[6]-Gingerol fasilite sekresyon CXCL8 ak pwodiksyon ROS nan netrofil prensipal imen lè li vize Chèn TRPV1 Pati 1.

1. Entwodiksyon

Idantifye engredyan manje ak pwopriyete imunomodulateur ansanm ak objektif molekilè respektif yo te atire enterè ogmante nan dènye ane yo. Akòz divèsite ligand segondè yo, superfami potansyèl reseptè tranzitwa nan chanèl ion (chanèl TRP) reprezante yon klas trè enteresan nan estrikti sib potansyèl yo.

Yon sib molekilè se yon molekil espesifik sou ki yon dwòg aji nan kò a. Iminite refere a fòs nan kapasite kò a pou reziste maladi.

Gen yon relasyon sere ant sib molekilè ak iminite. Efè dwòg yo souvan afekte iminite kò a. Pa egzanp, sèten medikaman ka trete sèten maladi kwonik lè yo entèfere ak fonksyon sistèm iminitè yon òganis. Anplis de sa, tretman timè souvan itilize terapi vize, se sa ki vize sèten sib molekilè pou atake selil kansè yo, kidonk amelyore kapasite iminite yo pou konbat selil kansè yo.

Anplis de sa, fòs iminite a pral afekte efè dwòg la tou. Moun ki gen sistèm iminitè febli ka fè eksperyans efè segondè oswa mwens efikas medikaman lè yo itilize paske sistèm iminitè a pa absòbe dwòg yo byen, sa ki lakòz tretman mwens efikas. Se poutèt sa, kenbe yon sistèm iminitè ki an sante trè enpòtan pou terapi dwòg.

An konklizyon, gen yon koneksyon sere ant sib molekilè ak iminite, ak yon konpreyansyon konplè sou relasyon sa a gen gwo siyifikasyon pou itilizasyon rasyonèl nan dwòg. Nou ta dwe aktivman amelyore iminite nou, itilize dwòg kòrèkteman dapre konsèy doktè a, ak amelyore iminite atravè terapi vize pou pi byen pwoteje sante nou. Soti nan pwennvi sa a, nou bezwen amelyore iminite nou an. Cistanche ka siyifikativman amelyore iminite paske Cistanche tou gen efè anti-viris ak anti-kansè, sa ki ka ranfòse kapasite sistèm iminitè a pou goumen ak amelyore iminite kò a.

Klike sou benefis sante nan cistanche

Superfamily TRP kanal mamifè a gen ladan sis fanmi pwoteyin ki gen rapò, sètadi ankyrin (TRPA), kanonik (TRPC), melastatin (TRPM), mucolipin (TRPML), polycystin (TRPP), ak fanmi vanilloid (TRPV). tout nan yo ki tipikman pataje sis segman transmembrane ki rasanble kòm tetramers yo fòme porositë pèmeyab kasyon ak diferan selektivite kasyon.[1] Chèn TRPV1 a ka, byen lwen, manm ki pi entans envestige nan superfami TRP la. TRPV1 te okòmansman idantifye kòm reseptè a pou capsaicin, eleman pike nan piman tchili.[2] Apre sa, tou engredyan yo pike soti nan jenjanm, gingerols yo, yo te montre yo aktive TRPV1.[3]

Wòl byolojik TRPV1 nan kalite selil ki pa newòn toujou anba envestigasyon vaste, men rezilta ki disponib yo vle di fonksyon byen lwen pase pèsepsyon sansoryèl ak tèmik. Pa egzanp, yon entèvansyon 12-semèn ak yon dòz chak jou 0.15 mg agonist TRPV1 nonivamide, yon analòg estriktirèl kapsaicin, te anpeche yon ogmantasyon nan mas grès nan kò a ki te pwovoke nan rejim alimantè a, ak ogmante serotonin nan plasma. nivo nan matyè ki ansante ki twò gwo.[4]

