Ekstrè pèl soluble bay efikas po eklèsi pa antagonize Endothelin

Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Jing Wang MD1|Zhixiong Chen MSc2|Yaojia Lu BSc2|Lihua Zhang BSc3|Jiahuan Mo BSc2|Fumin Cao BSc2|Min Xie BSc3|Xinzhong Shen BSc3|Anquan Yang BSc3

Résumé

Background:Ensidans la nan maladi pigmantasyon po a te sou ogmantasyon nan globalman. Sa a mande pou pi an sekirite ak pi efikas aktualite eklèsisman po ak pwodwi pou retire freckle. Nan etid sa a, nou te sipoze saSoluble Pearl Extrait(SPE) ka posede endothelin antagonize konpoze ak bon poblanchimanefè.

Objektif: (a) Pou detèmine efè ak mekanis nanSPEsou selil melanom B16 ki trete ET-1-. (b) Pou eksplore efè sitotoksik SPE sou selil melanom B16 yo.

Metòd:Yo te fè tès CCK-8 pou detèmine kijan SPE ak ET-1 afekte pousantaj pwopagasyon selil melanom B16 yo, yo te fè tès NaOH lysis pou quantifier kontni melanin pandan aktivite tirozinaz la te detèmine pa oksidasyon DOPA. tès. Nivo ekspresyon mRNA ak pwoteyin nan TYR ak TRP-1 yo te detèmine pa tès qRT-PCR ak tès Western blot, respektivman.

Rezilta:Nou jwenn saSPEnan 0.1 ak 1 ug/mL konsantrasyon pa gen okenn efè sou pwopagasyon selil yo ak 10 nmol/L ET-1 ankouraje pwopagasyon selil B16 melanom. Miyò, selil B16 melanom trete ak 10 nmol/L ET-1 te montre siyifikativman pi wo sentèz melanin, aktivite tirozinaz, TYR, ak nivo ekspresyon mRNA TRP-1 konpare ak selil ki pa trete yo. Nòt, efè tretman 10 nmol/L ET-1 te aboli ak SPE nan yon fason ki depann de dòz la.

Konklizyon:SPE inibit endothelin kidonk san danje epi efektivman eklèsi po a pa antagonize endothelin. Anplis, SPE an sekirite epi efikas.

MO KLE:Selil melanom B16, endotelin-1, ekstrè pèl soluble,blanchiman

Cistanche herbase yon engredyan blanchi po.

1|ENTWODIKSYON

Nan dènye ane yo, pi nouvo ak efikas poblanchimanpwodui kosmetik pou itilize ekstèn yo te mete sou mache a. Sa a se atribiye a devlopman ekonomik ak chanje bezwen fòm nan tout moun nan tout jenerasyon. Po a kounye a itilizeblanchimanajan yo enkli idrokinòn, asid kojik, fosfolipaz D1, plasenta, ak vitamin A. Maladi pigmantasyon po yo sitou asosye ak pwodiksyon melanin. Li se sentèz atravè yon pwosesis inisye pa konvèsyon nan tirozin nan dopa katalize pa tirozinaz. Dopa inisye yon seri reyaksyon byochimik konplèks ki mennen nan sentèz melanin. Mekanis blanchiman nan asid dihydro aspèj ic, 1 hydroquinone, ak asid kojik enplike nan anpèchman nan aktivite tirozinaz, ki se anzim nan limite pousantaj nan sentèz melanin.2 Nan ​​fè sa, ajan sa yo diminye pwodiksyon an nan melanin ki lakòz blanchiman po. 3 Kontrèman, fosfolipaz D1, plasenta, ak asid retinoik aji nan diminye kantite sentèz tirozinaz.4 Malgre ke ajan sa yo reyalize kèk nivo blanchiman po, mekanis blanchiman yo pa klè. Anplis, yo toksik epi yo pran plis tan pou yo lakòz blanchiman po.

