Repons selil T apre vaksinasyon anti-COVID-19 BNT162b2 kenbe kont SARS-CoV-2 Omicron B.1.1.529 Variant of Concern

Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Résumé

Pwogresyon an nanmaladi pandemi COVID-19te mennen nan Aparisyon nan varyant nan enkyetid (VOC), ki ka konpwomèt efikasite nan vaksen yo kounye a administre. Drift antijenik ka potansyèlman pote diminye iminite pwoteksyon selil T ak, kidonk, manifestasyon maladi pi grav. Pou evalye posiblite sa a, repons selil T yo nan kalite sovaj Wuhan- 1 SARS-CoV-2 pwoteyin Spike zansèt la akOmicron B.1.1.529Spike pwoteyin yo te konpare. An konsekans, selil mononikleyè san periferik (PBMC) yo te kolekte nan uit volontè ki an sante 4-5 mwa apre twazyèm vaksinasyon an ak BNT162b2 epi yo te ankouraje ak bibliyotèk peptide sipèpoze ki reprezante pike nan swa zansèt la oswa nan.OmikronSARS-CoV-2virisvariants. Kantifikasyon selil T espesifik yo te fèt pa yon tès fliyoresan ELISPOT, kontwole selil ki sekrete interferon-gama (IFNg), interleukin-10 (IL-10), ak interleukin-4 (IL{). {4}}). Pou tout moun ki egzamine yo, yo te detèmine nivo reyativite konparab ak tou de fòm pwoteyin Spike. Anplis de sa, yo te obsève yon repons Th1 dominan, ki manifeste sitou pa selil ki sekrete IFNg ak sèlman yon kantite limite selil ki sekrete IL-10- ak IL-4-. Done yo demontre aktivite selil T ki estab an repons a variant Omicron ki parèt nan moun ki teste yo; Se poutèt sa, iminite pwoteksyon an nan variant la apre vaksen BNT162b2 pa afekte anpil.

Mo kle: SARS-CoV-2; COVID-19;Omikron; Repons selil T yo;ELISPOT; FluoroSpot; varyant enkyetid

1Depatman byochimik ak jenetik molekilè, Enstiti Izrayèl pou rechèch byolojik, Ness-Ziona 74100, Izrayèl; hilac@iibr.gov.il (HC); shaharr@iibr.gov.il (SR); urie@iibr.gov.il (UE);galb@iibr.gov.il (GB)

2 Sheba Medical Center, Inite Maladi Enfektye, Ramat Gan 5262112, Izrayèl; Itsik.Levy@sheba.health.gov.il

3 Sackler Medical School, Tel Aviv University, Tel Aviv 6997801, Izrayèl

1. Entwodiksyon

Omicron B.1.1.529se kounye a Variant nan enkyetid (VOC) nan mitan émergentes yoSARS-CoV-2variants[1]. Variant Omicron an te dekri an premye nan Novanm 2021 e depi lè sa a, li te rapidman gaye atravè lemond [1,2]. Li pote 26-32 mitasyon nan pwoteyin Spike a konpare ak sekans Wuhan-1 SARS-CoV{-2 [1], anpil nan mitasyon sa yo sitiye nan domèn reseptè-obligatwa (RBD). Jan sa te montre pou lòt VOCs [3], mitasyon nan sit netralize nan pwoteyin Spike a febli potansyèl netralize nan antikò epi, kidonk, ka mennen nan amelyore chape iminolojik. Aspè sa a gen anpil enplikasyon sante piblik, lè nou konsidere gwo kanpay vaksinasyon k ap kontinye atravè lemond ki baze sou espesifik antijenik souch primordial SARS-CoV-2 la.

