Efè anti-aje Urolithin A sou ovosit bovins in vitro 2

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

2.8.Estatistik analiz

Done ki soti nan pwodiksyon anbriyon ak bon jan kalite sesyon yo te analize lè l sèvi avèk Proc Glimmix soti nan SAS (Statistical Analysis Systems, SAS Inst., Inc., Cary, NC, USA), lè l sèvi avèk distribisyon an binè ak logit la kòm fonksyon lyen. Modèl mixte lineyè jeneralize a enkli tretman (dòz UA, efè aje, ak laj fi, ak entèraksyon yo) kòm yon efè fiks ak replike kòm yon efè o aza. Anplis de sa, yo te kalkile mwayen pou chak tretman, epi konparezon ant gwoup yo te fèt lè l sèvi avèk tès PDIFF la. Done JC-1, nivo transkripsyon mRNA yo, ak kantite kopi mt-DNA yo te analize lè l sèvi avèk Proc Mixed of SAS ak yon modèl ki gen ladan tretman (efè UA, efè aje, ak/oswa laj fi, ak entèraksyon yo) kòm yon efè fiks. Sesyon an te konsidere kòm yon efè o aza. Done konfigirasyon kwomozòm yo te konpare ant gwoup yo lè l sèvi avèk egzak tès Fisher la, nan yon tab enprevi 2 x 2. Analiz rezilta yo te konsidere kòm estatistik enpòtan lè p<>

Tanpri klike isit la pou konnen plis

3. Rezilta yo

3.1.Previous Essay—Etid Dòz-Repons

Estati spirasyon oosit yo obsève pandan etid dòz-repons nan UA ki konplete ak mwayen spirasyon an reprezante nan Figi 1. Sipleman sa a te enfliyanse anpil etap spirasyon nikleyè oosit yo. Gwoup 50 UA (38.9±0.5 pousan) revele yon pi gwo pousantaj ovosit nan estati faz AI/TI konpare ak Kontwòl la (10.8±{{ 15}}.5 pousan ,P=0.03)ak 10 UA(0.0±0.{{ 45}} pousan ,p=0.0006) gwoup yo.Nan faz sa a, yon pi gwo pousantaj nan gwoup 25 UA (17.2±0.5 pousan, p=0.05) konpare ak gwoup la 10 UA te idantifye tou. Anplis, yo te jwenn yon tandans ant gwoup 50 UA ak 1 UA (14.3±2.0 pousan, p=0.08). Dòz ki pi wo a te montre tou yon efè danjere, redui kantite ovosit ki klase nan Metaphase-II. (MII) etap (50 UA, 44.4 ± 2.0 pousan) lè yo konpare ak kontwòl (86.5±7.0 pousan, p=0.003), 1 UA (82.1±2.5 pousan, p{{ 53}}.01), 10 UA (89.3±6.5 pousan ,p=0.002)ak 25UA (82.8±9.0 pousan ,p=0.01) gwoup yo.Okenn diferans yo te obsève ant rès yo. etap nan spirasyon ovosit. Faz spirasyon GV ak CCl yo pa te montre nan Figi 1, paske pa gen okenn ovosit yo te evalye nan kategori sa yo.

Tès repons dòz la pa montre okenn efè enpòtan nan konsantrasyon UA ​​sou klivaj ak pousantaj anbriyon kale. Sepandan, pousantaj anbriyon ki pwodui nan jou 7 te enfliyanse pa konsantrasyon diferan nan UA. Gwoup 50 UA (7.2±2.7 pousan) te gen pi ba pousantaj anbriyon nan jou 7 konpare ak 1 UA (28.5±4.8 pousan,p=0.004),10 UA (20.4±4.0 pousan). , p=0.03) ak 25 UA(18.5±4.7 pousan ,p=0.05)gwoup. Malgre ke pa gen okenn diferans enpòtan yo te jwenn ant gwoup kontwòl la ak 50 UA, yo te idantifye yon tandans (p=0.06). Anplis, to anbriyon jou 7 yo gen tandans (p =0.07) vin pi wo apre 1 UA dòz siplemantè konpare ak kontwòl. Anplis, gwoup 1 UA a double kantite ekselan/bon kalite anbriyon (68.9 pousan nan anbriyon klas 1, n=20) lè yo konpare ak kontwòl (34.6 pousan, n{=10) ak 10 UA (26.8). pousan ,n{=10).Yon ti kantite anbriyon klas 1 yo te jwenn ak pi gwo dòz yo: 25UAgroup (15.4 pousan ,n{=4) ak 50UA (35.4 pousan ,n{=3). Dapre rezilta yo mansyone anwo a, yo te chwazi 1 uM UA pou kontinye nan etid sa yo.

