Etid sou metòd detèminasyon nan glikozid pineal ak kontni glikozid ergosterol nan Cistanche Tubulosa

Cistanche tubulosa se yon tij chèch chèch ak fèy kalm ki fè pati genus Cistanche nan fanmi Ledaceae. Li se cho nan lanati, dous ak sale nan gou, epi li fè pati meridyen ren yo ak gwo trip. Li gen efè tradisyonèl tankou tonifyan Yang nan ren, sans nourisan ak san, mwatir trip ak pwomosyon mouvman entesten, ak retade aje. Li se ke yo rekonèt kòm "Dezè Ginseng la". Kòmanse nan edisyon 2010 Farmakope Repiblik Pèp la nan Lachin, Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wight te ajoute kòm youn nan plant fondamantal legal nan Cistanche ak ki nan lis ansanm ak C. deserticola.

Cistanche tubulosa se sitou pwodwi sou kwen sid Tarim Basen nan Xinjiang Uygur Otonòm Rejyon, ap grandi parazit sou rasin yo nan plant Tamarix. Li se sous prensipal Cistanche tubulosa materyèl medsin nan mache Lachin nan kounye a, ak pwodiksyon anyèl kontablite pou plis pase 60%. Akòz rate ki ogmante nan resous sovaj yo, li te nan lis kòm yon plant ki pwoteje dezyèm klas nan National Key Protected Wild Plant List (edisyon 2021).

Rechèch famasi modèn yo te montre ke sibstans debaz la famasi nan Cistanche tubulosa baze sou glikozid phenylethanoid (PhGs), nan mitan ki Echinacoside (C35H46O20) ak Acteoside/verbascoside (C29H36O15) gen kontni ki pi wo a ak aktivite ki pi fò, epi yo se eleman ki klè nan kontwòl kalite materyèl tubules yo klè. Farmakope Chinwa. Dapre edisyon 2020 nan Farmakope Chinwa a, kantite total echinacroside ak verbascoside nan pwodwi sèk nan Cistanche tubulosa pa ta dwe mwens pase 1.5%, ki se pi wo pase estanda a nan 0.30% pou dezè Cistanche tubulosa. Se poutèt sa, etabli metòd detèminasyon kontni egzat, efikas ak repwodiktif se yon gwo siyifikasyon pou kontwòl kalite, evalyasyon orijin, optimize plante, ak devlopman pwodwi nan materyèl Cistanche tubulosa medsin.

Echinoside, eleman chimik prensipal Cistanche tubulosa

Acteoside, eleman chimik prensipal Cistanche tubulosa

Karakteristik chimik pinecone krizantèm glikozid ak ergotamin glikozid

estrikti chimik

Glikozid Pinecone ak glikozid ergosterol yo tou de se glikozid fenilethanoid, ki gen eskèlèt debaz ki konpoze de yon nwayo fenilethanoid ki konekte pa lyezon glikozidik ak gwoup sik (anjeneral glikoz ak rhamnose), ak gwoup ranplase tankou gwoup kafeyil yo prezante nan pozisyon idroksil yo. Fòmil molekilè echinakozid la se C35H46O20, ak yon pwa molekilè relatif 786.72. Estrikti li yo gen yon gwoup kafeyil, yon gwoup glikoz, ak yon gwoup rhamnose. Fòmil molekilè ergosterol glikozid (verbascoside) se C29H36O15, ak yon pwa molekilè relatif 624.59. Estrikti li yo sanble ak sa yo ki nan pinealoside, men li manke rhamnose ak kèk sibstitisyon caffeoyl. Tou de yo fasil idrosolubl nan solvang polè tankou metanol, etanòl, ak dlo, epi yo gen absòpsyon karakteristik nan rejyon an iltravyolèt (maksimòm longèdonn absòpsyon alantou 330 nm), ki bay yon baz teyorik pou deteksyon HPLC-UV.