Se poutèt sa enperatif jwenn po pi an sekirite ak pi efikasblanchimanajan yo. Rechèch sou blanchiman po te peye yon prim segondè nan entèraksyon ki genyen ant sitokin ak melanosit kòm yon avni yo devlope ajan efikas po blanchiman. Keratinosit sekrete cytokines tankou endothelin (ET) lè yo ekspoze a radyasyon iltravyolèt. Sitokin sa yo enfliyanse migrasyon melanosit, devlopman dendritik, ak pwodiksyon melanin.5 Kòm sa yo, antagonize sit aksyon sa yo sitokin ap mennen nan po pi blan.6 Shi et al (2011) rapòte ke resveratrol, yon nouvo antagonist endothelin, blanchi a. po atravè yon mekanis ki enplike anpèchman aktivite tirozinaz nan melanosit B16.7 Yang et al (2000) te jwenn ke resveratrol vize manbràn melanosit. Sa vle di ke li sèlman pase nan manbràn melanosit la ak manbràn melanozòm lan pou rive nan sit kote li anpeche pwodiksyon melanin.8 Tirozinaz sitiye nan melanozòm nan, epi konsa, inibitè li yo dwe travèse kat kouch (strat korne a, epidèm nan fon, melanosit manbràn, ak manbràn melanozòm lan) pou bloke efè li.9 Resveratrol sèlman depase de kouch (strat korne a ak epidèm fon an) pou anpeche aktivite tirozinaz la.10 Sa vin pi kout peryòd blanchiman an.

Harley (1993) te jwenn ke bèl grenn pèl nan dlo dous Scottish, Ostralyen, ak dlo lanmè Sri Lankan yo te fè nan konpozisyon chimik menm jan an, se sa ki, kabonat kalsyòm, 91.72 pousan, matyè òganik, 5.94 pousan, dlo, 2.23 pousan, ak lòt sibstans, {{ 7}}.11 pousan .11 Yon lòt kote, Zhang et al (2018) te jwenn ke ekstrè pèl bay efè antioksidan enpòtan nan vitro.12,13 Yang et al (2016) te jwenn ke ekstrè pèl ka anpeche aktivite tirozinaz nan selil B16F10 kidonk diminye a. pwodiksyon melanin.14 Sa a te endike ke pèl ekstrè ka posede poblanchimanefè, men mekanis ki enplike yo pa te etidye. Isit la, nou postule saSPEantagonize endothelin chanje sentèz melanin ak aktivite tirozinaz nan selil melanom B16 yo. Rezilta nou yo montre ke ekstrè pèl idrosolubl antagonize endothelin ki lakòz blanchiman po.

2|MATERYÈL AK METÒD

2.1|Preparasyon ak analiz konpozisyon nan ekstrè pèl idrosolubl (SPE)

Poud pèl te fonn nan asid laktik, epi pH melanj lan te ajiste a 7.0 ak PBS. Idwoliz anzimatik te inisye ak adisyon nan proteaz, epi ekstrè a te filtre ak 10 μm papye filtre kalitatif. Supernatant la te jwenn ak lyofilize pou prepare ekstrè pèl idrosolubl.

2.2|Analiz de konpozisyon poud lyofilize a

Yon ti tan, kontni an imidite nan laSPEte mezire ak metòd siye atmosferik la. Yo te chofe yon kantite echantiyon espesifik nan yon fou siye nan 95-105 degre pou 3 èdtan epi yo te peze. Echantiyon yo te repete cheche pou jwenn yon pwa konstan. Kontni imidite a te detèmine kòm diferans lan nan mas anvan ak apre chofaj. Echantiyon an te boule sa ki lakòz fòmasyon nan yon sibstans inòganik rele sann. Metòd la peze boule te itilize pou mezire bon jan kalite sann, nan ki diferans lan nan bon jan kalite anvan ak apre boule te konsidere kòm kontni an sann. Metòd Kjeldahl te anplwaye pou detèmine kontni pwoteyin SPE a. Kontni peptide yo te estime jan sa dekri anvan an.15 Yo te detèmine kontni an nan polisakarid lè l sèvi avèk metòd anthranone-sulfirik asid la.

sistanchekstrè

2.3|Kilti selilè

Selil melanom B16 murin yo (jantiman bay Stem Cell Bank, Chinese Academy of Sciences) yo te kiltive nan Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ki gen 10 pousan serom fetis bovin ak 1 pousan penisilin/streptomycin nan yon enkibatè (BB150 Thermo). Fisher Scientific) mete sou 37 degre ak 5 pousan CO2. Apre 3 jou nan kilti, selil yo te nan yon eta tou pre-fusion ak fondamantalman gaye nan tout plat la. Selil yo te lave ak salin tanpon fosfat (PBS) epi yo te pase nan dijere ak 0.25 pousan tripsin. Selil yo te konte lè l sèvi avèk yon plak konte selil ak sispansyon selil yo prepare nan konsantrasyon apwopriye. Sispansyon selil yo te kiltive nan yon enkibatè selil pou eksperyans ki vin apre yo