3.2.Eksperyans 1——Ovocyte Kalite ak Devlopman Potansyèl Ovosit ki gen laj ak fizyolojik ki gen matirite

3.2.1.Matirite Nikleyè

Nou te envestige efè sipleman UA sou estati spirasyon kwomozòm nan ovosit ki gen laj ak fizyolojik ki gen matirite yo kolekte nan men fanm prepubè ak adilt. Endepandamman de efè a UA, aje ovocyte ak laj fi pwovoke yon efè danjere enpòtan sou spirasyon. Yo te idantifye pi gwo pousantaj faz MII nan ovosit kontwòl konpare ak moun ki gen laj (22h=93.2±5.4 pousan vs.30h{=77.6±4.1 pousan , p {{11} }}.02). Anplis, yo te idantifye yon reta nan pwogresyon spirasyon sou gamèt ki gen laj ak fi prepibètè ki gen plis ovosit nan faz AI/TI (22h=3.4±0.5 pousan kont 30h). =17.9±0.6 pousan ,p=0.01 ak prepuberal=21.1±1.1 pousan kont granmoun{=6.8±0.7 pousan p =0.03).Anplis de sa, yo te idantifye yon pi gwo kantite ovosit dejenere apre 30 èdtan nan IVM konpare ak apre 22h (7.1 ±1.39 pousan kont 4.1±0.89 pousan ,p =0.02) . Laj fi ak sipleman UA pa t entèfere (p 0.05) ak kantite ovosit dejenere.

Tou de aje in vitro ak sipleman UA nan mwayen spirasyon an te enfliyanse siyifikativman konfigirasyon kwomozòm nan oosit nan fi prepibè ak adilt (p.<0.05, figure="" 2).="" on="" the="" al/ti="" phase="" of="" the="" maturation="" status,="" higher="" rates="" of="" oocytes="" were="" found="" in="" this="" stage="" in="" the="" control="" aged="" 30="" h="" prepubertal="" group="" (46.7±0.5%)="" when="" compared="" to="" control="" prepubertal="" (0.0±0.0%,p="0.05)" and="" ua="" aged="" 30h="" prepubertal="" (0.0="" ±0.0%,p="0.02),and" both="" adult="" control="" (5.6±0.5%,p="0.01" and="" ua="" adult,0.0±0.0%,="" p="0.0002)and" control="" aged="" 30h="" adult="" (9.1±10%,p="0.02)groups." a="" trend="" was="" also="" identified="" between="" ua="" adults="" and="" ua="" aged="" 30="" h="" adult="" (p="">

Konsènan faz MII ki koresponn ak spirasyon nikleyè konplè, yo te jwenn diferans enpòtan tou ant gwoup yo (Figi 2). Yo te jwenn pi ba pousantaj ovosit nan etap MII nan kontwòl ki gen laj 30 èdtan anvan pibè (53.3±2.0 pousan) konpare ak kontwòl prepibètè a (10{{2{ {27}}}}.0±1.5 pousan ,p=0.05),UA ki gen laj 30h anvan pipitè (100.0±2.5 pousan , p=0.02)ak UA granmoun (100.0 ±10.5 pousan ,p=0.0002)ak kontwole ki gen laj 30hadult(86.0±5.5 pousan p =0.056) gwoup. Anplis, gwoup adilt UA a te montre pi gwo pousantaj ovosit ki gen matirite (MII) konpare ak UA ki gen laj 30 èdtan adilt (76.2±11.3 pousan, p=0.01), kontwòl ki gen laj 30h granmoun (86. 0±5.5 pousan ,p=0.08)ak kontwole granmoun (83.3±4.5 pousan ,p{=0.057).

Pa gen okenn diferans ki te obsève ant etap ki rete yo nan matirite oosit.flavonoid,An rezime, sipleman UA amelyore pwogresyon spirasyon an vitro nan ovosit ki soumèt nan pwosesis la aje, espesyalman nan fi prepuber. Yon efè anti-aje enpòtan nan UA te konsa idantifye.

