yo idantifye itilize estanda natif natal (Tablo Siplemantè S1), dis te prezan sèlman nan ekstrè flè (Figi 1 liy wouj, Tablo 1 HF): katechin ak epicatechin (pik 16b ak 23), asid klorojenik (pik 18), peonidin-3-O-glukozid ak oenin (pik 21 ak 22), asid trans-ferulik (pik 27), twa kaempferol glycoside dérivés (kaempferol-3-O-rutinoside, kaempferol-7-O- glikozid, ak kaempferol -3-O-glikozid; pik 30,31b, ak 32), ak salidroside (pik 34). Anplis de sa, phloridzin (pik 33b) te detekte sèlman nan ekstrè fèy (Figi 1 liy ble, Tablo 1 HL), pandan y ap rutin ak quercetin -3-O-glucoside (pik 26b ak 28a) yo te idantifye nan tou de kalite ekstrè (Figi 1, Table1HF/HL). Dérivés quercetin ki sanble, tankou quercetin -3-O-sambubioside ak isoquercitrin, te deja obsève nan H.sabdariffa [26,29,35,36] ak nan H. rosa-sinensis ekstrè [18]. Kèk nan glikozid sa yo ka koresponn ak dérivés quercetin nou te detekte nan H. roseus. Anplis de sa, tiliroside te deja detekte tou nan ekstrè fenolik nan H. sabdariffa flè [37,38]. Oenin (malvidin-3-O-glukozid) ak peonidin-3-O-glukozid, de anthocyanin yo idantifye isit la nan flè H. roseus la pou premye fwa, te diferan de sa yo te dekri deja nan flè H. sabdariffa, delphinidin 3-sambubioside, delphinidin-3-glukozid, ak cyanidin-3-O-sambubioside [27,35,39,40].Sepandan, li enpòtan pou mansyone ke pati ki pi etidye nan flè H. sabdariffa se kalis la (sepal), pa petal yo jan envestige isit la pou H.roseus.

Anplis de konpoze ki idantifye ak konfime pa estanda sib natif natal yo, yo te idantifye yon lòt 27 konpoze nan ekstrè fèy ak flè H.roseus ki baze sou MRM yo (m/z) ak iyon pitit fi yo, kidonk konsidere pwodwi fwagmantasyon yo jwenn. soti nan précurseur a (Tablo Siplemantè S1).An patikilye, prezans nan p-coumaric, trans-ferulic, ak chlorogenic aacid dérivés, ak dérivés quercetin, osi byen ke phloretin ak dérivés phloridzin yo te jwenn nan tou de ekstrè (Tablo 1).

Kantifikasyon nan fenolik yo idantifye nan ekstrè sa yo te fèt pa analiz HPLC-DAD (kwomatografi likid segondè-pèfòmans makonnen ak deteksyon etalaj dyod; Tablo 2). Kontni an nan dérivés asid hydroxycinnamic (THC) te pi wo nan fèy yo pase nan flè, pandan ke yo te jwenn pi gwo kantite flavonoid (TFC) nan flè pase nan fèy yo (p.<0.001,table 2).catechin="" derivatives(tcd),dihydrochalcones(tdc),and="" anthocyanins="" (tac)="" were="" quantified="" only="" in="" flower="" extracts(table=""><0.001).therefore, flowers="" represent="" a="" greater="" source="" of="" phenolics="" compared="" to="" leaves="" (tpc,p="0.02," table="" 2).="">cistanche OstraliMenm jan ak ekstrè H. sabdariffa, pi gwo klas konpoze yo te jwenn nan fèy H. roseus yo te dérivés asid klorojèn ak p-koumarik osi byen ke asid caffeoylquinic ak p-coumaroylquinic [26,40,41]. Anplis de sa, anthocyanins yo te sèlman rapòte nan Hibiscus spp. flè ak kalis, ansanm ak katechin [19,28,35].

