Efè antioksidan nan feniletanoid soti nan Cistanche Deserticola

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Quanbo Xiong/ Shigetoshi Kadota, "Tadato Tani,6 ak Tsuneo Namba"

Ekstrè asetòn-H2O (9:1) ki soti nan tij Cistanche deserticola te montre yon gwo aktivite radikal gratis. Nèf gwo konpoze phenylethanoid yo te izole nan ekstrè sa a. Yo te idantifye pa RMN kòm acteoside, isoacteoside, l^acetylacteoside, tubuloside B, echinacoside, tubuloside A, syringalide A 3z-a-rhamno-pyranoside, cistanoside A ak cistanoside F. Tout konpoze sa yo te montre pi fò aktivite gratis radikal pase yon. -tokoferol sou 1,1 -diphenyI-2-picrylhydrazy 1 (DPPH) radikal ak xanthine/xanthine oksidaz (XOD) te pwodwi sipèoksid anyon radikal (Oj). Pami nèf konpoze yo, isoacteoside ak tubuloside B, ki gen kafeyil nan yon pozisyon nan glikoz la, te montre yon efè inhibition sou XOD. Nou te etidye plis efè phenylethanoids sa yo sou peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat pwovoke pa metòd anzimatik ak ki pa anzimatik. Kòm espere, chak nan yo ekspoze siyifikatif anpèchman sou tou de asid ascorbic / Fe2 plis ak ADP / NADPH / Fe3 plis pwovoke peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat, ki te pi pisan pase a-tokoferol oswa asid kafeik. Yo te jwenn efè antioksidan yo potensye pa yon ogmantasyon nan kantite gwoup idroksil fenolik nan molekil la.

Mo kle: Cistanche deserticola; feniletanoid;antioksidan; DPPH (1 ,1 -difenil-2-picrylhydrazil) radikal; superoksid anyon radikal; peroksidasyon lipid

tij Cistanche deserticola

Tij Cistanche spp. (Cistanche Herba, fanmi Orobanchaceae) se yon tonik nan medikaman tradisyonèl Chinwa yo itilize pou deficiency nan ren an karakterize pa fèblès, sansasyon frèt nan ren yo ak jenou, esterilite fi, ak konstipasyon akòz sechrès nan entesten an nan senil la.Yon kantite konstitiyan ki gen ladan fenil-etmoid (pafwa yo rele fenilpropanoid),2) ididoid3* ak polisakarid4) yo te izole nan plant sa yo. Sato et al5} rapòte ke kèk phenylethanoids ki soti nan dwòg sa a te montre yon efè pwoteksyon kont diminye nan tou de konpòtman seksyèl ak aprantisaj nan pandye sourit chaje estrès. Phenylethanoids yo se pi gwo konstitiyan nan plant sa yo epi yo konsidere yo kontribye nan aksyon yo divès kalite dwòg sa a.6)

Phenylethanoids yo lajman distribiye nan wayòm plant la ak kèk yo te jwenn ki gen aktivite nan anti-anoksi, 7) anti-neoplasm, 8) anpèchman anzim, 9 * anti-enflamasyon, 10) antinefrit, 1 n anti-mikwo-òganis, ak immunomodulation.12) Yo te rapòte etid sou aktivite antioksidatif kèk feniletanoid ki soti nan Pedicularis tou,13 -15) men yo pa te jwenn okenn rapò sou aktivite antioksidatif feniletanoid ki soti nan espès Cistanche.

Li se byen rekonèt ke radikal gratis yo se kritik ki enplike nan patojèn divès kalite tankou kansè, maladi kadyovaskilè, atrit, enflamasyon, osi byen ke nan pwosesis dejeneratif ki asosye ak aje.16™18) Nan tès depistaj nou an pou ajan anti-aje soti nan resous natirèl. , nou te jwenn ke chak nan CHC13 (C), EtOAc (E), asetòn (A), asetòn-H2O (9:1) (AH), ak dlo (H) ekstrè nan tij la nan Cistanche deserticola te montre yon DPPH ki pisan. aktivite scavenging radikal (figi 1), nan mitan ki, pi fò a te ekspoze pa asetòn-H?.(9:1) ekstrè (AH). Ekstrè asetòn-H2O (9:1) te gen yon rapò segondè nan feniletanoid, ki te pwobableman eleman aktif nan efè yo gratis radikal. Nou izole pi gwo phenylethanoids soti nan ekstrè sa a epi etidye efè antioksidatif yo pa scavenging yo sou DPPH radikal ak xanthine / XOD ki te pwodwi superoksid anion radikal, ak anpèchman yo nan asid ascorbic / Fe2 plis ak ADP / NADPH / Fe3 plis pwovoke peroksidasyon lipid nan fwa rat. mikrosòm.