3.2.2.Potansyèl manbràn mitokondriyo

Yo nan lòd yo analize patisipasyon nan malfonksyònman mitokondriyo nan ovosit ki gen laj fi ak efè a nan UA ak laj matènèl, yo te evalye potansyèl la manbràn mitokondriyo (MMP) nan oosit nan diferan gwoup.

Cistanche ka anti-aje

Endepandamman de laj fi ak efè UA, aje ovosit te gen yon gwo efè danjere sou MMP evalye kòm rapò a nan mezire wouj ak vèt fluoresans lan (22 h rapò =0.54±1.8 pousan vs.30hratio{{6} }.47±1.5 pousan ,p=0.002).

Konbinezon laj fi a, efè aje, ak sipleman ak UA pandan spirasyon an anpil (p{{0}}.{{10}}07) enfliyanse MMP la. (Figi 3). Jan yo obsève nan Figi 3, pi gwo pousantaj MMP yo te jwenn nan gwoup UA prepuberal (rapò =0.55±0.04) ak UA adilt (rapò {=0.63±0.04) kote ovosit yo te gen matirite pou 22h. , konpare ak kontwòl la ki gen laj 30 h granmoun (rapò =0.45±0.04, p=0.04 ak p=0.0007, respektivman) ak UA ki gen laj 30 h granmoun (rapò {{ {23}}.45±0.03,p=0.03 ak p=0.0003,respektivman) gwoup yo.itilize hesperidinAnplis, yon ogmantasyon siyifikatif nan rapò total JC{{0}}, ki endike yon ogmantasyon siyifikatif nan MMP, te obsève nan gwoup adilt UA lè yo konpare ak granmoun kontwòl (rapò =0.47). ±0.04,p =0.0031),kontwole prepibète (rapò=0.52±0.04, p=0. 03), kontwole ki gen laj 30 h granmoun (rapò =0.48±0.03,p=0.003)ak UA ki gen laj 30h granmoun (rapò{=0.47±0.03,p{{25) }}.001)gwoup yo.Yon tandans te idantifye tou ant UA prepuberal, ak UA ki gen laj 30 h prepubertal (p=0.07).

An rezime, UA amelyore MMP a pandan spirasyon fizyolojik, men li pa t kapab simonte efè negatif nan aje nan tou de ovosit prepibètè ak adilt.

3.2.3.Devlopman anbriyon

Yo te evalye potansyèl devlopman anbriyon an atravè klivaj, D7, ak pousantaj anbriyon kale, yo te jwenn ak diferan tretman (aje ak sipleman UA) aplike nan COCs prepibète ak granmoun fi yo pandan spirasyon. Endepandamman de laj fi ak efè UA, aje ovosit te gen yon gwo efè danjere sou klivaj (22h=79.5±1.7 pousan vs.30h{=68.6±2.0 pousan, p=0.0001)ak D7 pousantaj anbriyon (22h=18.6±1.9 pousan

vs.30h=12.1±1.7 pousan ,p=0.01).Sipleman UA yo te montre tou pou amelyore pousantaj anbriyon D7 (kontwòl{ {8}}.1±1.5 pousan kont UA=20.0±2.0 pousan ,p=0.0009).

Konbinezon laj fi a, efè aje, ak sipleman ak UA pandan spirasyon an anpil (p {{0}}.{{30}}1) te enfliyanse devlopman anbriyon, sètadi klivaj la ak Pousantaj anbriyon D7 (Tablo 2). Yo te reyalize pi wo pousantaj klivaj lè ovosit adilt yo te gen matirite pou 22 èdtan avèk oswa san sipleman UA (kontwole granmoun =1.4±3.2 pousan ak granmoun UA=80. 9±3.4 pousan) ak ovosit prepibètè yo te gen matirite pou 22 èdtan ak sipleman UA (UA prepuberal=80.6±3.2 pousan ), konpare ak UA ki gen laj 30hadult (66.5±4.2 pousan ,p Mwens pase oswa egal a 0.01), kontwole ki gen laj 30h prepuberal (66.9±3.9 pousan, p mwens pase oswa egal a 0.02) ak UA ki gen laj 30h prepuberal (67.2±4.0 pousan, p mwens pase oswa egal a 0.01) gwoup (Tablo 2). Yo te idantifye tou yon tandans (p=0.09) ant granmoun kontwòl ak gwoup adilt kontwòl ki gen laj 30 h.

