Etid sou analiz eleman ak aktivite antioksidan polisakarid ki soti nan Cistanche Deserticola Deserticola

Résumé: Nan papye sa a, sik net CLP1 ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola yo te jwenn nan èkstraksyon polisakarid la soti nan Cistanche deserticola deserticola ak pirifye polisakarid brit CLP nan Cistanche deserticola deserticola ak chromatografi kolòn seluloz DEAE. Kontni an nan sik total, asid uronic ak pwoteyin nan Cistanche deserticola brut polisakarid CLP, Cistanche deserticola net sik CLP1 ak Cistanche deserticola sik asid CLP2 yo te detèmine pa optik spectre iltravyolèt, ak pwa molekilè ak konpozisyon monosakarid nan polisakarid yo te detèmine. An menm tan an, kontni an nan Cistanche deserticola brut polysaccharide CLP la DPPH kapasite scavenging radikal ak total kapasite antioksidan nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola yo te analize eksperimantal. Done yo mezire te montre ke konpozisyon an nan polisakarid bit CLP nan Cistanche deserticola deserticola, sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola, ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola yo te menm jan an, men kontni an te siyifikativman diferan; Sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola ka jwenn plizyè pik elisyon lè yo separe ak pirifye pa kolòn kwomatografik DEAE seluloz, ak pwa molekilè a ant 0 ak 10000 Da, ki endike yo. ke eleman prensipal la nan polisakarid Cistanche deserticola deserticola se ti sik molekilè. Monosakarid yo nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola te montre ke monosakarid ki genyen nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola deserticola yo te sitou Mannose, Galactose uronic asid, glikoz, Galaktoz, ak Arabinose; Rezilta yo detèminasyon nan monosakarid nan Cistanche deserticola asid sik CLP2 te montre ke monosakarid ki genyen nan Cistanche deserticola asid sik CLP2 yo te sitou Rhamnose, Galactose asid uronik, glikoz, ak Galaktoz. Eksperyans DPPH lib radikal scavenging ak eksperyans total antioksidan kapasite polisakarid nan Cistanche deserticola te montre ke kapasite antioksidan net CLP1 sik nan Cistanche deserticola te pi wo pase sa yo ki nan polisakarid bit CLP nan Cistanche deserticola ak asid sik CLP2 nan Cistanche deserticola.

Mo kle yo: Cistanche deserticola; polisakarid; Analiz eleman; aktivite antioksidan; absorbans

Eksperyans Cistanche deserticola

Cistanche deserticola deserticola se yon kalite plant parazit èrbeuz, ki gen yon gwo kantite glikozid fenolik, alkaloid, glikozid alkòl Phenethyl, sik, ak alkòl. Pami yo, sik yo sitou nan fòm polisakarid. Polisakarid Cistanche deserticola gen gwo fonksyon regilasyon aktivite iminitè [1-2]. Kòm yon metabolit entèmedyè nan aktivite lavi moun, radikal gratis yo nan yon eta enstab epi yo gen gwo entansite aktivite oksidasyon, ki pral lakòz domaj nan tisi ak ògàn biomacromolecules nan kò imen an. Se poutèt sa, itilize nan antioksidan natirèl elimine radikal gratis te vin direksyon prensipal la nan etid Manje aktyèl yo. Konpozan polisakarid nan Cistanche deserticola gen yon gwo kapasite antioksidan, ki ka ankouraje eliminasyon radikal gratis nan kò imen an [3].

Benefis cistanche tubulosa—antioksidan

Nan papye sa a, yo te pran Cistanche deserticola deserticola kòm objè rechèch la, epi sibstans polisakarid yo te ekstrè ak klase. Pwa molekilè Cistanche deserticola deserticola sibstans polisakarid yo te mezire pa segondè-pèfòmans jèl permeation chromatography. An menm tan an, konpozisyon an nan sibstans polisakarid yo te analize an pwofondè. Aktivite antioksidan Cistanche deserticola deserticola polysaccharide te analize pa mezire kapasite radikal gratis scavenging ak total kapasite antioksidan Cistanche deserticola deserticola polysaccharide konpozan, Li bay yon baz teyorik pou devlopman ak itilizasyon Cistanche deserticola deserticola ak pwomosyon valè ajoute.

