Idantifikasyon sib ak analiz mekanis pou aktivasyon makrofaj nan sakarid ki ba pwa molekilè ki soti nan Cistanche Deserticola ki baze sou kromatografi afinite molekilè.

［Rezime］Etid sa a gen pou objaktif pou mennen ankèt sou sib yo ak mekanis ki enplike nan objektif pou aktivasyon makrofaj nan sakarid ki ba pwa molekilè soti nan Cistanche deserticola (LMSC). Aktivite fagositik la ak NON lage RAW264. 7 selil yo te detekte, ak rezilta yo te montre ke LMSC egzèse efè aktivasyon iminitè nan ogmante siyifikativman aktivite fagositik la ak NO lage. LMSC-konjige epoksidik aktive pèl sepharose yo te prepare kòm reyaktif afinite pran pwoteyin sib yo. Vennkat pwoteyin tankou Eef2 te idantifye pa analiz LC-MS / MS. Analiz anrichisman chemen te montre LMSC aktive RAW264. 7 selil pa reglemante fagositoz depandan reseptè Fcgamma, chemen siyal TNF-alfa NF-κB, glikoliz/glikoneogenesis ak sik asid asid ak chemen transpò elèktron respiratwa.

［Mo kle］Cistanche deserticola; sakarid ki ba pwa molekilè; aktivasyon makrofaj; kromatografi afinite molekilè; idantifikasyon sib; analiz mekanis

Dezè ginseng

Cistanches Herba se yon pi popilè medikaman tradisyonèl Chinwa pou tonifye ren ak Yang, benefisye sans ak san, ak nouri trip yo ak mouvman entesten. Li se ke yo rekonèt kòm "dezè ginseng". Rechèch chimi analitik modèn montre ke Cistanche deserticola gen yon varyete konpozan idrat kabòn, ki gen ladan konpoze monosakarid sitou ki gen ladan fruktoz, konpoze oligosakarid tankou sikwoz, ak polisakarid tankou ACDP-2, ki se sibstans efikas pou Cistanche deserticola jwe wòl nan. regilasyon iminitè, defèkasyon, elatriye [2-5]. Polisakarid Cistanche deserticola yo te lajman rapòte kòm yon klas nan engredyan aktif ak efè imunomodulateur, pandan y ap sik ki ba pwa molekilè (LMSCs) tankou oligosakarid ak monosakarid yo te raman etidye. Yon etid pa gwoup rechèch nou an sou deklanchman macrophage nan eleman prensipal yo aktif nan Cistanche deserticola te jwenn ke sik molekilè ki ba se yon kalite eleman aktif ak aktivasyon macrophage, men sib aktivasyon iminitè li yo ak mekanis nan aksyon yo toujou klè.

Efè Cistanche-Amelyore iminite

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Enhance Immunity

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Kwomatografi afinite molekilè se yon metòd kwomatografi ki reyalize separasyon ak pirifikasyon molekil sib yo lè yo lye yo espesyalman nan yon faz estasyonè [6]. Metòd sa a gen gwo afinite ak espesifik e li patikilyèman apwopriye pou sistèm òganik konplèks ak konsantrasyon pwodwi sib ki ba anpil [7]. Nan dènye ane yo, li te devlope piti piti nan yon zouti pwisan pou idantifye objektif dwòg natirèl. Nan etid sa a, ti molekil sib pwoteyin kaptire teknoloji ki baze sou molekilè chromatografi afinite yo te itilize yo idantifye pwoteyin sib LMSC ak aktivasyon macrophage. Atravè analiz bioenfòmatik, yo jwenn enfòmasyon siyal regilasyon gwoup sib la pou eksplore aktivite regilasyon iminitè a ak mekanis ki gen rapò ak LMSC.

1 Materyèl

1.1 Selil

Liy macrophage sourit RAW264 7 Achte nan Sant selil Chinwa Akademi Syans Medikal.