Another parameter that was significantly (p=0.01) influenced by the combination of the female age, the supplementation with UA, and COCs aging was the rate of embryos produced at day 7(Table 2). Exceptions were made for the UA prepubertal and UA 30 h prepubertal groups, the UA adult group presented the highest rates of the embryo at day7 (26.8±4.3%,p≤0.05). Moreover, lower D7 embryo rates were produced from aged oocytes from both adult and prepubertal females without the supplementation of UA (control aged 30hprepubertal=7.7±2.6% and control aged 30h adult=7.7±2.6%)compared to those that were supplemented with UA, respectively (UA aged 30 h prepubertal=18.9±4.0%,p=0.03 and UA aged 30 h adult=15.9±4.0%,p=0.09). The supplementation of UA to the maturation medium did not significantly (p>0.05) enfliyanse pousantaj kalite pwodwi anbriyon klas 1,2 ak 3, ni efè aje oswa tout efè etidye ansanm (Tablo 3). Sepandan, kantite anbriyon ekselan / bon kalite ki te pwodwi lè UA yo te konplete nan oosit ki gen matirite pou 22 èdtan double (Tablo 3).

3.3.Eksperyans 2

3.3.1.Nivo ekspresyon jèn yo

Yo nan lòd yo etidye efè a UA ak enfliyans laj matènèl sou chemen an siyal Nrf2, analiz de nivo ekspresyon jèn NFE2L2 ak NQO1 nan kilti GCs soti nan bèf prepubertal ak adilt te evalye pa RT-qPCR. Endepandamman de lòt faktè etidye yo, laj fi yo te enfliyanse anpil ekspresyon jèn NFE2L2 la, ki reflete nan nivo ki pi wo nan transkripsyon NFE2L2 nan GC soti nan fi prepibète (nivo mRNA prepibète=0.00015). ±0.0012 pousan kont granmoun=0.00011±0.0012,p=0.048).

The supplementation of UA to the culture medium of GCs, both independently and considering female age, did not significantly(p>0.05) enfliyanse nivo ekspresyon jèn nan jèn NFE2L2, NQOl ak mt-ND5. Figi 4 reprezante nivo ekspresyon jèn sa yo ki te nòmalize ak kontwòl respektif yo, nan tou de GCs prepuberal ak adilt ki trete UA.

3.3.2.mt-ADN Kopi Nimewo

Analysis of mt-ND5 DNA content in GC culture from prepubertal and adult cows was assessed by qPCR. The supplementation of UA to the culture medium of GCs, both independently and considering female age, did not significantly (p>0.05) enfliyanse nimewo kopi jèn mt-ND5 la.pèdi anpi cistancheFigi 5 reprezante nimewo kopi jèn sa a nòmalize ak kontwòl respektif yo, nan tou de GCs prepuberal ak adilt ki trete UA.

4. Diskisyon

Pandan deseni ki sot pase yo, yo te obsève ogmantasyon demann pou aplikasyon ART nan bèt [8,46,47]. Anplis de sa, reta nan fè pitit ki asosye ak laj matènèl avanse kounye a vin faktè prensipal ki mennen fanm yo ale nan ART [5]. Kalite ovosit enpòtan anpil pou ensidan an nan yon konsepsyon siksè, ak aje nan gamèt fi a se yon gwo enkyetid pou siksè ART. Malgre pwogrè ogmante yo te fè nan domèn sa a, teknoloji aplike yo poko kapab retabli fètilite, retounen revèy byolojik la [7]. Nan travay sa a, yo te devlope yon modèl pou etid sterilite ki asosye ak laj nan ovosit bèt yo. Akòz resanblans ak gwosès imen, evènman folikilè ak andokrin [48,49], modèl sa a ka itil tou pou rechèch imen, evite restriksyon etik ak fizik ki anpeche etid sa yo nan oosit imen. Modèl nou an pou aje gamèt fi pwouve yo trè efikas ak apwopriye pou etidye diferan pwoblèm ki asosye ak aje repwodiktif ak pwoblèm fètilite, kounye a youn nan defi ki pi enpòtan nan mond lan. Anplis de sa, rechèch la pou nouvo terapi antioksidan k ap vini ak potansyèl pou anpeche sterilite pwovoke pa aje gamèt fi, jan yo etidye nan travay prezan an, se egalman nan pi gwo enpòtans.

