Tongluo Digui dekoksyon trete blesi nan ren nan rat dyabetik pa ankouraje otofaji nan podosit.

Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

HAN Jiarui, ZHANG Yage, SHI Xiujie, PENG Zining, XING Yufeng, PANG Xinxin

Résumé

OBJEKTIF:

Pou mennen ankèt sou efè Tongluo Digui dekoksyon sou aksidan ren ak strèptozotosin-induit otofaji podocyte nan rat dyabetik.

METÒD:

Gason Sprague-Dawley rat yo te owaza divize an sis gwoup: nòmal, modèl, Tongluo Digui dekoksyon (dòz segondè, mwayen ak ba), ak valsartan. Streptozotocin te enjekte intraperitoneally pou repwodui modèl bèt dyabetik la. Apre 8 semèn, yo te evalye proteinuria pou etabli modèl nefropati dyabetik la. Tretman yo te administre chak jou atravè wout la entragastric. Nan 16 semèn apre gavage, nou detèmine konsantrasyon pwoteyin pipi 24 èdtan, glikoz nan san, kreyatinin serik, ak konsantrasyon nitwojèn ure. Lè sa a, rat yo te sakrifye, ak ren yo te rekòlte ak tache ak peryodik asid-Schiff evalye chanjman yo patolojik nan glomeruli, ki gen ladan podosit glomerulè pa mikwoskospi elektwonik transmisyon. Yo te itilize analiz Western blot pou detèmine ekspresyon nephrin, podocin, p62, beclin-1, LC3Ⅱ/Ⅰ, ak p-mTOR/mTOR pwoteyin nan tisi ren yo.

REZILTA:

Konpare ak gwoup modèl la, Tongluo Digui dekoksyon te asosye ak diminisyon nan konsantrasyon pwoteyin pipi 24 èdtan, glikoz nan san, emoglobin A1c, kreyatinin serik, konsantrasyon nitwojèn ure, pwoteyin total serom, ak albumin. An menm tan, elajisman mesanterik mesanjyal ak fizyon nan pwosesis pye yo te redwi, manbràn nan sousòl glomerular pa te siyifikativman epesè, ak kantite podocytes ak kantite otophagosomes nan podocytes yo te ogmante. Anplis de sa, ekspresyon nephrin, podocin, LC3Ⅱ, ak beclin-1 pwoteyin nan tisi ren yo te kontwole, pandan y ap ekspresyon pwoteyin p62 te regle anba e fosforilasyon mTOR te anpeche.

KONKLIZYON:

Tongluo Digui dekoksyon ka anpeche pwogresyon nefropati dyabetik pa anpeche fosforilasyon mTOR, kidonk ogmante otofaji pou pwoteje podosit ak diminye proteinuri.

Mo kle:nefropati dyabetik; otofaji; podosit; Tongluo Digui dekoksyon

benefis tij cistanchepoufonksyon ren

ENTWODIKSYON

Nefropati dyabetik (DN) se youn nan konplikasyon mikwo-vaskilè grav nan dyabèt, ak 30 pousan -40 pousan pasyan dyabetik ki soufri maladi ren. Ak ogmante ensidans dyabèt la, DN te vin kòz prensipal nan etap final maladi ren atravè lemond.1 Sa a se yon gwo fado ekonomik sou tou de fanmi yo ak sosyete a.

