Preparasyon izolasyon ak pirifikasyon kat konpoze ki soti nan Cistanches Deserticola YC Ma pa gwo vitès Counter-Current Chromatography

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Résumé:

Apre yon etap anrichisman konstitiyan sou yon kolòn jèl silica, katglikozid feniletanoidyo te izole avèk siksè nanCistanches deserticolaak pirifye pa preparasyon gwo vitès kont-kouran chromatografi (HSCCC) ak yon sistèm sòlvan de-faz ki konpoze de etil acetate-n-butanol-etanòl-dlo (40:6:6:50, v/v). /v/v). Yon total de 30.9 mg akteozid, 13.0 mg isoakteozid, 12.5 mg siringalid A 3'- -L-rhamnopyranoside, ak 7.2 mg 2'-acetylatteoside ak pite ki pi wo pase 95 pousan, jan HPLC-ELSD detèmine, yo te. jwenn nan yon sèl-etap separasyon soti nan 297 mg nanCistanche deserticola ekstrè, respektivman. Estrikti yo te idantifye pa HR-MS, 1H-NMR, ak 13C-NMR.

Mo kle: gwo vitès kont-kouran chromatografi;Cistanches deserticola YC Ma;glikozid feniletanoid; acteoside; izoakteozid; siringalid A 3'- -L-ramnopiranozid; 2'-asetilakteozid.

Entwodiksyon

Cistanches deserticolaYC Ma, yon espèsCistancheski fè pati fanmi Orobanchaceae, se yon medikaman tradisyonèl Chinwa ki byen koni pou tretman defisyans ren, sterilite fi, leukorrhea morbid, neurapraxia, ak konstipasyon senil [1]. Li se yon plant parazit ki lajman distribiye nan nòdwès Lachin. Jiskaprezan, plizyè konpoze, ki gen ladan glikozid phenylethanoid (PhGs), iridoid, ak lignan yo te izole nan espès sa a [2]. Gen kèk nan PhG yo te rapòte ke yo posede aktivite antioksidatif, epatopwotektif, ak neuroprotective [3-6]. Sepandan, pwosedi izolasyon ak pirifikasyon PhG yo difisil ak pran tan. Anplis, metòd klasik miltip chromatografik yo pa sèlman itilize yon gwo kantite solvang òganik, men tou bay yon pi ba echantiyon rekiperasyon. High-speed counter-current chromatography (HSCCC), yon teknik kwomatografi patisyon likid-likid san sipò, ofri ekselan rekiperasyon echantiyon konpare ak kèk metòd konvansyonèl e li te lajman itilize pou separasyon ak pirifye divès kalite pwodwi natirèl [7-9] . Malgre ke plizyè PhG yo te pirifye soti nanCistanchesgenus ak lòt pa HSCCC [10–14], pa gen okenn papye ki rapòte pirifikasyon akteozid, izoakteozid, siringalid A 3'- -L-ramnopiranozid ak 2'-acetylacteoside nan yon sèl sistèm bifaz.

Nan papye sa a, nou rapòte yon metòd senp pou separasyon ak pirifikasyon nan kat PhG soti nan C. deserticola. Finalman, yo te jwenn 30.9 mg akteozid, 13.0 mg isoakteozid, 12.5 mg siringalid A 3'- -L-rhamnopyranoside, ak 7.2 mg 2'-acetylatteoside nan yon sèl etap. separasyon de 297 mg nan fraksyon ak pite nan 99 pousan, 95 pousan, 99 pousan, ak 98 pousan, respektivman. Estrikti yo te karakterize ki baze sou 1H- ak 13C-NMR done espèk ak espèk HR-MS. Estrikti kat PhG yo idantifye nan ankèt sa a montre nan Figi 1.

Rezilta ak Diskisyon

Analiz HPLC nan ekstrè brit la

Konstitiyan anrichi fraksyon nan ekstrè n-butanoik soti nan C. deserticola te analize pa HPLC-UV. Kolòn nan itilize se te yon Accurasil C18 (250 mm × 4.6 mm, id 5 μm) (Thermo-Fisher Scientific Instruments, vil, eta abrev, USA), faz mobil lan te metanol-dlo (30:70, v / v). Pousantaj koule a te 1 mL / min. Longèdonn detektè a te fikse nan 254 nm. Chromatogram HPLC a montre nan Figi 2. Pik 1 a 4 koresponn ak acteoside (1), isoacteoside (2), syringalide A 3'- -L-rhamnopyranoside (3), ak 2'-acetylatteoside (4), respektivman.

