Kontni segondè nan Ent-11 -hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic Acid nan Adenostemma Lavenia (L.) O. Kuntze Leaf Extrait: Avèk Preliminè in Vivo Assay

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Akie Hamamoto, Ryosuke Isogai, Miwa Maeda, Masumi Hayazaki, Eito Horiyama, Shigeo Takashima, Mamoru Koketsu ak Hiroshi Takemori *

Résumé:Background: Ent-11 -hydroxy-15-oxo-Kaur-16-en-19-asid oik(11 OH-KA) se yon byochimik miltifonksyonèl yo jwenn nan kèk foujèr, Pteris semipinnata, ak espès konjenere li yo. Malgre ke yo te pwopoze yon kantite aplikasyon terapetik nan 11 OH-KA (egzanp, anti-kansè, anti-enflamasyon, akblanchiman po), kontni an nan 11 OH-KA nan foujèr sa yo pa wo. Adenostemma lavenia (L.)O. Kuntze, yon Asteraceae, yo te rapòte tou ki genyen 11 OH-KA. Dekoksyon an (dlo cho ekstrè) nan plant antye nan A. Lavenia yo itilize kòm yon remèd popilè pou maladi enflamatwa, tankou ashepatit ak nemoni, sijere ke 11 OH-KA ka engredyan ki responsab pou pwopriyete yo medikaman nan plant sa a. Metòd: Aktivite anti-melanogenic ekstrè dlo yo nan A. Konje Lavenia ak fèy Pteris dispar Kunze (yon parèy P. semipinnata) te konpare nan selil melanom souritB16F10. Kantite lajan an nan11 OH-KAte mezire lè l sèvi avèk likid chromatographyspectrometri. Sourit C57BL/6J yo te trete ak ekstrè dlo nan fèy A. Lavenia, epi yo te mezire konsantrasyon nan san nan 11 OH-KA. Efikasite nan vivo ekstrè dlo nan A. Lavenialeaf te evalye dapre aktivite anti-melanogenic li yo pa kontwole koulè cheve. Rezilta: Byenke tou de ekstrè yo (A. Lavenia ak P. dispar Kunze) te montre gwo aktivite anti-melanogenic, sèlman A. Lavenia te gen yon gwo kantite 11 OH-KA, apeprè 2.5 pousan nan pwa fèy sèk la.11 OH-KA ka pirifye soti nan A. Lavenia fèy nan de etap: ekstraksyon dlo ki te swiv pa kloroformdistribution. Tretman an nan sourit ak ekstrè dlo nan fèy A. Lavenia siprime pigmantasyon nan cheve yo. Konklizyon: Malgre ti kantite sourit egzamine, rezilta preliminè prezan nan pigmantasyon cheve a siprime sijere ke ekstrè dlo nan fèy A. Lavenia ak engredyan ki posib responsab pou sa a—11 OH-KA—yo se nouvo materyèl pou pwodui kosmetik oral. rezilta yo ka itil tou nan devlopman nan lavni nan manje fonksyonèl ak metòd trete pasyan ki soufri maladi ipèpigmantasyon, tankou melasma.

Mo kle: 11 -hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-asid oik; anti-melanogenesis; blanchiman po;manje fonksyonèl; plant medikal; Adenostemma Lavenia; Pteris dispar Kunze;tirozinaz; B16F10 melanom

Cistanche inibit aktivite tirozinaz

1. Entwodiksyon

Etid sou reyaktif anti-melanogenic poublanchiman poak anti-aje vin pi souvan, espesyalman pou engredyan nan manje (fwi, legim, ak remèd fèy medikal) [1]. Yon kantite polifenol ak terpèn ak sous yo te devlope ak komèsyalize kòm manje fonksyonèl ak sipleman.

Diterpene/kaurene ent-11 -hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-asid oik (11 OH-KA), yo jwenn nan fèy foujèr (Pteris semipinnata [2– 5], Pteris livida [6]) ak Compositae (Gochnatia decora [7]), se tou yon kandida atire pou reyaktif anti-melanogenic [5]. Malgre gwo aktivite fizyolojik li yo (egzanp, anti-kansè ak anti-enflamasyon) [8-11], gen sèlman kèk dosye sou efikasite nan in vivo nan 11 OH-KA, ki gen ladan potansyèl anti-melanogenic li yo, gen anpil chans akòz rar li yo. ak kantite restriksyon nan sous.