Domaj Podocyte se yon kòz enpòtan nan pwogresyon DN. Kòm yon selil tèminal diferansye, otofaji jwe yon wòl enpòtan nan kenbe fonksyon fizyolojik podosit yo.2,3 Nan yon eta fizyolojik nòmal, gen yon wo degre otofaji nan podosit ki retire pwoteyin ki domaje ak òganèl.4 Sepandan, nan dyabetik la. anviwònman, podocyte autophagy se inibit, sijere ke podocyte autophagy jwe yon wòl enpòtan nan patojèn nan DN.5 DN ki dwe nan kategori yo nan "Xiao Ke", "Guan Ge" ak "edema" nan Medsin Tradisyonèl Chinwa. Teyori a nan Medsin tradisyonèl Chinwa se ke stasis san akYin defisise kòz ki pi enpòtan nan DN.6 Se poutèt sa, tretman DN ta dwe ankouraje sikilasyon san ak nouri Yin, ak Tongluo Digui dekoksyon te etabli pou sa. Nou te deja jwenn ke Tongluo Digui dekoksyon te gen yon efè tretman benefisye nan DN. Nan etid sa a, nou vize pou sèvi ak streptozotocin (STZ)-induit tip 1 DN rat modèl pou evalye efè Tongluo Digui dekoksyon sou aksidan ren, otofaji, ak chemen siyal mTOR. Nou menm tou nou te eksplore mekanis molekilè ki kache nan Tongluo Digui dekoksyon nan retade pwogresyon nan DN ak bay prèv pou prevansyon nan klinik ak tretman nan DN.

MATERYÈL AK METÒD

Bèt

Rat Sprague-Dawley san patojèn espesifik (SPF) [n=60, gason, (150 ± 10) g; nimewo sètifika kalifikasyon: SCXK (Yu) 2017-0001] yo te achte nan Henan Experimental Animal Center (Zhengzhou, Lachin). Sik limyè estanda (14 h limyè, 10 h lannwit), tanperati andedan pòt (23 ± 2) degre, imidite (40 pousan -50 pousan), lojman (twa bèt pou chak kaj), ak manje (manje esterilize ak manje). dlo pou bwè) yo te itilize. Eksperyans lan te konplete nan laboratwa Sant Imaging selilè nan Henan Lopital Medsin Tradisyonèl Chinwa (Zhengzhou, Lachin). Tout eksperyans yo te fèt dapre gid pou swen ak itilizasyon bèt laboratwa pibliye pa Enstiti Nasyonal Sante.

Dwòg

Valsartan (Val) kapsil yo te achte nan Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Beijing, Lachin). Tongluo Digui dekoksyon konsiste de Shuichi (Hirudo) 12g, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 g, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 g, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 g, Danggui (Radix Angelicae Sinensis, Zexima) 30R Alismatis) 10 g, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 g, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 g. Remèd fèy Chinwa yo te achte nan men Lopital Henan Medsin Tradisyonèl Chinwa (Zhengzhou, Lachin).

Konsepsyon eksperimantal

Rat yo te divize owaza nan sis gwoup, chak ki gen ladann 10 rat: gwoup kontwòl (Ctrl), gwoup modèl DN (STZ), modèl DN ak gwoup tretman Val (Val), modèl DN ak Tongluo Digui dekoksyon gwoup tretman dòz segondè (HTL) , DN modèl ak Tongluo Digui dekoksyon gwoup tretman mwayen dòz (MTL) ak DN modèl ak Tongluo Digui dekoksyon gwoup tretman dòz ki ba (LTL). Sis gwoup rat yo te sakrifye nan 16 semèn apre gavage ak ren yo te kolekte.

Val (10 mg·kg－1·d－1) ak Tongluo Digui dekoksyon nan twa dòz diferan yo te bay pa gavage yon fwa chak jou pou 16 semèn. Dòz yo te administre yo te baze sou ekwasyon konvèsyon pou dòz dwòg ant bèt ak moun. Dòz rat (mg/kg)=granmoun moun dòz (mg/kg) × faktè konvèsyon (6.25). Gwo-dòz, mwayen-dòz, ak ti-dòz gwoup Tongluo Digui dekoksyon yo te bay gavage gastric nan 5.4, 2.7 ak 1.35 g·kg - 1·d - 1, respektivman. Yo te peze rat chak semèn. Yo te ranmase pipi 24-h lè yo itilize kaj metabolik nan fen semèn 0, 12, ak 24. Apre fen tretman an (nan 24 semèn), rat yo te anestezi pa piki lar idrat chloral, epi echantiyon tisi ren ak san yo te rekòlte epi estoke nan -80 degre. Rat yo te gen aksè gratis nan yon rejim nòmal bèt laboratwa ak dlo pwòp (eksepte jan sa dekri anba a).