Dezè vivan cistanche

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1 Egzanp preparasyon Cistanche deserticola

Peze 2.5kg Cistanche deserticola, koupe li, ajoute 12.5L dlo distile, epi bouyi li pou 3h. Apre bouyi, filtre epi kolekte filtraj la. Ajoute 75 pousan etanòl epi kite l kanpe pou 24 èdtan. Santrifize li nan 4000r/min pou 30min, kolekte sediman an, epi friz epi seche sediman an pou jwenn polisakarid CLP Cistanche deserticola [4]. Pran DEAE seluloz, tranpe ak gonfle li anvan tretman degaze, chaje l nan kolòn kwomatografi DEAE cellulose anion echanj, epi balans li ak dlo distile ak solisyon NaCl. Peze 100 mg polisakarid CLP ki soti nan Cistanche deserticola deserticola epi fonn li nan 10 mL dlo distile. Apre lave ak dlo distile, kolekte eluant a epi konsantre li pou siye friz pou jwenn sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola; Apre yo fin eliye ak solisyon NaCl, yo te kolekte eluyan an, konsantre, epi seche friz apre dyaliz pou jwenn sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola [5].

Prepare sik net CLP1 ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola nan solisyon polisakarid ak yon konsantrasyon 1mg/mL, respektivman. Sèvi ak yon 210-600nm spèktrofotomèt pou analiz UV spèktroskopi. Lè yon pik parèt nan 260-280nm, li konfime ke solisyon an gen pwoteyin ak asid nikleyik [6].

Prensipal eleman chimik nan Cistanche deserticola

2 Detèminasyon konpozan polisakarid Cistanche deserticola

Kontni an nan sik total nan Cistanche deserticola te detèmine pa metòd la fenol asid silfirik. Mezire {{0}}, 0.2, 0.4, 0.6, {{10}}.8, ak 1mL solisyon glikoz ak yon konsantrasyon 0.1mg/mL, epi mete yo nan tib tès vè. Ajoute dlo distile nan yon volim konstan 1mL, epi ajoute 0.5mL reyaktif fenol ak yon konsantrasyon 6 pousan ak 2.5mL konsantre asid silfirik nan tib tès yo. Souke byen epi fre nan tanperati chanm. Sèvi ak yon espektrofotomèt pou mezire absorpsyon nan 490nm, ak kontni sik kòm aks x la ak absorpsyon kòm aks y a, trase yon koub estanda, epi kalkile ekwasyon regresyon [7-8].

Yo te itilize metòd Coomassie briyan ble pou detèmine kontni pwoteyin nan echantiyon Cistanche deserticola. Pran 1mL echantiyon estanda ak diferan konsantrasyon ak solisyon echantiyon ak konsantrasyon 0.1mg/mL, respektivman ajoute 4mL solisyon Coomassie briyan ble nan chak tib tès, byen souke, epi apresa kanpe. Sèvi ak yon espektrofotomèt pou mezire absorbans nan 495nm, epi kalkile kontni pwoteyin nan echantiyon an dapre ekwasyon koub estanda a [9].

Kontni asid uronik nan Cistanche deserticola te detèmine pa metòd m-hydroxyphenyl la. Pran 0.4mL nan solisyon estanda ak diferan konsantrasyon ak echantiyon solisyon ak yon konsantrasyon nan 0.1mg/mL, ajoute 2.5mL nan asid silfirik konsantre nan tib tès la, byen souke li, epi answit fè yon beny dlo bouyi 25min, retire li epi refwadi li nan tanperati chanm, ajoute m-hydroxyphenyl ak yon konsantrasyon 0.3 pousan ak solisyon idroksid sodyòm ak yon konsantrasyon 0.5 pousan nan tib tès, souke l byen, epi mete l pou 30min, Sèvi ak yon espektwofotomèt pou mezire absòbe a nan 525nm, epi kalkile kontni asid uwonik nan echantiyon an dapre ekwasyon koub estanda [10-11]. Pwa molekilè relatif nan polisakarid Cistanche deserticola te detèmine pa kwomatografi jèl segondè-pèfòmans, ak konpozisyon monosakarid nan Cistanche deserticola deserticola te detèmine pa segondè-pèfòmans likid kromatografi [12].