Etid relasyon estrikti-aktivite, tou de nan vitro ak nan selil kiltive, te idantifye tèm nan 11 OH-KA enpòtan pou egzèse aktivite fonksyonèl li yo (Figi 1). Ranplasman gwoup carboxy nan 19yèm pozisyon nan11 OH-KApa gwoup methyl oswa idroksi konvèti konpoze sa a nan yon konpoze ki gen gwo aktivite anti-kansè, ki endike ke 19- gwoup karboksil la febli toksisite selilè konpoze sa a [5,10,12]. Kontrèman, gwoup alken la nan pozisyon 16yèm la, gwoup la ketone nan pozisyon 15yèm lan, ak gwoup idwoksi nan pozisyon 11 amelyore aktivite apoptotik yo pa aktive chemen siyal Caspase la [10,12]. Sepandan, mwatye sa yo pa endispansab pou siyal lanmò selil kaurenes yo. Kondisyon estriktirèl pou aktivite anti-enflamatwa yo sanble ak sa yo pou aktivite anti-kansè, sa ki sijere crosstalk atravè sib selilè komen, tankou faktè nikleyè kappa B (NF-κB) [12].

Tirozinazse yon anzim ki limite vitès nan sentèz melanin [13,14]. Anzim nan katalize reyaksyon sekans: konvèsyon tirozin nan l-3,4-dihydroxyphenylalanine, l-Dopa, epi answit nan dopaquinone.Nou rapòte ke 11 OH-KA inibit ekspresyon jèn tirozinaz la, ki rezilta nan absòpsyon nanmelanogenesisnan selil melanom sourit B16F10 [5]. Mosyon 11 -idroksi,15-oxo, ak 16-en nan 11 OH-KA yo endispansab pou li.anti-melanogenesisaktivite, ki se karakteristik diferan nan kondisyon yo estriktirèl nan 11 OH-KA konpare ak lòt aktivite, tankou anti-kansè oswa aktivite anti-enflamatwa.

Kidonk, an tèm de aktivite anti-melanogenic li yo, 11 OH-KA se yon konpoze inik nan mitan kaurenes. Malerezman, Pteris dispar Kunze, sous anvan nou an nan11 OH-KA, te genyen sèlman yon ti kantite konpoze sa a [5], ak foujè sa a, osi byen ke P. semipinnata (yon parèy) [4,15], pa gen okenn dosye ofusage nan sijè imen. Anplis, nan tout eksperyans ki sot pase yo, yo te itilize solvang òganik (methyl oswa etilalkòl, klowofòm oswa hexane) pou ekstrè 11 OH-KA, san okenn dosye sou itilizasyon ekstraksyon akeuz.

Sa gen prèske 40 ane, yon gwoup Ameriken te dekouvri 11 OH-KA ak dérivés li yo nan AdenostemmaLavenia (L.) O. Kuntze (yon Asteraceae) [16]. Malgre ke A. Lavenia pa te etidye ase konsènan risk pou kontaminan posib (egzanp, polyan inòganik [17] ak metabolit segondè ki pwodui pa fongis [18,19]) nan fèy ak lòt pati, poud plant antye (yo te rele Ma Zhi Hu) se vann nan. Etazini anba pèmisyon doktè medikal (pwodwi yo ka jwenn nan QualiHerb, Cerritos, CA, USA: Materyèl siplemantè Figi S1). Se poutèt sa, nan etid sa a, pa mezire a11 OH-KAkontni ak evalye efikasite nan aktivite anti-melanogenic li yo, nou egzamine potansyèl la nan yon ekstrè dlo nan fèy A. Lavenia pou itilize nan pwodui kosmetik entèn yo, ansanm ak yon nouvo kategori manje fonksyonèl [20-22] ki ka itilize pou trete. pasyan ki soufri maladi ipèpigmantasyon tankou melasma. Pou dat, sèlman asid tranexamic (yon dwòg emostatik) te disponib kòm yon dwòg entèn pou maladi hyperpigmentation [23,24].

Nou rapòte isit la ke fèy A. Lavenia genyen 11 OH-KA nan nivo segondè (apeprè 2.5 pousan nan pwa sèk nan fèy yo). Ekstrè dlo a nan fèy la A. Lavenia avèk efikasite siprimemelanogenesisinB16F10 selil, epi11 OH-KAka responsab pou 50 pousan nan aktivite anti-melanogenic nan ekstrè dlo a. Tretman oral nan sourit ak ekstrè dlo nan fèy A. Lavenia rezilta nan repwesyon nan pigmantasyon cheve yo.