Aktivite famasi

Pinecone krizantèm glikozid ak ergosterol glikozid gen yon pakèt aktivite famasi: (1) efè antioksidan - lè yo netwaye anyon superoksid (O2 · -), radikal idwoksil (· OH), ak oksijene idwojèn (H2O2), aktive chemen siyal Nrf2/ARE, ak enzime aktivite antioksidan SOD ak GSH Px; (2) Efè neropwotektif - ankouraje ekspresyon faktè nerotwofik tankou GDNF, ki gen yon efè amelyore sou maladi alzayme a ak modèl maladi Parkinson la; (3) Efè tankou òmòn - ankouraje ekspresyon sentèz testostewòn ki gen rapò ak anzim ak amelyore fonksyon repwodiktif; (4) Efè hepatoprotective - diminye blesi fwa alkòl ak estrès oksidatif; (5) Efè anti-tumeur - pwovoke apoptoz selil kansè nan èzofaj atravè chemen depandan mitokondriyo. Aktivite ki anwo yo fè yo konpozan endikatè iranplasabl pou evalyasyon kalite Cistanche tubulosa.

Efè cistanche-antitumor

Apèsi sou Metòd Detèminasyon kontni

Kounye a, metòd pou detèmine kontni pineal glycoside ak ergosterol glycoside nan Cistanche tubulosa sitou gen ladan segondè-pèfòmans likid chromatografi (HPLC), ultra-wo pèfòmans likid chromatografi (UPLC), mens-kouch chromatografi imaj dijitalizasyon (TLC ImageJ), ak likid chromatografi mas-MSspectrometry/tandèm LC). Pami yo, metòd HPLC te adopte kòm metòd detèminasyon legal pa Pharmacopeia Chinwa a akòz popilarite ekipman segondè li yo, operasyon senp, ak bon repwodiksyon, e kounye a se metòd ki pi lajman rapòte nan literati a. Sa ki annapre yo konsantre sou etablisman sistèm ak pwosesis optimize metòd HPLC.

Enfliyans diferan orijin ak tout pouvwa sou kontni an

Diferans nan orijin

Etid miltip yo te toujou montre ke gen diferans enpòtan nan kontni an nan echinacroside ak ergosterol nan Cistanche tubulosa nan diferan rejyon yo. Lè w pran Xinjiang kòm yon egzanp, diferans lan nan kontni an nan de eleman nan echantiyon ki soti nan kote tankou Hetian Moyu County, Kashgar Jiashi County, ak Alar City ka rive nan 2-5 fwa. Anjeneral pale, kantite total glikozid phenylethanoid nan Cistanche tubulosa pwodwi nan zòn Hotan (espesyalman Konte Moyu, Konte Minfeng, ak Konte Yutian) relativman wo, ak kontni an nan glikozid phenylethanoid nan kèk echantiyon-wo kalite ka rive jwenn 2.5% a 5.0% pharmacopo estanda a, byen lwen 1%.

Enfliyans lame diferan

Cistanche tubulosa parazit rasin diferan plant nan genus Tamarix, ak espès lame yo gen yon enpak siyifikatif sou bon jan kalite a nan materyèl medsin. Chen et al. (2005) rapòte ke kontni an nan asid phenylethanolic nan echantiyon parazit sou T. talama kanensis te jeneralman pi wo pase sa ki parazite sou T. ramosissima. Anplis de sa, gen diferans ki genyen ant pwodwi sovaj ak kiltive. Anjeneral, kontni an nan de eleman nan pwodwi sovaj pi wo pase sa ki nan pwodwi kiltive, men bon jan kalite pwodwi kiltive kapab tou reyalize pi wo nivo pa optimize kondisyon plante.

Diferans nan espesifikasyon ak pati yo

Espesifikasyon yo (dyamèt, longè) ak pati medsin nan Cistanche tubulosa tou gen yon enpak sou kontni li yo. Rechèch yo montre ke kontni an nan echinacoside ak ergosterol nan tij mens charnèl souvan pi wo pase sa ki nan tij pi epè; Kontni an nan pati siperyè tij la (tou pre fen enfloresans) anjeneral pi wo pase sa ki nan baz la. Règ sa a bay yon referans pou seleksyon an nan pati pandan rekòlte a ak pwosesis remèd fèy medsin.

