Depistaj fitochimik ak aktivite estwojèn nan glikozid total nan Cistanche Deserticola
Mar 03, 2022
Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com
Résumé
Pandan plizyè dizèn ane yo, te gen efò kontinyèl pou amelyore kalite lavi moun. Sendwòm postmenopausal se yon enkyetid grav pou byennèt sante fanm yo. Terapi ormonal se kounye a prensipal la nan tretman pou kondisyon sa a. Sepandan, terapi sa a ka mennen nan abi estwojèn, ki mennen nan reyaksyon negatif ak efè segondè. Kòm yon rezilta, terapi ormon pa gen siksè nan amelyore sendwòm postmenopoz.Cistanche deserticolase yon zèb tonik klasik nan medikaman tradisyonèl Chinwa. Li montre siyifikatif aktivite estwojèn. Konpoze prensipal yo aktif nan zèb sa a se glikozid. Nan yon eksperyans anvan, yo te idantifye twa faktè enpòtan ki kontribiye nan pwodiksyon total glikozid, sede aktozid, ak aktivite estwojèn, sètadi konsantrasyon eluyan, pH, ak volim eluyan. Nan eksperyans sa a, yo te detèmine yon pwosesis pirifikasyon optimal lè l sèvi avèk yon metodoloji sifas konsepsyon-repons santral konpoze pou jwenn glikozid nan zèb sa a. Yo te jwenn yon eluyan (etanòl) konsantrasyon 85 pousan ak volim 25 BV nan yon pH 11. Yo te idantifye ven-yon konpoze aktif pa yon tès spektrometri mas likid segondè-pèfòmans/kwadrupol tan-of-vol. Etid sa a bay bonjan enfòmasyon pou plis rechèch apwofondi evalye aktivite estwojèn glikozid total nanCistanche deserticola.
Mo kle: Santral konsepsyon konpoze; Cistanche deserticola total glikozid; LC/Q-TOF-MS; teknoloji pou pirifye; tès kwasans matris.

Entwodiksyon
Cistanche deserticolase yon zèb manjab, klasik tonik. Li te premye mansyone nan klasik èrbal Shen Nong a ak enskri nan klas siperyè a. Li se yon zèb cho ak dous. Li gen anpil pwopriyete medsin, tankou nouriti fwa ak ren, ranfòse misk ak zo yo, ak amelyorasyon regilasyon iminitè ansanm ak aktivite anti-aje ak anti-timè [1-4]. Gen kèk konpoze natirèl yo te izole ak idantifye nan ekstrè yo nan zèb sa a, pi gwo yo se glikozid feniletanoid, lignanoid, iridoid, polisakarid, ak alkaloid [5-8].
Dwòg yo jwenn nan plant medsin yo gen plizyè konpoze aktif, ki prensipalman responsab pou aksyon terapetik yo. Efikasite nan menm dwòg la jwenn nan diferan sous plant yo ka varye akòz diferans ki genyen nan kalite ak kantite konpoze aktif ki prezan nan li. Kidonk, li enpòtan pou idantifye ak quantifier tout konpoze aktif ki prezan nan dwòg yo jwenn nan plant medsin. Menm bagay la tou aplike nan C. deserticola. Metodoloji sifas repons se yon metòd eksperimantal pou envestige entèraksyon ant diferan faktè ansanm [9-10]. Li ka itilize pou optimize paramèt ekstraksyon pou fitopharmaceuticals ak estimasyon quantitative nan konpoze aktif nan dwòg. Santral konpoze konsepsyon (CCD) se youn nan desen yo eksperimantal itil nan metodoloji sifas repons. Konpare ak desen ortogonal ak inifòm, CCD gen pi wo presizyon ak pi bon previzibilite [11].