1.2 Dwòg ak reyaktif

Serom fetal bovine (FBS) te achte nan men PAN Biotech nan Almay; Antibyotik, DMEM segondè sik mwayen, ak 6 × tanpon an echantiyon pwoteyin te achte nan men Zhongke Maichen Technology Co, Ltd. Sik la ki ba pwa molekilè nan Cistanche deserticola te pwòp tèt ou-fè pa gwoup rechèch nou an ak detèmine pa HPLC sitou gen mannitol ( 16 53 pousan), sikwoz (8 34 pousan), Fruktoz (25 38 pousan), glikoz (7 75 pousan) ak lòt konpozan monomerik. Lipopolisakarid ki soti nan Escherichia coli O55: B5, LPS, 3 - (4,5-dimethyl thiazole-2) - 2,{5-diphenyltetrazolium bromur (MTT) ak {{ Yo te achte 14}} pousan solisyon net wouj nan men Sigma Aldrich nan Etazini. Yo te achte twous reyaktif oksid nitrique (NO) nan Nanjing Jiancheng Biotechnology Research Institute. Epoksidik aktive Sepharose jèl (6B) te achte nan men swen sante GE nan Sweden. Twous tach ajan rapid la te achte nan men Biyuntian Biotechnology Research Institute. Tou de asid fòmik ak asetonitrile pou espektometri mas yo te achte nan men Thermo Fisher Scientific nan peyi Etazini. Tout lòt réactifs se domestik analyse pi.

Cistanche poud

1.3 Enstriman

CO2 selil enkibatè (SANYO, Japon); CIX100 mikwoskòp (Olympus Corporation, Japon); 5424R santrifujeur (Eppendorf, Almay); Otomatik dlo purifikateur (Millipore, USA); Sunrise Basic ELISA (TECAN, Swis); THZ-C Desktop konstan tanperati osilator (Suzhou Peiying Eksperimantal Ekipman Co, Ltd.); EAS Y-nLC - II likid chromatographs (Thermo Fisher Scientific, USA); LTQ-Orbitrap iyon pèlen tandem mas espektrometri (Thermo Fisher Scientific, USA); Kapilè kolòn kwomatografi likid (Michrom Bioresources, USA).

2 Metòd

2.1 Kilti Selil ak Administrasyon

RAW264. 7 selil yo te kiltive nan mwayen DMEM ki wo glikoz ki gen 10 pousan serom fetis bovin ak 1 pousan doub antikò, epi yo mete yo nan yon enkibatè tanperati konstan imidite 37 degre ki gen 5 pousan CO2. Pase yon fwa chak 2-3 jou epi fè eksperyans lè selil yo antre nan faz kwasans logaritmik la. Divize selil yo nan gwoup vid, gwoup lipopolysaccharide, oswa gwoup sik ki ba pwa molekilè nan Cistanche deserticola. Selil gwoup LPS yo te trete ak 1 mg · L-1 solisyon LPS kòm yon kontwòl pozitif; Selil gwoup LMSC yo te ajoute ak solisyon LMSC nan konsantrasyon mas diferan (0 25,0. 5,1,2 g·L - 1; Filtre ak yon manbràn filtre anvan administrasyon); Ajoute yon volim egal nan mwayen kilti san serom nan selil gwoup vid yo.

2.2 Detèminasyon aktivite fagositik macrophage lè l sèvi avèk metòd net wouj la

RAW264. 7 selil yo te simen sou yon plak 96-byen epi yo te kiltive lannwit lan anvan yo te ranplase ak mwayen san serom oswa mwayen san serom ki gen LPS oswa diferan konsantrasyon LMSC. Apre 48 èdtan nan kiltivasyon, selil yo te ranplase ak 0 075 pousan solisyon wouj net epi yo te kontinye enkube a 37 degre pou 4 èdtan. Absòbe epi jete supernatant la, lave de fwa ak PBS, epi sèvi ak solisyon liz selil (glasyal asid acetic etanòl 1:1) pou lyse selil yo nan 4 degre. Apre liz konplè, mezire absorbans chak pi (A540 nm).