Entwodiksyon nan lòt metòd mezi

Kwomatografi likid ultra-wo pèfòmans (UPLC)

Eksperyans Cistanche tubulosa

Klike la a pou w wè Cistanche Tubulosa ekstrè natirèl poud siplemantè

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / WeChat: 18599088692

Metòd UPLC a sèvi ak yon kolòn chromatografi ak yon gwosè patikil ki pi piti (tankou Waters HSS T3, 1.8 μ m, 100 × 2.1 mm), yon pousantaj koule nan 0.3 mL / min, yon volim piki nan sèlman 1 μ L, ak tan an analiz ka vin pi kout nan 10-15 min, separasyon tradisyonèl yo ak HPLC pi byen mande pou min30-50. Liang Jiansong et al. (2021) te etabli yon metòd UPLC pou detèminasyon similtane sis phenylethanolic glikozid, ki gen yon ranje lajè lineyè ak gwo pousantaj rekiperasyon, epi li apwopriye pou tès depistaj rapid nan gwo kantite echantiyon.

LC-MS/MS metòd

Kwomatografi likid tandem espektrometri mas metòd la gen sansiblite trè wo epi li ka ansanm detèmine plizyè douzèn konpozan nan Cistanche tubulosa, ki gen ladan echinacoside, ergosterol glycoside, isoergosterol glycoside, ak guanosine A. Li apwopriye pou rechèch metabolomik ak evalyasyon kalite konplè. Teknoloji konbine RPLC-HILIC ka menm mezire 23 konpozan polè ak konpozan ki pa polè alafwa, ki kouvri yon seri kontni nan 5 lòd grandè.

Sou entènèt presyon sòlvan microextraction eddy aktyèl chromatografi HPLC metòd

Metòd sa a marye echantiyon ekstraksyon, pirifikasyon, ak separasyon kwomatografik sou entènèt, siyifikativman diminye konsomasyon nan solvang òganik ak itilizasyon echantiyon. LOQs twa phenylethanolic glycoside yo se 0.50 mg/L (echinacoside), 0.25 mg/L (ergosterol glycoside), ak 0.38 mg/L (isoergosterol glycoside), respektivman, ki apwopriye pou analiz rapid echantiyon presye yo.

TLC Metòd Dijitalizasyon Imaj

poud ekstrè cistanche

Ki baze sou lojisyèl ImageJ, yo te fè analiz quantitative sou valè gri nan tach kwomatografi kouch mens. Koefisyan korelasyon r nan pineal krizantèm glycoside, guanosine A, ergosterol glycoside, ak isoergosterol glycoside te 0.9974, 0.9931, 0.9923, ak 0.9890, respektivman, ki te konsistan avèk metòd HPLC. Metòd sa a se pri ki ba, fasil yo opere, ak apwopriye pou tès depistaj rapid nan inite de baz ak jaden an.

diskisyon

Pwoblèm kle nan optimize kondisyon kwomatografik yo

Seleksyon faz mobil enpòtan anpil nan devlopman metòd HPLC. Konparezon literati montre ke: (1) sistèm acetonitrile dlo a gen tandans lakòz keu nan pik la glikozid fenylethanolic, epi ajoute 0.1% asid fòmik oswa 1% asid acetic ka siyifikativman amelyore fòm nan pik; (2) Efikasite separasyon sistèm methanol acetonitrile asid acetic ternary siperyè pase methanol pi oswa sistèm binè asetonitrile pi; (3) Seleksyon longèdonn deteksyon 330-334 nm ka balanse entansite absòpsyon tou de eleman yo, ak yon repons yon ti kras pi wo nan 334 nm ak mwens entèferans nan ergosterol nan 330 nm. Tanperati kolòn gen yon enpak sou tan retansyon men li pa chanje siyifikativman degre separasyon, ak yon seri rezonab nan 30-35 degre.