Sendwòm nan postmenopoz ka redwi anpil kalite lavi nan fanm yo. Nòmalman, estwojèn yo itilize pou trete kondisyon sa a. Sepandan, itilizasyon alontèm nan estwojèn ka mennen nan abi, kidonk sa ki lakòz divès reyaksyon negatif ak efè segondè. Se poutèt sa, li enperatif pou chwazi yon terapi altènatif, de preferans yon medikaman èrbal ki gen estwojèn kòm yon engredyan aktif pou tretman sendwòm postmenopoz [12-13].
Nan yon eksperyans preliminè, yo te idantifye estrikti divès kalite konpoze natirèl yo jwenn nan C. deserticola lè l sèvi avèk espektometri mas (MS) [14]. Li te konfime ke glikozid yo se prensipal konpoze aktif ki gen aktivite estwojèn enpòtan [14-15]. Pou devlope yon engredyan aktif estwojèn ki an sekirite epi ki efikas nan yon nouvo dwòg, yo bezwen yon ankèt apwofondi sou TGCD apre pirifikasyon. Nan etid sa a, CCD te premye itilize pou optimize pirifikasyon total de glikozid C. deserticola (TGCD). Imedyatman, tès kwasans matris la te itilize pou evalye aktivite estwojèn menm glikozid la. High-pèfòmans likid chromatographie/quadrupole tan-of-vol mas spectrométrie (HPLC/Q-TOF-MS) te itilize pou analiz qualitative de composés de TGCD apre pirifikasyon. Pwosesis sa a te aplike pou demontre klèman prezans divès konpoze aktif ak aktivite estwojèn nan TGCD. Sa a ka ansanm bay baz pou itilizasyon klinik li yo nan sendwòm postmenopausal ranplase estwojèn.

Pwosedi eksperimantal
Enstriman
Sistèm HPLC Agilent 1290 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA), Agilent 6530 seri quadrupole tan-de-vòl LC/MS (Q-TOF) sistèm (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA), ak Chimik HPLC{ {5}}D yo te itilize estasyon travay kòm enstriman kwomatografik pou trete done yo. Milli-Q dlo ultrapure te itilize pou etid la tout antye. AR1140 elektwonik balans analyse (Ohaus International Ltd.); 680 lektè microplate (Bio-Rad Corporation); ak santrifujeur gwo vitès 64R (Beckman Coulter Allegra) yo te itilize pou preparasyon echantiyon.
Dwòg ak pwodwi chimik yo
C. deserticola te achte nan mache dwòg la ak idantifye pa pwofesè Zhang Delian (Harbin University of Commerce, Lachin). Standard diethylstilbestrol (99 pousan pi, anpil nimewo 60518) te achte nan men Dr Ehrenstorfer (Almay). Lòt estanda actoside (111530-200505) ak echinacoside (111670-200503) yo te jwenn nan Enstiti Nasyonal pou Kontwòl pwodwi famasetik ak byolojik, Beijing, Lachin. Pite chak estanda te > 98 pousan. Acetonitrile (ACN), methanol, ak asid fòmik (MS klas) yo te achte nan men Thermo Scientific Pierce (Rockford, IL, USA). Dlo ultrapure te jwenn nan Hangzhou Wahaha Group co, Ltd (Hangzhou, Lachin). Tout reyaktif komèsyal ki disponib yo te nan klas analyse.
Preparasyon nan glikozid total nan C. deserticola solisyon pou pirifye
Apre plonje nan 75 pousan etanòl pou 12 èdtan, yo te ekstrè poud brit C. deserticola (1 00 g) ak 800 mL nan 75 pousan (v/v) etanòl nan 80 degre pou 150 min anba rflu. Lè sa a, li te filtre nan yon filtè doub-pon epi imedyatman ekstrè ak 800 mL nan 75 pousan etanòl de fwa pou yon lòt 150 min. Imedyatman, filtraj yo te konbine epi konsantre nan yon vakyòm nan 45 degre. Ekstrè a te jwenn nan retire sòlvan an. Yon sèten kantite dlo distile te ajoute nan ekstrè a jwenn yon konsantrasyon nan 0.5 g / mL, ki te itilize nan ekran pwosesis la pou pirifye.