2.3 Deteksyon lage NO nan supernatant selil

RAW264. 7 selil yo te simen sou yon plak 48-byen epi yo te kiltive lannwit lan anvan yo te ranplase ak mwayen san serom oswa mwayen san serom ki gen LPS oswa diferan konsantrasyon LMSC. Apre 24 èdtan nan kilti endiksyon, kolekte supernatant la epi mezire kontni NO nan supernatant nan chak selil bon dapre enstriksyon yo nan twous reyaktif la.

2.4 MTT tès pou viabilite macrophage

RAW264. Yo te bay 7 selil sou yon plak 96-byen, epi apre kiltivasyon lannwit lan, yo te ranplase yo ak mwayen san serom oswa mwayen san serom ki gen LPS oswa diferan konsantrasyon LMSC epi yo te kontinye kiltive pou 24 èdtan. Ranplase chak selil bon ak 0 Enkube 5 g · L-1 solisyon MTT a 37 degre C pou 4 èdtan, apresa fonn pwodwi reyaksyon MTT la ak dimethyl sulfoxide, epi mezire absorpsyon chak pi nan yon longèdonn. nan 570 nm lè l sèvi avèk yon tès imunosorban ki lye ak anzim.

Preparasyon nan 2.5 Cistanche deserticola ba sik molekilè afinite mwayen

Referans metòd [8], peze résine agaroz aktive epoksidik 0 5 g, fonn li nan dlo deyonize pou 40 minit, santrifuje epi jete supernatant la, epi repete pwosesis la twa fwa pou fè jèl la konplètman. anfle (volim li se apeprè 1 mL), pou sibstiti. Pran 0 Melanje 5 mL jèl agaroz ki anfle ak epoksidik ak 1 mL solisyon LMSC (1 g · mL - 1) oswa yon volim ekivalan sòlvan, epi enkube nan yon shaker tanperati konstan a 37 degre lannwit lan. Lave mwayen agaroz vid oswa LMSC makonnen plizyè fwa ak dlo deyonize jiskaske supernatant la san koulè, apresa ajoute 1 mL solisyon etanolamin (1 mol · L-1) epi sele li sou yon tab souke tanperati konstan a 37 degre pou 2 jou. Apre reyaksyon an fini, netwaye 5 fwa chak ak dlo distile doub, tanpon NaCl Hac, ak tanpon NaCl Tris HCl, epi finalman sèvi ak 0 Lave de fwa ak 01 pousan NP40 eluyan pou backup.

2.6 Anrichisman ak Idantifikasyon gwoup sib yo

Pou RAW264 Ekstrè total de pwoteyin ki soti nan 7 selil (0 Ajoute 50 a 5 g · L-1 respektivman μ L mwayen vid oswa mwayen afinite LMSC, kòm yon gwoup kontwòl vid ak gwoup obligatwa LMSC ; Fikse yon gwoup konpetitif ki an menm tan ajoute solisyon LMSC ak mwayen afinite LMSC. Apre melanje chak gwoup, enkube nan 4 degre lannwit lan pou li konplètman LMSC nan pwoteyin sib la. Apre reyaksyon an, sèvi ak 0 Lave mwayen afinite a 6 fwa ak yon 01. pousan NP40 eluyan pou retire rezidyèl pwoteyin gratis nan mwayen afinite a.Ajoute mwayen afinite lave nan yon volim egal 2 × Egzanp tanpon chaje, denatire nan 98 degre pou 8 minit pou disoye pwoteyin obligatwa a. Souse surnatant la, fè jèl SDS-PAGE. elektwoforèz, ak Lè sa a, fè analiz tach ajan dapre enstriksyon yo nan twous la.