Seleksyon Sistèm Solvan De-faz

Siksè separasyon pa HSCCC depann lajman sou seleksyon an nan yon sistèm sòlvan de-faz apwopriye, sistèm sòlvan de-faz la te chwazi dapre valè yo koyefisyan patisyon (K) nan chak eleman sib ak yon seri pi gwo nan K ta dwe soti nan {{ 2}}.5 a 2.

Nan eksperyans la, yo montre valè K pou konpozan sib plizyè sistèm sòlvan de-faz nan Tablo 1 (byenke yon ti kras pi wo pou pik 4, rezilta yo te montre yo akseptab). Pami yo, etil acetate-n-butanol-etanòl-dlo (40:6:6:50, v/v/v/v) te bay koyefisyan patisyon apwopriye pou konpoze sib yo. Evantyèlman, sistèm sòlvan ki konpoze de etil acetate-n-butanol-etanòl-dlo (40:6:6:50, v/v/v/v) te itilize pou izole ak pirifye kat konpoze C. deserticola, jan yo montre nan Figi 3. Jan yo montre nan Figi 2, analiz HPLC nan chak fraksyon HSCCC revele ke kat PhG pi (akteozid, 99 pousan; isoacteoside, 95 pousan; syringalide A 3′- - L-rhamnopyranoside 99 pousan ak 2′-). asetilakteozid 98 pousan) yo ka jwenn nan fraksyon bit la.

Eksperimantal

Aparèy

Ekipman HSCCC yo te anplwaye nan etid prezan an se te yon TBE-300B gwo vitès kont-aktyèl chromatografi sistèm (Shanghai Tauto Biotech Co., Shanghai, Lachin) ak twa kolòn separasyon bobin multikouch preparasyon ki konekte nan seri (dyamèt tib).=2.6 mm, volim total=300 mL) ak yon bouk echantiyon 20 mL. Reyon revolisyon an oswa distans ki genyen ant aks detantè a ak santral laaks santrifij la (aks santrifij la (R) te 5 cm, ak valè a varye de 0.5 nan tèminal entèn la rive 0.8 nan tèminal ekstèn lan (= r/R, kote r se distans ki soti nan bobin la ak arbr detantè a). Yo te itilize yon HX 105 sikilasyon konstan tanperati (Beijing Changliu Lab Instrument Company, Beijing, Lachin) pou kontwole tanperati a nan eksperyans la. Sistèm HSCCC la te ekipe ak yon modèl TBP-5002 ponp koule konstan presyon mwayen, yon modèl detektè UV TBP-2000 ki opere nan 254 nm, ak yon estasyon travay modèl V4.0 (Jinda Biochemistry Instrument Company, Shanghai, Lachin).

Ekipman segondè-pèfòmans likid kromatografi (HPLC) yo te itilize se yon sistèm Agilent 1200 ki gen ladann yon ponp binè G1312A, yon echantiyon oto G1329A, yon detektè G1314A varyab longèdonn (VWD), yon lòj kolòn thermostat G1316A, yon G1379B desserga ak Agile. estasyon travay. Yo te itilize yon Alltech 3300 ELSD pou deteksyon pite yo. Yo te itilize espektwomèt Agilent 6520 Q-TOF ak Bruker AVANCE III 500-NMR pou idantifikasyon estriktirèl konpoze yo. 1H ak 13C-NMR spectre (nan 500 ak 125 MHz, respektivman) yo te mezire nan tanperati chanm (22 degre / 295.1 K).

Reyaktif ak materyèl

Ethyl acetate, n-butanol, ak etanòl te klas analyse ak metanol te klas HPLC. Tout solvants yo te achte nan men Tianjin Concord Technology Company (Tianjin, Lachin). Milli-Q dlo (18.2 MΩ) (Millipore, Bedford, MA, USA) te itilize pou tout solisyon ak dilution. Rizòm C. deserticola te ranmase nan pwovens Inner Mongolia, Repiblik Pèp la Lachin, nan mwa jen 2009. Pwofesè Lijuan Zhang te idantifye plant la, epi yo te depoze yon echantiyon bon (No 20091001) nan laboratwa nou an.