sistanchpoupwisan iminite

Apati jodi a, korelasyon egzak nan pwoteksyon kont SARS-CoV-2 pa te defini nèt. Li klè ke repons antikò netralizasyon an esansyèl pou bloke atachman viral ak antre nan selil lame yo, e ke selil T jwe yon wòl santral nan diminye gaye viral nan lame a, kidonk soulaje gravite manifestasyon maladi a [4]. An konsekans, pou plizyè VOCs émergentes, yo te montre ke yon repons antikò netralize pi ba yo te korelasyon ak pi ba efikasite nan vaksen an ak pi wo nivo nan enfeksyon zouti iminitè [4,5]. Lè nou konsidere sinetik tit antikò yo apre vaksinasyon an ak potansyèl yo bese pi ba pase nivo netralize yo, li esansyèl pou kenbe repons memwa selil T pwoteksyon, ki espere montre lonjevite enpòtan [6-8]. Chape iminitè a nan repons umoral la se sitou yon rezilta nan mitasyon espesifik nan yon antijèn bay, ki rive nan yon pwosesis mikwo-evolusyonè konvèjan e kidonk afekte moun egalman diferan. Kontrèman, repons selil T a gen yon karaktè divergent, ki afekte diferan moun akòz polimòfis HLA; Se poutèt sa, mitasyon inik nan epitop iminodominan yo gen mwens chans afekte repons selil T yo globalman. Afebli nan iminite selil T kont yon VOC ka rive kòm yon konsekans derive antijenik ki mennen nan akimile mitasyon ki kache anba iminite [9].

Repons selil T yo ka bay pwoteksyon kont SARS-CoV-2 menm lè pa gen repons antikò [10]. Espesyalman, nivo segondè nan selil IFNg ki sekrete ki reponn a eksitasyon antijenik ak pwoteyin Spike SARS-CoV-2 ki gen rapò ak manifestasyon maladi COVID- 19 mwens grav [10]. Siveyans repons selil T a se eksperimantal pi difisil pase quantification repons umoral yo, ki mande disponiblite selil solid ki reponn a eksitasyon antijèn. Pifò etid karakterize repons selil T pa elevasyon makè activation-induced (AIM) ak tach intraselilè cytokine, kontwole pa sikometri koule ak analiz ELISPOT [11]. Nan etid aktyèl la, nou te detèmine nivo reyativite selil T an repons a zansèt Wuhan-1 SARS-CoV{-2 Spike a ak Spike nan variant Omicron B.1.1.529 nan moun ki an sante iminize ak BNT162b2 la. vaksen. Etid la revele yon repons Th1 ki sanble ak dominan nan tou de vèsyon nan pwoteyin Spike a, sijere ke iminite selil T ki estab kenbe kont varyant Omicron ki genyen kounye a.

2. Materyèl ak Metòd

2.1.PBMC Izolasyon

Yo te pran san nan 8 moun ki an sante nan 4-5 mwa apre twazyèm vaksen BNT162b2 yo. Yo te kolekte san nan tib sodyòm-eparin (vacutainer, BD, Franklin Lakes, NJ, USA) epi trete nan lespas 2 èdtan apre koleksyon an. Selil mononikleyè san periferik (PBMC) yo te izole pa sedimantasyon gradyan dansite lè l sèvi avèk Ficoll-Paque (Sigma-Aldrich, Rehovot, Izrayèl) dapre pwotokòl manifakti a. Lè sa a, selil yo te lave yon fwa nan PBS epi imedyatman trete pou tès ELISPOT.