Cistanche deserticola

MATERYÈL AK METÒD

Reyaktif Polyamid C-200 (75一150/zm) ak jèl silica (Wakogel C-200, 75—150^m) poud pou kwomatografi kolòn, DPPH (1,1 -diphenyl{{ 8}}picrylhydrazyl), xanthine, XOD (xanthine oksidaz), NBT (nitroblue tetrazolium), ADP, g-NADPH, asid kafeyik ak a-tokoferol yo te achte nan men Wako Pure Chemicals, Osaka, Japon. Malonaldehyde bis (dimethylacetal) te soti nan Tokyo Kasei, Tokyo, Japon. BSA (albumin serik bovin) ak allopurinol te soti nan sigma, St. Louis, USA Lòt pwodwi chimik yo te nan klas analyse.

Enstriman absorbance UV te mezire sou yonShimadzu UV-2200 espektrofotomèt anrejistreman, espèk NMR yo te pote sou yon JEOL GX-400 oswa yon sistèm JEOL JNM-LA 400WB FT NMR.

Materyèl plant Yon dwòg komèsyal brit (pwodwi nan Nei Monggol, achte nan Bozhou Brut Drug Market, pwovens Anhui, Lachin, 1995; bon speci men yo, TMPW No 15479 depoze nan mize a nan Materia Medica, Sant rechèch analyse pou etnomedcin, rechèch). Enstiti pou Wakan-Yaku, Toyama Medical and Pharmaceutical University) te idantifye kòm tij nan Cistanche deserticola YC Ma lè w konpare karaktè mòfolojik ak anatomik li yo ak yon echantiyon natif natal ki ofri pa Pwofesè Dawen Shi, Depatman Pharmacognosy, Shanghai Medical University, Lachin.

Ekstraksyon ak Izolasyon Medikaman an poud brit (5.87 kg) te ekstrè youn apre lòt ak CHC13 (12, 9 1x2) ak EtOAc (9 1 x 3) nan tanperati chanm ak refluxed ak asetòn (9 1 x 3), asetòn-玦0 (9:1,91x3) ak H2O (7.5 1x4) pou bay ekstrè CHC13 (C) (28.7g), EtOAc (E) ( 13.4g), asetòn (A) (95g), asetòn- H2O (9:1) (AH) (175 g) ak H2O (H) (2.51kg), respektivman. Yo te sibi yon pòsyon lOOg nan ekstrè asetòn-H2O (9:1) nan yon kolòn poliamid C-200 (4{{50}}0 g) epi li te elimine ak H2O ({{41 }}) epi answit MeOH (5 1). Eliyan MeOH (20 g) yo te chaje nan yon kolòn jèl silica (600 g) epi elite ak CHCl3-MeOH-H2O (8: 3:0.3) (5 1) pou bay 10 fraksyon. Chak fraksyon te sibi kolòn Sephadex LH-20 ak eluye ak divès rapò MeOH-H2O (0一50 pousan); nèf pi gwo phenylethanoids 1 (607 mg), 2 (286 mg), 3 (43 mg), 4 (187 mg), 5 (1.1 g), 6 (100 mg), 7 (208 mg), 8 (168 mg) , 9 (75 mg) yo te jwenn.

Bèt Gason Std: Rat Wistar (8 semèn, 230一 250 g) yo te itilize. Bèt yo te achte nan Shizuoka Laboratory Animal Center epi yo te manje ak yon granules chow laboratwa (Clea Japon) epi yo te bay dlo ad libitum.

Preparasyon nan Sispansyon Mikwosomal Fwa Rat Yo te prepare fraksyon mikrosomal fwa rat pa metòd Kiso et al.l9) men san yo pa pretreatman nan fenobarbital. Apre bèt yo te fè jèn pou 24 èdtan, fwa yo te perfuze ak yon glas frèt 0.9 pousan solisyon NaCl in situ, Lè sa a, koupe an moso mens ak omojeneize nan frèt 1.15 pousan solisyon KC1 (1.{{9} } ml/g pwa fwa mouye). Yo te dilye omojèn nan kat fwa ak 1.15 pousan solisyon KC1 ak santrifuje nan 8000 g pou 20 min nan 4 degre. Lè sa a, yo te kolekte fraksyon supernatant ak ultracentrifuge nan 105000 g pou 60 min. Granules yo te jwenn yo te resuspende nan menm volim nan 1.15 pousan solisyon KC1. Kontni pwoteyin yo te detèmine pa metòd Lowry ak lè l sèvi avèk albumin kòm yon estanda.