Prezante rezilta rapòte pou premye fwa efè benefik UA nan rezilta ART yo. UA se yon metabolit manje ki kapab anpeche akimilasyon nan mitokondri disfonksyonèl ki gen rapò ak laj pa pwovoke mitofaji yo ak yon lavi pwolonje nan selil [28]. Depi UA pa janm te teste anvan nan repwodiksyon bovin, dòz yo te aplike avèk siksè nan diferan liy selil ki montre efè anti-kansè, anti-enflamatwa ak anti-aje yo te itilize [28,35,39].Nan etid nou an, yon dòz anvan-. tès repons te pote soti ak konsantrasyon nan 1 uM UA te klèman idantifye kòm pi pwomèt la. Anplis, yo te demontre yon efè danjere nan pi wo dòz, espesyalman nan dòz la 50 uM UA, mal pwogresyon nan spirasyon nikleyè jouk MII. Efè sa a te reflete sou andikap devlopman anbriyon. An konsekans, Liu ak kòlèg li yo (2019) remake siyifikativman redwi viabilite selil ak pwopagasyon fibroblast po moun senesan, nan yon konsantrasyon UA ​​nan 50 uM. Yo refere ke gwo dòz UA mennen nan diminye viabilite selil ogmante kantite selil yo arete nan sik selil G / M [35]. Okontrè, pi wo pousantaj anbriyon yo te pwodwi nan jou 7 apre sipleman 1 uM UA nan mwayen spirasyon an lè yo konpare ak lòt dòz yo. Pou plis eksplore mekanis potansyèl aksyon UA ​​nan repwodiksyon fi, yo te aplike yon etid pandan aje ovosit ak lè l sèvi avèk fi ki gen laj diferan kòm donatè oosit. Yamamoto ak kòlèg travay yo (2010) rapòte yon bès ki asosye ak laj nan to fètilizasyon bèf fin vye granmoun, ki montre ke ovosit sa yo te gen plis tandans rekòmanse premye divizyon meyotik pandan spirasyon e souvan te deja inisye spirasyon meyotik nan koleksyon oosit [50] Done sa yo sigjere ke ovosit ki soti nan pi gran bèf yo te gen yon pwogresyon spirasyon nikleyè pi vit epi yo te rive nan faz MII la pi vit pase oosit ki soti nan jèn fi akòz yon konpetans pi ba oosit [51]. An konsekans, etid nou an revele ke laj donatè fi yo ak pwosesis la nan aje oosit siyifikativman enfliyanse konfigirasyon kwomozòm nan oosit pandan pwogrè spirasyon. An reyalite, ovosit ki soti nan bèf prepibètè yo te montre yon pi gwo pousantaj nan etap reta yo, tankou faz Al/TI (prepibète=21.1 pousan kont granmoun =6.8 pousan ), revele yon pwogresyon pi dousman nan nikleyè. spirasyon, ki ka akòz pi ba konpetans oosit jan Soto-Heras ak kòlèg yo pwopoze (2018). Oosit ki gen laj yo prezante tou pi ba pousantaj ovosit ki te rive nan faz MII pandan yon peryòd 30 èdtan (7.6 pousan) konpare ak peryòd fizyolojik la (93.2 pousan). Anplis, yo te idantifye yon efè pozitif ak tretman UA pandan pwosesis spirasyon fizyolojik la, epi tou efè anti-aje nan tou de fi prepubertal ak granmoun.

An akò ak konklizyon nou yo, yon etid te demontre ke sipleman melatonin pandan spirasyon nan oitro te kapab ankouraje reouvè meyoz nan COC bovins, tandiske ovosit kontwòl kiltive san òmòn te gen pi dousman pousantaj reouvè meyoz [52]. Okontrè, sipleman an ak lòt ajan antioksidan, tankou quercetin, vitamin C oswa resveratrol pa t prezante okenn efè sou pousantaj spirasyon nikleyè, menm lè yo te obsève yon nivo ROS redwi oswa ogmante nivo anzimatik antioksidan [53,54].mikronize pirifye fraksyon flavonoid 1000 mg itilizeKontrèman, rezilta nou yo montre ke UA ta ka sove ovosit soti nan efè aje nan tou de fanm adilt ki gen laj ak prepubertal, ki prezante pi ba konpetans, amelyore pousantaj spirasyon.