plant cistanche

Etablisman modèl DN

STZ (Sigma, St. Louis, MO, USA) te itilize pou pwovoke dyabèt jan sa dekri deja.7 Tout rat 60 te gen aksè limite dlo pou 12 èdtan anvan eksperyans yo. Nan sa yo, 50 rat yo te administre yon sèl piki intraperitoneal nan STZ 60 mg / kg fonn nan tanpon sitrat (0.1 mol / L, pH 4.5). Dyabèt te konfime lè yo mezire konsantrasyon glikoz nan san 72 èdtan apre piki STZ la. Bèt ki gen yon konsantrasyon glikoz ki pi gran pase oswa egal a 16.7 mmol / L pou twa jou youn apre lòt yo te konsidere kòm dyabetik. Apre 8 semèn, rat yo te loje nan kaj metabolik separe, epi yo te kolekte pipi pou 24 èdtan pou mezire mikroalbumin pipi (UAE). Yo te konfime modèl DN la lè w te jwenn UAE pi gwo pase oswa egal a 30 mg/ 24 h.

Endikatè byochimik

Serom ak evalyasyon urin yo te itilize pou evalye fonksyon ren bèt yo. Yo te evalye pipi rat lè l sèvi avèk kalòj metabolik la. Yo te jwenn echantiyon san rat avèk metòd koupe ke a.8 Yo te jele echantiyon serom ak pipi nan －80 degre jiskaske yo itilize yo. Kreatinin serik, nitwojèn ure nan san, albumin, ak konsantrasyon pwoteyin pipi yo te mezire pa radyoimmunoassay. Emoglobin A1c (HbA1c), C-peptide ak nivo ensilin yo te mezire lè l sèvi avèk HbA1c ELISA Kit (Crystal Chem INC, Elk Grove Village, IL, USA), C-peptide Elisa twous (Kainuo Bio Ltd., Beijing, Lachin) ak ensilin. Elisa twous (Merck Millipore Co., Ltd., Bed Ford, MA, USA) swiv enstriksyon manifakti a respektivman. Asid urik, total pwoteyin serik (TP), albumin (ALB), alanine aminotransferaz (ALT), ak aspartate aminotransferaz (AST) nan rat yo te detèmine pa yon analizeur byochimik otomatik.

Egzamen istopatolojik

Tisi ren ki fikse fòmalin yo te entegre nan parafine, tranche nan 3-4 μm seksyon epè, epi tache ak peryodik asid-Schiff (PAS). Chanjman mòfolojik nan tisi ren yo, ki gen ladan pwopagasyon selil mesangyal, enfiltrasyon selilè, ak chanjman matris mezanjyal, yo te egzamine pou chak seksyon tache pa mikwoskòp limyè (NIKON D3100) (× 400).

Mikwoskòp elèktron transmisyon

Yo te itilize TEM pou obsève mòfoloji podosit ak selil mesangyal nan tisi ren yo. Tisi ren fre yo te divize an blòk (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Analiz Western blot