Kontrèman, asid ferulik ak dérivés li yo te mwens rapòte kòm konstitiyan Hibis-cus spp. ekstrè, men yo ka gen gwo enpòtans pou aktivite byolojik yo [6,42-44]. Vreman vre, dérivés asid ferulic yo jwenn nan diferan espès Hibiscus te montre pwopriyete famasi enpòtan tankou aktivite antiviral ak anjyotansin-konvèti anzim inhibition [43,44]. Anplis de sa, asid ferulic te dekri kòm yon molekil aktif nan H.mutabilis, H.taivanensis ekstrè [45,46], ak nan H.sabdariffa kalik ekstrè [28,38].

Konsènan aplikasyon kosmetik potansyèl yo, li te pwouve ke asid ferulic inibit fòmasyon melanin [6,42], pandan y ap dérivés asid p-coumaric posede depigmen-tation [47,48], anti-enflamatwa, ak aktivite anpèchman tirozinaz [49]. Anplis de sa, anpil envestigasyon mete aksan sou wòl adisyonèl nan flavonol ak anthocyanins, ki ka aji kòm konpoze pwoteksyon po, an patikilye anpeche melanogenesis [50,51] ak nan aksyon yo kòm konpoze anti-aje ak anpeche melanom [52,53]. Anplis de sa, aplikasyon potansyèl H. roseusleaf ekstrè pou maladi po yo ta ka amelyore tou pa prezans phloridzin, ki te montre diminye ekspresyon UVB-induit pro-enflamatwa cytokines nan UV-ekspoze po [54].

2.2.Essay aktivite antioksidan

Sèjousi, li se lajman demontre ke akimilasyon nan espès oksijèn reyaktif (ROS) responsab pou pwosesis aje po, ki mennen nan sechrès, pèt tisi lar, ak fòmasyon ondilasyon [55,56]. Se poutèt sa, jwenn natirèl konpoze antioksidan potansyèl ki ka aplike nan pwodwi swen pou po trè enpòtan pou endistri kosmetik.

Rezilta nou yo te montre ke H. roseus fèy ekstrè yo te gen pi ba aktivite antioksidan (eksprime kòm valè ECso) pase flè (Tablo 3). 3). Rezilta sa yo dakò ak konpozisyon fenolik ak kontni ekstrè sa yo (Figi 1, Tablo 1 ak 2), depi ekstrè HF yo te pi rich nan konpoze fenolik (Tablo 2). Vreman vre, analiz korelasyon ant valè ECso yo ak kontni diferan klas fenolik yo te montre siyifikatif ak negatif pou tout konpoze eksepte THC. Kòm sa yo, pi gwo kantite flavonoid, katechin, anthocyanins, dihydrochalcones, ak total kontni fenolik kontribye nan pi gwo kapasite antioksidan (valè ki pi ba nan EC50-Tablo 4).

Pami flavonoid, quercetin ak dérivés li yo se antioksidan ki pi byen etabli ak scavengers radikal gratis, tou aji kòm inibitè efikas nan oksidaz ak lipoksijenaz [57]. Anplis, dihydrochalcones, tankou phloretin, yo te dekri tou kòm antioksidan ki pisan nan 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)-scavenging ak OH-scavenging assays [58]. Anplis de sa, anthocyanins izole nan ekstrè Hibiscus te montre yo se pi gwo konpoze antioksidan nan selil imen [59].

Ekstrè diferan pati nan espès Hibiscus yo te montre gwo kapasite antioksidan [18,21,27,35,40]. Fraksyon nan ekstrè etanolik nan H. sabdariffa te montre valè EC50 ki ba anpil nan tès antioksidan, ki te gen rapò ak kontni an wo nan asid protocatechuic [21,59], asid klorojenik, flavonoid, ak anthocyanins [24,60]. Anplis de sa, yon etid sou H. esculentus te montre potansyèl antioksidan nan vitro dérivés quercetin ak katechins ki prezan nan ekstrè li yo [61]. Finalman, nan H.acetosella, aktivite antioksidan an te fòtman korelasyon ak kontni anthocyanins [62].