Nan 3T3-L1 adiposit aktivasyon TRPV1 pa nonivamide diminye akimilasyon lipid pandan diferansyasyon ak spirasyon pa siprime ekspresyon PPAR𝛾.[5] Nan makrofaj, capsaicin ak nonivamid atenue yon liberasyon LPS pwovoke nan sitokin pro-enflamatwa tankou IL6, CXCL8, ak TNF-alfa, nan yon fason TRPV1-depandan.[6] Men, fonksyon patikilye TRPV1 nan lekosit san moun rete vag. Nan selil NK imen yo, 10 ak 50 μM capsaicin pwovoke yon ogmantasyon nan konsantrasyon entraselilè Ca2 plis, ki endike yon kanal TRPV1 fonksyonèl.[7]

Sepandan, fonksyon efektè selil NK mouye tankou degranulasyon sitotoksik ak sekresyon sitokin, pwovoke pa pre-tretman selil yo ak capsaicin pou 1 èdtan nan yon seri konsantrasyon 10-100 μM, te lajman TRPV1 endepandan.[7] ] Nan selil T, TRPV1 te dokimante pou patisipe nan pwosesis siyal reseptè selil T, pwopagasyon selil T, ak diferansyasyon, ak pwodiksyon sitokin.[8] Travay anvan gwoup nou an te demontre tou ekspresyon fonksyonèl TRPV1 nan selil T prensipal imen yo.[9] Anplis de sa, analiz dòz-repons nan konsantrasyon ki sòti nan 0.03 a 300 μmol L-1 revele ke [6]-gingerol inibit sekresyon cytokine pa leukosit imen prensipal ak yon valè IC50 nan 82.2 μmol L-1.

Sepandan, kantite [6]-gingerol nan echantiyon plasma nan matyè ki an sante revele yon konsantrasyon maksimòm plasma vle di sèlman 42.0 ± 16.3 nmol L-1 apre konsomasyon nan 1 L nan te jenjanm. Piske konsantrasyon sa yo [6]-gingerol pa te gen okenn enpak enpòtan sou sekresyon cytokine nan etid anvan yo, [9] li pa klè, si yon konsantrasyon dyetetik ki enpòtan nan 50 nmol L-1, yo te rive nan plasma san apre konsomasyon nan 1 L nan jenjanm. te, se ase yo modile repons iminitè selilè nan lòt leukosit prensipal imen.

Pou netrofil imen, konesans sou wòl fonksyonèl TRPV1 limite. Lè nou konsidere ke Köse ak Nazıroglu˘ [10] te montre Ca2 plis -flux nan neutrophils an repons a 10 μM capsaicin yo dwe diminye pa capsazepine antagonis TRPV1 la, lòt rezilta yo pa t demontre capsaicin pwovoke yon foul Ca2 plis lè yo teste nan yon seri konsantrasyon 1. –100 μM, malgre yon ekspresyon TRPV1 RNA detekte.[11]

Neutrofil yo se lekosit ki pi abondan nan san moun, ki reprezante 60-70 pousan nan tout globil blan k ap sikile. Yo se premye selil iminitè yo ke yo rekrite nan sit enfeksyon yo; Se poutèt sa yo souvan refere yo kòm premye liy defans.[12] Rekritman netrofil yo deklanche pa, pami lòt moun, peptide bakteri oswa mitokondri ki sòti N-Formylmethionine-leucyl-phenylalanine (fMLF) oswa chemokines tankou CXCL8 (IL-8).[13]

Mekanis defans netrofil yo enkli fagositoz,[14] lage anzim anti-mikwòb atravè degranulasyon,[15] jenerasyon espès oksijèn reyaktif (ROS),[16] ak fòmasyon pyèj ekstraselilè netrofil yo.[17] Anplis mekanis defans dirèk sa yo, netrofil yo kontribye nan repons iminitè ki vin apre yo atravè liberasyon divès sitokin ak chemokin.[18] Epitou, netrofil yo ka sibi yon pwosesis priming ki pèmèt yo reponn pi fò nan deklanchman konplè ki vin apre.[16b]