2. Materyèl ak Metòd

2.1. Pwopagasyon A. lavenia

Depi A. lavenia nan lis kòm yon espès ki an danje nan pifò zòn nan Japon, nou kiltive plant sa a nan yon jaden toupre laboratwa nou an. A. lavenia te pwopaje pa divizyon soti nan 10 plant, ak prèske 100 gof fèy sèk rekòlte soti nan mwa jen jiska jiyè 2019 yo te itilize nan etid sa a.

2.2. Pirifikasyon nan 11 OH-KA soti nan ekstrè dlo ak analiz li yo

Pi bon kalite 11 -OH KA (otantik) te achte nan men BioBioPha (Shanghai, Lachin). Poud fèy sèk (100 mg) ki te jwenn nan fèy A. lavenia oswa P. dispar Kunze te tranpe nan 1 mL dlo distile (pou yon 10-ekstraksyon volim) pou 12 èdtan, epi rezidyèl yo te retire pa santrifugasyon nan 12, 000 rpm pou 10 min. Ekstrè ki kapab lakòz yo te analize pa segondè-pèfòmans (HP) likidchromatography (LC) lè l sèvi avèk yon kolòn C18 ODS (4.6 mm × 50 mm: RP-18 GP, Kanto Kagaku, Tokyo, Japon) ak yon gradyan sòti nan 40 pousan. methanol/dlo a 100 pousan methanol sou 10 min. 11 -Deteksyon OHKA la te fèt lè w detèmine absòpsyon iltravyolèt (UV) nan 245 nm (A245). Pou fè ekstraksyon 20-,30-, ak 50-volim, 50 mg, 33 mg, ak 20 mg poud fèy sèk yo te ekstrè pa 1 mLof dlo distile.

Pou konfime estrikti {{0}}OH KA nan A. lavenia, yo te pirifye asid kaurenoik nan yon semi-gwo echèl. Yon total de 100 g fèy sèk A. lavenia te extrait de fwa nan 20 volim dlo, yon equi-volim CHCl3 te ajoute nan ekstrè dlo a nan fèy yo, epi 11 -OH KA te rekipere nan faz CHCl3 la. Pandan evaporasyon faz CHCl3 refè a, 11 -OH KA te presipite kòm kristal blan. Kristal sa yo te refè pa yon filtè papye. Kristal refè yo te analize pa rezonans mayetik nikleyè (NMR) (1H-NMR (CDCl3) δ 0.95 (3H, s), 1.28 (3H, s), 1.05-2.22 (15H, m), 2.37 (1H, d, J {). {27}}.9 Hz), 3.06 (1H, s laj), 4.06 (1H, d, J=4.6 Hz), 5.27 (1H, s), ak 5.87 (1H, s)). Spectre 1H-NMR nan kristal la te konyensidans ak natif natal 11 -OH KAspectrum (gade Materyèl siplemantè Figi S2).

2.3. Analiz de 11 OH-KA nan serom sourit

Metòd pou analiz ultra-pèfòmans LC (UPLC)-spèktrometri mas (MS) te trase nan plizyè metòd yo itilize nan [25,26]. Yon ti tan, pou trete sourit (C57BL/6J), A. lavenia fèy yo te ekstrè ak 30 volim dlo. Apre esterilizasyon nan 120 ◦C pou 20 minit, ekstrè a te dilye ak 2 volim dlo epi li te sèvi kòm dlo pou bwè. Pou egzamine famakokinetik 11 -OHKA, yo te administre 100 mg/kg konpoze an sispann nan 1 pousan Tween 80 (Kanto Kagaku, Tokyo, Japon). Yo te refè san atravè venn ke a 15-240 minit apre administrasyon an.