Preparasyon echantiyon Echantiyon yo teste yo te fonn nan dlo oswa etanòl epi dilye ak dlo nan divès konsantrasyon. Konsantrasyon final yo nan etanòl yo te anba a 1 pousan nan tout sistèm tès yo eksepte DPPH tès scavenging radikal. Etanòl nan yon konsantrasyon final anba a 1 pousan pa te montre okenn efè sou sistèm tès sa yo.

DPPH Radical Scavenging Efè Efè a scavenging koresponn ak entansite a nan trempe DPPH radikal, jan sa dekri pa Hatano et al.21) Senksan /A nan 60 卩m DPPH nan EtOH te ajoute nan 500 /zl nan solisyon echantiyon ak pèmèt yo reyaji pou 30 min nan tanperati chanm, Lè sa a, yo te mezire dansite optik nan 520 nm. Pou vid, EtOH yo te itilize olye pou yo solisyon DPPH, ak pou kontwòl, H2O te itilize olye pou yo solisyon echantiyon. Valè IC50 yo te kalkile apati liy regresyon kote abscis la reprezante konsantrasyon konpoze teste ak òdone pousantaj mwayèn rediksyon radikal DPPH nan kat tès separe.

Efè sou jenerasyon radikal anyon superoksid yo te detèmine pwodiksyon anion superoksid nan sistèm xanthine/XOD lè l sèvi avèk yon mwatye gwosè metòd Imanari et al.22) Yon melanj ki konpoze de 900/zl. nan 0.05m Na2CO3 (pH 10.2), 50 /il chak nan 3mM xanthine, 3mM EDTA, 1.5mg/ml BSA, 0.75mM NBT ak echantiyon teste yo te ajoute ak 50 nan 0.1 mg/ml XOD pou kòmanse a. reyaksyon. Apre enkubasyon pou 30 minit, yo te sispann reyaksyon an ak 50 /il nan 6 mM CuCl2 epi yo te mezire absòbe a nan 560 nm. Solisyon kontwòl la te prepare nan menm fason an, men yo te itilize 50 /il H2O olye pou yo solisyon echantiyon an. Nan solisyon vid, yo te itilize 50 /il H2O olye pou yo solisyon XOD. Valè IC50 yo te kalkile nan liy regresyon kote abscis la reprezante konsantrasyon boutèy la nan konpoze teste ak òdone a anpèchman an mwayèn pousan nan rediksyon NBT nan kat nan tès depandan.

Efè inhibition sou aktivite XOD yo te estime efè inhibition sou aktivite XOD pa metòd Hatano et al.* ak kèk modifikasyon. Yon melanj ki gen 600/11 yon tanpon (0.1 m solisyon fosfat, pH 7.5), 50 以 solisyon XOD (0.068 U/ml nan tanpon) ak 50 卩 1 nan echantiyon solisyon te pre-enkube pou 10 min nan 25 degre. Lè sa a, 300 pl solisyon xanthine (0.1 mM nan tanpon) te ajoute nan melanj lan, epi solisyon an ki kapab lakòz yo te enkube pou 30 min nan 25 degre. Reyaksyon anzim la te sispann lè yo ajoute 1 n HC1 (100 / zl), epi yo te mezire absòbe melanj reyaksyon an nan 295 nm. Konsantrasyon nan asid urik ki te fòme nan melanj lan te kalkile nan absòbe a, apre yo fin soustraksyon absòbe a nan solisyon an vid ki te prepare jan sa dekri pi wo a, eksepte ke solisyon XOD te ranplase pa 50 / zl nan tanpon an. Efè inhibition sou XOD yo te eksprime pa anpèchman an pousan (pousan) nan fòmasyon nan asid urik kont sa nan kontwòl, nan ki te itilize dlo olye pou yo solisyon echantiyon. Inibitè XOD ki byen koni, allopurinol, te itilize kòm yon kontwòl pozitif.

Efè inhibition sou peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat Peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat ki pa enzymatikman pwovoke pa ascorbic/Fe2 plis ak enzymatikman pwovoke pa ADP/NADPH/Fe3 plis yo te mezire pa metòd Kiso et al.l9) ak kèk modifikasyon. .

a) Ascorbic Asid/Fe2 plis peroksidasyon lipid pwovoke nan mikrosòm fwa rat: melanj reyaksyon an te konpoze de 390/11 nan 100mM KC1/45mM Tris-HCl (pH 8.0), 50pl. nan fraksyon mikrosomal nan 1.15 pousan KC1 (20mg pwoteyin/ml) ak 50 以 nan yon solisyon echantiyon. Apre yo fin ajoute 10/11 nan 10 mM asid ascorbic / 0.5mM FeSO4 ak Lè sa a, enkubasyon nan 37 degre pou 20 min, yo te melanj reyaksyon an refwadi nan glas yo sispann reyaksyon an. Peroksidasyon lipid la te mezire pa metòd asid thiobarbituric24) epi li te eksprime kòm pwodiksyon MDA (malondialdehyde). Sa