Optimizasyon nan metòd ekstraksyon

Konsantrasyon sòlvan an, rapò solid-likid, tanperati ultrason, ak tan tout afekte efikasite ekstraksyon an. Rechèch yo montre ke: (1) 50% ~ 80% metanol oswa etanòl ka efektivman ekstrè tou de eleman glikozid, ak yon pousantaj ekstraksyon yon ti kras pi wo nan 60% ~ 80% etanòl; (2) Yon rapò solid-likid 1:30 ~ 1:50 (g/mL) se ase pou fè ekstraksyon bon jan; (3) Konbinezon optimal la se tanperati ultrason 50-60 degre ak tan 40 min; (4) Ekstraksyon à se siperyè ekstraksyon rflu, paske lèt la ka fasilman mennen nan degradasyon nan glikozid feniletanolik thermosensitive.

Diskisyon sou rasyonalite estanda famakope yo

Farmakope aktyèl la endike ke kantite total paeoniflorin ak glikozid ergosterol nan Cistanche tubulosa ta dwe pi gran pase oswa egal a 1.5%. Estanda sa a se relativman ki lach - echantiyon kalite siperyè soti nan Xinjiang anjeneral rive nan 3% a 5%, ak sèlman kèk echantiyon ki ba-bon jan kalite apwoche limit la pi ba. Gen kèk chèchè sijere ogmante estanda a nan 2.0% a 2.5% pi byen asire bon jan kalite a nan materyèl medsin. Anplis de sa, pharmacopeia a sèlman itilize de eleman kòm endikatè, pandan y ap Cistanche tubulosa tou gen divès kalite glikozid fenilethanolik aktif tankou guanosine A, glikozid isoergosterol, ak hesperidin. Evalyasyon konplè milti-endikatè se direksyon devlopman nan lavni.

Sijesyon pou Seleksyon Metòd

Pou enspeksyon kalite materyèl jeneral medsin ak kontwòl kalite pwodiksyon chak jou, li rekòmande pou itilize metòd HPLC pharmacopeia. Metòd la gen matirite, kondisyon ekipman yo ba, ak rezilta yo trè konparab. Pou tès depistaj echantiyon gwo echèl oswa analiz echantiyon presye, UPLC oswa metòd PLME-TFC-HPLC sou entènèt yo pi efikas. Metòd klasifikasyon LC-MS/MS se metòd pi pito pou evalyasyon kalite apwofondi ak idantifikasyon varyete. Metòd imaj TLC a apwopriye pou tès depistaj inisyal rapid nan nivo baz. Chèchè yo ta dwe fè chwa rezonab ki baze sou bezwen aktyèl yo.

poud ekstrè cistanche

Konklizyon

Atik sa a elabore sistematikman sou metòd HPLC pou detèmine kontni echinacoside ak ergosterol nan Cistanche tubulosa. Metòd sa a te valide pa metodoloji miltidimansyonèl e li gen karakteristik yon seri lineyè lajè (r Pi gran pase oswa egal a 0.999), bon presizyon (RSD).<3%), high accuracy (recovery rate 95.7%~100.7%), and easy operation, fully meeting the quality control requirements of the Chinese Pharmacopoeia for Cistanche tubulosa.

Analiz konplè montre ke: (1) kontni an nan glikozid pineal nan Cistanche tubulosa se nòmalman 3-8 fwa sa ki nan glikozid ergosterol, ak kantite total de la varye depann sou kote ki gen orijin, lame, gwosè, ak kote; (2) Kantite total asid phenylethanolic nan echantiyon kalite siperyè soti nan Hotan, Xinjiang ka rive jwenn 2-3 fwa oswa plis nan estanda farmakope a; (3) Nouvo teknoloji tankou UPLC ak LC-MS/MS bay zouti pwisan pou detèminasyon synchrone milti-konpozan ak evalyasyon kalite pwofon.

Rechèch nan lavni ta dwe konsantre sou: (1) etabli yon sistèm evalyasyon kalite milti-endèks ki kouvri plis glikozid feniletanoid; (2) byen envestige enpak konplè anviwònman plante, peryòd rekòlte lame, ak metòd pwosesis sou kontni an; (3) pwomouvwa normalisation tout chèn endistri Guanhua Cistanche soti nan remèd fèy medsin nan manje sante ak matyè premyè kosmetik.