Pou adsorption lè l sèvi avèk AB-8 résine macroporous, pH la nan solisyon echantiyon tès la te ajiste a 11. Premyèman, yo te itilize 2 BV dlo distile pou lave lwen enpurte yo. Lè sa a, eluyan an nan yon konsantrasyon nan 25 BV 85 pousan etanòl te eluye ak kolekte. Finalman, eliyan pirifye kolekte te fizyone. Yon sèten kantite dlo distile te ajoute nan ekstrè a pou jwenn yon konsantrasyon 1.5 g / mL, ki te itilize pou administrasyon entragastric. Pou kontwòl pozitif, solisyon diethylstilbestrol (20 ug/mL) te prepare ak poud diethylstilbestrol.
Dapre rapò pirifikasyon ({{0}}.6), yo te transfere yon sèten kantite ekstrè a (ekivalan a 1 g C. deserticola) nan yon flakon volumetrik 1{0 mL, fonn nan 50 pousan (v/v) methanol solisyon nan yon beny ultrasons pou 5 min, ak dilye a 10 mL. Solisyon medsin lan te jwenn apre filtraj supernatant la atravè yon manbràn filtre 0.45 μm. Acteoside ak echinacoside (1 mg chak) te melanje ak fonn nèt nan yon 10 mL 50 pousan (v/v) methanol solisyon. Finalman, solisyon estanda a te filtre nan yon filtè 0.45 μm Millipore anvan analiz.
Kondisyon LC-MS
Separasyon kwomatografi yo te fèt nan yon sistèm HPLC (Agilent 129{{10}}), ekipe ak yon sistèm livrezon sòlvan kwatènè, degazifikateur vakyòm, ak detektè fotodyode. Analiz MS/MS te fèt nan yon enstriman Agilent-1290 HPLC/6530 Q-TOF-MS sistèm, ekipe ak yon sous iyonizasyon electrospray nan tou de mòd iyon pozitif ak negatif. Yon kolòn Waters Symmetry shield RP C18 (4.6 × 250 mm, 5 μm) (Waters Corporation, Milford, MA, USA) te itilize pou separasyon. Faz mobil lan te gen 0.2 pousan asid fòmik solisyon akeuz (v/v) (A) ak ACN (B), epi li te ponpe nan yon pousantaj koule nan 0.5 mL / min. Volim piki chak echantiyon te 10 μL. Pwogram elisyon gradyan an te jan sa a: 5−23 pousan B pou 0−35 min, 23−25 pousan B pou 35−65 min, ak 25−5 pousan B pou 65−70 min. Tanperati kolòn lan te kenbe nan 30 degre. Chromatogram yo te kontwole ak anrejistre nan 330 nm. Presyon gaz atomizasyon an te mete nan 30 Psi, ak vòltaj kapilè a te 3.5 kV. Pousantaj gaz sèk la te 8 L/min nan yon tanperati 30 degre. Tanperati gaz djenn yo te fikse nan 400 degre nan yon vitès koule 12 L/min. Enèji kolizyon an te fikse nan 10-20 eV pou analiz ki ba enèji ak 30-50 eV pou analiz ki gen gwo enèji. Done spectre mas yo te anrejistre nan seri eskanè 50-1000 Da nan mòd optik ion pozitif ak negatif. Nan etid sa a, yo te fè yon konparezon rapid ak efikas ant TGCD ak estanda yo nan menm kondisyon LC-MS.
Tès kwasans matris
Sa a te fèt an akò strik ak rekòmandasyon yo nan Gid la pou Swen ak Itilizasyon Bèt Laboratwa nan Enstiti Nasyonal Sante yo. Tout pwosedi eksperimantal yo te revize ak apwouve pa Komite Etik Animal nan Harbin University of Commerce, Lachin.