b) ADP/NADPH/Fe3 plis peroksidasyon lipid pwovoke nan mikrosòm fwa rat: melanj reyaksyon an te genyen 290贝 nan 100mM KC1/45him Tris-HCl (pH 8.0), 50/il nan sispansyon mikwosòm nan 1.15 pousan KC1. (20mg pwoteyin / ml) ak 50 以 nan echantiyon nan dlo. Yo te ajoute senkant nan frèch prepare 20 mM ADP, 50//I nan 1 mM NADPH ak 10 nan 2mM FeCl3 ak Lè sa a, enkube nan 37 degre pou 30 min. Yo te mezire peroksidasyon lipid epi yo te kalkile IC50 pa metòd ki pi wo a.

benefis cistanche: pwoteje fwa a

REZILTA

Detèminasyon estrikti Lè yo konpare done ^H-NMR ak 13C-NMR yo ak literati a,2* nèf feniletanoid yo te idantifye kòm 2,-acetylatteoside (1), cistanoside A (2), tubuloside A (3), echinacoside ( 4), acteoside (5), syringalide A 3'-a-rhamnopyranoside (6), tubuloside B (7), isoacteoside (8) ak cistanoside F (9), respektivman (figi 2). Sepandan, pou akteozid, yon konpoze reprezantif nan feniletanoid, plasman nan siyal 13C-NMR nan C-3 ak C-4 nan moso aglikon, C-3, C-4 , C-5 ak C{-6 nan mwatye kafeyik nan rapò anvan25) te konfizyon. Pa metòd 2D-NMR tankou HMBC ak HMQC, nou bay done 13C-NMR nan akteozid kòm yon pati nan aglycone Cl: 131.49, C-2: 117.14, C-3: 146.07, C-2: 146.07. {41}}: 144,62, C-5: 116,34, C-6: 121,29, Ca: 72,33, C# 36,54; Mosyon kafeyil Cl: 127.63, C-2: 115.26, C-3: 146.79, C-4: 149.78, C-5: 116.55, C{-6: 123.24 , Ca: 168,33, Cg: 114,68, Cy: 148,04; kantite glikoz C-l': 104.16, C-2': 75.97, C-3': 81.66, C4: 70.39, C-5': 76.16, C-6' : 62.35; ak ramnoz: Cl: 102.99, C-2: 72.22, C{-3: 72.05, C{-4: 73.79, C{-5: 70.58, C-6 : 18.46.

Relasyon estrikti-aktivite yo te etidye pou nèf phenylethanoids sa yo pa radikal DPPH yo ak xanthine/XOD te pwodwi superoxide anion radikal aktivite scavenging, asid ascorbic / Fe2 plis ak ADP / NADPH / Fe3 plis pwovoke peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat. Asid kafeyik ak a-tokoferol ki se byen koni radikal gratis ak antioksidan yo te anplwaye kòm sibstans ki sou kontwòl pozitif.

DPPH Radical Scavenging Activity All of the nine phenylethanoids showed stronger DPPH radical scav-enging activity than either a-tocopherol or caffeic acid, except that cistanoside A (2), syringalide A 3'-a-rhamno- pyranoside (6) and cistanoside F (9) showed weaker activity than caffeic acid (Fig. 3). The activity order was tubuloside B ⑺(IC50 = 2.99 ^m) > echinacoside ⑷ (IC50 = 3.29 fiM)M 2z-acetylacteoside ⑴(IC50 = 3.30 /im) M tubuloside A (3) (IC50 = 3.34/im) acteoside (5) (IC50 = 3.36 〃m)> isoacteoside (8) (IC50 = 3.49 ^m) >caffeic acid (IC50 = 4.79 /2M)> cistanoside A (2) (IC5O = 4.87 /im)>syringalide A S'-a-rhamnopyranoside (6) (IC5O=5.52 /zm) > cistanoside F (9) (IC50=6.29 /im) > a-tokoferol (IC{{10 }}.2//m). Tubuloside B ⑺, echinacoside (4), 2/-acetylacetoside (1), tubuloside A (3), acteoside (5) ak isoacteoside (8) (IC5O=2.99一3.49 /im), chak nan yo gen kat gwoup idroksil fenolik nan molekil la menm jan an te montre aktivite ki pi fò pase cistanoside A (2) ki gen 3-OH nan yon moso aglikon te methylated. Syringalide A 3z-a-rhamnopyranoside (6) ki gen yon sèl gwoup OH nan pati aglikon la te montre aktivite relativman fèb. Cistanoside F (9), ki gen sèlman de gwoup idroksil ki sitiye nan moety caffeoyl men pa gen okenn phenylethanol aglycone, ekspoze aktivite ki pi fèb la.