2.4|Deteksyon pwopagasyon selil apre tretman ak SPE ak ET-1 pa tès CCK-8

Selil nan faz kwasans logaritmik yo te kiltive nan {{0}}plak byen nan yon konsantrasyon 1 × 104 selil/mL nan yon enkibatè ki mete nan 37 degre ak 5 pousan CO2 pou 24 èdtan. . Lè sa a, yo te ajoute diferan konsantrasyon nan SPE ({{10}}, 0.01, 0.1, 1, ak 10 ug/mL) nan pwi yo epi kite yo kanpe pou 24 èdtan. Yo te ajoute 10 pousan nan twous konte selil-8 (CCK-8) reyaktif (Jian Cheng Bioengineering Co.) nan chak pi pou mezire pousantaj pwopagasyon selil yo. Yo te li absorbans chak pi nan yon longèdonn 490 nm lè l sèvi avèk yon lektè mikroplak. Chak gwoup te teste kòm twa kopi. Efè ET-1 (0.1, 1, 10, ak 100 nmoL) sou pwopagasyon selil yo te evalye apre menm pwotokòl la. Lè sa a, selil yo te divize an twa gwoup: gwoup kontwòl la (pa te bay okenn tretman), gwoup ET-1 (selil yo te trete ak 10 nmoL ET-1 pou 24 èdtan), akSPEgwoup (selil yo te trete ak 10 nmoL ET-1 pou 24 èdtan epi yo te trete ak 0.1, 1 ug/mL SPE pou 24 èdtan).

cistanche tubulosase yon inibitè tirozinaz

2.5|Tès aktivite tirozinaz

10 μL selil (trete yon fason diferan) te simen nan chak pi nan yon plak 96-byen nan yon dansite selil (5-10) × 104 selil/mL, epi yo te ajoute 100 μL nan mwayen kwasans lan nan chak byen. Lè sa a, selil yo te pre-kiltive nan yon enkibatè mete nan 37 degre ak 5 pousan CO2 pou 24 èdtan. Plak yo te santrifuje nan 2000 wotasyon pou chak minit pou 2 minit, epi yo te jete supernatant la. Selil yo te lave twa fwa ak PBS apre, epi 50 μL nan 1 pousan Triton X -100 solisyon (Jian Cheng Bioengineering Co.) te ajoute nan chak pi. Selil yo te imedyatman estoke nan -80 degre pou 30 minit epi answit dekonjle nan tanperati chanm pou reyalize rupture konplè nan selil yo. Lè sa a, selil yo te prechofe nan 37 degre pou 5 minit, epi yo te ajoute 10 μL nan 1 pousan L -DOPA solisyon. Selil yo te kite kanpe a 37 degre pou 2 èdtan, epi absòbe plak la te mezire nan yon longèdonn 490 nm lè l sèvi avèk yon lektè mikroplak.

2.6|Tès kontni Melanin

Selil yo te kiltive nan {{0}}plak pui nan yon dansite de (5-10) ×104 pou chak pi. Chak pi gen 2 mL mwayen kwasans. Selil yo te enkube pou 24 èdtan nan yon enkibatè mete nan 37 degre ak 5 pousan CO2. Sipènatant la te jete, epi melanosit yo te trete ak 0.25 pousan tripsin pou 3 minit. Yo te ajoute 2 mL 10 pousan mwayen DMEM ki gen FBS pou sispann reyaksyon an. Melanosit yo te kolekte nan yon tib santrifujeur 15 mL, santrifuje nan 1000 wotasyon pou chak minit pou 5 minit, epi supernatant la jete. Melanosit yo te lave ak PBS epi mete yo nan tib ki gen 500 μL nan solisyon etanòl / etè melanje nan rapò a nan 1: 1 ak melanje byen pa souke. Yo te kite melanj lan kanpe nan tanperati chanm pou 30 minit ak Lè sa a, santrifuje nan 3000 wotasyon pou chak minit pou 5 minit. Sipènatant la te jete, epi 300 μL NaOH 1N (ki gen 10 pousan DMSO) te ajoute nan selil yo. Yo te kite melanj sa a reyaji nan yon beny dlo mete nan 80 degre pou 40 minit konplètman fonn melanin la. Lè sa a, yo te transfere 200 μL nan melanin ki fonn nan yon plak 96-byen, epi yo te mezire absòbe a nan yon longèdonn 405 nm lè l sèvi avèk yon lektè microplate.

2.7|Kantite analiz PCR an tan reyèl (qRT-PCR).