Ki pa gen matirite sourit fi Kunming (apeprè 21 d nan nesans, sevre) ki peze 12 ± 2 g, yo te achte nan Changchun National Biological Industry Base Laboratory Animal Center (Changchun, Lachin). Sourit yo te loje nan yon chanm tanperati kontwole (22 ± 2 degre) ak manje ak dlo ad libitum. Eksperyans bèt yo te kòmanse apre senk jou nan aklimatasyon. Sourit yo jene lannwit lan ak dlo ad libitum anvan administrasyon entragastric solisyon tès la.
Sourit yo te owaza divize an 22 gwoup, ak 10 bèt nan chak gwoup. Yo te administre dwòg eksperimantal nan menm volim de fwa pa jou (maten ak aswè) pandan kat jou jan sa a:
Gwoup 1: Entragastric total glikozid nan C. deserticola solisyon pou pirifye (20 mL / kg), (volim solisyon / pwa sourit),
Gwoup II: Entragastric dlo distile (gwoup kontwòl negatif), ak
Gwoup III: Entragastric diethylstilbestrol (20 ug/mL) (gwoup kontwòl pozitif).
Sou senkyèm jou a, tout sourit yo te sakrifye. Matris yo te imedyatman retire epi peze epi yo te kalkile koyefisyan matris yo.
Analiz estatistik
Yo te itilize yon tès t-de-tailed paired-echantillon pou idantifye diferans estatistik siyifikatif nan divès paramèt yo nan diferan gwoup eksperimantal yo. Yo te fè analiz la avèk lojisyèl estatistik SPSS (SPSS pou Windows v21.0, SPSS Inc., USA). Diferans yo te konsidere estatistik enpòtan nan yon nivo konfyans 95 pousan (p <>
Rezilta ak diskisyon
Linearite ak korelasyon nan pwodiksyon akteozid ak glikozid total
Ekwasyon regression lineyè pwodiksyon akteozid la te y {{0}}x – 14.75 (kote x se konsantrasyon aktozid, e y se zòn pik korespondan li) ak yon koyefisyan korelasyon r=1 nan seri konsantrasyon 0.12-{{10}}.72 mg/mL. Sa a te endike yon koub kalibrasyon lineyè. Ekwasyon regresyon lineyè pwodiksyon total de glikozid la te y=26.074x plis 0.0866 (kote x se konsantrasyon total glikozid, epi y se zòn pik korespondan li) ak yon koyefisyan korelasyon r { {12}}.9982 nan seri konsantrasyon 0.013-0.065 mg/mL. Sa a tou endike yon koub kalibrasyon lineyè.
Ankèt metodolojik
Yo te envestige presizyon, repwodibilite, estabilite, ak rekiperasyon echantiyon yo nan ankèt metodolojik la. Nan eksperyans presizyon an, devyasyon estanda relatif (RSD) actoside ak glikozid total te 1.43 pousan ak 0.05 pousan respektivman. Nan eksperyans repwodiksyon an, RSD akteozid ak glikozid total te 0.10 pousan ak 1.44 pousan respektivman. Nan eksperyans estabilite 24 èdtan an, RSD akteozid ak glikozid total te 0.14 pousan, ak 0.90 pousan respektivman. Nan eksperyans rekiperasyon an, rekiperasyon akteozid la te 100.50 pousan ak yon RSD nan 2.08 pousan, pandan y ap rekiperasyon an nan glikozid total te 99.12 pousan ak yon RSD nan 1.65 pousan. Tout valè RSD yo te mwens pase 3 pousan. Rezilta sa yo demontre bon presizyon ak repwodibilite. Anplis de sa, echantiyon an te estab pou 24 èdtan. Rezilta yo nan rekiperasyon yo tou nan ranje ki akseptab (95-105 pousan). Se poutèt sa, metòd sa a ka itilize pou detèminasyon actoside ak total glycosides sede apre pirifikasyon.