Effects on Superoxide Anion Radical Generation All the tested compounds exhibited a stronger inhibitory activity than a-tocopherol but weaker than caffeic acid on the generation of superoxide anion radical (Fig. 4). The activity order was caffeic acid (IC5()= 1.82jUM)>2'- acetylacteoside (1) (IC50 = 2.25 /im) tubuloside B ⑺ (IC50 = 2.34jUM) >echinacoside (4) (IC50 = 2.74juM)^ isoacteoside (8) (IC50 = 2.88 /zm) acteoside (5) (IC50 = 2.89 f/M) >cistanoside F (9) (IC5o = 3.13 rm) tubuloside A (3) (IC50 = 3.17 jUM)syringalide A 3'-a-rhamnopyrano- side (6) (IC50 = 3.20^m)>cistanoside A (2) (IC5O=3.69 jUm) > a-tokoferol (IC50 > 10 〃m).

Efè Inibitè sou Aktivite XOD Se sèlman izoakteozid (8) ak tubuloside B (7), ki gen kafeyil ki nan pozisyon 6z nan glikoz la, te gen efè inhibition sou aktivite XOD, ak lòt feniletanoid, ki gen yon pati kafeyil nan ^-. pozisyon nan glikoz la, pa montre okenn efè nan konsantrasyon yo teste (25 一 200 m) (Tablo 1). izole nèf pi gwo konpoze phenylethanoid nan ekstrè sa a epi detèmine estrikti yo pa NMR. sistèm kòm tubuloside B (7) M2'-acetylatteoside (1) izo-akteozid (8) echinacoside (4) tubuloside A (3) bò M akteo (5) > siringalid A 3'-a-rhamnopyranoside (6) > cistanoside A (2) > cistanoside F (9); nan sistèm ADP/NADPH/Fe3 plis kòm tubuloside B (7)2,-acetylatteoside (^^iso acteoside (8) acteoside (5) > tubuloside A (3) > echinaco bò (4) > syringalide A 3z-a-rhamnopyranoside (6) > cistanoside A (2) > cistanoside F (9).Tou de lòd sa yo te sanble ak sa ki nan tès yo pi wo a radikal gratis, espesyalman nan tès la radikal DPPH.Toujou, kantite gwoup idroksil fenolik nan molekil la. te jwe wòl ki pi enpòtan nan anpèchman peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat.

efè cistanche

DISKISYON

Nou te teste aktivite yo retire radikal gratis nan ekstrè yo divès kalite sòlvan nan tij la nan Cistanche deserticola sou DPPH radikal epi yo te jwenn ke ekstrè nan asetòn-H2O (9:1) ekspoze aktivite ki pi fò. Pou jwenn konstitiyan yo aktif nan aktivite a scavenging radikal gratis, nou izole nèf gwo konpoze fenilethanoid nan ekstrè sa a epi detèmine estrikti yo pa NMR.

Efè antioksidan feniletanoid sa yo te evalye pa aktivite gratis radikal yo ak aktivite peroksidasyon anti-lipid. A-tokoferol lajman li te ye a te itilize kòm yon sibstans kontwòl pozitif. Kòm lalipophilicity nan a-tokoferol ka afekte aktivite li yo nan sistèm tès yo kounye a eksepte nan DPPH tès scavenging radikal, nou te pran asid kafeyik kòm yon lòt sibstans kontwòl pozitif.

Premyèman, nou te pote soti tès sou aktivite yo gratis radikal scavenging. Tout 9 phenylethanoids yo teste san dout ekspoze pi fò DPPH radikal ak superoksid anyon radikal aktivite scavenging pase a-tokoferol, men kèk te pi fò ak lòt moun yo te pi fèb pase asid kafeyik. Aktivite scavenging radikal la ogmante ak yon ogmantasyon nan kantite gwoup idroksil fenolik. Paralèl la enkonplè nan aktivite DPPH radikal ak supèroksid aniyon scavenging yo te kwè se akòz karaktè yo diferan ant espès radikal yo ak kèk lòt faktè ki enplike nan de sistèm reyaksyon sa yo,21,26) pou radikal DPPH la se yon radikal pwodui chimik ki reyaji. ak scavengers radikal nan yon senp chimik man ner, pandan ke superoxide anion radikal ki te pwodwi pa xanthin/XOD, yon reyaksyon nzim.