RNA total yo te ekstrè nan selil twa gwoup yo (Kontwòl, ET{0}}, akSPEgwoup yo) lè l sèvi avèk twous RNAiso Plus (TaKaRa Bio) epi transkri anvers nan cDNA lè l sèvi avèk Twous reyaktif PrimeScript™ RT (TaKaRa Bio). yo te fè tès qRT-PCR la pou detekte ekspresyon -aktin nan chak echantiyon. Sa a te fè lè l sèvi avèk lank vèt SYBR la. Yo montre sekans premye 16 yo (TaKaRa Bio) nan tablo 1. Kondisyon PCR yo se te yon tanperati inisyal denaturasyon ki te fikse nan 95 degre pou 30 segonn, 40 sik denaturasyon, tanperati rkwit mete nan 95 degre pou 5 segonn, ak 60 degre pou 34. segonn, respektivman. Sa a te fèt nan yon StepOne plis sistèm PCR an tan reyèl (Applied Biosystems). Rezilta qRT-PCR yo te analize epi eksprime kòm ekspresyon mRNA relatif ki baze sou valè CT (sik papòt) ki te konvèti pita nan chanjman pliye.

2.8|Analiz Western blot

Pwoteyin total yo te ekstrè nan selil yo lè l sèvi avèk Radyo-Imunoprecipitation Assay (RIPA) (Solarbio Science & Technology Co., Ltd.). Konsantrasyon ekstrè pwoteyin yo te detèmine ak twous Bicinchoninic Acid Assay (BCA) (Solarbio Science & Technology Co., Ltd.). Lè sa a, pwoteyin yo te separe pa sodyòm dodecylsulphate polyacrylamid gel electrophoresis (SDS-PAGE), ak bann rezilta yo transfere elektwoforetik sou yon manbràn Polyvinylidene Fluoride (PVDF). Lè sa a, manbràn an te bloke ak 5 pousan poud lèt ekreme ak enkubasyon ak antikò kont TYR, TRP -1, ak -aktin (Santa Cruz Biotechnology) nan 4 degre pou 24 èdtan. Apre sa, yo te enkube manbràn nan ak antikò segondè (Goat Anti-Mouse IgG Abmart) pou 1 èdtan nan tanperati chanm. Gwoup pwoteyin yo te detekte lè l sèvi avèk chemiluminescence améliorée (ECL) (Solarbio Science & Technology Co., Ltd.). Te analiz analiz teren an fèt lè l sèvi avèk yon sistèm analiz Image J. -Actin te itilize kòm referans entèn nan analiz ekspresyon pwoteyin. Echantiyon yo te kouri kòm replike endepandan repete twa fwa pou chak gwoup.

2.9|Analiz estatistik

Analiz estatistik yo te fèt lè l sèvi avèk GraphPad prism8 ware mou. Diferans gwoup yo te konpare lè l sèvi avèk analiz yon sèl-fason nan divèjans (ANOVA), ak rezilta yo prezante kòm vle di ± SD P<.05 was="" considered="" statistically="">

cistanche pou vann: cistanche se yon serom blanchi

3|REZILTA

3.1|Analiz konpozisyon SPE

Karakterizasyon chimik te montre saSPEte genyen yon kontni imidite nan 6.03 ± 0.16 pousan, sann kontni nan 1.55 ± {{10}}.11 pousan, kontni peptide nan 7.52 ± {{16 }}.03 pousan, kontni pwoteyin nan 54.12 ± 0.18 pousan, ak kontni polisakarid nan 0.09 ± 0.005 pousan. Rezilta sa yo endike ke pwoteyin yo te pi abondan nan matyè òganik nan SPE.

3.2|Efè SPE sou pwopagasyon selil melanom B16

Apre selil melanom B16 yo te trete ak diferan konsantrasyon (0, 0.{01, 0.1, 1, ak 10 ug/mL) nan SPE pou 24 èdtan, yo te evalye pwopagasyon selil la pa tès CCK-8 (Figi 1A). Nou te jwenn pwopagasyon selil B16 melanom trete ak 0.01 ug/mL SPE te pi wo pase gwoup vid la (P).<.01). 0.1="" and="" 1="" μg/ml="" spe="" had="" no="" effect="" on="" the="" proliferation="" of="" the="" cells.="" however,="" 10="" μg/ml="" of="" spe="" significantly="" inhibited="" the="" proliferation="" of="" b16="" melanoma="" cells="" (p=""><.01). thus,="" 0.1="" and="" 1="" μg/ml="" of="">SPEte itilize nan eksperyans ki vin apre. Sou baz konsiderasyon sekirite, kòm yon eleman natirèl nanblanchimanpwodui kosmetik, SPE pa toksik pou selil nan de konsantrasyon sa yo; konsa, li an sekirite nan yon sèten mezi.