3 Rezilta detèminasyon ak analiz konpozan polisakarid Cistanche deserticola

Koub optik UV spectre fotomèt la nan 210-600nm montre nan Figi 1

Figi 1 koub espektak UV (210-600nm)

Li ka wè nan Figi 1 ke sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola gen yon pik absòpsyon evidan nan 280nm, ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola deserticola pa gen okenn pik absòpsyon evidan nan 260-280 nm, men UV la. spectre absòpsyon wo. Depi triptofan ak tirozin ki genyen nan pwoteyin lan gen gwo valè absòpsyon nan limyè iltravyolèt nan 280nm, li ka detèmine ke sik net CLP1 nan Cistanche deserticola gen glikoprotein, epi li enposib detèmine si sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola gen ladan nwayo. asid ak pwoteyin.

DEAE cellulose anion echanj chromatografik kolòn chromatografi ka adsorb sibstans iyonik ak enpurte sou kolòn chromatografik la reyalize separasyon an nan sibstans polisakarid. Apre konsantre ak siye solisyon lave dlo distile a, yo te jwenn yon total de 34.68 mg nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola, epi apre elution, konsantre, ak siye ak solisyon NaCl, yo te jwenn yon total de 16.52 mg nan sik asid CLP2 nan Cistanche. deserticola. Pandan eksperyans la, yo te jwenn ekwasyon koub estanda nan kontni total sik, kontni pwoteyin, ak asid uronik nan Cistanche deserticola. Sa ki nan sik total, pwoteyin, ak asid uronik nan Cistanche deserticola yo te mezire, jan yo montre nan Tablo 1.

Tablo 1 Kontni total sik, pwoteyin, ak asid uwonik nan Cistanche deserticola

Ou ka jwenn ekwasyon regression la lè w detèmine pwa molekilè ak zòn pik echantiyon estanda a. Pwa molekilè echantiyon an pou teste a ka jwenn lè w ranplase valè siyal fotoemisyon echantiyon an pou teste nan ekwasyon regresyon an. Pli lwen analiz ak kalkil ka jwenn kantite mwayèn pwa molekilè, pwa mwayèn pwa molekilè, ak koyefisyan dispèsyon nan sik net CLP1 ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola. Tan an retansyon ak rezilta kalkil pwa molekilè nan chromatogram segondè-pèfòmans jèl permeation nan Cistanche deserticola net sik CLP1 ak Cistanche deserticola asid sik CLP2 yo montre nan Tablo 2. Nimewo mwayèn pwa molekilè yo itilize pou reprezante gwosè a nan molekil la mezire, epi yo itilize rapò pwa mwayèn pwa molekilè ak kantite pwa molekilè mwayèn pou reprezante lajè distribisyon molekilè a.

Tablo 2 Tan Detèminasyon Pik Retansyon ak Rezilta Kalkil Pwa Molekilè

Li ka wè nan tablo 2 ke ranje distribisyon pwa molekilè nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola se 0 ~ 10000 Da, ki endike ke polisakarid nan Cistanche deserticola se yon ti kras. molekil polisakarid ak molekil diferan, ak pwa molekilè a montre eterojenite. Li ka dedwi ke sik net CLP1 nan Cistanche deserticola ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola se melanj plizyè sibstans polisakarid.

Gade Tablo 3 pou pik HPLC ak tan retansyon pik nèf echantiyon estanda monosakarid, sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola. Lè w konpare tan pik la, li ka konkli ke gen senk monosakarid evidan nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola ak kat monosakarid evidan nan sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola. Pwopòsyon monosakarid nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola montre nan Tablo 4.

Tablo 3 Tan Retansyon Monosakarid High-Pfòmans likid Chromatography Peaks

Tablo 4 Pwopòsyon Monosakarid nan Cistanche deserticola

Kontni monosakarid nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola apre idroliz se siyifikativman diferan de sa ki nan sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola. Kontni glikoz nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola se kòm yon wo 88.62 pousan, kontni glikoz nan sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola se sèlman 9.99 pousan, ak asid asid galaktoz, galaktoz ak ramnoz nan sik asid CLP2 nan. Cistanche deserticola yo tout plis pase 5 pousan.

