Rekiperasyon selil iminitè natirèl yo ak chanjman ki pèsiste nan iminite adaptatif nan san periferik donatè plasma konvalesans yo nan uit mwa apre enfeksyon SARS-CoV-2 Pati 1

Résumé:

Yo te deja detekte chanjman ki pèsiste ak siyati iminitè inik nan san periferik donatè plasma konvalesans (CP) apeprè de mwa apre premye enfeksyon SARS-CoV-2 la. Atik sa a prezante rezilta analiz sekans 47 donatè CP nan yon tan medyàn uit mwa (ranje 7.5-8.5 mwa) apre enfeksyon, jan yo evalye sikometri koule.

Ak epidemi nouvo kouwòn nemoni epidemi an, pi plis ak plis moun te kòmanse peye atansyon sou enpak plasma konvalesans sou iminite. Plasma konvalesans se kounye a yon mwayen efikas pou trete nouvo nemoni kowonè. Li ka amelyore iminite pasyan yo, amelyore rezistans kò a, epi ede pasyan yo refè pi vit ke posib.

Plasma konvalesans se yon sibstans ki ekstrè nan plasma pasyan refè ak nouvo nemoni kowonè, ki gen yon gwo kantite antikò ak selil iminitè, ki ka ede sistèm iminitè a rekonèt ak atake viris la, kidonk jwe yon wòl antiviral. Se poutèt sa, plasma konvalesans ka amelyore iminite nan yon sèten limit ak amelyore rezistans kò a.

Kounye a, anpil lopital yo te kòmanse sèvi ak plasma konvalesans pou trete pasyan ki gen nouvo nemoni kardyovaskulèr, e yo te reyalize sèten efè guérison. Etid yo montre ke terapi plasma konvalesans ka redwi anpil tan entène lopital pasyan yo, soulaje kondisyon an epi redwi to mòtalite a. Se poutèt sa, nou ta dwe aktivman sipòte ak patisipe nan tretman an nan plasma konvalesans ede plis pasyan refè pi vit ke posib.

Anplis de sa, nan lavi chak jou, nou bezwen tou peye atansyon a ranfòse iminite nou an pou anpeche ensidan an nan maladi tankou nouvo nemoni kowonè. Pa egzanp, peye atansyon sou yon rejim ekilibre epi manje manje ki pi nourisan tankou legim, fwi, ak pwason; ranfòse egzèsis pou amelyore kapasite fizik ak iminite; peye atansyon sou ijyèn, lave men yo souvan, epi redwi risk pou yo enfeksyon.

Nan ti bout tan, plasma konvalesans gen yon enpak pozitif sou iminite, ki ka amelyore rezistans kò a nan yon sèten limit epi ede pasyan yo refè pi vit ke posib. Nou ta dwe aktivman sipòte ak patisipe nan tretman an nan plasma konvalesans, epi peye atansyon sou swen sante nan lavi chak jou pou kò nou yo pral an sante ak plen nan vitalite! Se konsa, an rezime, nou bezwen amelyore iminite nou an. Cistanche ka siyifikativman amelyore iminite paske polisakarid yo nan vyann lan ka kontwole repons iminitè a nan sistèm iminitè imen an, amelyore kapasite nan estrès nan selil iminitè, ak ranfòse efè bakterisid selil iminitè yo.

Klike sou sipleman cistanche deserticola

Enteresan, rezilta nou yo montre yon varyasyon enpòtan nan konpozisyon iminitè ki enpòtan nan mitan donatè CP yo. Konsènan iminite natirèl, tou de monosit ki pa klasik, ak granulosit CD11b- te konplètman refè nan uit mwa apre enfeksyon COVID-19. Monosit entèmedyè ak selil asasen natirèl (NK) te deja retabli nan evalyasyon de mwa a epi yo te rete estab. Konsènan iminite adaptasyon, polarizasyon selil Th1 ak Th2 ki gen rapò ak COVID--19-te rete nan menm nivo ak nan de mwa. Sepandan, nivo ki ba nan selil B total yo te detekte menm apre uit mwa nan enfeksyon.

Yon rediksyon pèsistan nan CD8 plis Tregs ak chanjman nan lòj selil NKT la te remakab tou. Donatè CP yo prezante yon peyizaj iminitè inik nan uit mwa apre enfeksyon COVID-19, ki karakterize pa restorasyon remakab nan eleman iminite natirèl yo ansanm ak yon anprent ki pèsiste SARS-CoV-2 nan selil yo. nan iminite adaptasyon an.

Mo kle:

SARS-CoV-2; COVID-19; donatè plasma konvalesans; profilage iminitè; restorasyon iminitè; 8 mwa.