Si phenylethanoids yo anpéché xanthine/XOD gen erated superoxide anion radikal, anpèchman an ta ka konsidere kòm rezilta a nan superoxide anion radikal scavenging aktivite yo oswa (ak) anpèchman yo nan anzim XOD a, 23) se konsa nou te fè soti yon tès nan yo. efè inhibition nan xanthine oksidaz. Li enteresan ke, selektivman, sèlman isoacteoside (8) ak tubuloside B (7), ki gen kafeoyl moety se nan 6/-pozisyon nan glikoz la, demontre anpèchman. Yo montre yon efè nan konsantrasyon 25-200jtiM sou 3.4xlO ^ 3U/ml (10jug/ml) XOD, byenke aktivite a te pi fèb pase allopurinol; lòt konpoze, ki gen kafeyil nan yon pozisyon nan glikoz la, pa montre okenn efè inhibition. Rezilta sa a bay premye rapò efè inhibition phenylethanoids sou XOD anzim. Chan et al21) rapòte ke asid kafeyik ak kèk nan analogue li yo te gen efè inhibition sou aktivite XOD, sepandan, nou pa jwenn okenn efè sa yo nan asid kafeik nan kondisyon sa yo reyaksyon prezan. Nan tès sa a, konsantrasyon XOD la te sanble ak sa nan tès efè sou jenerasyon radikal anion superoxide (4.3 /zg/ml), men konsantrasyon konpoze yo te pi wo pase nan lèt la. Se poutèt sa, anpèchman nan jenerasyon Oj pa phenylethanoids sa yo se akòz aktivite scavenging radikal yo, men se pa nan aktivite inhibitory yo nan anzim XOD la.

Reyaksyon chèn radikal gratis sa a finalman mennen nan peroksidasyon lipid se byen li te ye.28,29) Se poutèt sa, nou te etidye konpoze feniletanoid sa yo pou efè yo sou peroksidasyon lipid nan mikrosòm fwa rat pwovoke pa sistèm anzimatik ADP/NADPH/Fe3 plis ak sa ki pwovoke pa. sistèm ki pa anzimatik asid ascorbic/Fe2 plis. Tout konpoze sa yo te montre pi fò efè peroksidasyon anti-lipid pase asid kafeyik ak a-tokoferol nan tou de sistèm yo. Li jeneralman aksepte ke tou de sistèm yo katalize pa iyon fè, swa Fe2 plis oswa Fe3 plis, ki enplike ak radikal peroksil lipid,30,31) e ke radikal idroksil OH jwe wòl ki pi enpòtan nan peroksidasyon lipid,32 _34) byenke inisyasyon OH yo te kesyone nan kèk rapò.35祁6) Nan lòt men an, superoxide anion radikal OJ, ki se pwodwi prensipal e_ atak sou O2 nan chèn radikal la, se yon olye mal. radikal reyaktif epi li pa lakòz peroksidasyon lipid tèt li. Malgre ke phenylethanoids sa yo te montre pi fèb aktivite scavenging sou superoxide anion radikal pase asid kafeyik, yo te montre pi fò aksyon peroksidasyon anti-lipid pase lèt la. Se poutèt sa, nou kwè ke yo, tankou kèk lòt aromat, polifenol ki kase chèn, ka anpeche peroksidasyon lipid ki anwo a nan mikrosòm fwa rat pa chelat ing Fe2 plis oswa Fe3 plis iyon, epi tou pa scavenging supèroksid radikal Oj kraze reyaksyon chèn radikal. .37,38) Anplis, yo ka tou scavenge plis espès radikal toksik tankou radikal idroksil ak radikal lipid peroksil dirèkteman entèwonp peroksidasyon lipid nan pi gwo puisans pase asid kafeyik.38,39)

Li et al. etidye kèk glikozid feniletanoid ki gen ladan akteozid (verbascoside) (5), izoakteozid (izoverbascoside) (1), ak echinacoside (4) ki soti nan Pedicularis pou anpèchman otoksidasyon asid linoleik nan micèl, yon sistèm ki pa byolojik,13) pou pwoteksyon yo kont emoliz oksidatif nan vitro,14''1 epi tou pou efè scavenging yo sou NBT/PMS/NADH pwodwi superoksid ak anpèchman peroksidasyon lipid pwovoke pa asid ascorbic/Fe2 plis nan mikrosòm fwa sourit.15) Yon aktivite ki sanble. -relasyon estrikti te obsève nan rapò yo nan Li et al. ak rezilta nou yo. Sa vle di, aktivite phenylethanoids pou anpeche peroksidasyon lipid depann sitou sou kantite ak pozisyon esterik gwoup idroksil fenolik.15) Sou baz chimi stereo yo, gwoup idroksil fenolik nan moety kafeyil sou acteoside (5), tubuloside A ( 3), ak echinacoside (4), ki gen caffeoyl nan pozisyon 4z nan glikoz la, ta pi fasil pou fòme yon kosyon idwojèn ak gwoup hydroxyl nan rhamnosyl pase sa yo sou isoacteoside (8) ak tubuloside B (7), ki gen kafeyil la nan pozisyon 6' nan glikoz la. Kidonk, lèt la rezève plis gratis gwoup idroksil fenolik pase ansyen an e li te montre pi fò aktivite peroksidasyon anti-lipid. Nou menm tou nou remake ke 2z-acetylation nan feniletanoid sa yo, byenke yon ti kras, amelyore efè antioksidatif yo. Pou egzanp, acteoside (5) ak isoacteoside (8), lè 2'- acetylated nan 2/-acetylatteoside (1) ak tubuloside B (7), respektivman, te montre aktivite pi fò nan tout kat sistèm tès yo. Akòz siperyorite a nan chimi stereo ak 2'-acetylation, tubuloside B (7) ekspoze pi fò aktivite antioksidatif nan mitan echantiyon yo teste yo. Petèt akòz sibstitisyon yon twazyèm sik nan pozisyon 6' ~, korelasyon sa a pa t 'anfòm byen nan ka tubuloside A (3) oswa echinacoside (4); sepandan, nan sistèm ADP/NADPH/Fe3 plis, tubuloside A ⑶ toujou montre pi fò aktivite peroksidasyon anti-lipid pase echinacoside (4).