4 Analiz aktivite antioksidan polisakarid Cistanche deserticola

Pandan analiz eksperyans antioksidan polisakarid Cistanche deserticola deserticola, yo te prepare polisakarid Cistanche deserticola deserticola nan solisyon polisakarid Cistanche deserticola deserticola ak konsantrasyon {{0}}, 0.25, 0 Yo te mezire .5, 1.0, 2.0, 4.0 mg/mL, ak to DPPH gratis radikal ak kapasite total antioksidan solisyon an. Pandan detèminasyon an nan to DPPH gratis radikal scavenging nan solisyon Cistanche deserticola deserticola polisakarid, ajoute 2 × Yon total de 2mL 10-4mol/L DPPH melanje respire epi mete yo nan kondisyon fè nwa pou 15 minit. Solisyon an te santrifuje nan yon vitès santrifujeur nan 4000r / min ak yon tan santrifujeur nan 15 minit. Sèvi ak yon espektrofotomèt pou mezire valè absorpsyon solisyon an nan vag 517nm, ki soti nan ki pousantaj DPPH scavenging radikal nan solisyon Cistanche deserticola deserticola polisakarid ka jwenn, jan yo montre nan Tablo 5.

Tablo 5 DPPH radikal scavenging pousantaj nan solisyon polisakarid Cistanche deserticola

Li ka wè nan Tablo 5 ke to scavenging nan polisakarid bit CLP nan Cistanche deserticola ak net sik CLP1 nan Cistanche deserticola sou radikal gratis DPPH se siyifikativman pi wo pase sa yo ki nan sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola sou radikal gratis DPPH. Lè konsantrasyon solisyon an se mwens pase 2.0mg/mL, pousantaj DPPH radikal scavenging nan polisakarid brit CLP nan Cistanche deserticola deserticola ak sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola piti piti ogmante ak ogmantasyon nan konsantrasyon, ak finalman vin estab.

Pandan detèminasyon kapasite total antioksidan polisakarid Cistanche deserticola deserticola, yo te itilize twous tès kapasite antioksidan pou deteksyon rapid. Pran solisyon deteksyon estanda Trolox la epi delye li ak dlo distile a {{0}}, 0.25, 0.5, 1.0, 2.{ {10}}, ak 4.0 mg/mL, respektivman. Ajoute solisyon k ap travay peroksidaz nan plak la byen deteksyon, Lè sa a, ajoute echantiyon an oswa solisyon deteksyon estanda yo dwe teste, epi finalman ajoute solisyon an k ap travay nan twous la deteksyon rapid. Melanje byen epi kite l kanpe pou 6 minit, Kapasite total antioksidan polisakarid Cistanche deserticola te detèmine pa yon lektè microplate nan longèdonn 405nm ak 734nm [14-15]. Gade Tablo 6 pou rezilta tès total antioksidan Akonplisman solisyon solisyon polisakarid Cistanche deserticola deserticola.

Tablo 6 Kapasite total antioksidan solisyon polisakarid Cistanche deserticola

Li ka wè nan tablo 6 ke lè konsantrasyon nan solisyon Cistanche deserticola se mwens pase 4.0mg/mL, total kapasite antioksidan nan polisakarid brit CLP nan Cistanche deserticola, sik net CLP1 nan Cistanche deserticola ak sik asid. CLP2 nan Cistanche deserticola ogmante ak ogmantasyon nan konsantrasyon solisyon; Kapasite antioksidan nan sik net CLP1 nan Cistanche deserticola deserticola se siyifikativman pi wo pase sa yo ki nan polisakarid bit CLP nan Cistanche deserticola deserticola deserticola ak asid sik CLP2 nan Cistanche deserticola deserticola deserticola.

Cistanche te

5 Konklizyon

Rezilta analiz yo nan polisakarid Cistanche deserticola deserticola pa segondè-pèfòmans jèl permeation chromatografi te montre ke pwa molekilè nan polisakarid ki genyen nan li pa t 'plis pase 10000 Da, epi li te genyen plizyè pik elisyon. Cistanche deserticola deserticola polisakarid te gen sèten pwopriyete antioksidan. Rezilta etid sa a mete yon fondasyon pou plis devlopman ak itilizasyon Cistanche deserticola.