2.7 LC-MS/MS metòd pou idantifye gwoup pwoteyin sib yo

Metòd referans [8] te itilize pou idantifye pwoteyin obligatwa espesifik lè l sèvi avèk yon de dimansyon nano HPLC-LTQ-Orbitrap/MS tandem lineyè iyon pèlen mas spèktrometri (nano HPLC-LTQ-Orbitrap/MS). Metòd espesifik la se jan sa a: Premyèman, yo itilize trypsin pou idrolize bann pwoteyin ki eksprime diferan nan jèl la pou jwenn yon melanj de segman peptide sib. Melanj peptide a te sibi 0 vennde μ Apre filtraj ak yon manbràn mikwopore, ekstrè 10 pousan μ Add L echantiyon solisyon nan kolòn kapilè likid kromatografi a. Kondisyon chromatografik: faz mobil 0 1 pousan solisyon akeuz asid fòmik (A) - asetonitrile (B), kondisyon elisyon gradyan yo montre nan Tablo 1. Kondisyon spectre mas: vòltaj espre elektrik se 1 8 kV, ion pozitif mòd koleksyon done, seri eskanè konplè mete sou m/z 350-2 000; Fè MS/MS eskanè sou 15 pik ki pi fò yo, ak yon enèji kolizyon segondè mete nan 35 V. Finalman, sèvi ak lojisyèl rechèch SEQUEST pou chèche ak matche ak done segman peptide yo jwenn.

Tablo 1 pwofil gradyan nan analiz nano-HPLC

Remak: To koule yo tout se 300 nL · min-1.

2.8 Aksyon gwoup sib chemen ak analiz fonksyonèl

Enpòte pwoteyin sib idantifye a nan Cytoscape 3 Nan lojisyèl 5.1 la, yo te itilize plugin ClueGO pou analiz KEGG, REACTOME Pathways, ak Wiki Pathways, epi yo te mete espès la kòm sourit ak P.<0 05 as the significance threshold, and the rest use default parameters.

2.9 Analiz estatistik

Tout done eksperimantal yo eksprime nan jaden x ± s. Sèvi ak GraphPad Prism-6 02 Lojisyèl estatistik yo te itilize pou analiz yon sèl-fason nan divèjans (ANOVA), ak P<0 01 having a very significant difference.

3 Rezilta ak Diskisyon

3.1 Sik molekilè ki ba nan Cistanche deserticola afekte RAW264 Efè aktivite fagositik selil 7-

Nan yon lòt etid pa gwoup rechèch nou an sou eleman aktif nan aktivasyon makrofaj nan Cistanche deserticola, LMSC ka yon kalite eleman ak aktivasyon macrophage..

Etid eksperimantal sou Cistanche deserticola

Eksperyans sa a te itilize premye metòd net wouj la pou detèmine RAW264 Sistèm kilti vitro nan 7 makrofaj peritoneal sourit yo te ankouraje ak diferan konsantrasyon nan LMSC pou mennen ankèt sou efè a nan LMSC sou RAW264 Efè a nan 7 selil fagocytic aktivite. Konpare ak gwoup kontwòl vid la, dwòg kontwòl pozitif LPS stimul selil pou 48 èdtan siyifikativman amelyore aktivite fagositik selilè (P).<0 01); LMSC at 0 Each administration group of 25-2 g · L-1 significantly increased RAW264 The phagocytic activity of 7 cells (P<0 01), and exhibit dose-dependent characteristics. The above results suggest that LMSC may have activated RAW264 The role of 7 cells is shown in Figure 1.

Konpare ak gwoup kontwòl vid la, 1) P<0 01 (same as Figure 2).

Fig. 1 Efè sakarid ki ba pwa molekilè ki soti nan Cistanche deserticola sou aktivite fagositik RAW264. 7 selil

3.2 Sik molekilè ki ba nan Cistanche deserticola afekte RAW264 Efè NO lage nan 7 selil

NO se yon cytokine enpòtan ki gen efè regilasyon iminitè nan kò a [9], anpil rapòte ke yo patisipe nan reglemante repons aktivasyon selil RAW264 7-. Pou plis envestige enpak LMSC sou RAW264 Yo te detèmine efè aktivasyon 7 selil yo, epi yo te mezire kontni NO nan supernatant selil apre eksitasyon LMSC. Liberasyon NO nan gwoup LPS la ak deklanchman macrophage dwòg pozitif te siyifikativman pi wo pase sa nan gwoup kontwòl vid la (P<0. 05) 01), similar to it, 0 RAW264 in the LMSC administration group with 3 doses of 5, 1, 2 g · L-1 The NO release of 7 cells was significantly higher than that of the blank control group (P<0. 05) 01), and it is dose-dependent, as shown in Figure 2. The above results indicate that LMSC can promote RAW264 The effect of 7 cells releasing NO confirms its macrophage activation effect.