Pwoteyin total te ekstrè nan tisi ren pa tanpon pwoteyin liz (Solarbio Biotech, Beijing, Lachin). Konsantrasyon pwoteyin nan supernatant la te teste pa yon twous tès BCA (Solarbio Biotech, Beijing, Lachin, PC0020). Echantiyon ki gen 40 ug pwoteyin yo te separe sou 12 pousan SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS PAGE) (Applygen, Beijing, Lachin, B1004), ak Lè sa a, transfere nan yon manbràn filtre nitrocellulose (Solar biotech, Beijing, Lachin). Apre bloke ak 5 pousan lèt ekreme nan tanperati chanm pou 2 èdtan, -aktin (Proteintech, nimewo atik: 60008-1- lg), LC3II/I (Ab cam, nimewo atik: ab48394), P62 (Proteintech, nimewo atik: 18420-1-AP), beclin-1 (teknoloji pwoteyin, nimewo atik: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, nimewo atik: #5536), mTOR (CST, nimewo atik: # 2983), nephrin (Abcam, nimewo atik: ab58968), ak podocin (pwoteyin chak, nimewo atik: 20384 -1-AP) yo te ajoute ak enkubasyon nan 4 degre lannwit lan. Lè sa a, yo te lave melanj sa a senk fwa ak TBS plis 0.05 pousan Tween-20 (Solar bio Biotech, Beijing, Lachin) (TBS-T) pou 5 minit anvan yo ajoute antikò segondè a (1∶2000) anvan yo enkubasyon nan chanm. tanperati pou 1 èdtan, lave senk fwa ak TBST pou 5 min, sibi devlopman koulè ak chemiluminescence amelyore (ECL, Millipore, Billerica, MA, USA) ak ekspoze lè l sèvi avèk lojisyèl ImageJ la pou analiz gri.

Analiz estatistik

Done yo te analize ak lojisyèl SPSS (IBM SPSS Statistics pou Windows, vèsyon 23.0. 2014, Armonk, NY, USA). Diferans ant gwoup yo te teste lè l sèvi avèk yon analiz yon sèl nan divèjans ki te swiv pa tès Tukey a. Done yo te eksprime kòm mwayèn ± devyasyon estanda. P <0.05 te="" konsidere="" kòm="">

luteolin

REZILTA

Efè pwoteksyon Tongluo Digui dekoksyon sou ren rat DN

Endikatè byochimik tankou glikoz nan san, emoglobin glycated, kreyatinin serik, konsantrasyon nitwojèn ure nan san, ak konsantrasyon pwoteyin pipi {{0}}èdtan yo te mezire 16 semèn apre gavaj. (Tablo 1). Rezilta yo te montre ke lè yo konpare ak gwoup nòmal la, glikoz nan san, emoglobin glycated, kreyatinin serik, konsantrasyon nitwojèn ure nan san, konsantrasyon pwoteyin pipi 24-èdtan, TP ak ALB te siyifikativman pi wo nan gwoup modèl la (P < {{="" 7}}.01),="" kidonk="" endike="" ke="" gwoup="" modèl="" la="" te="" gen="" pwoblèm="" fonksyon="" ren.="" nan="" gwoup="" val,="" tou="" de="" konsantrasyon="" kreyatinin="" serik="" ak="" konsantrasyon="" pwoteyin="" pipi="" 24="" èdtan="" yo="" te="" diminye="" (p=""><0.05). anplis,="" nan="" gwoup="" la="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" gwo="" dòz="" yo="" te="" obsève="" yon="" rediksyon="" enpòtan="" nan="" glikoz="" nan="" san,="" hba1c,="" kreyatinin="" serik,="" ak="" konsantrasyon="" nitwojèn="" ure,="" osi="" byen="" ke="" eskresyon="" pipi="" 24="" èdtan="" (p=""><0.01). efè="" sa="" yo="" te="" depann="" de="" dòz="" la.="" pa="" te="" gen="" okenn="" diferans="" enpòtan="" nan="" asid="" urik,="" ensilin,="" alt,="" ak="" nivo="" ast="" nan="" chak="" gwoup="" rat.="" ansanm,="" rezilta="" nou="" yo="" te="" montre="" ke="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" soulaje="" domaj="" nan="" ren="" ak="" amelyore="" fonksyon="" ren="" nan="" rat="" dn="" nan="" yon="" fason="" ki="" depann="" de="" dòz="">