Rezilta etid nou an sou ekstrè etanòl H. roseus te montre yon aktivite antioksidan ki te yon santèn fwa pi wo pase sa yo rapòte pou ekstrè akeuz nan H. sabdariffl kalis, pou ki EC a te tou pre 45 mg mL- nan yon DPPH menm jan an vitro modèl [56]Sepandan, nan diferans ak rezilta nou yo, kontni total flavonoid ak kapasite antioksidan ekstrè fèy H. sabdariffa yo te pi wo pase sa yo ki nan flè [63,64]. 2.3. Faktè Pwoteksyon Solèy In Vitro (SPF)

Radyasyon iltravyolèt se youn nan faktè ki pi danjere nan anviwònman an enfliyanse sante ak fizyoloji nan po a, se yon kòz enpòtan ekstèn po aje [65,6] Konstan ekspoze a radyasyon iltravyolèt ogmante risk pou maladi pigmantasyon ak foto aje po [67]. Sa a se sitou akòz ogmantasyon nan nivo ROS, ki mennen nan eksitasyon nan pwodiksyon kolagenaz ak rezilta nan domaj konsiderab nan fonksyon selilè po [56]. Se poutèt sa, engredyan ki pwoteje UV, ki gen ladan sa yo ki prezan nan ekstrè plant yo, yo lajman aplike nan pwodui kosmetik pou fè pou evite pénétration radyasyon iltravyolèt nan po a, men tou anpeche pwodiksyon ROS nan aji kòm antioksidan [56,

Yon metòd senp pou verifye efikasite diferan konpozan natirèl kòm filtè UV se tès faktè pwoteksyon solèy (SPF), ki se yon metòd in vitro rapid ak serye ki baze sou tès depistaj absorpsyon nan rejyon espektral UV-B (ant 290 ak 320 nm), yo te itil nan yon faz bonè nan seleksyon engredyan aktif fotopwoteksyon [69].

Segondè kontni fenolik ak aktivite antioksidan H.benefis cistancheroseus extracts suggest that they may have also an UV absorbing activity. Both leaf and flower extracts of H. roseus at 0.1 mgmL-1 showed comparable SPF results (p>{{0}}.05): 2.6±0.15 pou HL ak 2.4±0.19 pou HF. Rezilta sa yo pwomèt depi yon fòmilasyon estanda krèm pwotèj kont solèy ki gen 8 pousan homosalate (yon krèm pwotèj kont solèy chimik lajman aplike) te montre yon valè SPF 4 [69,70]. Rezilta yo te jwenn isit la pou H.roseus te sanble ak sa yo te jwenn pou lòt espès plant[68,69,71,72]epi yo enpòtan konsidere konsantrasyon ki ba nan ekstrè yo itilize pou teste efè sa a.

Ekstrè H. rosa-Sinensis deja montre efè pozitif kont domaj radyasyon iltravyolèt nan po sourit pa mwayen pwoteksyon antioksidan [73]. Pwodwi natirèl ki montre SPF ansanm ak gwo kapasite antioksidan ak anpèchman kolagenaz ak elastaz yo se kandida enpòtan yo dwe itilize pou pwoteje po a kont fotodomaj ak anpeche aparans nan ondilasyon [66,71]. An reyalite, asosyasyon ki genyen ant solèy tradisyonèl apwouve. filtè ak dérivés sa yo nan sous natirèl reprezante yon tandans nan endistri a kosmetik, depi konsomatè yo wè pwodwi sa yo kòm pi an sekirite, akòz efè segondè yo nan UVfilters sentetik [72].