Fig. 2 Efè sakarid ki ba pwa molekilè ki soti nan Cistanche deserticola sou NO lage nan RAW264. 7 selil

3.3 Sik molekilè ki ba nan Cistanche deserticola afekte RAW264 Enpak viabilite selil 7-

Sitotoksisite se yon faktè enpòtan ki mete restriksyon sou devlopman nouvo dwòg ak afekte efikasite yo. Pou envestige si dòz LMSC yo itilize nan eksperyans sa a gen sitotoksisite potansyèl, yo te itilize metòd MTT pou detekte RAW264 apre administrasyon LMSC 7 selil viabilite. LMSC nan 0 25-2 g · L-1 entèvansyon RAW264 Apre 24 èdtan nan 7 selil, pa te gen okenn efè enpòtan sou viabilite selil yo, ak rezilta ki anwo yo sijere ke 0 25-2 g · L{{8 }} LMSC vs RAW264 7 pa gen okenn sitotoksisite, jan yo montre nan Figi 3.

Fig. 3 Efè sakarid ki ba pwa molekilè ki soti nan Cistanche deserticola sou RAW264. 7 viabilite selil

3. 4 Anrichisman ak Idantifikasyon Gwoup Sib pou Aktivasyon Macrophage nan sik ki ba pwa molekilè nan Cistanche deserticola

Jèl agaroz aktive epoksid se yon transpòtè faz solid lajman ki itilize pou kouple sakarid, pwoteyin, ak lòt molekil ki gen gwoup idroksil oswa amine. LMSC se sitou konpoze de fruktoz ki rich ak idroksil, mannitol, ak lòt konpozan. Nan etid sa a, hydroxyl ki genyen nan ka reyaji ak gwoup epoksidik aktif pou lye sik molekilè ki ba nan Cistanche deserticola nan sifas mikrosfè jèl agarose epoksidik aktive pou konstwi mwayen afinite LMSC, jan yo montre nan Figi 4A. Sèvi ak teknoloji molekilè kwomatografi afinite, mwayen afinite LMSC te melanje ak RAW264 Enkube ekstrè pwoteyin total 7 selil yo pou pran gwoup pwoteyin sib la dirèkteman. Yo te fè tach ajan sou gwoup sib la, jan yo montre nan Figi 4B. Gwoup pwoteyin LMSC afinite medyòm Liaison gwoup yo te siyifikativman pi wo pase sa yo ki pa kouple LMSC blanch mwayen gwoup la, pandan ke LMSC konpetitif gwoup la siyifikativman redwi kantite afinite mwayen te kaptire sib akòz twòp lib LMSC konpetitif obligatwa ak pwoteyin sib la. Imedyatman, yo te itilize metòd HPLC MS/MS pou idantifye chak gwoup pwoteyin, epi yo te jwenn yon total de 24 pwoteyin sib tankou Eef2, ki endike ke sik molekilè ki ba nan Cistanche deserticola ka lakòz aktivasyon makrofaj atravè aksyon an konbine nan pwoteyin sib sa yo.

3. 5 Analiz de mekanis aksyon ki gen rapò ak gwoup sib aktivasyon makrofaj ki ba sik molekilè nan Cistanche deserticola.

Pou mennen ankèt sou pwoteyin ki ba sik molekilè nan Cistanche deserticola ki lakòz RAW264 Mekanis aktivasyon makrofaj la analize nan etid sa a lè l sèvi avèk baz done KEGG, REACTOME, ak Wiki siyal pou mennen ankèt sou wout byolojik ki enplike nan gwoup pwoteyin sib LMSC. Rezilta analiz anrichisman chemen siyal yo montre nan Figi 5 ak Tablo 2. Pwoteyin sib aktivasyon makrofaj LMSC sitou patisipe nan 10 chemen siyal ki gen rapò ak aktivasyon makrofaj yo, ki ka rezime nan 4 kategori sa yo: Fc Receptor depandan fagositoz, TNF-NF. - κ B chemen siyal, glikoliz/glikoneogenesis, sik asid asid (TCA), ak transpò elèktron respiratwa.