Pou mezire {{0}}OH KA nan san sourit, yo te ekstrè serom (2{0 µL) ak 2{00 µL offacetonitrile. Pou nòmalize efikasite ekstraksyon an, yo te ajoute 10 nmols 18 -asid glisirretinik (Kanto Kagaku) ​​nan serom la anvan ekstraksyon an. Apre yo fin retire acetonitrile pa evaporasyon, konpoze yo te fonn nan 5 µL metanol ki te swiv pa adisyon 5 µL H2O. Lè sa a, yo te itilize 1 µLof solisyon pou LC-MS spèktrometri (MS: Waters Xevo G2-XS QTof, Waters, Milford, MA). Pou separe 11 -OH KA, yon kolòn C18 ODS (3.0 mm). × 150 mm (5 µm): RP -18 GP, Kanto Kagaku) ​​ak yon gradyan ki soti nan 35 pousan acetonitrile/dlo a 100 pousan acetonitrile sou 10 min. MSconditions yo te jan sa a: kapilè (kV), 2.20; nwayo echantiyon, 45; kòn ekstraksyon, 4.0. Paske nou echwe pou detekte fragman 11 -OH KA atravè analiz MS/MS (Materyèl Siplemantè Figi S3A),11 -OH KA te quantifye ak siyal MS sèlman lè yo kontwole rapò mas-a-chaj la (m/ z) nan 331.1879 ak chemen an 0.01 Da (Materyèl Siplemantè Figi S3B). Yo te prepare yon koub estanda pa adisyon 11 -OH KA (nan yon konsantrasyon final 0.1-3 µM) ak 50 pousan metanol/dlo ki te prepare nan serom nòmal sourit lè l sèvi avèk menm pwosedi pou 11 -OH. Ekstraksyon KA. Yo te mezire 18 -asid glisirretinik lè l sèvi avèk LC-UV nan menm kondisyon yo te itilize pou 11 -OH KA mezi a. Eksperyans bèt sa yo te apwouve pa Animal ExperimentCommittee nan Gifu University (H30-041). Nou te itilize yon kantite minimòm sourit pou respekte kondisyon byennèt bèt yo.

2.4. Esè Melanogenesis

Selil melanom B16F10 sourit ki soti nan Koleksyon Kilti Ameriken Kalite (RIKEN, Tsukuba, Japon) yo te kiltive nan mwayen Dulbecco modifye Eagle (DMEM-High glikoz (4.5 g/L d-glikoz), WAKO, Kyoto, Japon) epi yo te konplete ak 10 pousan. serom fetis bovin ak antibyotik. Selil yo te enkube nan yon atmosfè imidite ak 5 pousan CO2 nan 37 ◦C epi yo te transfere chak de jou viatripsinizasyon nan nouvo plak kilti.

Selil yo (2 × 105) yo te plake sou yon plak 6-byen epi yo te enkube pou 12-16 èdtan anvan endiksyon an.melanogenesis. Melanogenesis te pwovoke pa 20 µM forskolin (Fsk) ansanm ak ekstrè A. laveniawater oswa 11 -OH KA pou 48 èdtan. Mezi Melanin yo te fèt an akò ak literati [5]. Yon ti tan, selil yo te lave de fwa ak fosfat-tanpon saline ak rekipere nan tib koleksyon 2 mL, ki te swiv pa santrifujasyon nan 8000 rpm pou 1.5 min. Chak grenn selil yo te sispann nan 200 µL dlo distile, epi yo te itilize 50 µL pou mezire kontni pwoteyin. Yo te melanje 150 µL rezidyèl yo ak 150 µL NaOH 2 M epi lisize pa enkubasyon nan 45 ◦C pou 2 èdtan. Melanin nan te ekstrè ak yon melanj 2: 1 klowofòm-metanòl epi mezire ak aspektofotomètr (Glomax Multi, Promega, Madison, WI, USA) nan 405 nm. Konsantrasyon pwoteyin nan granules selil yo te detèmine lè l sèvi avèk yon reyaktif Bradford (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) epi yo itilize pou nòmalize kontni melanin.

efè cistanche ekstrè: anpeche melanin ak blanchi po

2.5. Analiz estatistik

Yo te fè analiz estatistik la lè l sèvi avèk tès t Student la lè yo te jwenn done yo pandan menm eksperyans la. Nou pa t sèvi ak analiz estatistik si eksperyans yo te fèt nan jou diferan oswa si nimewo echantiyon an te sèlman de.