Youn nan kontribitè prensipal yo nan rezilta fètilite pòv ki afekte bon jan kalite oosit gen rapò ak fonksyon mitokondriyo, ki vin konpwomèt ak laj matènèl avanse ak aje post-ovulatwa [21,55]. MMP yo te lajman etidye nan diferan modèl, revele ke tou de gamèt ki gen laj apre ovilasyon ak aje matènèl, pwovoke pèt la nan fonksyon mitokondriyo [56]. Kontinwe, pèt MMP te reflete negatif sou devlopman ovosit ak anbriyon [26,57]. Dapre konklizyon sa yo, nan etid nou an, yo te jwenn yon rapò MMP redwi nan ovosit ki gen laj ki soti nan tou de bèf prepibètè ak adilt. Anplis, sipleman UA nan mwayen kilti a te pwovoke yon ogmantasyon sou MMP nan oosit prepuberal ak adilt ki gen matirite pou 22 èdtan, reverberating nan pi gwo pousantaj klivaj. Done sa yo an akò ak rezilta yo te jwenn pa Liang ak kòlèg travay (2017) ki te obsève yon amelyorasyon MMP lè ovosit bèf yo te konplete ak melatonin pou 22 èdtan [26]. Sepandan, nou menm tou nou idantifye yon rediksyon nan MMP nan ovosit ki gen laj konplete ak UA, ki vle di ke UA ka pa kapab ranvèse efè negatif aje nan MMP. Yo te obsève rezilta diskrè konsènan MMP apre sipleman nan oosit ki gen laj ak konpoze antioksidan. Vreman vre, plizyè otè rapòte pi gwo nivo MMP sou oosit apre sipleman ak melatonin [26] ak laminarin [21] tandiske lòt moun te obsève opoze a, yon diminye MMP nan ovosit ki gen laj trete ak L-carnitine [58] ak melatonin [38]. Anplis de sa, Ryu ak kòlèg yo (2016) te montre yon rediksyon nan MMP nan myoblast sourit kiltive ak UA [28]. Konsènan rezilta nou yo, yo ta dwe adrese plis etid pou apwofondi konesans nan mekanis aksyon UA ​​nan mitokondri oosit yo epi eksplike efè diferans yo idantifye sou ovosit ki gen laj ak fizyolojik ki gen matirite.

Yo te rapòte bon jan kalite intrinsèque nan ovosit kòm prensipal detèminan devlopman anbriyon ki vin apre yo. Prèv akimile te revele ke plizyè anomali selilè ak molekilè rive pandan peryòd spirasyon pwolonje in vitro osi byen ke pandan aje post-ovulatwa nan oivo [57]. Anplis de sa, anòmal sa yo ka egzèse enpak enpòtan sou bon jan kalite oosit reverberating sou pwodiksyon anbriyon [52]. Pou demontre ke UA ka aji kòm yon konpoze anti-aje ak amelyore kalite oosit, retade aje oosit, nou envestige kapasite devlopman nan ovosit ki gen laj apre fètilizasyon in vitro. Nan etid nou an, yo te obsève yon siyifikatif (p mwens pase oswa egal a 0.01) efè danjere nan aje gamèt sou klivaj ak to pwodiksyon anbriyon jou 7 yo. An konsekans, plizyè otè refere ke vye fi yo gen yon bès ki asosye ak laj nan kapasite repwodiktif, ki reflete nan pi ba pousantaj fètilite ak bon jan kalite anbriyon pòv [44,55]. Nan lòt men an, etid anvan yo teste lòt molekil antioksidan pou sove ovosit ki gen laj te rapòte efè benefik kèk nan konpoze sa yo pandan spirasyon in vitro sou devlopman anbriyon fi ki gen laj ki soti nan diferan espès, tankou bèt [58], kochon [58] 38] ak sourit [6]. Pou egzanp, L-carnitine te teste sou ovosit ki gen laj bèf epi yo pa jwenn okenn diferans enpòtan sou pousantaj klivaj yo jwenn. Sepandan, yo te idantifye yon ogmantasyon siyifikatif nan pousantaj zigòt devlope nan etap blastocyst la, konpare ak ovosit ki gen laj san L-carnitine [59]Rezilta nou yo tou demontre ke sipleman UA pandan spirasyon fizyolojik amelyore to a klivaj nan fanm prepubertal ak granmoun. Malgre ke pousantaj klivaj nan ovosit ki gen laj UA yo pa t 'siyifikativman diferan de ovosit ki gen laj kontwòl, pi wo pousantaj anbriyon D7 yo te idantifye nan ovosit ki gen laj UA ki soti nan tou de fi prepuber ak adilt. Rezilta sa yo fè remake ke efè anti-aje UA te idantifye deja nan diferan kilti selil [28,35] valab pou ovosit ak anbriyon. Aje ovosit se yon pwosesis miltifaktoryèl ki afekte devlopman anbriyon an, epi retabli kapasite devlopman nan ovosit ki gen laj se yon objektif enpòtan ki te atenn nan etid sa a.