4 Diskisyon

Rechèch modèn rapòte ke medikaman tradisyonèl Chinwa ak dwòg natirèl gen yon pakèt aktivite byolojik, men akòz konpozisyon chimik konplèks yo, gen toujou defi nan elisid mekanis nan aksyon nan sistèm yo eleman konplèks nan medikaman tradisyonèl Chinwa ak dwòg natirèl. Ki baze sou teknoloji a ti molekil sib pwoteyin kaptire nan kromatografi molekilè afinite, etid sa a konbine avèk konpozisyon chimik komen ki eleman prensipal yo nan sik molekilè nan Cistanche deserticola (LMSC) tout gen gwoup idroksil, ak konstwi LMSC lye epoksidik aktive agarose jèl mikrosfè. kòm mwayen afinite a, yo idantifye gwoup pwoteyin sib LMSC ak aktivasyon makrofaj ak analize chemen transdiksyon siyal ki gen rapò ak gwoup sib la, Anplis de sa, mekanis deklanchman macrophage LMSC te revele.

Efè Cistanche-Amelyore iminite

Makwofaj yo se yon kalite selil repons iminitè enpòtan nan kò a ki ka fagositè antijèn granulaire. Aktivasyon makwofaj ki te koze pa stimuli ekzojèn sitou manifeste pa amelyorasyon fonksyon fagositik ak liberasyon NO ak lòt faktè ki te koze pa yon seri de chemen siyal. Amelyorasyon LMSC depandan de dòz RAW264 Aktivite fagositik 7 selil yo ak yon ogmantasyon siyifikatif nan lage NO endike ke LMSC gen yon efè aktivasyon makrofaj. Analiz anrichisman chemen siyal sib deklanchman makrofaj LMSC yo te kaptire pa kromatografi afinite molekilè lè l sèvi avèk mwayen byoenfòmatik sijere ke LMSC kontwole Fc pa fagositoz depandan reseptè, TNF-NF- κ Chemen siyal B la, glikoliz / glikoz, sik asid asid (TCA), ak transpò elèktron respiratwa jwe wòl aktivasyon macrophage.

A. Mikwoskopik karakterizasyon mwayen afinite (ba =25 μ m); B. Silver tache jèl elektwoforèz nan sib anrichi.

Fig. 4 Idantifikasyon objektif yo pou sakarid ki ba pwa molekilè ki soti nan Cistanche deserticola

Fig. 5 Analiz anrichisman chemen pou objektif sakarid pwa molekilè ki ba nan Cistanche deserticola.

Reseptè Fc yo se reseptè sifas selil yo ak youn nan reseptè rekonesans makwofaj yo [11]. Yo sitiye sou sifas selil la epi yo ka espesyalman rekonèt patikil ekzojèn, sa ki lakòz yo mare nan sifas selil la. Fc transdiksyon siyal fagositoz medyatè reseptè ka lakòz en polymerization aktin ak fòmasyon fagosit [11]. LMSC siyifikativman amelyore aktivite fagositik selil RAW264 7, ki ka gen rapò ak lyezon divès kalite Fcs tankou Hsp90 Receptor siyal pwoteyin ki gen rapò ak kontwole fagositoz depandan Fc Receptor. NF- κ chemen siyal B la konsidere kòm yon chemen siyal kle pou aktivasyon makrofaj [12]. NF- κ B se yon faktè regilasyon enpòtan transkripsyon nan nwayo a, NF- κ Aktivasyon nan chemen an siyal B ka lakòz NF nan sitoplasm nan- κ B se aktive ak transloke nan nwayo a, kidonk medyatè ekspresyon jèn nan divès sitokin, ak NON. medyatè. Eksitasyon LMSC ka lakòz selil RAW264 7 lage yon gwo kantite NO, ki ka gen rapò ak TNF lè yo lye ak plizyè faktè tankou Eef2- NF-κ B siyal chemen ak lòt pwoteyin ki gen rapò aktive NF. - κ Chemen siyal B la ak pwosesis inisyasyon ak ekstansyon tradiksyon ekaryotik ki asosye li yo aplike. Anplis de sa, sib ki gen rapò ak LMSC enplike tou de chemen metabolis idrat kabòn: glikoliz / glikoneogenesis, sik asid asid (TCA), ak transpò elèktron respiratwa. Yo espekile ke LMSC gen divès kalite sik molekilè ki ba tankou fruktoz ak mannitol, ki ka afekte RAW264 7 selil yo bay enèji, ak mare nan pwoteyin tankou Aldoa ki gen rapò ak metabolis glikoz, kidonk reglemante chemen ki gen rapò ak metabolis glikoz.