3. Rezilta yo

3.1. A. Lavenia genyen yon gwo kantite 11 OH-KA

Nou te deja rapòte ke ekstrè etanòl P. disper Kunze fèy, prepare ak 10 volim nan pwa sèk (v/w) etanòl, efikasman anpechemelanogenesisnan selil B16F10, menm apre yon dilution 1/1000 [5]. Pou konpare efikasite nan ekstrè dlo yo nan fèy sèk A. lavenia ak sa yo ki nan ekstrè nan dlo nan fèy P. disper Kunze, nou prepare ekstrè yo (20 volim dlo (v/w driedleaves)) epi ajoute yo nan mwayen kiltive yo ansanm. ak forskolin (melanogenesis inducer-acAMP agonist). Tou de ekstrè yo efikasman anpeche sentèz melanin menm nan 1/1000 dilution, lè kontni themelanin te vizyèlman evalye (Figi 2A). Te kontni an melanin mezire apre NaOHextraction (Figi 2B). Nan 1/3000 dilution, A. lavenia ekstrè a diminye kontni an melanin pa 69 pousan konpare ak kontwòl la (Fsk sèlman), ak ekstrè nan P. disper Kunze diminye kontni an melanin by41 pousan. Nan 1/1000 dilution, A. lavenia ekstrè diminye kontni an melanin nèt, pandan y ap ekstrè yo P. disperKunze diminye kontni an melanin pa 60 pousan. Diferans sa a pa te obsève lè ekstrè yo te dilye nan 1/300.

Analiz LC-UV yo sijere sa11 OH-KAse te pi gwo eleman nan ekstrè A. laveniawater (Figi 2C, agoch). Kontrèman, pa gen okenn pik klè pou 11 OH-KA te detekte lè theP. disper Kunze ekstrè te analize (Figi 2C, adwat). Analiz LC-MS yo sijere ke pik ki endike pa yon flèch koresponn ak 11 OH-KA (done yo pa montre). Rezilta sa yo endike ke 11 OH-KA ta ka pi gwo eleman responsab poumelanogenesisanpèchman nan ekstrè A. lavenia, alòske dérivés tankou fòm glikozile [5] ta ka preferansyèlman kontribye nan anpèchman melanin inP. dispèse Kunze ekstrè.

Apre sa, nou te eseye pirifye11 OH-KApa distribisyon. CHCl3 te kapab ekstrè 11 OH-KA fromthe pi wo a A. lavenia ekstrè dlo ak pite segondè (plis pase 87 pousan) (Figi 2D, bò gòch). Spectraof analiz RMN yo nan sibstans ki kristalize nan CHCl3 yo te idantik ak sa yo ki nan otantik11 OH-KA a (gade Materyèl ak Metòd). Kontrèman, yon gwo kantite konpoze enkoni yo te ekstrè soti nan ekstrè dlo P. disper Kunze (Figi 2D, adwat). Yon rezime analiz LC yo endike nan Figi 2E, ki sijere ke A. lavenia se yon sous atire 11 OH-KA.

3.2. Fè ekstraksyon apwopriye nan 11 OH-KA soti nan A. lavenia

Dapre enfòmasyon yo jwenn sou Entènèt la, tout pòsyon (fèy, tij, ak rasin) nan A. lavenia yo itilize kòm medikaman èrbal nan Lachin ak Taiwan. Pou detèmine kondisyon ki pi bon pou 11 OH-KAextraction soti nan A. lavenia, nou premye egzamine ki pòsyon nan plant la rich nan konpoze sa a. Ekstrè dlo yo te prepare soti nan fèy pou kont li oswa nan pati ayeryen. Lamelanogenesistès sou selil B16F10 yo te montre ke ekstrè ki te prepare nan pati ayeryen yo (tij ak fèy) te gen mwens aktivite anti-melanogenic pase sa ki te prepare nan fèy yo pou kont li (Figi 3A, agoch). Sa a sijere ke tij (ki konte pou plis pase 90 pousan nan pwa sèk la) gen mwens11 OH-KA, ki te konfime pa analiz LC-UV yo (Figi 3A, adwat).

Apre sa, nou te egzamine konbyen volim dlo yo ta dwe itilize pou fè ekstraksyon an. Aparamman, yon ti volim dlo (10-pliye) ka anrichi11 OH-KA(Figi 3B). Nou te espekile ke lowsolubility nan 11 OH-KA nan dlo ta ka ede kenbe konpoze sa a nan résidus. Yo te obsève yon rekiperasyon maksimòm 11 OH-KA nan dlo lè yo te itilize plis pase 30 volim dlo (Figi 3C).Se poutèt sa, konsidere maksimòm rekiperasyon ak anrichisman 11 OH-KA nan dlo, nou te itilize 30volumes dlo nan eksperyans pita.