Chanjman nan patoloji ren DN rat yo te evalye pa tach PAS apre tretman Tongluo Digui dekoksyon (Figi 1). Konpare ak gwoup nòmal la, yo te obsève yon ogmantasyon siyifikatif nan selil glomerulèr mesangial ak stroma mezanjyal ansanm ak yon elaji zòn mezanjyal nan gwoup modèl la. Zòn glomerulèr mesangial la ogmante nan chak nan twa nivo dòz Tongluo Digui dekoksyon ak nan gwoup Val. Anplis de sa, kat gwoup tretman sa yo te redwi lajè matris mesangyal la konpare ak gwoup modèl la, ak zòn glomerular mesangial nan gwo dòz Tongluo Digui dekoksyon gwoup la te mwens pase nan gwoup Val. Konklizyon sa yo te endike ke Tongluo Digui dekoksyon te retade pwogresyon nan blesi glomerulaire DN.

Efè Tongluo Digui dekoksyon sou blesi glomerular podocyte nan rat DN

Western blot analiz te itilize pou detèmine ekspresyon de protéines marque podocyte nephrin ak podocin (Figi 2). Konpare ak gwoup nòmal la, ekspresyon tou de pwoteyin nan gwoup modèl la te siyifikativman diminye (P <0.01), ki="" endike="" blesi="" podocyte.="" anplis="" de="" sa,="" ekspresyon="" nephrin="" ak="" podocin="" te="" kontwole="" nan="" gwoup="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" konpare="" ak="" gwoup="" modèl="" la="" (p=""><>

Efè Tongluo Digui dekoksyon sou glomerular podocyte autophagy nan rat DN

Chanjman nan otofagosòm nan podosit glomerulè yo te obsève anba TEM (Figi 3). Rezilta yo te montre otofagosòm nan podosit glomerular nan gwoup nòmal la. Podocyte autophagosomes te absan nan gwoup modèl la, ak pwosesis pye podocyte yo te disparèt tou. Nan twa gwoup dòz Tongluo Digui dekoksyon ak gwoup valsartan, nou te obsève glomerular podocyte autophagosomes, ki sijere ke Tongluo Digui dekoksyon amelyore otofagi podocyte nan rat DN. Western blot te itilize pou detekte ekspresyon de pwoteyin ki gen rapò ak otofaji P62, beclin-1, ak LC3 Ⅱ (Figi 4). Konpare ak gwoup nòmal la, ekspresyon beclin-1 ak LC3Ⅱ nan gwoup modèl la te siyifikativman diminye (P <0.01), pandan="" ke="" ekspresyon="" p62="" la="" te="" siyifikativman="" ogmante="" (p=""><0.01). 0.01).="" konklizyon="" sa="" yo="" te="" endike="" ke="" otofaji="" te="" febli="" nan="" rat="" dn.="" konpare="" ak="" gwoup="" modèl="" la,="" gwoup="" dòz="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" segondè="" te="" gen="" ekspresyon="" beclin="" -1="" ak="" lc3ⅱ="" (p=""><0.05), ansanm="" ak="" ekspresyon="" p62="" reglemante.="" ansanm,="" rezilta="" sa="" yo="" te="" montre="" ke="" efè="" pwoteksyon="" ren="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" nan="" rat="" ak="" dn="" ka="" gen="" rapò="" ak="" otofaji="" amelyore="" nan="" selil="" ren="">

Tongluo Digui dekoksyon amelyore otofaji glomerular podocyte nan rat DN pa anpeche fosforilasyon mTOR.