Kontni ki pi wo nan konpoze fenolik total nan ekstrè HF (TPC; Tablo 2) ta ka endike pi wo aktivite absòbe UV yo. Sepandan, tou de fèy ak flè ekstrè te montre rezilta trè menm jan an, ki endike ke plis pase kontni an total nan fenolik, pwofil la fenolik nan ekstrè yo ta gen rapò ak pwoteksyon an kont UV.An patikilye, kontni an pi wo nan dérivés asid hydroxycinnamic nan HL( Tablo 2) ka kontribye nan ogmante valè SPF yo, paske konpoze sa yo gen yon absòpsyon UV alantou 300-320 nm [74] ki konsa santre nan rejyon UV-B. Kontrèman, flavonoid ak anthocyanins, sitou prezan nan ekstrè flè, gen yon spectre pi laj nan absòbe nan ki omwen de gwoup yo prezan, ak gwoup la pi gwo nan oswa tou pre ranje vizib la, alantou 350 nm pou flavonol ak 505-550 nm pou anthocyanins [53,69]. Vreman vre, dérivés asid idroksicinamik yo pwodui pa plant, espesyalman pou pwoteksyon yo kont radyasyon UV [75]. Se poutèt sa, sa yo dérivés asid hydroxycinnamic ta ka anpil kontribye nan absòpsyon nan UV-B pa po moun [6]. Sepandan, konsidere prezans anthocyanins ak flavonoid ki kouvri yon seri absòpsyon longèdonn, ki gen ladan tou UV-A ak rejyon vizib yo, ekstrè flè H. roseus ta ka pwomèt pou plis analiz ak devlopman pwodui kosmetik sunblock. Anplis de sa, aktivite antioksidan ki pi wo yo obsève pou HF (Tablo 3) ta ka amelyore efè pwoteksyon solèy nan fòmilasyon posib plis [69].

2.4.Kollagenase Anpèchman Aktivite

Both H.roseus extracts showed high collagenase inhibitory activity (>80%)at0.25mg mL-1, which is comparable to that of the synthetic inhibitor 1,10-phenanthroline 1M (Figure 2). The IC50 value of both extracts were very similar( >{{0}}.05),IC50ekstrè flè =0.14 ± 0.02 mg mL-1 ak IC50fey ekstrè =0.13±0.01 mg mL-1, malgre diferans yo nan konpozisyon fenolik ak kontni (Tablo 1 ak 2). Sa a ta ka akòz entèraksyon sinèrjik ant fenolik yo ak kolagenaz, ki ta ka jwe yon wòl enpòtan nan mekanis anpèchman an. Anplis de sa, lòt konpoze pètèt prezan nan ekstrè yo H. roseus epi yo pa analize isit la ta ka patisipe nan aktivite anti-kolagenaz la, ki gen ladan vitamin E ak asid ascorbic [71,7]. Anplis, de konpoze estanda tès yo, asid chlorogenic, ak quercetin, ki gen dérivés yo prezan nan H. roseus fèy ak flè ekstrè (Tablo 1), ekspoze trè wo anpèchman kolagenaz, ak valè ICso nan 5.8±0.5 ak 5.6±0.7ug mL -l respektivman. Se poutèt sa, konpoze sa yo ta ka responsab pou aktivite anti-kolagenaz yo obsève. Li enpòtan pou remake ke diferan klas fenolik, ki prezan tou nan ekstrè plant nou yo, te deja montre aktivite anti-aje atravè anpèchman degradasyon kolagen an ak kontribye nan imidite po [78]. Pou egzanp, asid ferulic ak dérivés li yo te pwouve idrat po a ak estimile sentèz la nan fib kolagen an, yo te itilize nan pwodui kosmetik tankou krèm anti-rid [6]. Anplis de sa, flavonol, an patikilye dérivés quercetin, se inibitè fò nan anzim kolagenaz la [79].