Nan dènye ane yo, prèv te grandi ke engredyan ki soti nan manje ak oswa plant medsin ka modifye youn oswa plis nan repons yo mansyone nan defans nan netrofil imen. Modifikasyon sa yo gen ladan ogmante aktivite fagositotik [19] ak jenerasyon ROS, [20] ogmante chemotaxis nan direksyon pou fMLF, [21] ak fòmasyon pyèj ekstraselilè netrofil yo.[20] Sepandan, konpoze aktif (yo) yo pa te idantifye. Konstitiyan ki soti nan Ferula akitschkensis (𝛽-pinene, sabinen, 𝛾-terpinene, geranyl asetòn, ak iso bornyl acetate) desensibilize netrofil yo nan fMLF- ak CXCL8- pwovoke Ca2 plis foul ak inibit fMLF pwovoke chemotaxis, kote yon acetoneger la. efè pwovoke yo te medyatè atravè TRPV1.[22]

Ki baze sou done ki disponib yo, nou te sipoze ke deklanchman TRPV1 ligan-induit pa [6]-gingerol ka afekte fonksyon jeneral netrofil, swa dirèkteman oswa atravè amelyore repons yo nan aktive stimuli. Nan sijè ki abòde lan ipotèz sa a, nou patikilyèman vize pou elisid, si yon konsantrasyon verifye nitrisyonèl ki enpòtan ase pou modile repons iminitè selilè nan neutrofil prensipal imen kòm yon pati nan popilasyon an lekosit. '

Anplis de sa, nou t ap chèche konpare nivo ekspresyon RNA tout manm superfamily mamifè TRP nan senk nan kalite selil ki pi enpòtan nan san moun pou jwenn yon BECA kalitatif ak quantitative konplè sou ekspresyon chanèl TRP nan leukosit imen.

2. Rezilta yo

2.1. Abondans ak nivo transkripsyon relatif chanèl TRP nan lekosit imen

Pou evalye ekspresyon RNA chanèl TRP nan lekosit san yo, yo te izole senk nan kalite selil lekosit ki pi enpòtan nan san donatè ki an sante, epi ekspresyon RNA chanèl TRP yo te analize atravè RT-PCR quantitative (Figi 1).

Yo te detekte transkripsyon espesifik TRPV a ansanm ak fanmi TRPM ak gwo frekans 75-100 pousan nan tout kalite selil yo analize. Mwayèn frekans jeneral la konsidere tout kalite selil yo te 96 pousan pou fanmi TRPV a ak 98 pousan pou fanmi TRPM. TRPC-espesifik transkripsyon yo te anpil mwens abondan, sòti nan 0 pousan nan monosit, selil NK, selil T, ak selil B a 100 pousan nan selil NK, ak selil T ak yon frekans mwayèn jeneral nan sèlman 53 pousan (Figi 1A). Transkripsyon espesifik TRPC5-sèlman te detekte nan netrofil yo, ak yon frekans 70 pousan.

Epitou, transkripsyon espesifik TRPA1-revele jeneralman yon abondans ki ba nan kalite selil yo analize ak yon frekans 100 pousan nan netrofil, 25 pousan nan monosit, 80 pousan nan selil NK, 100 pousan nan selil T, ak 60 pousan. pousan nan selil B yo. Menm jan an tou, transkripsyon TRPML3-espesifik la te montre yon frekans ba nan netrofil (50 pousan), monosit (25 pousan), selil NK (40 pousan), ak selil B (20 pousan), men yon frekans 100 pousan nan Selil T. Yo te detekte transkripsyon espesifik TRPV1-nan tout kalite selil, ki montre yon frekans 100 pousan nan monosit, selil NK, ak selil T, ak yon frekans 90 pousan nan netrofil ak 80 pousan nan selil B yo.

Konsènan ekspresyon relatif RNA, konpare ak frekans respektif yo, chanèl TRP yo revele yon modèl ekspresyon ki pi espesifik nan selil yo, jan sa evidan pa konparezon valè respektif Δct yo nan diferan kalite selil yo analize (Figi 1B). Pou egzanp, TRPP3 te detekte ak yon frekans 100 pousan nan tout kalite selil men revele nivo ekspresyon ki pi wo a nan monosit.

Kontrèman, yo te detekte kanal TRPV2 la nan tout kalite selil yo envestige, ak yon nivo ekspresyon RNA ki sanble wo ak yon frekans segondè. Menm jan an tou, nivo transkripsyon TRPV1 yo te menm jan an nan tout kalite selil yo te egzamine (Figi 1B).