3.3|Efè ET-1 sou pwopagasyon selil B16 melanom

Selil melanom B16 yo te trete ak diferan konsantrasyon ET-1 pou 24 èdtan, epi pwopagasyon selil yo te evalye pa yon tès CCK-8. Miyò, tretman selil B16 melanom ak 0.1, 1, ak 10 nmol/L ET-1 ankouraje pwopagasyon nan yon fason ki depann de konsantrasyon, ak 10 nmol/L ET{{12} } pwodui to pwopagasyon ki pi wo a (P<.001). by="" contrast,="" 100="" nmol/l="" of="" et-1="" decreased="" the="" proliferation="" of="" cells="" (figure="" 1b).="" therefore,="" 10="" nmol/l="" was="" used="" in="" subsequent="">

3.4|SPE inibit aktivite Tyrosinase nan selil melanom B16

Pou plis eksplore mekanis inhibition nanSPEsou sentèz la nan melanin, nou analize efè li sou anzim nan limite pousantaj (tirosinaz) nan pwosesis la nan sentèz melanin. Aktivite tirozinaz nan selil yo te detekte pa metòd oksidasyon L-dopa. Selil melanom B16 ki te trete ak 10 nmol/L ET-1 te montre siyifikativman pi wo aktivite tirozinaz intraselilè konpare ak selil ki pa trete (P <.01). sepandan,="" aktivite="" tirozinaz="" nan="" selil="" trete="" ak="" 0.1="" ug/ml="" ak="" 1="" ug/ml="" tretman="" spe="" te="" pi="" ba="" pase="" nan="" selil="" ki="" pa="" trete="" (p=""><.05, p=""><.01). rezilta="" sa="" yo="" montre="" ke="" spe="" inibi="" aktivite="" tirozinaz="" nan="" yon="" fason="" konsantrasyon-depandan="" (figi="">

3.5|SPE inibit sentèz melanin nan selil melanom B16

Nou te teste plis si efè SPE sou pwodiksyon melanin nan selil melanom B16 te medyatè pa ET-1 lè l sèvi avèk metòd liz NaOH. Rezilta yo te montre ke kontni melanin nan selil melanom B16 yo te ogmante siyifikativman apre tretman ak 10 nmol/L ET-1 konpare ak gwoup kontwòl la (P).<.01). however,="" the="" melanin="" content="" in="" cells="" treated="" with="" the="" 0.1="" μg/ml="" and="" 1="" μg/ml="" of="" spe="" was="" significantly="" lower="" than="" in="" cells="" of="" the="" control="" group.="" moreover,="" the="" inhibitory="" effects="" of="">SPEsou pwodiksyon melanin yo te depann de dòz la. Efè SPE sou kontni melanin ak aktivite tirozinaz yo te sanble (Figi 2B). Etandone ke 0.1 ug/mL ak 1 ug/mL nan SPE pa t 'chanje pwopagasyon selil B16 melanom, diminisyon nan kontni an melanin nan de konsantrasyon sa yo ka rive nan mekanis enkoni.

3.6|Efè SPE sou nivo mRNA TYR ak TRP-1

Mekanis kote SPE te chanje efè ET-1 sou selil melanom B16 yo te detèmine lè yo mezire nivo mRNA TYR ak TRP-1 nan selil ki te resevwa diferan tretman. Nivo mRNA TYR ak TRP-1 nan selil melanom B16 yo te siyifikativman pi wo (P<.01 and="" p=""><.001, respectively)="" after="" treatment="" with="" 10="" nmol/l="" et-1="" compared="" to="" cells="" of="" the="" control="" group.="" interestingly,="" spe="" treatment="" effectively="" inhibited="" the="" expression="" of="" tyr="" and="" trp-1="" mrna="" (p=""><.05, p=""><.05 for="" 0.1="" μg/ml,="" and="" p="" <="" .01,="" p="" <="" .01="" for="" 1="" μg/ml,="" respectively).="" altogether,="" these="" results="" show="" that="" treatment="" with="">SPEanpéché nivo ekspresyon TYR ak TRP-1 mRNA nan yon fason ki depann de konsantrasyon.