Ankèt yon sèl-faktè nan TGCD
Pirifikasyon TGCD lè l sèvi avèk résine macroporous ka afekte pa anpil faktè, tankou kalite résine, faktè adsorption estatik (tan adsorption, konsantrasyon flit, ak pH nan solisyon echantiyon an), ak kondisyon elisyon (vitès koule, volim, ak konsantrasyon). Sèvi ak kapasite adsorption ak pousantaj desorption ak elisyon nan TGCD kòm endis, kondisyon eksperimantal la te detèmine ki baze sou rezilta yo nan eksperyans sèl-faktè. Sèvi ak AB-8 résine adsorption macroporous, kondisyon sa yo pi gwo yo te detèmine: 0.5 mg/mL solisyon echantiyon, pH nan 10, tan adsorption estatik nan 8 h, 2 BV dlo distile pou lave enpurte, 20 BV 80 pousan etanòl kòm eluyan, ak yon vitès koule nan 0.5 BV / min. Rezilta espesifik yo montre nan Figi 1−7.

CCD pou optimize teknoloji pirifikasyon TGCD
Ki baze sou rezilta yo nan ankèt la sèl-faktè, twa faktè siyifikativman enfliyanse metòd la pirifikasyon yo te chwazi kòm endis, sètadi, pH nan solisyon an echantiyon (x1), konsantrasyon eluent (x2), ak volim eluent (x3). Dapre prensip CCD, chak faktè gen senk nivo. Nivo maksimòm ak minimòm divès faktè sa yo te fikse selon rezilta eksperyans preliminè a. Nivo faktè yo montre nan Tablo 1 ak rezilta eksperimantal yo montre nan Tablo 2.

Yo te detèmine pwodiksyon total de glikozid ak acteoside pou optimize metòd pirifikasyon pou TGCD. Premyèman, total glikozid ak pwodiksyon akteozid yo te fikse sou kritè nimerik dezirabilite (d) ant {{0}}-1. Lè sa a, dezirabilite jeneral (OD) [OD=(d1, d2, d3,....,dn)1/n, kote n se nimewo endèks la] te kalkile. SPSS21. Yo te itilize lojisyèl {{10}} ak lojisyèl ekspè nan konsepsyon pou plizyè regression lineyè ak ajisteman binomial varyab endepandan ak OD, ak p < 0.05="" te="" konsidere="" yon="" estanda="" estatistik="" enpòtan="" nan="" ekwasyon="" an.="" ekwasyon="" an="" ak="" yon="" pi="" gwo="" r-valè="" (koyefisyan="" korelasyon="" miltip)="" te="" chwazi="" kòm="" modèl="" ki="" pi="" byen="" anfòm.="" ekwasyon="" lineyè="" miltivarye="" a="" reprezante="" kòm="" y="–" 1.02="" –="" 0.131x1="" plis="" 0.{034x2="" plis="" 0.012x3="" (r="" {{="" 25}}.55,="" p="0.004)." ekwasyon="" binomyal="" la="" se="" y="–" 21.92173="" –="" 0.74079x1="" plis="" 0.62914x2="" plis="" 0.041161x3="" plis="" 0.014972x1x2="" plis="" 2.06050*{10-4x1x3="" plis="" 8}2}{56}x1.="" {56}}.78730="" ×="" 10-3x{22="" -="" 2.89446="" ×="" 10-3x32="" (r="0.91," p="0.012)." nan="" ekwasyon="" ki="" anwo="" yo,="" li="" ka="" wè="" ke="" koyefisyan="" korelasyon="" ekwasyon="" regresyon="" lineyè="" miltivarye="" a="" pi="" ba.="" korelasyon="" ki="" genyen="" ant="" varyab="" endepandan="" ak="" depandan="" yo="" trè="" ba,="" e="" li="" te="" konsidere="" kòm="" favorab="" pou="" itilize="" nan="" modèl="" lineyè="">