Rezilta nou yo montre efè pwomèt H. roseus ekstrè kont degradasyon kolagen an, ki se youn nan pi gwo pwoteyin ki responsab pèt nan elastisite po ak entegrite ak nan fòmasyon ondilasyon [80,81]. Anzim kolagenaz la anpeche retansyon elastisite po ak fòs rupture [82]. Vreman vre, etid diferan yo te montre enpòtans ki genyen nan antioksidan natirèl akòz efikasite yo nan retade aje twò bonè nan anpèchman nan aktivite kolagenaz [78,83].

Etid anvan yo evalye efè yo nan espès Hibiscus nan eksitasyon nan pwodiksyon kolagen an ak nan anpèchman nan aktivite kolagenaz yo te fèt [56,84,85]. Anpèchman aktivite kolagenaz nan ekstrè akeuz H. sabdariffa te dènyèman dekri nan literati a [56]. Menm jan ak rezilta nou yo, otè yo pa t obsève efè anpèchman kolagenaz nan konsantrasyon ki ba nan ekstrè yo, men sèlman nan konsantrasyon siyifikativman wo [56]. Nan yon etid diferan, valè ICso nan anpèchman kolagenaz nan ekstrè etanolik H. sabdariffin te 0.75±0.04 mg mL-1[65], ki se yon aktivite ki se prèske sis fwa pi ba pase sa ki dekri isit la pou H. roseus.

3. Materyèl ak Metòd

3.1.Plant Materyèl

Yo te plante dis plant Hibiscus roseus Thore, ki te achte nan men yon pepinyè komèsyal nan Florence (Itali), yo te plante nan 10-po lit plen ak tè sab (sab/sfèy, 60:40,v/v) epi yo te konsève nan lakòz efè tèmik la. Depatman Agrikilti, Manje, Anviwònman ak Forè (DAGRI)—University of Florence(UNIFD, Sesto Fiorentino (Itali,43949/N,1137/E).Plant yo te kiltive nan lakòz efè tèmik la depi janvye jiska jiyè 2019, anba manyèl. irigasyon nan kapasite dlo chodyè a. Soti nan dis plant diferan sa yo, fèy de pisin ak flè yo te kolekte nan fen Jiyè pandan peryòd flè a epi imedyatman estoke nan -80 degre jiskaske ekstraksyon an.

Echantiyon liofilize (900 mg) flè H.roseus (HF) ak fèy (HL) yo te piye nan nitwojèn likid epi yo te ekstrè ak 3 × 15.0 mL etanòl 75 pousan (pH2.5 ajiste ak HCOOH) pa yon ekstraksyon asistans ultrason (UAE). UAE yo te fèt nan yon beny ultrasons (BioClass@ CP104) lè l sèvi avèk yon frekans konstan nan 39kHz ak yon pouvwa opinyon nan 100 W, pou 30 min, nan 5 degre. Apre santrifujasyon (5 min, 9000 rpm, 5 degre; ALC@4239R, Milan, Itali), supernatant yo te divize ak 3 × 15mL n-hexane pou retire konpoze lipofil ki ta ka entèfere ak analiz la. Faz etanolik la te redwi a sechrès, pondere sou yon balans analyse dijital (Precisa [125A), epi rezidi a te resuspended ak solisyon asid méthanol / dlo (1: 1 v / v, pH 2.5 ajiste ak HCOOH). Pwosesis ekstraksyon an te fèt an triple.

3.3.LC-MS Analiz: Fenolik pwofil ekstrè yo

Analiz LC-MS la te fèt lè l sèvi avèk yon espektwomèt mas ABSciex API3000 trip quadrupole (AB Sciex LC, Framingham, MA, USA) makonnen ak yon sistèm HPLC Agilent 1100 ak ponp binè ak autosampler (Agilent Technologies, Inc, Santa Clara, CA, USA). ). Akizisyon ak rediksyon done yo te fèt lè l sèvi avèk lojisyèl Analyst 1.6.2 (AB Sciex LLC, Framingham, MA, USA).