Anplis de sa, lòd la nan aktivite DPPH radikal scavenging te montre pi bon paralelis ak sa yo ki nan peroksidasyon anti-lipid pase te fè lòd la nan aktivite scavenging anion superoksid. Sa a te pwouve ankò ke DPPH radikal scavenging tès se yon metòd pratik ak serye pou tès antioksidan, 26) byenke DPPH radikal se yon radikal pwodui chimik pandan y ap radikal anion superoksid ta ka yon radikal byolojik andojèn.

An konklizyon, tout nèf phenylethanoids yo te montre siyifikatif aktivite radikal gratis ak efè peroksidasyon anti-lipid nan etid prezan an. Efè antioksidan an te potensye pa yon ogmantasyon nan kantite gwoup idroksil fenolik nan molekil la. Kòm ou ka imajine, efè antioksidan sa yo phenyletha noids pwouve isit la ka jwe yon wòl enpòtan nan aksyon yo nan dwòg la Cistanchis Herba epi yo ka an pati eksplike mekanis yo nan aktivite yo nan kèk etanoid fenil kont neoplasm,8 * enflamasyon10) ak nefrit, 1 n nan ki radikal gratis yo seryezman enplike.

Cistsanche Echinacoside: Anti-oksidasyon

REFERANS

1) Namba T., "The Ancyclopedia of Wakan-Yaku (Traditional Sino-Japanese Medicines) with Color Pictures,5, Vol II, Hoikusha, Tokyo, 1994, pp. 16-17.

2) a) Kobayashi H,, Karasawa H., Miyase T., Fukushima S., Chem. Pham. Bull, 32, 3009—3014 (1984); b) Idem, ibid., 32, 3880—3885 (1984); c) Idem, ibid., 33, 1452—1457 (1985); d) Karasawa H., Kobayashi H., Takizawa N., Miyase T., Fukushima S., Yakugaku Zasshi, 106, 562—566 (1986); e) Idem, ibid., 106, 721—724 (1986); /) Kobayashi H., Oguchi H., Takizawa N., Miyase T., Ueno A., Usmanghani K., Ahmad M., Chem. Pharm. Bull., 35, 3309一3314 (1987); g) Yoshizawa F., Deyama T., Takizawa N., Usmanghani K., Ahmad M., ibid., 38, 1927—1930 (1990).

3) a) Kobayashi H, Komatsu J., Yakugaku Zasshi, 103, 508一511 (1983); b): Kobayashi H., Karasawa H., Miyase T., Fukushima S., Chem. Pharm. Bull., 32, 1729—1734 (1984); c) Idem, ibid., 33, 3645—3650 (1985).

4) Naran R., Ebringerova A., Hromadkova Z., Patoprsty V., Phytochemistry, 40, 709-715 (1995).

5) Sato T., Kozima S., Kobayashi K., Kobayashi H., Yakugaku Zasshi. 105, 1131—1144 (1985).

6) Jin XL, Zhang QR, Lachin J. Chinese Materia Medica, 19, 695—697 (1994).

7) Yamahara J., Kitani T., Kobayashi H., Kawahara Y., Yakugaku Zasshi, 110, 932—935 (1990).

8) a) Pettit G. R・,Numata A., Takemura T., Ode RH, Narula A, S., Schmidt JM, Cragg GM, Pase CP, J. Nat. Pwod., 53, 456-58 (1990); b) Saracoglu I., Inoue M., Calis I., Ogihara Y., Biol. Pharm, Bull., 18, 1396—1400 (1995).