Anpèchman fosforilasyon mTOR amelyore otofaji (Figi 5). Konpare ak gwoup nòmal la, fosforilasyon mTOR nan gwoup modèl la te amelyore (P <{1}}.01), tandiske="" nan="" gwoup="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" li="" te="" anpeche="" (p=""><0.05). sa="" a="" te="" sigjere="" ke="" tongluo="" digui="" dekoksyon="" amelyore="" otofaji="" podocyte="" pa="" anpeche="" aktivasyon="" nan="" chemen="" an="" siyal="" mtor.="" etid="" anvan="" yo="" te="" montre="" ke="" otofaji="" pwoteje="" podosit="" ak="" amelyore="" fonksyon="">

DISKISYON

DN se sitou karakterize pa siy ak sentòm tankou prezans nan pwoteyin urin, glikoz segondè, polidipsi, polifaji, ak poliuri. Sentòm yo sanble ak medikaman tradisyonèl Chinwa, tankou "Xiao Ke", "Guan Ge" ak "èdèm". Ensidan an ak devlopman nan DN yo inséparabl nan baz la patolojik nan deficiency Yin ak stasis san.6 Avèk devlopman nan defisi Yin ak stasis san, ren an ap piti piti domaje, kidonk montre pèt nan pwoteyin urin, ki pi lwen mennen nan fòmasyon mikrotronb ak fibwoz nan ren an. Pasyan DN inevitableman soufri maladi ren fen etap.11

Tongluo Digui dekoksyon te etabli pa Zhang Binghou, yon doktè pi popilè Chinwa medikaman tradisyonèl, e ki baze sou ane eksperyans li nan tretman DN.12, 13 Tougluo Digui dekoksyon konsiste de Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Dihuang (Radix Rehmanniae), Huangqi (Radix Astragali Perparata), Danggui (Radix Angelicae Sinensis), Ze Xie (Rhizoma Alismatis), Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei), Gancio (Radix Glycyrrhizae). Pami yo, Shuizhi (Hirudo) ak Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) se dwòg monak, ki nou kwè jwe yon wòl nan nouri Yin ak ankouraje sikilasyon san an nan DN. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) amelyore iminite kò a ak eta sekretè ak reta aje.14 Shuizhi (Hirudo) gen anti-koagulan, anti-timè, anti-enflamatwa, ak anti-fibrotik efè pami lòt aksyon famasi, epi li ka amelyore ren. chanjman patolojik nan DN siyifikativman diminye kreyatinin serik ak konsantrasyon nitwojèn ure nan san, epi redwi ekskresyon pwoteyin urin.15,16 Nan DN, blesi podocyte jwe yon wòl enpòtan nan baryè filtraj manbràn glomerular sousòl la ak nan fòmasyon proteinuria.17 Nephrin ak podocin yo tou de pwoteyin pore-manbràn sou sifas podocytes. De pwoteyin yo kominike pou fòme yon konplèks ki jwe yon wòl kle nan fonksyon baryè filtraj glomerulè a.18 Distribisyon nòmal nan ekspresyon pwoteyin mennen nan diferan degre nan proteinuria.19 Nan etid sa a, STZ-induit tip 1 DN rat te montre yon ogmantasyon. nan eskresyon pwoteyin urin ak fonksyon ren pwoblèm sou 24 èdtan. Anplis, tach PAS te montre ke kantite selil mesangial ak matris mesangial la ogmante nan gwoup modèl la, kidonk endike ke modèl la te etabli avèk siksè. Diferan dòz Tongluo Digui dekoksyon redwi pwoteyin pipi 24 èdtan ak konsantrasyon kreyatinin serik ak amelyore patoloji ren rat DN ak selil mesangyal ak matris redwi. Analiz Western blot te montre ke ekspresyon nephrin ak podocin nan gwoup Tongluo Digui dekoksyon an te pi wo konpare ak gwoup modèl la, ki endike ke fòmil sa a retade pwogresyon DN nan rat pa pwoteje podosit.