Referans

[1] Soup bab panyòl HPLC metòd pou detèmine kontni an nan echinacoside ak ergotamine nan Guanhua Roucong Kui [J]. Famasyen Chinwa, 2009, 12 (8): 1061-1063

[2] Chen M, Xiao SP, Cui GH, et al. Detèminasyon an nan echinacoside ak acteoside nan remèd fèy nan Cistanche tubulosa [J]. Lachin Journal of Chinese Materia Medica, 2005, 30 (11): 839-841.

[3] Baoshan, Ju Aihua, Xiao Zhibin. Detèminasyon kontni echinakozid ak ergotamin nan Guanhua Roucong Kui [J]. Revizyon medikaman Chinwa, 2017, 23 (19): 39-40, 44

[4] Liang Jiansong, Xue Cuili, Wu Menghua, elatriye UPLC kontni detèminasyon ak evalyasyon chimyometrik nan sis glikozid feniletanoid nan Roucong Kui ak Shacong Kui [J]. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021, 41 (2): 226-235

[5] Komite Farmakope Repiblik Pèp la Lachin Farmakope Repiblik Pèp Lachin (edisyon 2020, Volim 1) [S]. Beijing: Lachin Medikal Syans ak Teknoloji Press, 2020: 148-149

[6] Zhang Leihong, Du Niansheng, Wang Qing, elatriye Detèminasyon Kontni Echinochlorin nan Roucongkui Total Glycosides Capsules pa HPLC [J]. Nòdwès famasetik Journal, 2002, 17 (1): 3-4

[7] Ju Aihua, Ao Geriletu, Zhou Kai Detèminasyon nan kontni echinakozid ak ergotamin nan vyann sale ak tounsòl ki soti nan Inner Mongoli [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2011, 26 (1): 178-180

[8] Song Peng, Tu Pengfei. Pwogrè rechèch sou kontwòl kalite ak evalyasyon medikaman tradisyonèl Chinwa Roucongkui [J]. Northern Pharmacy, 2011, 8 (2): 45-47

[9] Guo Dingyu, Xiao Jinglei. Pwogrè nan Kontwòl Kalite ak Rechèch Aktivite Byolojik nan Konpozan Fonksyonèl nan Roucongkui [J]. Jilin Medsin Tradisyonèl Chinwa, 2023, 43 (7): 856-860

[10] Lu Yinghui, Pi Wenmin, Zhang Yue, elatriye Etid Konparatif ak Analiz Market Status Roucong Kui ak Guanhua Roucong Kui [J]. Medsin Chinwa modèn, 2019, 21 (8): 1105-1110

[11] Estanda Komite Farmakope Nasyonal pou granules fòmil Roucongkui (Guanhua Roucongkui) [S]. Beijing: Lachin Medikal Syans ak Teknoloji Press, 2021

[12] Fu C, Li J, Aipire A, et al. Cistanche tubulosa phenylethanoid glikozid pwovoke apoptoz nan selil Eca-109 atravè chemen ki depann de mitokondri yo [J]. Lèt Onkoloji, 2019, 17 (2): 1883-1892.

[13] Xu Mingjun, Tann analiz Kalite ak Evalyasyon konplè nan tounsòl vyann dezè ki soti nan diferan rejyon nan Lachin [J]. Syans ak Teknoloji Endistri Manje, 2022, 43 (15): 312-320

[14] Sè Hao, Chen Sumei, Yan Donghai, elatriye Pwogrè rechèch sou aplikasyon Roucongkui nan pwodui kosmetik [J]. Journal of Daily Chemical Science, 2021, 44 (9): 28-33

[15] Hou Ji, Wang Bo, Li Guanghui, elatriye Pwogrè rechèch ak estati endistriyalizasyon nan Roucongkui [J]. Shandong Syans Agrikòl, 2020, 52 (12): 147-154