9) Andary C., '4Caffeic Acid Glycoside Esters and Pharmacology/ ed. pa Scalbert A., Polyphenolic Phenomenas, INRA Editions, Paris, 1993, pp 237—245.

10) Murai M., Tamayama Y., Nishibe S., Planta Med.. 61, 479― 80 (1995).

11) Hayashi K., Nagamatsu T., Ito M., Hattori T., Suzuki Y., Jpn. J. Pharmacol., 66, 47一52 (1994).

12) a) Molnar J., Gunics G., Mucsi I., Koltai M., Petri L, Shoyama Y., Matsumoto M., Nishioka L, Acta Microbiol. Hung.. 36, 425― 32 (1989); b) Sasaki H., Nishimura T., Morota T., Chin M., Mitsuhashi H" Komatsu Y., Maruyama H., Tu GR, He W., Xiong YL, Planta Med., 55, 4582462 (1989).

13) Li J., Wang PF, Zheng RL, Liu ZM, Jia 乙 J., Planta Med., 59, 315-317 (1993).

14) Zheng RL, Wang PF, Li J., Liu Z. M,, Jia ZJ, Chem. Phys. Lipid. 65, 151—154 (1993).

15) Li J., Zheng RL, Liu 乙 M., Jia 乙 J., Acta Pharmacol. Sinica, 13, 427T30 (1992).

16) Barber DA, Harris SR, Famasi Ameriken. 34, 26一35 (1993).

17) Elstner EF, Klin Wochenschr, 69, 949—956 (1991).

18) Martin GR, Danner DB, Holbrook NJ, Ann. Rev. Med., 44, 419—29 (1993).

19) Kiso Y., Tohkino H., Hattori M., Sakamoto T., Namba T., Planta Med.. 50, 298—302 (1984).

20) Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ, J. Biol. Chem.. 193, 265—275 (1951).

21) Hatano T., Edamatsu R., Hiramatsu M., Mori A., Fujita Y., Yasuhara T" Okuda T., Chem. Pharm. Bull., 37, 2016一2021 (1989).

22) Imanari T., Hirota M., Miyazaki M., Igaku No Ayumi, 101, 496—497 (1977).

23) Hatano T., Yasuhara T, Yoshihara R., Agata L, Noro T., Okuda T., Chem. Pharm. Bull., 38, 1224—1229 (1990).

24) Ohkawa H., Ohishi N., Yagi K., Anal. Biochem., 95, 351一358 (1979).

25) a) Lahloub M, F., Zaghloul AM, El-Khayat SA, Afifi MS, Sticher O., Planta Med.. 57, 481-85 (1991); b) Nishimura H., Sasaki H., Inagaki N., Chin M. (Zhen 乙 X.), Mitsuhashi H., Phytochemistry. 30, 965-969 (1991); c) Budzianowski J., Skrzypczak L., ibid,, 38, 997—1001 (1995),

26) Marsden SB, Nature (London), 181, 1199—1200 (1958).

27) Chan WS, Wen PC, Chiang HC, Anticancer Res., 15, 703一 708, (1995).

28) Janero DR, Burghardt B., Biochem, Pharmacol.. 37, 3335一3342 (1988).

29) Buettner GR, Arch. Byochim. Biophys., 300, 535一543 (1993).

30) Herbert V., Shaw S., Jayatilleke E., Stopler-Kasdan T., Stem Cells, 12, 289-303 (1994).

31) Aust SD, Miller DM, Samokyszyn VM,Methods Enzymol., 186, 457—463 (1990).

32) Kubota S., Ikegami Y., Kurokawa T., Sasaki R., Sugioka K., Nakano M., Biochem. Biophys. Res, Commun., 108, 1025一1031 (1982).

33) Yagi K., Ishida N., Komura S., Ohhishi N., Kusai M., Kohno M., Biochem. Biophys. Res. Commun., 183, 945一951 (1992).

34) Hockenbery DM, Oltvai ZN, Yin XM, Milliman CL, Korsmeyer SJ, Cell. 75, 241—251 (1993).

35) Bucher JR, Tien M., Aust AD, Biochem. Biophys. Res, Commun., Ill, 777—784 (1983).

36) Yoshida T., Otake H., Aramaki Y., Hara T., Tsuchiya S., Hamada A., Utsumi H., Biol. Pharm. Bull.. 19, 779—782 (1996).

37) Afanas5 EVIB, Dorozhko A. L, Brodskii AV, Kostyuk VA, Potapovitch L A., Biochem. Pharmacol., 38, 1763—1769 (1989).

38) Robak J., Gryglewski RJ, Biochem. Pharmacol.. 37, 837—841 (1988).

39) Chimi H., Morel I., Lescoat G., Pasdeloup N・,Cillard P., Cillard J., Toxicology in Vitro, 9, 695一702 (1995)