kostanch

2.2. Esè ELISPOT

Twa koulè fliyoresan ELISPOT tès la (FluoroSpot) te fèt ak aderans strik nan pwotokòl manifakti a (Human IFN-y/IL-4/IL-10 twa-koulè Fluo-rasin, ImmunoSpot, Cleveland, OH , USA), PBMC yo te resuspend nan FCS-gratis CTL-Test medya (ImmunoSpot) ak plake nan plak 96well PVDF manbràn nan 3 × 1 0 5 selil / byen. Selil yo te swa kite san estimile, ankouraje ak SARS-CoV-2 pwoteyin Spike sipèpoze-ping bibliyotèk la peptide oswa ankouraje ak 5ug/mL nan fitohemagglutinin (PHA) (Sigma-Aldrich, Rehovot, Izrayèl) kòm yon kontwòl pozitif. Pisin peptides ki disponib nan komèsyal (15-mer sekans ak yon sipèpoze 11 asid amine) ki kouvri tout longè Wuhan-1 SARS-CoV{{20}} (tip sovaj) oswa Omicron B.1.1.529 varyant Spike (peptides & elefan GmbH, Hennigsdorf, Almay) yo te itilize pou eksitasyon PBMC. Pisin peptides yo te fonn nan DMSO epi yo te itilize nan yon konsantrasyon final 200 ug/mL (06 ug/mL pou chak peptide); Konsantrasyon final DMSO a te pi ba pase 0.1 pousan. Layout plak la prezante nan Figi Siplemantè S1. Yo te ankouraje PBMC pou 48 èdtan, epi yo te mezire frekans selil ki sekrete sitokin yo ak lektè ImmunoSpot S6 Ultimate ak filtè 520,600 ak 690nm pou pèmèt enimerasyon selil ki eksprime IFNg, IL{36}} ak IL{37}. }, respektivman. Done yo te analize ak vèsyon lojisyèl ImmunoSpot 7.0.30.2 (ImmunoSpot). Tach pozitif ki sipèpoze pa filtè 520nm ak 600 oswa 690 nm yo te konsidere kòm zafè potansyèl ak eskli. Analiz siyifikasyon estatistik done yo te fèt pa tès t Student la.

3. Rezilta ak Diskisyon

Iminite selilè se yon bagay ki enpòtan nan anpeche COVID grav-19. Nan etid aktyèl la, ki te gen ladan uit moun ki an sante (ki refere kòm donatè), ki te pran vaksen an Izrayèl twa fwa ak vaksen mRNA BNT162b2 la, nou t ap chèche detèmine epi konpare nivo ak kalite repons selil T a swa Wuhan {{3} } Spike SARS-CoV-2 oswa variant Omicron B.1.1.529 la. Donatè yo te 20-52 ane fin vye granmoun (mwayèn 27.1,) ak enkli twa gason ak senk fi. Pa gen okenn istwa COVID-19 dokimante pou okenn nan donatè yo; nplis de sa, konsidere enskripsyon epidemyolojik egzat abityèl nan pèp Izrayèl la, li se enposib ke yo te deja enfekte. Yo te ankouraje PBMC yo te ranmase nan men donatè yo ak yon melanj de 315 peptides, chak 15 asid amine longè, ki kouvri tout pwoteyin Spike a. Etid la te enspekte tou de kalite ak nivo repons, jan yo detèmine pa kantite selil ki sekrete sitokin nan yon tès ELISPOT fliyoresan.

Apre eksitasyon antijenik ak peptides ki sòti nan Spike yo, yo te obsève yon repons IFNg dominan nan tout moun ki te egzamine yo, ki sòti nan 50 a 400 selil sekrete pou chak 106 PBMC, ak yon repons IL-10 ki pi ba, ki sòti nan 15 a 82 selil. pou chak 106 PBMC (Figi 1 ak Figi S1). Konfigirasyon eksperimantal la enkli yon etap eksitasyon antijèn 48 èdtan pou pèmèt manifestasyon reyaktivite IL-4-eksprime klon selil T ki kapab prezan nan echantiyon yo; sepandan, yo te detèmine nivo reyaktivite IL-4 prèske endeslabl, an akò ak done anvan yo ki gen rapò ak repons vaksen BNT162b2 ak m1273 yo te jwenn [2,4,8–13]. Yon konparezon nan repons mwayèn nan kalite sovaj ak Spike Omicron (Figi 2) te endike sèlman yon ti tay diminisyon ki pa siyifikatif soti nan 201 selil IFNg-sekre apre deklanchman ak Spike nan kalite sovaj, nan 188 selil ki reponn a Spike nan Omicron. Anplis de sa, pa gen okenn diferans enpòtan yo te obsève ant repons yo mezire sou baz IL-10- ak IL-4-sekrete selil yo.