Men, koyefisyan korelasyon ekwasyon binomyal la te wo epi li te lakòz yon bon anfòm. Kidonk, yo te chwazi modèl binomyal la. Baze sou yon analiz konplè figi sifas la ak kat jeyografik kontou konbine avèk done eksperimantal yo (valè OD tou pre {{0}}.6), yo te jwenn seri pi gwo nan metòd pou pirifye. Soti nan Figi 8, li ka wè ke valè maksimòm OD a te pwodwi lè pH nan solisyon echantiyon an (A) te nan seri a nan 9-10, ak konsantrasyon an eluyan (B) te nan seri a nan 79-85 pousan. . Figi 9 montre ke valè maksimòm OD a te jwenn lè valè pH echantiyon solisyon (A) te nan seri 9-10, ak volim eluyan (C) te nan seri 20-25 BV. Figi 10 montre ke valè maksimòm OD a te jwenn lè konsantrasyon an eluent (B) te nan seri a nan 80-85 pousan, ak volim nan eluent (C) te nan seri a nan 20-25 BV. Apati yon analiz konplè sou done sa yo, yo te detèmine pH solisyon echantiyon an, konsantrasyon eluyan, ak volim eluyan yo nan ranje 9−10, 80−85 pousan, ak 20−25 BV respektivman. Ki baze sou ekwasyon binomial miltivarye a pou rezilta derive varyab ak konplo optimal, yo te jwenn pi bon metòd pou pirifye TGCD nan yon konsantrasyon eluyan (etanòl) 85 pousan ak volim 25 BV nan yon pH 11. Valè OD ki koresponn lan te 0.8332. , ak rannman total de glikozid la te 73.0339 pousan . Enpresyon vizyèl nan figi 8-10 idantifye pi bon metòd pou se youn nan ki entèraksyon ant de faktè yo te konsidere, byenke metòd ki pi bon dedwi nan fòmil la rekonèt youn nan entèraksyon nan mitan twa faktè yo te enkli. De rezilta yo te diferan epi yo te konsidere metòd pirifikasyon optimal la ak yon konsantrasyon eluyan (etanòl) 85 pousan ak volim 25 BV nan yon pH 11.

Mezi kwasans matris
Koefisyan matris chak gwoup yo montre nan tablo 3. Konpare ak gwoup kontwòl negatif la, rezilta lòt gwoup yo te siyifikativman diferan. Li te jwenn ke TGCD jwenn nan 20 diferan metòd pou pirifye tout egzèse aksyon estwojèn.
Eksperyans konfimatè
Rezilta konplè CCD ak tès kwasans matris la te montre ke metòd pirifikasyon pi bon an te konsidere kòm yon konsantrasyon eluyan (etanòl) 85 pousan ak yon volim 25 BV nan yon pH 11. Pandan an.
pwosesis validation, pwodiksyon an mwayèn nan glikozid total te 70.9150 pousan. Devyasyon mwayèn ant valè prevwa ak valè aktyèl yo te 2.1180 pousan. Se poutèt sa, li ka sijere ke previzibilite a ak kredibilite eksperimantal nan modèl sa a yo bon.
Idantifikasyon TGCD apre pirifikasyon
Dapre tan retansyon ak done MS, 21 konstitiyan natirèl yo te espekile, ki gen ladan campneoside 1, 2′-acetylatteoside, cistanoside A, cistanoside B, syringalide A 3'- - L-rhamnopyranoside, tubuloside A, tubuloside B, salidroside, cistanoside G, asid teniposid, decaffeoylacteoside, 8-asid epiloganik, echinacoside, cistanoside F, cistantubuloside B1, isoacteoside, acteoside, cis-acteoside, kankanoside E, osmanthuside B, ak cistanoside C. Tan retansyon, MS ak MS/ Enfòmasyon MS, fòmil, ak konpoze espekile yo montre nan Tablo 4.