Otofaji se yon chemen pou degradasyon pwoteyin lizozomal nan selil yo epi li jwe yon wòl enpòtan nan clearance nan pwoteyin ki domaje oswa twò eksprime ki kenbe omeyostazi selil ak entegrite.20 Otofaji se entegral nan omeyostaz lizozomal podozit nan dyabèt, ak otofaji amelyore ka diminye blesi podosit. .5 Apre yo fin espesifikman frape jèn Atg5 ki gen rapò ak otofaji a nan podosit, sourit piti piti te montre agregasyon pwoteyin omniprésente, domaj mitokondriyo, ak aktivite otofagi nan podosit; podosit yo te vin domaje ak pwosesis pye yo te disparèt ak fizyone, ki te endike ke otofaji te konsève. Kenbe fonksyon nòmal podosit enpòtan.21,22 Nan ​​etid sa a, nou te envestige efè Tongluo Digui dekoksyon sou otofaji nan podosit glomerulè lè l sèvi avèk TEM ak analiz Western blot. TEM te montre ke kantite autophagosomes podocyte nan chak gwoup dòz Tongluo Digui dekoksyon ogmante konpare ak gwoup modèl la. Anplis, Western blot te montre ekspresyon de pwoteyin ki gen rapò ak otofaji LC3, beclin-1, ak p62. Konpare ak gwoup modèl la, ekspresyon LC3Ⅱ ak beclin-1 te siyifikativman ogmante nan gwoup Tongluo Digui dekoksyon an, pandan y ap ekspresyon pwoteyin p62 te siyifikativman diminye. Konklizyon sa yo endike ke Tongluo Digui dekoksyon ogmante nivo otofaji nan podosit glomerulèr.

Rapamicin sib pwoteyin (mTOR) se youn nan regilatè prensipal yo nan otofaji.23 Li se lajman distribiye nan cortical a ren ak medul la epi li jwe yon wòl nan devlopman nan DN podocyte blesi.24,25 Nan sitiyasyon nan glikoz segondè ak estrès, mTOR se aktive ak fosforilasyon, ki mennen nan fosforilasyon nan sib en li yo ak anpèchman nan otofaji. Liu et al 26 te demontre ke mTOR inibitè a, rapamisin, espesyalman mare nan mTOR kinaz ak inibit aktivite mTOR, amelyore otofaji podocyte, ak fonksyon ren pwoteje. Nou te jwenn ke fosforilasyon mTOR te amelyore nan gwoup modèl la e ke Tongluo Digui dekoksyon inibit pwosesis sa a, ki sijere ke Tongluo Digui dekoksyon amelyore otofaji nan podosit epi li ka anpeche deklanchman siyal mTOR.

An rezime, Tongluo Digui dekoksyon ka anpeche otofaji nan podosit, pwoteje podosit glomerulèr, kenbe entegrite manbràn filtraj glomerulè, diminye eskresyon pwoteyin pipi 24 èdtan, ak reta pwogresyon DN pa anpeche aktivasyon mTOR. Konklizyon sa yo bay apèsi sou plis konpreyansyon sou efè pwoteksyon Tongluo Digui dekoksyon nan DN, sepandan, mekanis ki kache ki enplike rete yo dwe elisid.