1. Entwodiksyon

Maladi kowonaviris 2019 (COVID-19) koze pa transmisyon ayeryèn ki kapab fatal ak trè kontajye nan sendwòm respiratwa egi grav coronavirus 2 (SARSCoV-2). Gravite COVID-19 varye anpil pami moun ki enfekte, soti nan ka ki totalman san sentòm [1], rive nan kondisyon ki pi modere ki gen lafyèv, tous, ak fatig, ak nan ka ki pi grav ki soufri nan nemoni ki mennen nan sendwòm detrès respiratwa egi ak echèk milti-ògàn san kontrent, ki souvan fatal [2].

Ka sentòm COVID-19 karakterize pa yon repons iminitè sistemik ipè-enflamatwa, epi kounye a gen anpil prèv ki montre varyasyon nan gravite sentòm yo apre enfeksyon SARS-CoV-2 yo dirèkteman gen rapò ak anvan an. estati iminitè lame a [3–5]. Faktè ki gen rapò ak plis pwofil iminitè iminitè disfonksyonèl, ak konsekans, pi gwo risk pou mòtalite, ki gen ladan ogmante laj ak sèten kondisyon medikal kwonik kache, tankou dyabèt tip 2, kadyomiopati, obezite, maladi kwonik obstriktif poumon, ak maladi ren kwonik [6,7] .
Anpil rechèch sou COVID-19 te revele enfòmasyon enpòtan sou kaskad iminitè yo ak chanjman patikilye nan divès kalite iminitè ki akonpaye enfeksyon SARS-CoV-2 [3,4,8,9]. Sepandan, gen toujou enfòmasyon limite konsènan chanjman ki ka pèsiste nan sistèm iminitè lame a sou tan apre rezolisyon konplè enfeksyon an.

Dènyèman, li te montre ke eleman diferan nan memwa iminolojik SARS-CoV-2 ka gen diferan sinetik sou tan [9,10]. Pa egzanp, memwa anti-SARS-CoV-2 ak selil T cytotoksik yo sanble pi vit konpare ak iminite selil B yo, tandiske tou de selil B memwa yo ak nivo imunoglobulin (Ig)G kont pwoteyin Spike SARS-CoV-2. {8}} pèsiste pou omwen sis mwa apre COVID-19 aparisyon [10].

Nan yon kòwòt diferan, Breton et al. te montre ke selil T CD4 plis ak CD8 plis memwa santral yo diminye, men selil T antijèn espesifik yo te pèsiste nan sis mwa apre enfeksyon [11]. Kòm pou selil iminite natirèl, pwofil yo sanble yo depann de laj, ak chanjman nan monosit ak netrofil yo te obsève jiska ca. de mwa apre enfeksyon [12].

Dènyèman, nou te rapòte tou chanjman patikilye ki pèsiste ak siyati iminitè inik nan san periferik (PB) donatè plasma konvalesans (CP) nan apeprè de mwa apre premye enfeksyon SARS-CoV-2. Siyati iminitè sa yo te korelasyon tou de ak kapasite pasyan yo pou monte yon repons umoral pwoteksyon, sa vle di, yo pwodwi ase ak detekte anti-SARS-CoV-2 IgG ak/oswa IgA antikò, men tou ak gravite sentòm yo ki gen eksperyans. , ak donatè CP ki te deja entène lopital yo te mwens iminokonpetan pase donatè CP ki te fè eksperyans sentòm pi modere [13].
Apre menm apwòch la ak eksplore anprent alontèm sou pwofil iminitè donatè CP COVID-19-rekipere, nou prezante isit la rezilta analiz sekans 47 donatè CP nan yon tan medyàn uit mwa (ranje 7.5– 8.5 mwa) apre enfeksyon.

2. Materyèl ak Metòd

2.1. Seleksyon Patisipan yo

Rapò sa a gen ladann tès sekans donatè CP ki te patisipe nan yon etid faz 2 (NCT04408209) epi ki te bay echantiyon PB pè pou analize pwofil iminitè yo nan de ak uit mwa, apre enfeksyon ak SARS-CoV-2. Tout patisipan yo te enfekte pa SARS-CoV-2 epi yo te dyagnostike apre yo fin bay yon prelèvman nazofarinj pozitif ak/oswa oropharyngeal ak RT-qPCR, jan sa te dekri anvan [14].

Anvan don CP a, yo te gen de tès PCR negatif ak yon entèval omwen sèt jou. Dezyèm tès negatif la te fèt 1-7 jou anvan plasmafèz. Yo devlope tou antikò detektab anti-SARS-CoV-2 IgG kont pwoteyin nan domèn Spike 1 (S1) nan SARS-CoV-2 lè yo egzamine ak yon sansib ki disponib nan komèsyal, ak Food and Drug Administration apwouve anzim. -lyed immunosorbent assay (Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG, Lubeck, Almay), ki dekri an detay deja [14].