Preparasyon echantiyon brit

Poud lè sèk tij charnèl nan C. deserticola (1 Kg) yo te refluxed de fwa ak etanòl akeuz (8 L, 60 pousan v / v) pou 2 èdtan chak fwa. Ekstrè a te evapore anba presyon redwi ak nan yon tanperati 60 degre jiskaske total evaporasyon etanòl la. Yo te sispann rezidi a nan dlo epi ekstrè twa fwa siksesif ak klowofòm, acetate etil, ak n-butanol, ki bay 5.16 g nan ekstrè n-butanoik apre evaporasyon nan sechrès anba presyon redwi. Lè sa a, ekstrè n-butanoik la separe sou yon kolòn jèl silica (200-300 may) lè l sèvi avèk elisyon gradyan pwogresif (CHCl3-MeOH, 10:1→1:1) bay uit fraksyon. Fraksyon 6 (297 mg) te itilize pou plis HSCCC izòlman ak separasyon.

Seleksyon sistèm de-faz-sòlvan yo

Sistèm sòlvan de-faz yo te chwazi dapre koyefisyan patisyon (K) nan eleman sib yo nan fraksyon nan C. deserticola. Valè K yo te detèmine pa analiz LC jan sa a: Yo te fonn kantite lajan apwopriye nan poud ekstrè bit (fraksyon 6) nan faz ki pi ba nan sistèm sòlvan an epi analize pa HPLC. Zòn tèt yo te anrejistre kòm A1. Lè sa a, yon volim egal nan faz anwo a te ajoute nan solisyon an ak melanje byen yo rive jwenn ekilib patisyon. Lè sa a, HPLC analize faz ki pi ba a ankò. Dènye zòn pik yo te anrejistre kòm A2. K-valè yo te kalkile dapre ekwasyon sa a: K=(A1 − A2)/A2 [15,16].

Preparasyon nan sistèm de-faz-sòlvan ak solisyon echantiyon

Nan etid la prezan, yo te itilize sistèm sòlvan de-faz ki konpoze de etil acetate-n-butanol-etanòl-dlo (40:6:6:50, v/v/v/v) pou separasyon HSCCC. Chak sòlvan yo te ajoute nan yon antonwa separasyon ak byen ekilibre nan tanperati chanm. Faz anwo a ak faz pi ba a te separe ak degaze pa sonication pou 30 minit yon ti tan anvan ou itilize. Solisyon echantiyon an te prepare pa fonn 297 mg nan Fraksyon 6 nan 15 ml nan faz ki pi ba nan acetate etil-n-butanol-etanòl-dlo (40:6:6:50, v/v/v/v).

Pwosedi separasyon HSCCC

HSCCC te fèt jan sa a. Kolòn mawonnen multikouch la te ranpli premye ak faz estasyonè òganik anwo a. Lè sa a, faz mobil akeuz ki pi ba a te ponpe nan fen tèt kolòn nan nan yon vitès koule nan 1.5 mL / min, ak an menm tan an, aparèy la HSCCC te kouri nan yon vitès revolisyon nan 900 rpm. Apre yo te etabli ekilib idrodinamik, jan sa endike nan yon faz mobil klè ki eliye nan priz la ke (apeprè de zè de tan pita), yo te enjekte yon solisyon echantiyon 15 mL ki gen 297 mg ekstrè brit la (fraksyon 6) sou fòm piki a. Te efluan kolòn nan kontinyèlman kontwole anba 254 nm. Kat fraksyon pik yo te kolekte dapre chromatogram la ak Lè sa a, evapore anba presyon redwi. Tanperati a nan aparèy la te fikse nan 25 degre.

Analiz HPLC ak Idantifikasyon Fraksyon Pik HSCCC

Fraksyon pik ki soti nan HSCCC yo te analize pa HPLC-ELSD. Kolòn ki te itilize se te yon Accurasil C18 (250 mm × 4.6 mm, id 5 μm), faz mobil lan te méthanol-dlo (30:70, v/v). Pousantaj koule a te 1 mL / min. ELSD te opere nan kondisyon sa yo: Tanperati 45 degre, gaz 1.6 L/min. Idantifikasyon estriktirèl nan kat fraksyon pik HSCCC yo te pote soti nan espektroskopi HR-ESI-MS, 1H, ak 13C-NMR.