Q-TOF-MS se patikilyèman apwopriye pou idantifikasyon estriktirèl konpozan molekilè konplèks nan dwòg ak manje paske li ka bay konpozisyon eleman posib atravè mas molekilè egzak ak karakteristik sa yo estriktirèl nan iyon yo fragman. Pou etabli yon karakterizasyon estriktirèl sistematik, Q-TOF-MS, done MS, chèche baz done, ak piblikasyon referans literati yo te itilize tou pou idantifikasyon. Fòmil molekilè chak eleman sib te dedwi nan ion paran an, epi li te matche ak konpoze yo li te ye. Fòmil sa a ta ka detèmine plis nan iyon fragman ki gen rapò li yo. Pou egzanp, pik 5 te montre yon ion deprotonasyon dominan nan m/z 654 (C30H38O16), ki te idantik ak konpozisyon elemantè campneoside 1. Pèt kafeyil la te fòme nan yon ion fragman nan m/z 493, ak pèt la nan rha te fòme apati yon iyon fragman nan m/z 347.

Konklizyon
Sèvi ak yon teknoloji LC-Q-TOF-MS, yon metòd analiz kalitatif senp ak gaya pou TGCD te devlope ak konplètman valide. Done validation pou tès depistaj ak idantifikasyon konpoze natirèl ki soti nan TGCD yo te satisfezan. Ven-yon konpoze bioaktif ki soti nan TGCD yo te espekile jan sa a: salidroside, cistanoside G, asid geniposidic, decaffeoylacteoside, campneoside 1, 8-asid epiloganik, 2'-acetylatteoside, cistanoside A, cistanoside B, syringalide A3′{99 }} L-rhamnopyranoside, echinacoside, cistanoside F, cistantubuloside B1, isoacteoside, acteoside, tubuloside A, cis-acteoside, kankanoside E, osmanthuside B, cistanoside C, ak tubuloside B. Karakterizasyon estriktirèl konpoze sa yo ka bay yon fondasyon eksperimantal pou kontwòl kalite yo ak plis aplikasyon klinik paske nan aktivite estwojèn yo. Sa a ka ofri yon opsyon nouvo ak amelyore terapetik pou tretman sendwòm postmenopoz, kidonk evite efè segondè yo ak reyaksyon negatif nan terapi estwojèn.

Abreviyasyon yo
TGCDCistanche deserticolaglikozid total LC/Q-TOF-MS likid chromatografi/kwadrupol tan-of-vol spèktrometri mas
RSM repons sifas metodoloji
CCD santral konsepsyon konpoze
MS mas spectrometri HPLC/Q-TOF-MS High-pèfòmans likid chromatografi/kwadrupol tan-of-vol espektrometri mas
ACN Acetonitrile
BV volim kabann
OD dezirabilite jeneral
LC-MS likid chromatografi-spèktrometri mas
Q-TOF-MS kwadripol tan-of-vol mas spèktrometri
TCM medikaman tradisyonèl Chinwa
RSD relatif estanda devyasyon
Rekonesans
Pwojè sa a te sipòte pa Fondasyon Nasyonal Syans Natirèl Lachin nan (No 81073015), Fondasyon Syantifik Nati nan pwovens Heilongjiang (ZD2017014), Young inovatè plan fòmasyon talan nan Kolèj la nan pwovens Heilongjiang (UNPYSCT- 2017209). Otè yo deklare ke pa gen okenn konfli enterè konsènan piblikasyon papye sa a.
Konfli enterè
Otè yo di pa gen okenn konfli enterè.

Referans
[1] Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y., Tu PF, Phenylethanoid glycosides ak aktivite anti-enflamatwa soti nan tij yo nan Cistanche deserticola kiltive nan dezè Tarim, Fitoterapia, 2013, 89, {{4} }.
[2] Guo Y., Cao L., Zhao Q., Zhang L., Chen J., Liu B., Zhao B., Karakterizasyon preliminè, aktivite antioksidan ak epatoprotective nan polisakarid soti nan Cistanche deserticola, Creole Journal of byolojik makromolekil , 2016, 293, 678-685.
[3] Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y., Tu PF, Anti-enflamatwa iridoid ki soti nan tij Cistanche deserticola kiltive nan dezè Tarim, Chinese Journal of Natural Medicines, 2016, 14, 61-65.