Nan Lachin ak Taiwan, A. lavenia ekstrè nan dlo cho, atravè ki estabilite nan tèmik nan 11 OH-KA te egzamine. Ekstrè dlo yo te enkube nan 90 ◦C oswa 120 ◦C pou 10 oswa 20 min, epi kontni 11 OH-KA te analize pa LC-UV. Tretman tèmik sa yo te pwodwi yon gwo kantite sedimantasyon, ki gen anpil chans ki gen ladan pwoteyin denatire. La11 OH-KAsa ki nan fraksyon thesoluble yo te aparamman ogmante (Figi 3D), ki ta ka yon rezilta nan retire nan materyèl sa yodimanted.

3.2.1. OH-KA se konpoze ki nan ekstrè dlo A. Lavenia ki responsab aktivite anti-melanogenic nan selil B16F10

Lè yo te ekstrè 1 g fèy la nan 3 0 volim dlo, kontni 11 OH-KA te apeprè 0.6 mg/mL (1.8 mM). Pou detèmine degre nan kontribisyon an nan11 OH-KAnan A. lavenia waterextract nan aktivite a anti-melanogenic, diferan konsantrasyon nan natif natal 11 OH-KA yo te teste inB16F10 selil yo. Egzamen vizyèl (Figi 4A) ak mezi kontni melanin (Figi 4B) te revele ke ekstrè dlo yo (Figi 4A, seri anwo) ki te montre menm efikasite an tèm de aktivite anti-melanogenic kòm natif natal 11 OH-KA pou kont li (Figi 4A, pi ba ansanm) te genyen sèlman yon mwatye nan11 OH-KA. Rezilta sa yo sijere ke 11 OH-KA nan ekstrè a kontribye nan prèske 50 pousan nan aktivite anti-melanogenic ekstrè a. Lòt 50 pousan yo ta ka sòti nan 11 OH-KA derivatifs, tankou fòm glikozid, ki ta ka tou eksplike kontni ki ba nan 11 OH-KA nan theP. dispèse Kunze ekstrè malgre efikasite segondè li an tèm de aktivite anti-melanogenic (Figi 2).

efè ekstrè cistanche: anti-aje ak blanchiman po

3.2.2. OH-KA se konpoze ki nan ekstrè A. lavenia ki responsab aktivite anti-melanogenic nan sourit

Pou jwenn rezilta preliminè pou devlopman nan lavni nan A. lavenia kòm yon materyèl pou pwodui kosmetik, nou te fè analiz in vivo lè l sèvi avèk yon ti kantite sourit. Nou premye egzamine pharmacokinetics 11 OH-KA nan sourit yo. Konsomasyon dlo a te apeprè 4 mL chak jou nan sourit ak apeprè 25 g pwa kò. Solibilite maksimòm 11 OH-KA nan ekstrè dlo A. lavenia (gade Figi 3C, 20–30 volim dlo: 0.6 mg/mL) te kapab bay teyorikman yon 100 mg/kg. dòz chak jou nan asid sa a kaurenoic (4 mL nan 0.6 mg / mL 11 OH-KA te fè 2.4 mg / jou; nòmalizasyon nan 2.4 mg pa pwa sourit (25 g) te lakòz 96 mg / kg). Se poutèt sa, nou deside trete sourit yo ak 100 mg / kg11 OH-KA (sispann nan 200 µL nan 1 pousan Tween 80).

Tretman oral ak11 OH-KAte lakòz aparans rapid li (nan 15 minit) nan san an (Figi 5A). Konsantrasyon an rive ak kenbe yon dòz efikas nan selil B16F10 yo. Rezilta sa a endike ke 11 OH-KA ka absòbe nan aparèy dijestif la. Sepandan, lefèt ke konsantrasyon an diminye nan lespas 60 minit sijere ekskresyon rapid nan konpoze sa a.

Apre sa, nou egzamine efè kwonik 11 OH-KA nan sourit yo. Depi menm 0.6 mg/mL 11 OH-KA rapidman presipite nan dlo pou bwè si11 OH-KAte pi, nou deside teste A. lavenia waterextract la. Sepandan, ekstrè dlo A. lavenia a ta ka genyen engredyan enkoni ak yon gou anmè. Se poutèt sa, ekstrè a te dwe dilye plis ak de volim dlo (ak yon valè final 0.3 mg/mL pou 11 OH). -KA, apeprè 50 mg/kg/jou). Sourit yo te trete ak ekstrè dlo yo pou 1 semèn, epi yo te kolekte echantiyon san yo (Figi 5B). LC-MS analiz detekte11 OH-KA nan san an nan yon konsantrasyon semi-efikas. Ekstrè dlo P. dispar Kunze ki te prepare pa menm pwosedi ak ekstrè dlo A. lavenia te egzamine tou. Kontni an nan 11 OH-KA nan san an nan sourit trete ak P. dispar Kunze ekstrè a te 10 fwa pi ba pase thatof sourit yo trete ak ekstrè nan A. lavenia.