Referans:

 [1] Bi Cuicui, Liu Yinlu, Wei Fenfen, et al. Pwogrè rechèch sou eleman chimik prensipal yo ak aktivite byolojik Cistanche deserticola [J]. Rechèch Evalyasyon Medikaman, 2019, 42 (9): 1896-1900

[2] Dong Yuwei, Miao Jingzhi, Li Yong. Optimizasyon pwosesis ekstraksyon doub anzim pou polisakarid lay ak aktivite antioksidan an vitro ［ J ］. Chinese Seasonings, 2020, 45 (10): 30-35, 48

[3] Yang Ting, Eladan McIntyre, Tao Yichun, et al. Detèminasyon kontni polisakarid ak aktivite antioksidan Cistanche tubulosa dreg ［ J ］. Journal of Xinjiang Medical University, 2019, 42 (2): 234-236241

[4] Liu Lisa, Zhang Qing, You Lin, et al. Etid sou teknoloji ekstraksyon sòlvan nan glikozid alkòl Phenethyl nan Cistanche tubulosa [J]. Syans ak Teknoloji Manje, 2019, 44 (4): 225-229

[5] Liu Yaowei, Su Zihao. Etid sou pwosesis ekstraksyon flash echinase ak Verbascum thapsus glikozid nan Cistanche deserticola ［ J ］. Rejim Medikal ak Sante, 2020, 18 (23): 27-28

[6] Tian Wenjing, Zhou Xuan, Huang Qunhui, et al. Efè tretman ultrasons sou pwopriyete reoloji nan polisakarid Cistanche deserticola deserticola ［ J ］. Bilten Biyoloji, 2021, 56 (2): 48-53

[7] Feng Jie, Guo Yehong, Zhu Wenjuan, et al. Efè diferan lame, abita, ak dat rekòt sou kontni engredyan aktif nan Cistanche deserticola ［ J ］. Chinese Wild Plant Resources, 2021, 40 (5): 18-23

[8] Lv Mingshuai, Zhao Bo, Sun Wenyu, et al. Etid sou pwopriyete fizikochimik ak aktivite antioksidan nan polisakarid Auricularia auricula-jij ki rich Selenyòm ［ J ］. Chinese Flavoring, 2021, 46 (6): 54-59

[9] Chen Yuebai. Depistaj pwosesis ekstraksyon Lentinan ak analiz de sitiyasyon aktyèl rechèch sou efè sante li yo [J]. Chinese Flavoring, 2021, 46 (8): 189-191

[10] Guo Qiaoli, Wu Zhibo, Zhou Yubi, et al. Analiz konpozisyon ak aktivite antioksidan nan polisakarid soti nan Cistanche deserticola nan Lanzhou ［ J ］. Syans ak Teknoloji endistri manje, 2021, 42 (15): 96-103

[11] Cao Libo, Gong Xingcheng, Jia Jinru, et al. Rapid analiz kalitatif nan konstitiyan chimik nan salsa Cistanche pa piki dirèk milti-etap espektrometri mas konplè metòd eskanè ［ J ］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2021, 46 (16): 4150-4156

[12] Hu Dongbao, Du Wei, Yang Meng. Optimizasyon pwosesis ekstraksyon ak aktivite antioksidan polisakarid soti nan Macrocybe gigantea pa metodoloji sifas repons ［ J ］. Kondiman Chinwa, 2021, 46 (10): 78-82

[13] Xu Sheng, Chai Shasha. Metòd deteksyon rapid prensipal sibstans aktif nan Cistanche deserticola [J]. Journal of Wuhan Vocational and Technical College, 2021, 20 (4): 116-120

[14] Zhang Hongchi, Liu Rui, Jiao Lele, et al. Optimizasyon pwosesis ekstraksyon Lentinan ki baze sou metòd ortogonal wotasyon retou kwadratik ［ J ］. Arom Chinwa, 2021,46 (11): 88-93

[15] Song Qingqing, Zhang Ke, Li Ting, et al. Detèminasyon similtane nan kontni milti-konpozan nan Cistanche deserticola pa ranvèse faz idrofil entèraksyon chromatografi Customized metòd siveyans milti-reaksyon [J]. Chimi analitik, 2020, 48 (11): 1573-1593