Kritè enklizyon yo enkli tou omwen 14 jou apre yon rekiperasyon konplè nan enfeksyon SARS-CoV-2 (pa gen okenn sentòm, rezolisyon konplè nan malfonksyònman ògàn ki te koze pa SARS-CoV-2), donatè gason san istwa transfizyon. , ak fi ki pa gen yon istwa transfizyon oswa gwosès, yon konte san nòmal konplè, tès serolojik negatif pou viris epatit B (HBV), viris epatit C (HCV), viris iminodefisyans imen (VIH), laboratwa rechèch maladi veneryen (VDRL), viris lenfotwòp selil T imen (HTLV)-1 ak negatif pou VIH, HBV, HCV ak tès anplifikasyon asid nikleyik, ak donatè yo satisfè tout kritè jeneral pou bay san an tèm de laj, kondisyon jeneral, nivo emoglobin, ak enpòtans. siy.

Yo te evalye dis moun ki an sante ki gen laj menm jan an (medyàn 47 ane, ranje-45 a 73 ane) ak sèks (6 gason/4 fi) tou epi yo te itilize kòm kontwòl nòmal. Sijè sa yo pa te gen okenn pwoblèm sante konnen epi yo te gen yon tès PCR negatif pou SARS-CoV-2 nan prelèvman nasopharyngeal nan moman an pran echantiyon san.

Tout patisipan yo te enfòme sou etid sa a epi yo te bay konsantman enfòme siyen dapre deklarasyon èlenki ak komite etik lokal la.

Tout pwosedi etid yo te pote soti nan deklarasyon Helsinki (18yèm Asanble Asosyasyon Medikal Mondyal la), amannman ki vin apre li yo, direktiv règleman yo grèk, osi byen ke direktiv yo Bon Pratik klinik (GCP) defini pa Konferans Entènasyonal Harmonizasyon an. Pwotokòl la te apwouve pa Komite Etik "Alexandra" Lopital Jeneral, Atèn, Lagrès (Ref No 245/16 Avril 2020).

2.2. Flow Cytometry analiz

Echantiyon PB yo te kolekte nan tib koleksyon san ki kouvwi EDTA (BD Vacutainer, BD Biosciences, San Jose, CA, USA; #367841) epi yo te trete nan yon èdtan apre koleksyon an apre pwotokòl Stain-Lyse-no-Wash (BD Biosciences). ). An patikilye, pou chak echantiyon PB, yo te transfere 100 µL nan total san antikoagulasyon nan yon tib FACS 12 × 75 mm wonn-an polistirèn ak tache ak yon panèl ki konsiste de antikò anti-moun ki konjige ak fluorofò ki apwopriye kont makè sifas CD{{ 12}}PerCP, CD4-BV510, CD8-PE, CD14-BV605, CD16-APC, CD25-PECF594, CD{{21} }APCH7, CD56- APCR700, CD183-BV421, CD194-BV650, CD196-BB515 ak CD11b-BV786 (tout soti nan BD Biosciences), nan tanperati chanm (RT). ) pou 20 min pwoteje kont limyè. Anplis de sa, yo te ajoute 450 µL nan 1 × FACS Lysing Solution, epi selil yo te enkube pou yon lòt 10 minit nan RT pwoteje kont limyè. Tout echantiyon yo te analize sou yon 3-lazè BD FACSCelesta (BD Biosciences), epi 100,000 evènman yo te akeri pou chak echantiyon.

12-Panèl koulè yo refere isit la te konsiste de panèl referans nou an pou analiz fenotipik donatè CP yo nan de mwa apre enfeksyon e li te pèmèt pou idantifikasyon ak analiz 24 popilasyon iminitè diferan, ki gen ladan selil B, CD3 plis selil T. , asasen natirèl (NK) selil, monosit, granulosit, ak sous-ensembles yo apre estrateji gating ki te dekri deja [13].

Pou yo ka konsistan avèk analiz pakèt anvan nou yo, nou te swiv yon pèfòmans regilye ak vaste konfigirasyon. Yo te fè konfigirasyon sitomèt la lè l sèvi avèk selil kontwòl san tach pou konfigirasyon vòltaj PMT ki apwopriye yo epi ak BD CompBeads Set anti-sourit Igκ (BD Biosciences) pou konpansasyon entè-chanèl fluoresans spillover. Anplis, yo te aplike yon pèfòmans chak jou CS&T anvan chak akizisyon pou verifye kondisyon ki estab sitomètr la.

Finalman, yo te aplike yon lòt etap normalisation chak jou lè l sèvi avèk pèl lakansyèl (Spherotech Inc, Lake Forest, IL, USA) pou tcheke estabilite lazè atravè kontwòl fluctuations PMT pou detekte entansite fliyoresan vize pèl yo.