Nan sourit adilt, kwasans cheve pran poz pandan etap telogen pou plizyè mwa, epi nouvo kwasans (anagen) rive owaza pandan kèk jou sèlman nan diferan zòn [27]. Se poutèt sa, egzamine efè a nanmelanogenesisinibitè, dire tretman an ak konpoze (inhibiteurs) ta dwe fè pati (egzanp, plizyè mwa). Kontrèman, cheve blan yo ranplase ak cheve granmoun pandan faz 3–4-semèn (W). Se poutèt sa, lè sourit 3W yo trete ak inibitè pou 2 semèn, efè yo soumelanogenesiska evalye apati pigmantasyon (koulè) cheve ki fèk grandi (sa vle di, premye cheve granmoun) nan 5W–6W [28].

Lè sourit yo te trete ak ekstrè A. lavenia atravè dlo pou bwè pou de semèn (3W-4W), pigmantasyon yo te siprime nan cheve yo ki fèk grandi (Figi 5C). Kontrèman, eyepigmentation yo pa te afekte. Suppression de pigmentation cheve nan tèt pa te obsève nan micetreated ak P. dispar Kunze extrait. Rezilta sa yo sijere ke ekstrè nan fèy A. lavenia mightcontain anti-melanogenic sibstans, petèt 11 OH-KA, ki efikas nan vivo, tandiske theP. dispar Kunze fèy ekstrè, gen anpil chans rich nan11 OH-KAdérivés, ta ka pa efikas nan vivo.

benefis cistanche: anti-oksidasyon

4. Diskisyon

Nou te jwenn ke fèy A. lavenia gen yon gwo kantite 11 OH-KA (apeprè 2.5 pousan pwa fèy sèk). Dlo efikasman ekstrè 11 OH-KA, malgre nati a idrofob nan konpoze sa a. Kòm 11 OH-KA nan dlo te estab nan 120 ◦C pou 20 min, nou esterilize ekstrè nan dlo nan A. fèy lavenia epi li bay sourit yo. Rezilta yo konfime prezans nan11 OH-KAnan san themice a ak puisans ekstrè dlo a kòm yon reyaktif anti-melanogenic nan vivo.

Prezans 11 OH-KA ak dérivés li yo nan A. lavenia te rapòte nan 1979 [16] ak 1990 [29].Depi lè sa a, yon sèl etid ki soti nan Endonezi te rapòte yon analiz konplè sou engredyan yo nan A. lavenia [30]. Sepandan, pa gen okenn 11 OH-KA te idantifye nan materyèl sa yo. Anplis, pa gen okenn etid sou pwopriyete fizik 11 OH-KA, ki ka ekstrè pa dlo pi ki soti nan A. lavenia, yo te jwenn.

Yon atik revizyon sou remèd popilè nan peyi Zend refere a A. lavenia ekstrè dlo kòm yon tretman maladi sistèm dijestif [31]. Yon rechèch sou Entènèt pou "A. lavenia" oswa non Chinwa li sijere kèk itilizasyon itil nan plant sa a kòm yon medikaman èrbal anti-enflamatwa atravè yon ekstrè dlo cho (sa vle di, kòm adecoction) (egzanp, pou epatit, enflamasyon poumon (alèji ak obstriktif kwonik). maladi pulmonè), ak enflamasyon po). Sepandan, yo pa jwenn okenn rapò fòmèl sou aktivite byolojik A. laveniaextracts oswa estati ekolojik plant sa a nan PubMed. Nan vil nou an (Gifu, Japon), A. laveniais ki nan lis kòm yon espès ki an danje. Rare A. lavenia ka fè li difisil pou analize ak devlope potansyèl kòm medikaman èrbal ak manje fonksyonèl.

Nan lòt men an, potansyèl la benefisye nan11 OH-KA, pirifye nan P. semipinnata, te detèmine nan vitro ak nan vivo [8-11]. Malgre ke nou pa t egzamine kontni an nan 11 OH-KA nan P.semipinnata, nou devine ke kontni sa a ka pa trè wo konpare ak sa ki nan A. lavenia paskeP. semipinnata se pre relasyon ak P. disper Kunze. Anplis de sa, pa gen okenn dosye sou itilizasyon foujèr sa yo nan sijè imen, menm sou entènèt la. Fond sa a sijere ke A. lavenia ka gen pi gwo potansyèl kòm yon medikaman èrbal pase foujèr sa yo si yo montre 11 OH-KA gen potansyèl klinik.