An rezime, etid sa a te idantifye 24 diferan pwoteyin sib fonksyonèl pou aktivasyon makrofaj LMSC lè l sèvi avèk teknoloji rekonesans pwoteyin sib ki gen rapò ak kromatografi afinite molekilè; Analiz anrichisman nan chemen siyal sib ki gen rapò ak pwoteyin sijere ke LMSC aji sou fagositoz depandan Fc Receptor, TNF-NF- κ Chemen siyal B la ak pwosesis metabolis glikoz finalman fè egzèsis RAW 264 7. Aktivasyon macrophage. Etid sa a bay sipò teyorik pou revele eleman aktif yo ak mekanis ki gen rapò ak règleman iminitè nan Cistanche deserticola epi tou li bay lide pou rekonesans sib la ak rechèch mekanis nan eleman konplèks aktif nan dwòg natirèl.

Tablo 2 Analiz anrichisman chemen pou objektif LMSC yo

[Referans]

［1］ Chinese Pharmacopea Pati 1 [S]. 2010:126

［2］ Xu Wenhao, Qiu Shengxiang, Zhao Jihong, et al Yon etid sou eleman chimik Cistanche deserticola ［ J ］. Chinwa Medikaman èrbal, 1994, 25 (10): 509

［3］ Wu XM, Gao XM, Tsim KW, et al. Yon arabinogalactan izole nan tij Cistanche deserticola pwovoke pwopagasyon lenfosit kiltive［J］． Int J Biol Macromol,2005,37 (5): 278．

［4］ Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Runlan, et al Aktivasyon Macrophage nan polisakarid soti nan Cistanche deserticola ［ J ］. Chinese Pharmacological Bulletin, 2009, 25 (6): 787

［5］ Gao Yunjia, Jiang Yong, Dai Fang, et al. Yon etid sou sibstans farmakodinamik Cistanche deserticola nan nourisan trip ak soulaje poupou ［ J ］. Medsin modèn Chinwa, 2015, 17 (4): 307

［6］ Liu Wangcai, Zhu Jiawen Pwogrè rechèch nan teknoloji kwomatografi afinite [J]. Shanghai endistri chimik, 2007, 32 (4): 27

［7］ Kwomatografi afinite Hong Minghan. Chemical World, 1981, 9:281

［8］ Liao LX,Song XM,Wang LC,et al. Anpèchman trè selektif nan IMPDH2 bay baz terapi antineuroinflammation［J］． Proc Natl Acad Sci USA,2017,114 (29) : E5986．

［9］ Wang Jing, Zhang Chundan, Yang Limin, et al Efè aktivasyon polisakarid ekstraselilè soti nan Pleurotus ferulae sou makrofaj sourit [J]. Teknoloji endistri manje, 2016, 37 (10): 356

［10］ Zhang Pengyu, Ruan Yingxin, Wang Yinan, et al Activin A ankouraje aktivite fagositik makwofaj peritoneal sourit ［ J ］. Journal of Academy of Military Medical Sciences, 2009, 33 (4): 330

［11］ Xie Zhijian, Xiong Xiaodong, Zuo Yun Fc Mekanis transdiksyon siyal nan fagositoz macrophage R ［ J ］. Iminoloji Medsin Etranje, 2002, 25 (1): 5

［12］ Yuan Xiaolin, Zhang Chunlei, Li Dianjun Pwogrè rechèch sou aktivasyon makrofaj yo ak mekanis siyal yo ［ J ］. Jounal Entènasyonal Imunoloji, 2007, 30 (5): 333