2.3. Analiz estatistik

Done yo te analize lè l sèvi avèk lojisyèl GraphPad Prism 8.0.2 (San Diego, CA, USA). Rezilta yo eksprime kòm vle di ± devyasyon estanda (SD). Pou analiz estatistik, yo te itilize yon tès t Student pou konpare kontwòl ak donatè CP uit mwa apre enfeksyon SARSCoV-2, alòske chanjman nan donatè CP nan de ak uit mwa apre enfeksyon yo te konpare lè l sèvi avèk tès t Student la. p-valè < 0.05 yo te konsidere estatistik enpòtan.

3. Rezilta yo

3.1. Karakteristik Donatè CP yo

Analiz prezan an te enkli 47 donatè CP ak echantiyon PB pè yo te kolekte nan yon mwayèn de ak uit (ranje 7.5-8.5) mwa apre enfeksyon COVID-19. Karakteristik klinik patisipan yo prezante nan Tablo 1.

3.2. Profilage iminitè a nan uit mwa apre enfeksyon SARS-CoV-2 pa gen rapò ak karakteristik klinik donatè CP yo.

Konfòm ak analiz anvan nou an nan de mwa apre SARS-CoV-2 enfeksyon [13], nan uit mwa, nou te obsève yon varyasyon enpòtan nan konpozisyon subset iminitè ki enpòtan nan mitan donatè CP yo. Varyasyon sa a depase karakteristik demografik ak klinik kòwòt nou an, paske pa gen okenn diferans enpòtan ki ka asosye ak sèks, laj, kantite sentòm ki gen eksperyans, oswa valè antikò espesifik anti-SARS-CoV-2-serik kont S1 viral. antijèn.

Nan nòt, pa gen okenn diferans enpòtan yo te jwenn nan pwofil iminitè a nan donatè CP ki te deja entène lopital ak moun ki te gen sentòm pi modere epi yo pa t satisfè kritè yo pou admisyon nan inite swen entansif (ICUs) (done yo pa montre). Se poutèt sa, nou pa t 'plis sibdivize donatè CP nan plis kategori nan analiz ki vin apre nou an nan dinamik yo nan pwofil iminitè sou tan (Tablo 2).

3.3. Rekiperasyon iminite natirèl nan uit mwa apre COVID-19

Nou te evalye plis pou evalye dinamik Des iminitè an patikilye lè nou konpare konpozisyon ki enpòtan nan divès kalite iminitè sou tan. Analiz de gwo popilasyon iminitè ki fè pati zam iminitè natirèl la ak bra adaptatif iminite yo ak subpopulations yo prezante nan Figi 1 ak 2. An jeneral, rezilta nou yo montre ke nan uit mwa apre enfeksyon, majorite sous-ensemble selil iminitè natirèl yo te refè. nan nivo ki sanble ak sa yo ki nan gwoup kontwòl la, kontrèman ak selil nan iminite a adaptasyon, kote espesifik lenfosit sous-ensembles te montre prèv ki pèsistan deklanchman alontèm.

Konsènan gwoup monosit yo, nou te deja rapòte yon ogmantasyon {{0}}pliye nan monosit entèmedyè ak yon ogmantasyon 2.2-pliye nan lòj ki pa klasik la (nan depans lan nan monosit klasik) pandan la. aktif COVID-19 maladi [11]. Nan de mwa apre enfeksyon, nivo monosit entèmedyè ak klasik yo te montre prèv rekiperasyon e yo te pratikman konplètman restore pa uit mwa apre enfeksyon. Pousantaj yo nan monosit ki pa klasik, ki te rete ogmante nan de mwa apre enfeksyon (pousantaj mwayèn - 1.16 pousan kont 0.27 pousan nan gwoup kontwòl la, p=0.01), tou konplètman refè pa uit mwa epi li te rive nivo gwoup kontwòl la.

Obsèvasyon menm jan an te anrejistre pou granulosit. Malgre ke pousantaj total yo nan uit mwa yo te yon ti kras redwi konpare ak kontwòl, nan uit mwa apre enfeksyon, prévalence de CD11b plus ak CD11b-subsets yo te siyifikativman diminye ak ogmante, respektivman, sa ki lakòz yon rapò CD11b plis / CD11b-granulocyte menm jan an. ak donatè nòmal ki an sante yo, an konparezon ak ekspansyon granulosit deregleman nan evalyasyon an de mwa [13].

Kòm pou selil NK, analiz nou yo pa t montre okenn fluctuation enpòtan ant de ak uit mwa, apre enfeksyon. Pousantaj total de selil NK yo ak sous-ensembles yo te prèske retabli nan de mwa apre rezolisyon maladi aktif, e menm pwofil la te wè tou nan uit mwa, ak pousantaj ki rete nan nivo nòmal.

For more information:1950477648nn@gmail.com