3.7|Efè SPE sou nivo pwoteyin TYR ak TRP-1 nan selil melanom B16 yo

Western blot te detekte ekspresyon pwoteyin TYR ak TRP{0}} nan selil melanom B16. Nou te jwenn pi wo nivo pwoteyin TYR ak TRP-1 nan selil melanom B16 trete ak 10 nmoL ET- 1 konpare ak gwoup kontwòl la (P<.05 and="" p=""><.01, respectively).="" this="" indicated="" that="" 10="" nmol/l="" et-1="" promoted="" the="" synthesis="" of="" melanin="" in="" the="" cells.="" this="" indicates="" that="" et-1="" may="" promote="" the="" synthesis="" of="" melanin="" by="" activating="" tyr="" and="" trp-1="" signaling="" pathways.="" in="" contrast,="" cells="" (treated="" with="" 10="" nmol="" et-1="" for="" 24="" hours="" and="" then="" treated="" with="">SPEpandan 24 èdtan) te gen nivo pwoteyin ki pi ba anpil nan TYR ak TRP -1 (P<.001 and="" p=""><.001, respectively)="" than="" cells="" treated="" with="" 10="" nmol/l="" et-1.="" this="" indicated="" that="" spe="" antagonized="" the="" effect="" of="" et-1="" thereby="" inhibiting="" melanin="" synthesis="" (figure="">

4|DISKISYON

Endothelin (ET) se yon peptide natirèl byoaktif sentèz pa selil andotelyal nan kò imen an. Li gen twa izomè: ET{{0}}, ET{-2, ak ET-3 ki siyal atravè twa reseptè ET: ETA, ETB, ak ETC.17 ETA ak ETB se la. reseptè prensipal yo eksprime nan sistèm ET imen an.18 ET soti nan keratinosit lè ekspoze a radyasyon iltravyolèt B (UVB). Lè ET mare nan reseptè melanosit, li ankouraje sentèz ADN ak ogmante aktivite tirozinaz. Sa a ankouraje pwopagasyon rapid nan melanosit ak sentèz melanin.19 ET-l ankouraje pwopagasyon melanosit, fòmasyon dendritik, adezyon, ak migrasyon.20 Isit la, nou te jwenn ke 0.1, 1, 10, ak 100 nmol/L ET-1 siyifikativman ankouraje pwopagasyon selil yo. Pwopagasyon an te pi wo nan 10 nmol/L ET-1 ki konsistan avèk rezilta yo rapòte pa Geng et al (2011), ki te jwenn ke ET-1 amelyore pwopagasyon ak sentèz melanin nan melanosit po alpaka kiltive. 21 Jèn TYR ak TRP-1 jwe yon wòl nan pwodiksyon melanin. Vreman vre, yon etid anvan te jwenn ke efè endothelin-1 sou aktivite tirozinaz yo medyatè pa reseptè ETA.22 10 nmol/L nan tretman ET{-1 nan selil melanom B16 ogmante aktivite tirozinaz ak kontni melanin. . Rezilta qRT-PCR te revele ke nivo mRNA TYR ak TRP-1 nan selil yo trete ak 10 nmol/L ET-1 yo te pi wo pase nan gwoup kontwòl la. Sa a te konfime ke ET-1 ankouraje pwodiksyon melanin.

An plis,SPEanpeche efè endothelin sou selil melanom B16. Nan konsantrasyon 10 ug/mL, li te egzèse efè toksik e pakonsekan anpeche pwopagasyon selil B16 melanom yo. Sepandan, SPE pa t chanje pwopagasyon selil yo nan konsantrasyon 0.1 ak 1 ug/mL. Sepandan, nan yon konsantrasyon {{10}}.01 ug/mL, li siyifikativman ankouraje pwopagasyon selil yo lè yo konpare ak gwoup kontwòl la. Rezilta sa yo sijere ke SPE an sekirite nan konsantrasyon anba a 1 ug/mL. SPE anpeche pwodiksyon melanin ET-1-pwovoke nan konsantrasyon 0.1 ak 1 ug/mL nan yon fason ki depann de dòz la. Anplis, tretman ak 0.1 ak 1 ug/mL SPE te lakòz pi ba nivo TYR ak TRP-1 mRNA konpare ak gwoup kontwòl la. Anplis, efè inhibition SPE te depann de konsantrasyon. Analiz Western blot revele efè menm jan SPE nan tou de konsantrasyon (0.1 ak 1 ug/mL) sou nivo pwoteyin nan TYR ak TRP -1.