Idantifikasyon estriktirèl la

Fraksyon I: HR-ESI-MS obsève nan m/z 623.2001 (M-H)-, kalkile pou C29H35O15, 623.1981. 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6 Hz, CH3 nan rhamnose), 2.79 (2H, t, J=7.5 Hz, Ar-CH 2-), 4.37 (1H, d, J=8 Hz, H{-1 glikoz), 5.18 (1H, d, J=1 Hz, H{{34} } nan ramnoz), 6.27 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH{=CH-), 7.59 (1H, d, J {= 15.5 Hz, Ar -CH=CH-), 6.5-7.1 (6H, aromat H).13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.5 (C{-1), 117.2 (C{{65} }), 146.2 (C{-3), 144.7 (C-4), 116.4 (C{-5), 121.3 (C{-6), 72.4 (C-), 36.6 (C-), 127.7 (Kafe{-1), 115.3 (Kafe{-2), 146.9 (Kafe{-3), 149.8 (Kafe{-4), 116.6 (Kafe{{{ 98}}), 123.2 (Caf-6), 168.3 (Caf-), 114.8 (Caf-), 148.1 (Caf-), 104.3 (G-1), 76.1 (Glc{{116} }), 81.7 (Glc-3), 70.5 (Glc{-4), 76.3 (Glc{-5), 62.4 (Glc{-6), 103.1 (Rha{{131} }), 72.3 (Rha{-2), 72.1 (Rha{-3), 73.9 (Rha{-4), 70.7 (Rha{-5), 18.5 (Rha{{146} }). Konpare ak done yo bay nan literati [17], fraksyon I te koresponn ak acteoside.

Fraksyon II: HR-ESI-MS obsève nan m/z 623.1987 (M-H)-, kalkile pou C29H35O15, 623.1981. 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.25 (3H, d, J=6.5 Hz, CH3 nan rhamnose), 2.78 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4.33 (1H, d, J=8 Hz, H{-1 glikoz), 5.17 (1H, d, J {{ 33}} Hz, H-1 nan rhamnose), 6.28 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH{=CH-), 7.56 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 6.5-7.0 (6H, aromat H). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.5 (C-1), 117.2 (C{-2), 146.2 (C{-3), 144.7 (C{-4 ), 116.5 (C{-5), 121.3 (C{-6), 72.4 (C-), 36.7 (C-), 127.8 (Caf{-1), 115.2 (Caf{{89} }}), 146.8 (Caf-3), 149.7 (Caf{-4), 116.6 (Caf{-5), 123.2 (Caf{-6), 169.2 (Caf-), 115.0 (Caf-), 147.3 (Caf-), 104.5 (G-1), 75.5 (Glc{-2), 84.2 (Glc{-3), 70.1 (Glc{-4 ), 75.7 (Glc{-5), 64.7 (Glc{-6), 102.8 (Rha{-1), 72.4 (Rha{-2), 72.4 (Rha-3 ), 74.1 (Rha{-4), 70.5 (Rha{-5), 17.9 (Rha{-6). Done espèk 1H-NMR ak 13C-NMR yo te an akò ak sa yo ki nan isoacteoside jan yo rapòte nan literati a [18].

Fraksyon III: HR-ESI-MS obsève nan m/z 6{{108}}7.2032 (M-H)-, kalkile pou C29H35O14, 607.2032. 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6 Hz, CH3 nan rhamnose), 2.84 (2H, t, J=7.5 Hz, Ar-CH 2-), 4.37 (1H, d, J=8 Hz, H-1 glikoz), 5.19 (1H, d, J=1.5 Hz, H{{ 35}} nan ramnose), 6.27 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH{= CH-), 7.59 (1H, d, J {= 16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.6–7.1 (7H, aromat H). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 130.8 (C-1), 116.2 (C{-2), 130.9 (C{-3), 156.8 (C{-4 ), 130.8 (C{-5), 116.2 (C{-6), 72.4 (C-), 36.4 (C-), 127.8 (Caf{-1), 114.8 (Caf{{88). }}), 149.8 (Caf{-3), 146.9 (Caf{-4), 116.6 (Caf{-5), 123.2 (Caf{-6), 168.3 (Caf-), 115.4 (Caf-), 148.0 (Caf-), 104.3 (G-1), 76.3 (Glc{-2), 81.7 (Glc{-3), 70.4 (Glc{-4 ), 76.1 (Glc{-5), 62.5 (Glc{-6), 103.0 (Rha{-1), 72.3 (Rha{-2), 72.2 (Rha{-3 ), 73.9 (Rha-4), 70.7 (Rha{-5), 18.4 (Rha{-6). Dapre literati [18], fraksyon III te koresponn ak siringalid A 3'- -L-rhamnopyranoside.