Separasyon HPLC a te fèt sou yon kolòn fenil Agilent (3 × 1 0 mm; 2.7 um), ak eluyan yo te (A) dlo asidifye (nan pH 2.5 ajiste ak HCOOH) ak (B) acetonitrile / dlo (90/10, nan pH2.5 ajiste ak HCOOH).Yon sistèm sòlvan gradyan yo te itilize jan sa a: 0-3 min,5 pousan B;3-18 min,5-40 pousan B; 18-28 min,40 pousan B;28-38min, 40-80 pousan B; 38-43min, 80 pousan B,43-45min, 80-5 pousan B, nan yon pousantaj koule 0.4mLmin -l. Analiz MS la te fèt nan kondisyon eksperimantal sa yo: Presyon atmosferik Ionizasyon chimik (APCI) lè l sèvi avèk koòdone nebilizè chofe a; Kouran zegwi （NC）, -5 μA; Nebulizer gaz (lè), 10 (inite abitrè); Oksilyè gaz (lè), 3L min-l; Tanperati gaz oksilyè (TEM), 550 degre; Gaz rido (CUR, nitwojèn), 6 (inite abitrè); Gaz kolizyon (CAD, Azòt), 9 (inite abitrè, ki koresponn ak 2.6 × 10 ~ Torr presyon selil kolizyon).

Idantifikasyon diferan konpozan fenolik yo te fèt lè l sèvi avèk yon apwòch vize, lè l sèvi avèk yon metòd siveyans reyaksyon miltip (MRM), optimize ak estanda pou 19 konpoze sib (chwazi baze sou etid anvan konpozisyon polifenolik Hibiscus spp.[25,35] ): de flavan-3-ols (catechin ak epicatechin), sèt flavonol (quercetagetin-7-O-glucoside, rutin, quercetin-3-O-glucoside, kaempferol-3-O. rutinoside , kaempferol-7-O-glukozid, kaempferol-3-O-glukozid, ak quercetin), yon ester sinnamat (asid klorojèn), de asid idroksicinamik (asid p-koumarik ak trans-ferulik), de dihydrochalcones ( phloridzin ak phloretin), yon oksiflavon (salidroside), ak kat antosyanin (myrtilin, kuromanin, peonidin-3-O-glucoside, ak oenin). Tan retansyon an ak tranzisyon MRM relatif yo (quantifier ak kalifikasyon) te rapòte nan Tablo Siplemantè S1. Anplis de sa, yo te sigjere idantifikasyon pwovizwa adisyonèl lè l sèvi avèk yon apwòch ki pa sible, analize quadrupol la soti nan m/z 100 a 100 Da.

3.4.HPLC-DAD analiz: Quantification de Phenolics

Yo te fè analiz HPLC-DAD pou quantifier diferan klas fenolik (dérivés asid hydroxycinnamic, katechin, dihydrochalcones, flavonoid, ak anthocyanins) nan ekstrè yo. Yo te enjekte alikòt echantiyon yo (15 μL) nan yon Perkin Elmer Flexar likid ki ekipe ak chromatograph. yon ponp kwatènè 200Q/410 ak yon detektè LC 200 (DAD) (tout soti nan Perkin Elmer", Bradford, CT, USA). Kondisyon kwomatografi yo te menm jan ak sa yo te itilize pou analiz HPLC-MS/MS (Seksyon 3.3) .