Nan melanosit, ET-1 mare nan reseptè Endothelin Receptor B (EDNRB) ki mennen nan aktivasyon fosfolipas C (PLC).23 Sa a plis idrolyse phosphatidylinositol diphosphate (PIP2) epi aktive pwoteyin kinaz C (PKC) konsa chanje. pèmeyabilite chanèl ion yo.24 Chanjman pèmeyabilite a mennen nan aktivasyon chanèl Ca2 plis ki depann sou vòltaj ak fosfolipaz A (PLA).25 Finalman, sa a aktive sentèz melanin.26 Isit la, mekanis kote SPE te antagonize ET{{ 8}} pou anpeche pwodiksyon melanin te sèlman etidye preliminèman. Kòm sa yo, ekspresyon nan reseptè a EDNRB kòm byen ke lòt aspè nan sentèz melanin tankou PKC, PKA, ak KIT27 merite plis envestigasyon.

Konpozan chimik prensipal yo nan poud pèl yo se kabonat kalsyòm ak pwoteyin, pandan ke lòt moun tankou porphyrin ak taurine gen mwens abondan.28 Ekstrè dlo a nan poud pèl sitou gen pwoteyin. Keratin difisil se pwoteyin prensipal la nan ekstrè dlo a. Sepandan, ekstrè dlo a ka genyen tou yon ti kantite eleman tras.29Modèn rechèch famasi sijere ke pèl ka ankouraje to metabolik kò imen an, ogmante viabilite selil epidèm yo, retade aje selil yo, ak anpeche pwodiksyon melanin. byen ke lòt efè famasi tankou freckle blanchiman ak dezentoksikasyon.30 Karakterizasyon chimik revele ke pwoteyin yo se biomolekil ki pi abondan nan kontni an nan matyè òganik nan SPE. Nou konsa ipotèz ke laSPEta genyen toublanchimanefè nan selil B16 melanom. Rezilta nou yo konfime ipotèz sa a.

Sa yo sesistanchtablèt poupo-blanchiman. Tanpri klike sou foto a epi jwenn detay yo.

5|KONKLIZYON AK PANDIK

ET{{0}} ankouraje pwopagasyon selil melanom B16 ak sentèz melanin lè li aktive chemen siyal TYR ak TRP-1 yo. SPE nan konsantrasyon 0.1 ak 1 ug/mL inibit sentèz melanin kidonk antagonize efè ET-1 san okenn efè sitotoksik sou selil B16 melanom. Tankou,SPEse yon antagonist endothelin potansyèl ki ka itilize kòm yon ajan san danje epi efikas pou eklèsi po.

REFERANS

1. Venditti A, Mandrone M, Serrilli M, et al. Dihydroasparagusic asid: aktivite antioksidan ak tirozinaz inhibition ak sentèz amelyore. J Agric Food Chem. 2013;61(28):6848-6855.

2. Jean-Paul O. Photoprotective pwopriyete melanin po. Brit J Dermatol. 2002;146(61):7-10.

3. Maeda K, Fukuda M. Invitro efikasite nan plizyè blanchiman konpozan kosmetik nan melanosit imen. J Soc Cosmet Chem. 1991;42(6):361-368.

4. Sato K, Morita M, Ichikawa C, Takahashi H, Toriyama M. Mekanis depigmantasyon nan tout-trans retinoic asid ak retinol sou selil B16 melanom. J Biosci Biotech Bioch. 2014;72(10):2589-2597.

5. Ching-Shuang W, Chia-Li Y, Chieh-Shan W, Lan Cheng-Che E, Hsin-Su Y. Narrow-band iltravyolèt-B stimul pwopagasyon ak migrasyon melanosit kiltive. J Exp Dermatol. 2004;13(12):755-763.

6. von Koschembahr AM, Swope VB, Starner RJ, Abdel-Malek ZA. Endothelin-1 pwoteje melanosit imen kont domaj ADN UV pwovoke lè li aktive chemen siyal JNK ak p38. J Exp Dermatol. 2015;24(4):269-274.

7. Shi XM, Yan ZM, Xie JH, Zhou HF, Li HX, Duan MX. Rechèch preliminar sou efè blanchi resveratrol. J Gou Parfen Cosmetics. 2011;10(05):37-39.

8. Yang LC, Wang F, Liu M, et al. Efè anti-endothelin-1 Cissus assamica. Chinese New Drugs J. 2000;12(07):455-458.

9. Serre C, Busuttil V, Botto JM. Regilasyon intrinsèques ak extrinsèques de melanogenesis po moun ak pigmentation. Int J Cosmet Sci. 2018;40(4):328-347.

10. Cabanes J, Chazarra S, Garcia-Carmona F. Kojic asid, yon ajan kosmetik blanchiman po, se yon inibitè ralanti-obligatwa nan aktivite katekolaz nan tirozinaz. J Pharm Pharmaco. 1994;46(12):982-985.