ki sa ki yon cistanchepou maladi ren

REFERANS
1 Tech GH. Nefropati dyabetik - èske se yon maladi iminitè? Clin Sci 2017; 131(16): 2183-2199.
2 Li JJ, Kwak SJ, Jung DS, et al. Podocyte byoloji nan nefropati dyabetik. Kidney Int Suppl 2007; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Podocyte autophagy: yon potansyèl sib terapetik pou anpeche pwogresyon nefropati dyabetik. J Diabetes Res 2017; 2017(4): 1-6.
4 Mizushima N, Komatsu M. Autophagy: renovasyon selil ak tisi yo. Selil 2011; 147(4): 728-741.
5 Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Enfimite otofaji podosit agrave proteinuria nan nefropati dyabetik. Dyabèt 2016; 65(3): 755-767.
6 Solèy C, Xie QY, Meng QG. Etid sou lwa distribisyon TCM sendwòm nefropati dyabetik. Beijing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao 2015; 38(4): 266-270.
7 Szkudelski T. Mekanis nan aksyon alloxan ak streptozotocin nan selil B nan pankreyas rat la. Physiol Res 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Efikasite Qingre Lishi Yishen dekoksyon sou fibwoz glomerular nan imunoglobulin A nefropati nan modèl yon rat. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Lu MK, Gong XG, Guan KL. mTOR nan fonksyon podosit: èske rapamicin bon pou nefropati dyabetik? Sik selil 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Hartleben B, Godel M, Meyer-Schlesinger C, et al. Otofaji enfliyanse maladi glomerulèr ak kenbe omeyostazi podocyte nan sourit ki aje. J Clin Invest 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Solèy GD, Li CY, Cui WP, et al. Revizyon medikaman tradisyonèl Chinwa èrbal pou tretman nefropati dyabetik. J Diabetes Res 2016; 2016: 5749857.
12 Zhao WJ, Cai Z, Meng Y, et al. Aplikasyon nan metòd nourisan Yin ren Zhang Binghou nan trete maladi ren kwonik. Beijing Zhong Yi Yao 2016; 35(4): 341-343.
13 Duan YF, Zhang HB. Entwodiksyon eksperyans aplikasyon pwofesè Zhang Binghou a. Xin Zhong Yi 2012; 44 (4): 147-149.
14 Yu XJ, Chen SH, Lu GY. Yon sondaj sou rechèch la sou farmakodinamik tòti "Ziyin Bushen". Dang Dai Yi Xue 2009; 15(10): 15-17.
15 Pang XX, Tong Y, Li HP, Han JR. Pwogrè rechèch nan leech ak ekstrè li yo nan tretman nefropati dyabetik. Guang Ming Zhong Yi 2019; 34(1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Pwogrè rechèch nan leech ak engredyan aktif li yo nan tretman nefropati dyabetikZhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Pwogrè rechèch sou mekanis rediksyon podosit nan nefropati dyabetik. J Diabetes Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Nephrin siyal nan podosit la: yon gade ajou sou règleman siyal nan dyafram nan fant ak pi lwen. Front Endocrinol (Lausanne) 2018; 9:302.
19 Jaakko P, Karl T. Molekilè makiyaj baryè filtraj glomerulè a. Biochem Bioph Res Co 2010; 396(1): 164-169.
20 Noboru M, Beth L, Ana Maria C, Klionsky DJ. Autophagy batay maladi atravè selilè pwòp tèt ou-dijesyon. Lanati 2008; 451(7182): 1069.
21 Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, et al. Selil andothelial
ak podocyte autophagy sinèrjetik pwoteje kont dyabèt-induit glomerulosclerosis. Autophagy 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Ilatovskaya DV, Levchenko V, Lowing A, Shuyskiy LS, Palygin O, Staruschenko A. Podocyte blesi nan nefropati dyabetik: enplikasyon angiotensin Ⅱ-depandan aktivasyon nan chanèl TRPC. Sci Rep 2015; 5: 17637.
23 Rabanal-Ruiz Y, Otten EG, Korolchuk VI. mTORC1 kòm pòtay prensipal la nan otofaji. Essays Biochem 2017; 61 (6): 565-584.
24 Kim YC, Guan KL. mTOR: yon sib famasi pou règleman otofaji. J Clin Invest 2015; 125(1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z, et al. Triptolide retabli otofaji pou soulaje fibwoz ren dyabetik atravè chemen miR-141-3p/PTEN/Akt/mTOR. Mol Ther Asid Nukleik 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang J, Guo Y, Yang X. Efè pwoteksyon rapamicin sou otofaji selil nan tisi ren rat ak nefropati dyabetik atravè mTORS6K1-LC3 Ⅱ chemen siyal. Ren Fail 2018; 40(1): 492-497.