Chromatogram yo te akeri nan 280,330,350, ak nan 520 nm (pou quantification anthocyanins). Yo te fè idantifikasyon ak quantification nan konpoze fenolik yo ki baze sou tan an retansyon, karakteristik UV espèk, ak konparezon ak estanda, osi byen ke ki baze sou done literati [25] ak nan analiz anvan an LC-MS. Koub kalibrasyon senk pwen ak diferan estanda (asid klorojèn, p-koumarik, rutin, epicatechin, naringin, ak peonidin -3-O-glucoside, tout soti nan Sigma-Aldrich"-Merck KGaA, Darmstadt, Almay) yo te itilize pou quantifye diferan polifenol yo detekte ak idantifye nan ekstrè yo. Si yon estanda komèsyal pa t 'disponib, yo te fè quantification lè l sèvi avèk koub kalibrasyon estanda ki soti nan menm klas fenolik la, bay yon kontni estime. Linearite koub yo te detèmine pa koyefisyan an. detèminasyon (R4), ki pi wo pase 0.99 pou tout estanda yo.

Tout ekstrè yo te analize an triple ak rezilta quantitative nan fenolik yo te bay nan mg gl nan pwa sèk (mg gl DW), eksprime kòm kontni total de dérivés asid idroksi sinamik (THC), kontni total flavonoid (TFC), total dérivés catechin. kontni (TCD), kontni total dihydrochalcones (IDC), kontni total anthocyanins (TAC), ak kontni total fenolik (TPC), ki te estime kòm sòm total konpoze endividyèl yo idantifye ki fè pati chak klas.

3.5.Essay aktivite antioksidan

Egzamen aktivite antioksidan an te fèt lè l sèvi avèk de metòd diferan: DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) ak Hydroxyl Radical (OH)-Scavenging (HRS) essais.

Metòd Khandi ak Charles [{{0}}] te aplike pou tès DPPH la. Yon ti tan, echantiyon dilye ekstrè yo (0.5 mL) yo te ajoute nan 0.5 mL nan solisyon DPPH (0.1 mM nan methanol; Sigma-Aldrich@,St. Louis, MI, USA), epi yo te kite melanj lan reyaji nan tanperati chanm pou 40 minit nan fè nwa. Tan sa a (40 min) te defini baze sou rezilta analiz sinetik chak ekstrè ak estanda asid klorojenik ak rutin. Apre tan reyaksyon an, yo te mezire absorbans nan 518 nm lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt PerkinElmer§ Lambda 25UV/VIS. Yo te evalye absorpsyon vid yo (0.5 mL methanol ak 0.5 mL echantiyon) ak nan kontwòl negatif (0.5 mL metanol ak 0.5 mL solisyon DPPH). Tout analiz yo te fèt an triple. Pousantaj aktivite antioksidan yo te kalkile jan sa a (1).

4. Konklizyon

Metabolit segondè yo se potansyèl engredyan aktif pou nouvo fòmilasyon kosmetik. Pami sa yo, konpoze fenolik ekstrè nan plant yo ka gen gwo pwopriyete antioksidan ak anti-aje, yo te efikas nan anpèchman nan anzim po (egzanp, kolagenaz) ak nan absòpsyon UV. Se poutèt sa, ekstrè plant anba envestigasyon, tankou sa yo ki nan H. roseus, ka reprezante sous unrevealed nan molekil byoaktif.

Nou te demontre ke fèy yo ak flè nan H.roseus yo rich nan dérivés asid hydroxycinnamic ak flavonoid, ak flè ki gen pi gwo kantite kaempferol glikozid, katechin, dihydrochalcones, ak anthocyanins, tout konpoze sa yo poko dekri nan literati a pou espès sa a. . Gwo kapasite antioksidan, espesyalman nan ekstrè flè, ansanm ak pwoteksyon solèy la ak aktivite anti-kolagenaz nan tou de fèy ak ekstrè flè, montre itilizasyon pwomèt espès sa a mal envestige nan aplikasyon pou swen pou po. An konklizyon, rezilta nou yo te montre potansyèl flè ak fèy H. roseus kòm sous fenolik ak aktivite ekstrè yo kòm ajan anti-aje ki ta ka itilize kòm engredyan pou pwodwi kosmetik fonksyonèl.

Atik sa a soti nan Plants 2021, 10, 522. https://doi.org/10.3390/plants10030522 https://www.mdpi.com/journal/plants