11. Kun GF, Stevenson CH. Liv pèl la. New York: Dover Publications; 1993:13-125.

12. Zhang LH, Shen YQ, Yang AQ, Mo JH, Chen ZX, Wang J. Etid sou aktivite antioksidan vitro nan poud lyofilize ekstrè pèl. J Flav Frag Cosm. 2018;13(04):26-29.

13. Yang YL, Chang CH, Huang CC, Liu HW. Efè anti-enflamasyon ak anti-apoptoz nan jèl ekstrè pèl sou UVB iradyasyon selil HaCaT. J Biomed Mater. 2015;26(Suppl 1): S139-S145.

14. Yang AQ, Wang J, Zhang LH, Mo JH, Chen ZX, Shen YQ. Efè a ekleraj nan ekstrè pèl sou melanosit nan vitro. J Pharma Biotechnol. 2016;23(2):146-149.

15. Lu W, Ren GP, ​​Song JM. Detèminasyon kontni nan idrolizat pwoteyin peptidesin. J Manje Sci. 2005;12(07):169-171.

16. Chia-Hua L. Ov-16 [4-(3,4-dihydroxybenzoyloxymethyl)phenyl-O- -D-glucopyranoside] inibit sentèz melanin pa reglemante ekspresyon de melanogenesis- jèn ak pwoteyin reglemante. J Exp Dermatol. 2011;20(9):743-748.

17. Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S, et al. Yon nouvo vasoconstrict ki pisan oswa peptide ki te pwodwi pa selil endothelial vaskilè yo. J Lanati. 1988;332:411-415.

18. Hou L, Pavan WJ, Shin MK, et al. Siyal selil otonòm ak selil ki pa otonòm atravè reseptè endotelin B pandan devlopman melanosit. J Devlope. 2004;131(14):3239-3247.

19. Imokawa G, Yada Y, Miyagishi M. Endothelins sekrete nan keratinosit imen yo se mitogen intrinsèques pou melanosit imen. J Biol Chem. 1992;267(34):24675-24680.

20. Tada A, Suzuki I, Im S, et al. Endothelin-1 se yon faktè kwasans parakrin ki modile melanogenesis nan melanosit imen epi ki patisipe nan repons yo nan radyasyon iltravyolèt. J Kwasans Selil Diferan. 1998;9(7):575-584.

21. Geng JJ, Zhang J, Mu XL, et al. Efè ET-1 sou pwoliferasyon ak sentèz melanin nan melanosit po alpaka nan vitro. Chinwa J Animal Veter Sci. 2011;42(07):932-938.

22. Monji A, Inoue H, Oshima H, et al. Tirozinaz endiksyon ak inaktivasyon nan melanosit nòmal kiltive imen pa endothelin -1. J Int J Tisi reyaji. 2005;27(2):41-49.

23. Takeshi S, Masashi Y, Tomoh M. Molekilè karakterizasyon reseptè endothelin. J Konsèy. 1992;13(3):103-108.

24. Georgia K, Ali B, Bou DG, Srivastava AK. Wòl modilatè nan sistèm oksid nitrique/cGMP nan repons siyal endothelin-1-pwovoke nan selil misk vaskilè lis yo. J Curr Cardiol Rev. 2010;6(4):247-254.

25. Sp H, Angela C. Endothelin siyal nan myosit kadyak la ak enpòtans fizyolojik li yo. J Curr Vasc Pharmacol. 2005;3(4):343-351.

26. Clouthier DE, Hosoda K, Richardson JA, et al. Defo kranyal ak kadyak krèt neral nan sourit endothelin-A reseptè ki manke. J Devlope. 1998;125(5):813-824.

27. Imokawa G, Yada Y, Kimura M, et al. Mekanis siyal nan mitogenesis endothelin-induit ak melanogenesis nan melanosit imen. Biochem J. 1996;314(Pt 1):305-312.

28. Zhang C, Xie LP, Huang J, et al. Yon fanmi pwoteyin matris roman k ap patisipe nan fòmasyon kad kouch prismatik nan zuit pèl. Pinctada fucata. Biochem Bioph Res Co 2006;344(3):735-740.

29. Wu WL, Zhang LP, Yang ZJ, et al. Eleman ak ultrastructure ak fòmasyon li yo nan pwa. J Mater Rep. 2011;025(021):79-85.

30. Shao DZ, Wang CK, Wang HJ, et al. Rezime: konparezon nan idratasyon, rezistans tirozinaz, ak aktivasyon antioksidan nan twa kalite poud pèl. Int J Cosmet Sci. 2010;32(5):396.