2.2. TRPV1 Ekspresyon Sifas sou Neutrophils

Konesans aktyèl la sou fonksyon TRPV1 nan netrofil imen yo toujou klè. Pou plis eksplore wòl TRPV1 nan netrofil imen, nou te envestige si wi ou non kanal TRPV1 eksprime sou sifas prensipal neutrofil imen lè l sèvi avèk sitometri koule selil vivan (Figi 2).

Netrofil izole yo te tache pou CD15 kòm yon makè sifas pou netrofil (Figi 2A, B) epi ansanm swa tache ak yon antikò leve kont yon epitop nan premye bouk ekstraselilè nan pwoteyin TRPV1 (Figi 2B) oswa kontwòl izotip respektif la, la. lèt sèvi kòm yon ranplasan pou mezire obligatwa ki pa espesifik (Figi 2A). Nan popilasyon CD15 plis la, yo te analize entansite fluoresans pou FITC. Tach nan netrofil yo ak antikò TRPV1 a te mennen nan yon siyal fliyoresan distenge konpare ak kontwòl izotip la, kidonk konfime ekspresyon sifas TRPV1 nan prensipal netrofil imen (Figi 2C). Analize netrofil soti nan kat donatè endividyèl revele yon ekspresyon sifas konparab nan TRPV1 (Figi 2D).

2.3. [6]-Gingerol pwovoke Ogmantasyon nan entraselilè Ca2 plis

Piske deklanchman TRPV1 pwovoke ligand pral lakòz yon foul Ca2 plus, [23] Entraselilè Ca2 plis konsantrasyon netrofil yo te detèmine atravè koloran Ca2 plus -sansib Fura-2. Dapre rezilta anvan nou yo, [9] yo te chwazi yon konsantrasyon 50 nM nan TRPV1 ligand [6]-gingerol ki byen koni ak yon tan enkubasyon 2 èdtan. Analiz yo te montre ke enkubasyon netrofil ak 50 nM [6]-gingerol te lakòz ogmante konsantrasyon entraselilè Ca2 plis ki te an mwayèn 18.4 pousan ± 1.0 pousan nan valè maksimòm, jan yo detèmine lè w aplike 1 μM nan ionomycin ionofòr la. Ogmantasyon an pwovoke pa DMSO te nan 4.7 pousan ± 1.2 pousan (Figi 3).

2.4. Enpak [6]-Gingerol sou ekspresyon TRPV1

Apre sa, nou vize pou analize enpak TRPV1 eksitasyon pa [6]-gingerol sou ekspresyon TRPV1 nan nivo transkripsyon atravè q-RTPCR kòm byen ke nan nivo pwoteyin sifas atravè tach selil vivan. Pou rezon sa a, netrofil imen yo te enkube ak 50 nM [6]-gingerol pou 2 èdtan, epi nivo ekspresyon respektif yo te kantite.

Enkubasyon 2 h sa a pa afekte ni transkripsyon TRPV1 ni nivo pwoteyin (Figi 4), epi tou li pa t chanje, eksepte IL6, IL17A, IL24, C5, ak GDF5, ekspresyon RNA nan cytokine komen ak jèn chemokine envestige (Figi S1, Tablo). S2, Enfòmasyon Sipò).

2.5. Enpak [6]-Gingerol sou ekspresyon makè sifas netrofil yo

Nan seri eksperyans sa a, nou te mande si [6]-gingerol gen yon enpak sou ekspresyon de makè sifas komen pou neutrophils. Nou te jwenn ke ekspresyon makè CD11b ak CD66b yo te ogmante apre peryòd enkubasyon 2 h ak [6]-gingerol lè yo konpare ak kontwòl sòlvan an, tandiske CD62L pa te afekte (Figi 5). Anplis de sa, ekspresyon sifas fMLF reseptè FPR1 la te siyifikativman elve apre tretman selil yo ak 50 nM [6]-gingerol konpare ak kontwòl sòlvan an.

For more information:1950477648nn@gmail.com