Fraksyon IV: HR-ESI-MS obsève nan m/z 665.21{{20}} (M-H)-, kalkile pou C31H37O16, 665.2087. 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6.5 Hz, CH3 nan rhamnose), 2.00 (3H, s, OAc), 2.72 (2H, t, J {{ {25}}.5 Hz, Ar-CH2-), 4.55 (1H, d, J=8 Hz, H-1 glikoz), 4.90 (1H, d, J { {37}} Hz, H-1 nan ramnose), 6.29 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH{=CH-), 7.62 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH{=CH-), 6.5-7.0 (6H, aromat H). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.9 (C-1), 117.3 (C{-2), 146.1 (C{-3), 144.7 (C{-4 ), 116.4 (C{-5), 121.4 (C{-6), 72.7 (C-), 36.4 (C-), 127.7 (Caf{-1), 115.4 (Caf{{93} }}), 146.9 (Kafe{-3), 149.9 (Kafe{-4), 116.6 (Kafe{-5), 123.2 (Kafe{-6), 168.1 (Caf-), 114.7 (Caf-), 148.2 (Caf-), 101.8 (G-1), 75.3 (Glc{-2), 80.3 (Glc{-3), 70.8 (Glc{-4 ), 76.2 (Glc{-5), 62.3 (Glc{-6), 103.3 (Rha{-1), 72.0 (Rha{-2), 71.8 (Rha{-3 ), 73.7 (Rha{-4), 70.8 (Rha{-5), 18.5 (Rha{-6), 171.5 (C{=O), 20.9 (OAC). Done espèk 1H-NMR ak 13C-NMR yo te dakò ak sa yo ki nan 2'-acetylatteoside [17].

Konklizyon

Yon metòd HSCCC pou preparasyon pou separasyon ak pirifikasyon akteozid, izoakteozid, siringalid A 3'- -L-rhamnopyranoside ak 2'-acetylacteoside soti nanCistanches deserticola YC Mate etabli. Etid la prezan endike ke HSCCC se yon teknik trè pwisan pou separasyon preparasyon ak pirifikasyon nan eleman byoaktif soti nan materyèl plant yo. Epitou, konpoze yo ka izole sou yon echèl ase gwo ak pite segondè epi yo ka Lè sa a, dwe itilize kòm sibstans ki sou referans pou syans kwomatografi oswa byaktivite. Metòd la se yon teknik posib, ekonomik ak efikas pou izolasyon rapid preparasyon pwodwi natirèl konplike.

Rekonesans

Travay sa a te sipòte pa Pwogram pou Changjiang Scholars ak Innovative Research Team in University (PCSIRT), Pwojè Plan Koperasyon Entènasyonal ki soti nan Ministè Syans ak Teknoloji nan Lachin (2008DFB30070), ak Pwogram syantifik nan Left Banner nan Alashan ({{2 }}).

Referans

1. Chinwa Pharmacopeial Komisyon. Farmakope Repiblik Pèp Lachin; Piblikasyon Medikal Pèp la: Beijing, Lachin, 2010; Volim 1, p. 126.

2. Jiang, Y.; Tu, PF Analiz konstitiyan chimik nan espès Cistanche. J. Chromatogr. 2009, 1216, 1970–1979.

3. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Acylated phenylethanoid aminoglycosides ak aktivite hepatoprotective soti nan plant la dezè Cistanche tubulosa. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882–1890.

4. Chen, H.; Jing, FC; Li, CL; Tu, PF; Zhang, QS; Wang, ZH Echinacoside anpeche nivo striatal ekstraselilè nerotransmeteur monoamin yo soti nan diminisyon nan rat blesi 6-hydroxydopamine. J. Ethnopharmacol. 2007, 114, 285–289.

5. Muraoka, O.; Ninomiya, K.; Morikawa, T.; Wakayama, H.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M. Konstitiyan Hepatoprotective soti nan tij yo nan Cistanche tubulosa. Yakugaku Zasshi 2007, 127, 49–51.