cistanche tcm

Konsènan endiksyon IFNg nan chak moun ki teste (Figi 1), nan yon ka (Donatè 2), yo te obsève aktivasyon preferansyèl estatistik siyifikatif pa peptides Spike zansèt yo, men nan yon lòt ka (Donatè 5), yo te ekspoze deklanchman preferansyèl an repons a. Spike nan Omicron. Nòt, pa gen okenn diferans enpòtan yo te anrejistre pou IL-10- ak IL-4-sekresyon kantite selil yo. Repons IFNg la te pi wo pase IL-10, ak rapò mwayèn repons IFNg/IL{-10 se 4.9, ki endike yon repons Th1 dominan ki pa gen okenn repons Th2 enpòtan. Esansyèlite selil T yo pou pwoteksyon kont COVID-19 byen dokimante [2,4,10]; Se poutèt sa, konfimasyon reyativite selil T anvè VOCs émergentes ki gen anpil enpòtans. Kòm yo idantifye nouvo VOC ki ap parèt, antretyen iminite pwoteksyon alontèm moun ki pran vaksen yo reprezante yon enkyetid sante piblik ki gen gwo priyorite. Li te sigjere ke nan ka a nan plizyè VOCs, moun ki konvalesans ak vaksen yo ekspoze kèk chape soti nan iminite umoral pandan y ap revele nòmal reyaktivite selil T san konpwomi [5,14].

benefis cistanche dezè

Nan etid la prezan, lè nou analize repons lan nan moun ki swiv twa vaksen BNT162b2, nou te montre yon repons Th1 dominan nan pwoteyin Spike Variant Omicron, ki korelasyon ak iminite pwoteksyon [6]. Repons selil T yo nan tou de varyant zansèt ak Omicron yo te nan nivo koresponn (Figi 2), an liy ak plizyè rapò resan [2,12,13]. Depi done nou yo montre nivo konparab nan repons a tou de Spikes zansèt ak Omicron, li rezonab pou estime ke konpozisyon CD4 ak CD8 nan lòj selil T a rete fiks pou repons a tou de varyant. Valè ajoute nan yon twazyèm vaksen pou reyalize Omicron antikò netralizasyon te deja demontre [15], ak syans nan lavni pral adrese enpòtans nan administrasyon twazyèm vaksen nan antretyen an nan repons selil T yo tou. Anplis de sa, etid adisyonèl yo espere kontwole lòt fraksyon popilasyon an, espesyalman moun ki aje ki gen gwo risk pou yo devlope fòm grav nan COVID-19.

Referans

1 Pulliam, JRC; van Schalkwyk, C.; Gouvènè, N.; von Gottberg, A.; Cohen, C.; Groome, MJ; Dushoff, J.; Mlisana, K.; Moultrie, H. Ogmantasyon risk pou re-enfeksyon SARS-CoV-2 ki asosye ak Aparisyon Variant Omicron nan Lafrik di sid. medRxiv 2021. [CrossRef]

2. Keeton, R.; Tincho, MB; Ngomti, A.; Baguma, R.; Bend, N.; Suzuki, A.; Khan, K.; Cele, S.; Bernstein, M.; Karim, F.; et al. Repons selil T SARS-CoV-2 ki te pwovoke lè vaksinasyon oswa enfeksyon rete solid kont Omicron. medRxiv 2021. [CrossRef]

3. Liu, C.; Ginn, HM; Dejnirattisai, W.; Supasa, P.; Wang, B.; Tuekprakhon, A.; Nutella, R.; Zhou, D.; Mentzer, AJ; Zhao, Y.; et al. Redwi netralizasyon SARS-CoV-2 B.1.617 pa vaksen ak serom konvalesans. Selil 2021, 184, 4220–4236.e13. [CrossRef] [PubMed]

4. Cevik, M.; Grubaugh, ND; Iwasaki, A.; Openshaw, P. Vaksen COVID-19: Kenbe vitès ak varyant SARS-CoV-2. Selil 2021, 184, 5077–5081. [CrossRef] [PubMed]