Anplis de sa, nou te evalye tou wòl prevansyon UA ​​nan deteryorasyon ki gen rapò ak laj sou kalite anbriyon an. Malgre ke nan etid sa a pa gen okenn diferans enpòtan yo te jwenn nan to kalite anbriyon, ovosit yo konplete ak UA ogmante kantite anbriyon transfere, konpare ak sa yo ki pa trete. Yon etid anvan te rapòte ke tretman L-karnitin te kapab amelyore kalite anbriyon devlope nan ovosit bovins ki gen laj atravè rediksyon nan nivo ROS ak pi wo nivo glutatyon kòm byen ke lòt anzim antioksidan [58]. Diferans ki genyen ant rezilta sa yo ak rezilta nou yo ka akòz diferan teknik yo aplike pou evalye kalite anbriyon an. Evalyasyon mòfolojik kalite anbriyon an rete yon metòd subjectif ki depann de eksperyans obsèvatè a. Nan tan kap vini an, plis etid yo ta dwe adrese lè l sèvi avèk lòt teknik pou evalye avèk presizyon kalite anbriyon.

Li se lajman li te ye ke estrès oksidatif jwe yon wòl enpòtan nan diminisyon nan laj ki asosye nan fètilite. Estrès oksidatif se youn nan pi gwo kontribitè nan efikasite spirasyon ovosit ki ba, ak deteryorasyon kalite oosit, kidonk afekte devlopman anbriyon ki vin apre [11]. Kominikasyon entèselilè ant gamèt yo ak selil somatik yo enpòtan anpil pou devlopman bon kalite oosit yo. Chanjman nan mikwo-anviwònman nan òvèj ki gen laj yo te rapòte, tankou diminye aktivite antioksidan anzimatik ki mennen nan yon efikasite ROS scavenging andikape.oteflavonoidAnplis de sa, yo te montre GC soti nan jèn ak pi gran fi yo gen diferan eksprime jèn ki asosye ak aktivite antioksidan ak laj matènèl [2,13]. Kidonk, li gen anpil enpòtans ke yo jwenn mekanis jere estrès oksidatif yo nan lòd yo sove ovosit soti nan aje ak simonte pwoblèm lakòz. Chemen Nrf2-Keapl la te etidye anpil akòz kapasite li genyen pou l fè fas ak efè danjere estrès oksidatif ak egzèse pwopriyete antioksidan. Nivo ekspresyon mRNA nan NFE2L2 ak antioksidan en li yo (NQO1). Rezilta nou yo te montre yon enfliyans enpòtan nan laj fi sou nivo transkripsyon NFE2L2, ki diminye ak laj. Vreman vre, pi gwo nivo ekspresyon mRNA yo te obsève nan bèf prepibète lè yo konpare ak granmoun. Sa a se akò ak etid anvan yo ki te rapòte yon nivo trè eksprime nan pwoteyin Nrf2 ak mRNA sou tisi òvèj nan sourit fè pitit ak fanm ki soti nan 22 ak 49 ane fin vye granmoun, tandiske nan sourit ki gen laj ak fanm yo te jwenn yon ekspresyon pi ba. Li te sigjere ke ekspresyon diminye nan Nrf2 ka patisipe nan n bès nan kapasite nan repwodiksyon nan pi gran fanm ak kontwòl li yo ka gen enplikasyon enpòtan nan retade aje òvèj [15,61]. Anplis de sa, Akino ak kòlèg travay yo (2019) te montre ke deklanchman chemen Nrf2-Keapl la atravè administrasyon dimethyl fumarate te kapab diminye nivo ROS ak mennen nan lakòz reta [18]. Rezilta menm jan an konsènan efè UA nan diminye ROS nan fibroblasts po moun senesan yo te rapòte. Lè selil sa yo te trete ak UA, yo te rapòte yon ogmantasyon siyifikatif nan ekspresyon mRNA nan jèn Nrf2 vize, tankou SOD1, NQ01, GCLC ak HMOX1. [35].Nan etid nou an, nou te obsève ke nivo ekspresyon jèn NFE2L2 ak NQO1 nan GC yo pa te siyifikativman afekte pa sipleman UA. Sepandan, plis etid yo ta dwe adrese konfime rediksyon nan ROS ak amelyorasyon ki vin apre nan blastosist la pwodui, osi byen ke efè a UA sou ekspresyon mRNA nan jèn yo mansyone pi wo a sou oosit ki gen laj.