6. Koo, KA; Sung, SH; Park, OH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC Aktivite neuroprotective nan vitro nan glikozid fenilethanoid soti nan Callicarpa dichotoma. Planta Med. 2005, 71, 778–780.

7. Li, M.; Liu, RM; Solèy, AL; Wu, SJ; Liu, NN Separasyon ak pirifikasyon nan Rutin ak Acaciin soti nan Chinwa Herb Medsin Herba Cirsii pa konbinezon de résine adsorption makropore ak gwo vitès Counter-Kwomatografi aktyèl. J. Chromatogr. Sci. 2009, 47, 329–332.

8. Yin, H.; Zhang, S.; Luo, XM; Liu, YH Preparasyon izolasyon ak pirifikasyon nan de glikozid benzoxazinoid soti nan Acanthus ilicifolius L. pa gwo vitès kont-kouran chromatografi. J. Chromatogr. 2008, 1205, 177–181.

9. Peng, AH; Li, R.; Hu, J.; Chen, LJ; Zhao, X.; Luo, HD; Wi, HY; Yuan, Y.; Wei, YQ Flow vitès gradyan gwo vitès kont-kouran kwomatografi separasyon nan senk diterpenoids soti nan Triperygium wilfordii ak echèl-up. J. Chromatogr. 2008, 1200, 129–135.

10. Xie, J.; Deng, J.; Tan, F.; Su, J. Separasyon ak pirifikasyon nan echinacoside soti nan Penstemon barbatus (Can.) Roth pa resiklaj gwo vitès kont-kouran chromatografi. J. Chromatogr. B2010, 878, 2665–2668.

11. Li, L.; Tsao, R.; Yang, R.; Liu, C.; Young, JC; Zhu, H. Izolasyon ak pirifikasyon nan glikozid phenylethanoid soti nanCistanche deserticolapa gwo vitès kont-kouran chromatografi. Manje Chem. 2008, 108, 702–710.

12. Li, L.; Tsao, R.; Liu, ZQ; Liu, SY; Yang, R.; Young, JC; Zhu, HH; Deng, ZY; Xie, MWEN; Fu, ZH Izolasyon ak pirifikasyon nan acteoside ak isoacteoside soti nan Plantago psyllium L. pa gwo vitès kont-aktyèl chromatografi. J. Chromatogr. 2005, 1063, 161–169. Molekil 2012, 17 8284

13. Lei, L.; Yang, FQ; Zhang, TY; Tu, PF; Wu, LJ; Ito, Y. Preparasyon izolasyon ak pirifikasyon nan acteoside ak 2'-acetyl acteoside soti nan Cistanches salsa (CA Mey.) G. Beck pa gwo vitès kont-aktyèl chromatography. J. Chromatogr. 2001, 912, 181–185.

14. Lei, L.; Yang, FQ; Zhang, TY; Tu, PF; Wu, LJ; Chen, FK; Ito, Y. Preparasyon izolasyon ak pirifikasyon nan glikozid phenylethanoid soti nan ekstrè nan poupou nan chen beagle pa gwo vitès chromatografi kontrekouran. J. Liq. Chromatogr. Relat. Teknoloji. 2001, 24, 2187–2195.

15. Gao, SY; Feng, B.; Zhu, RN; Ma, JK; Wang, W. Preparasyon Izolasyon Twa Anthraquinones soti nan Rumex japonicus pa High-Speed ​​Counter-Current Chromatography. Molekil 2011, 16, 1201–1210.

16. Li, F.; Bai, YH; Wang, J.; Wei, J.; Yu, CY; Li, S.; Yang, WL; Han, CH Izolasyon ak pirifikasyon nan Oridonin soti nan plant la antye nan Isodon rubescens pa High-Speed ​​Counter-Current Chromatography. Molecules 2011, 16, 7949–7957.

17. Kobayashi, H.; Oguchi, H.; Takizawa, N.; Miyase, T.; Ueno, A.; Usmanghani, K.; Ahmad, M. New phenylethanoid glycosides soti nan cistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. I. Chem. Pharm. Toro. 1987, 35, 3309–3314.

18. Yoshizawa, F.; Deyama, T.; Takizawa, N.; Usmanghani, K.; Ahmad, M. Konstitiyan yo nan cistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. II. Izolasyon ak estrikti yon nouvo glikozid feniletanoid ak yon nouvo glikozid neolignan. Chem. Pharm. Toro. 1990, 38, 1927–1930.