[4] Peng F., Chen J., Wang X., Xu C., Liu T., Xu R., Chanjman nan nivo glikozid feniletanoid, aktivite antioksidan, ak lòt karakteristik kalite nan tranch Cistanche deserticola pa pwosesis vapè, pwodui chimik. ak Pharmaceutical Bulletin (Tokyo), 2016, 64, 1024-1030.
[5] Wang T., Zhang X., Xie W., Cistanche deserticola YC Ma, "Desert Ginseng": yon revizyon, The American Journal of Chinese Medicine, 2012, 40, 1123-1141.
[6] Song Y., Song Q., Li J., Zhang N., Zhao Y., Liu X., Jiang Y., Tu P., Yon estrateji entegre pou distenge kamomiy quantitatively antCistanche deserticolaak C. tubulosa lè l sèvi avèk segondè-pèfòmans likid chromatografi-ibrid trip quadrupole lineyè iyon pèlen mas spèktrometri, Journal of Chromatography A, 2016, 1429, 238-247.
[7] Li Y., Peng Y., Wang M., Zhou G., Zhang Y., Li X., tès depistaj rapid ak idantifikasyon diferans ki genyen ant metabolit nanCistanche deserticolaak C. tubulosa ekstrè dlo nan rat pa UPLC-Q-TOF-MS konbine analiz rekonesans modèl, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2016, 131, 364-372.
[8] Li WL, Sun XM, Song H., Ding JX, Bai J., Chen Q., HPLC/Q-TOF-MS-Baze Idantifikasyon nan konstitiyan absòbe ak metabolit yo nan serom rat ak pipi apre administrasyon oral Cistanche. deserticola Extrait, Journal of Food Science, 2015, 80, H2079-2087.
[9] Almasi A., Dargahi A., Mohamadi M., Biglari H., Amirian F., Raei M., Retire penicilin G pa konbinezon sonolysis ak Photocatalytic (sono-photocatalytic) pwosesis soti nan solisyon akeuz: pwosesis optimize lè l sèvi avèk RSM (Metodoloji Sifas Repons), Electron Physician, 2016, 8,
[10] 2878-2887. Hou W., Zhang W., Chen G., Luo Y., Optimizasyon nan kondisyon ekstraksyon pou maksimòm fenolik, flavonoid ak aktivite antioksidan soti nan Melaleuca bract done fèy lè l sèvi avèk metodoloji sifas repons, PloS One, 2016, 11,
[11] e0162139. Pooralhossini J., Ghaedi M., Zanjanchi MA, Asfaram A., Chwa pou fè ekstraksyon ultrasound-asistans makonnen ak spectrophotometric pou detèminasyon rapid nan asid galik nan echantiyon dlo: Santral konsepsyon konpoze pou optimize nan varyab pwosesis, Ultrasonics Sonochemistry, 2017, 34 , 692- 699.
[12] Han L., Boakye-Yiadom M., Liu E., Zhang Y., Li W., Song X., Fu F., Gao X., Karakterizasyon estriktirèl ak idantifikasyon glikozid feniletanoid soti nanCistanches deserticola YC Mapa UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS, Phytochemical Analysis, 2012, 23, 668-676.
[13] Lu D., Zhang J., Yang Z., Liu H., Li S., Wu B., Ma Z., Kantitatif analiz de Cistanches Herba lè l sèvi avèk segondè-pèfòmans likid kromatografi makonnen ak deteksyon etalaj dyod ak segondè- espektometri mas rezolisyon konbine avèk metòd chimyometrik. Journal of Separation Science, 2013, 36, 1945-1952.
[14] Li WL, Chen Q., Yang B., Gao S., Zhang JJ, Depistaj nan ekstrè efikas fito-estwojèn ak dòzCistanche deserticola, Chinwa Medikaman èrbal, 2013, 5, 292-296.
[15] Li YP, Huang FR, Dong J., Xiao C., Xian RY, Ma ZG, Zhao J., Idantifikasyon rapid nan Cistanche atravè Fluoresans Spectrum Imaging Teknoloji konbine avèk analiz prensipal eleman ak distenksyon Fisher, Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi, 2015, 35, 689-694.