5. Kustin, T.; Harel, N.; Finkel, U.; Perchik, S.; Harari, S.; Tahor, M.; Caspi, I.; Levy, R.; Leshchinsky, M.; Dror, SK; et al. Prèv pou ogmante pousantaj dekouvèt nan SARS-CoV-2 varyant enkyetid nan moun BNT162b2-mRNA-vaksen yo. Nat. Med. 2021, 27, 1379–1384. [CrossRef] [PubMed]

6. Altmann, DM; Reynolds, CJ; Boyton, RJ SARS-CoV-2 varyant: Subversion nan repons antikò ak enpak prevwa sou rekonesans selil T. Rep. selil Med. 2021, 2, 100286. [CrossRef] [PubMed]

7. Baraniuk, C. Konbyen tan iminite Covid-19 dire? BMJ 2021, 373, n1605. [CrossRef] [PubMed]

8. Reynolds, CJ; Gibbons, JM; Pade, C.; Lin, K.-M.; Sandoval, DM; Pieper, F.; Butler, DK; Liu, S.; Otter, AD; Joy, G.; et al. Enfeksyon eterològ ak vaksinasyon fòme iminite kont varyant SARS-CoV-2. Sci. 2022, 375, 183–192. [CrossRef] [PubMed]

9. Altmann, DM; Boyton, RJ; Beale, R. Iminite kont SARS-CoV-2 varyant enkyetid. Syans 2021, 371, 1103–1104. [CrossRef] [PubMed]

10. Non, JY; Jeong, HW; Kim, JH; Shin, E.-C. Estrateji oryante selil T pou kontwole pandemi COVID-19. Nat. Rev Immunol. 2021, 21, 687–688. [CrossRef] [PubMed]

11. Ogbe, A.; Kronsteiner, B.; Skelly, DT; Pace, M.; Brown, A.; Adland, E.; Adair, K.; Akhter, HD; Ali, M.; Ali, S.-E.; et al. Tès selil T fè diferans ant enfeksyon SARS-CoV-2 klinik ak subklinik ak repons antiviral kwa-reyaktif. Nat. Komin. 2021, 12, 1–14. [CrossRef] [PubMed]

12. GeurtsvanKessel, CH; Geers, D.; Schmitz, KS; Mykytyn, AZ; Lamers, MM; Bogers, S.; Gommers, L.; Sablerolles, RSG; Nieuwkoop, NN; Rijsbergen, LC; et al. Repons divergent SARS CoV-2 Omicron-espesifik T- ak selil B nan moun k ap resevwa vaksen COVID-19. medRxiv 2021. [CrossRef]

13. Naranbhai, V.; Natan, A.; Kaseke, C.; Berrios, C.; Khatri, A.; Choi, S.; Getz, MA; Tano-Menka, R.; Forman, O.; Gayton, A.; et al. Reyaksyon selil T pou SARS-CoV-2 Omicron variant la konsève nan pifò moun, men se pa tout moun ki te enfekte ak moun ki te pran vaksen anvan an. medRxiv 2022. [CrossRef]

14. Geers, D.; Shamier, MC; Bogers, S.; den Hartog, GD; Gommers, L.; Nieuwkoop, NN; Schmitz, KS; Rijsbergen, LC; van Osch, JAT; Dijkhuizen, E.; et al. SARS-CoV-2 varyant enkyetid yo chape pasyèlman repons imoral men pa selil T nan COVID-19 donatè konvalesans ak moun k ap resevwa vaksen yo. Sci. Imunol. 2021, 6, eabj1750. [CrossRef] [PubMed]

15. Nemet, I.; Klinker, L.; Lustig, Y.; Zuckerman, N.; Erster, O.; Cohen, C.; Kreiss, Y.; Alroy-Preis, S.; Regev-Yochay, G.; Mendelson, E.; et al. Twazyèm vaksen BNT162b2 netralizasyon SARS-CoV-2 Omicron enfeksyon. N. Engl. J. Med. 2021. [CrossRef] [PubMed]