Anplis de sa nan domaj nan ADN mitokondriyo (mt-DNA) [25,57], yo te montre tou dezòd ekspresyon jèn mitokondriyo yo kontribye nan malfonksyònman mitokondriyo ak laj. Zhang ak kòlèg yo (2019) rapòte ke kèk jèn ki enplike nan OXPHOS la, sètadi mt-ND2, mt-ND3, mt-ND4, mt-ND4L, ak mt-ND5, yo te siyifikativman downregulated nan etap GV nan oosit ki soti nan sourit ki gen laj, konpare ak sa yo ki soti nan jèn sourit [62]. Nan etid nou an, yo pa te jwenn okenn diferans enpòtan nan ekspresyon mt-ND5 mRNA, ant GC yo rekipere nan bèf prepuberal ak adilt. Anplis, nou te evalye tou nimewo kopi mt-DNA a, paske kontni mt-DNA nan GC yo te asosye pozitivman ak bon jan kalite oosit ak devlopman anbriyon [63,64]. Malgre ke nan etid nou an pa gen okenn diferans enpòtan yo te idantifye ant nimewo kopi mt-DNA nan GC soti nan bèf prepubertal ak adilt, oswa lè yo te trete ak UA, nou obsève yon pi gwo kantite ovosit ki te devlope nan etap nan blastocyst, konpare ak gwoup yo pa trete. Anplis de sa, Ryu ak kòlèg travay yo (2016) rapòte ke kontni mt-DNA ak nivo pwoteyin ki soti nan konplèks respiratwa yo pa t chanje nan myoblast sourit ki te konplete ak UA [28]. Plis etid yo ta dwe fèt pou divilge mekanis aksyon UA ​​nan amelyore fètilite fi.

5. Konklizyon

Rezilta yo jwenn nan etid sa a konfime efè danjere nan aje oosit sou konpetans devlopman li. Anplis, modèl nou an pou aje gamèt fi yo te pwouve trè efikas ak itil pou etidye diferan pwoblèm ki asosye ak aje repwodiktif ak pwoblèm fètilite konsekan. Anplis de sa, sipleman UA pandan pwosesis spirasyon nan oosit ki gen laj amelyore pousantaj spirasyon ak pwodwi anbriyon. Se poutèt sa, yo te idantifye yon efè anti-aje UA nan sovtaj gamèt ki gen laj la pou premye fwa, amelyore devlopman nan blastosist, ki mennen nan yon kantite anbriyon ogmante pou transfere nan fi benefisyè yo. Yo te idantifye tou yon efè pozitif UA sou spirasyon fizyolojik, MMP, ak devlopman anbriyon. An konklizyon, tretman UA bay yon nouvo apwòch terapetik pou anpeche oswa retade aje gamèt, ak amelyore fòmasyon blastosist ki vin apre yo ak rezilta fètilite nan ART.

Atik sa a soti nan Animals 2021, 11, 2048. https://doi.org/10.3390/ani11072048 https://www.mdpi.com/journal/animals