Etid sou potansyèl de11 OH-KAyo te konsantre sou aktivite li yo kòm yon ajan anti-kansè [2,10,11,32] ak anti-enflamatwa [11,33]. Sepandan, se vre tou ke dòz 11 OH-KA ki nesesè pou aktivite sa yo gen plis pase 20 µM, ki se relativman wo. Kontrèman, nan yon konsantrasyon ki mwens pase 1 µM, kaurene ent-11 -idwoksi-16-Karen{-15-yon sèl, ki gen yon gwoup methyl nan pozisyon19- olye de karboksil la. gwoup nan 11 OH-KA, montre gwo aktivite apoptotik kont monosit imenHL-60 [12]. Diferans sa yo sijere ke 19-pozisyon an ka yon detèminan nan selilè toksisite [5].

Malgre ke aktivite anti-timè ak anti-enflamatwa yo jwenn nan yon varyete kaurens [7,34-36], karakteristik espesifik 11 OH-KA se yon kalite aktivite anti-melanogenic [5]. Yon kantite konpoze natirèl, tankou flavonoid ak terpenoid, yo te jwenn modil.melanogenesispa chanje ekspresyon faktè transkripsyon mikroftalmi (MITF), ki esansyèl pou pwogram melanogenic [13,14]. Kontrèman ak konpoze sa yo, pa gen okenn modulateur MITF yo te jwenn nan kaurens orkaurenoic asid.

11 OH-KAsiprime ekspresyon an nantirozinazjèn pa downregulating aktivite pwomotè li yo. Byenke 11 OH-KA pa chanje ekspresyon oswa nivo aktivite MITF, 11 OH-KA suppressestyrosinase jèn aktivite pwomotè nan yon fason MITF-obligatwa-element-depandan [5]. Enteresan, twòp ekspresyon MITF nan selil B16F10 la lakòz yon anilasyon aktivite pwomotè tirozinaz 11 OH-KA-medyatè, ki sijere ke 11 OH-KA ka rekrite yon represè enkoni nan eleman MITF-obligatwa. Anplis, mekanis nan ki 11 OH-KA siprimetirozinazaktivite pwomotè ka diferan de sa ki mennen nan sitotoksisite paske yo obsève aktivite anti-melanogenic menm lè selil B16F10 yo trete ak 1.2 µM nan 11 OH-KA (Figi 4).

Rechèch ki enplike yon modèl po moun ki genyen twa dimansyon ki konpoze de keratinosit prensipal ak melanosit sijere ke itilizasyon an aktualite nan 1 mM nan11 OH-KAkonplètman siprime skinpigmentation [5]. An tèm de aktivite anti-melanogenic, 1 mM nan 11 OH-KA ekivalan a approximativement 6.6 mg/mL (0.66 pousan) fèy cheche A. Lavenia (Figi 3). Nan kontèks sa a, A. Lavenia se yon sous atiran nan atik kosmetik poublanchiman po. Anplis de sa, A. Lavenia yo itilize kòm yon medikaman popilè, ak 11 OH-KA gen yon maj lajè ant dòz efikas li yo (konsantrasyon) pou anti-melanogenicactivity ak sitotoksisite.

Sa ki enpòtan, yo te jwenn asid tranexamic (yon dwòg emostatik) pou siprime depozisyon melanin nan po moun epi li itilize kòm yon medikaman oral pou trete melasma [23,24]. Enteresan, fouri nan sourit trete ak asid tranexamic chanje koulè soti nan nwa a mawon [37]. Nan etid sa a, nou te montre tou ke yon ekstrè dlo nan fèy A. Lavenia ka efikasman siprime pigmantasyon cheve (nwa mawon) nan sourit lè yo bay oralman, sijere ke fèy A. Lavenia ta ka devlope nan tou de pwodui kosmetik entèn ak manje fonksyonèl [20–. 22] pou pasyan ki soufri melasma. Plis etid yo bezwen konsènan objektif selilè A. Lavenia ekstrè ak11 OH-KA, osi byen ke sekirite yo.

tablèt cistanchepoublanchiman po