Pwopriyete chimik yon mannoglukan ki soti nan Cistanche Deserticola
Mar 06, 2022
Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com
1. Materyèl
Yo te itilize keratin oral pou chwal ki soti nan de manifaktirè diferan ki gen 10 mg / g (A) oswa 20 mg / g (B) nan ivermectin, respektivman. Yo te fè tès quantitative pou ivermectin epi kontni an te 104.4-107.7 pousan konsantrasyon deklare.
2. Tès Dissolution
Tès la te fèt ak yon Ph. Eur. aparèy pedal (Tès Pharma, Heinberg, Almay), nan ajitasyon 75 rpm oswa 50 rpm, nan 37 -0.5 C. Sodyòm lauril sulfat (BDH Chemicals, Poole, Angletè) 0.5 pousan (w /v) solisyon akeuz te itilize kòm yon mwayen dissolution (900 ml). Yo te mete keratin nan (4 g nan A oswa 2 g B) nan veso a ak yon sereng ak yon kanul (A) oswa jete echantiyon an nan sifas la nan mwayen disolisyon an (B). Apre entèval tan yo (15, 30, 45, 60 min, ak 2 h), yo te retire yon echantiyon nan mwayen disolisyon an (2 ml), filtre nan yon filtè vè, epi analize.
3. HPLC analiz
Te detèminasyon an nan ivermectin fèt ak yon metòd HPLC modifye jan sa dekri nan Ph. Eur. Solisyon yo analize yo te dilye ak metanol (1: 10). Sistèm HPLC a te genyen yon kolòn octadecyl (250 -4 mm; 5 mm; Lichrospher RP-18; Merck), yon entegre D-12500 A, yon detektè UV-Vis L{{7} }, ponp L-6200A (Merck-Hitachi, Darmstadt, Almay). Yon melanj de asetonitrile: methanol: dlo (64: 24: 16) yo te itilize kòm faz nan mobil ak yon pousantaj koule nan 1.9 ml / min. Volim echantiyon enjeksyon an te 20 ml epi deteksyon an te fèt nan 254 nm.
4. Etid solubilite
Yon aksè nan sibstans la te souke nan flakon an vè byen fèmen ak yon sòlvan apwopriye (Tablo 1) pou 20 èdtan nan 37 0.1 C. Sispansyon yo te filtre ak filtraj la, apre yo fin dilution nan metanol, te analize pa HPLC. .
5. Estabilite nan solisyon asid
Solisyon ivermectin nan HCl {{0}}.1 M yo te estoke nan flakon an vè byen fèmen nan 20 C ak 37 C. Chromatogram nan solisyon yo te anrejistre nan t ¼ 0 ak apre 1, 2 ak 6 h. Yo te kalkile zòn nan ivermectin (tan retansyon 10.5 min) ak pik adisyonèl.
Referans
FDA Gid pou endistri: SUPAC-SS nonsterile semisolid dosage forms. Chanjman echèl ak apre apwobasyon: chimi, fabrikasyon, ak kontwòl; tès lage vitro ak dokiman bioekivalans nan vivo. Me 1997. Gid FIP pou tès disolisyon pwodwi oral solid (1997) Dissolute. Teknoloji. 4:5–14. Siewert M, Dressman J, Brown C, Shah VP (2003) FIP/AAPS direktiv pou dissolution/in vitro lage tès nan fòm dòz roman/espesyal, AAPS PharmSciTech, 4 (1) atik 7 Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine, School nan Syans famasetik, Peking University Health Science Center, Beijing, Lachin
Xiang mei Wu, Pengfei Tu te resevwa 13 fevriye 2004, te aksepte 4 avril 2004, pwofesè Dr Pengfei Tu, modèn rechèch sant pou tradisyonèl Chinwa medikaman, lekòl famasetik syans, Peking Inivèsite sante syans sant, nimewo 38, Xueyuan Road. , Haidian District, Beijing 100083, Lachin Pengfeitu@bjmu.edu.cn Pharmazie 59: 815–816 (2004)
Yon nouvo mannoglucan soti nanCistanche deserticolasoti nan Lachin karakterize. Konpoze an responsab pou yon eksitasyon twò grav nan pwopagasyon lenfosit T ak B mitogen pwovoke.
Cistanche deserticolaYC Ma se yon oloparazit k ap grandi sou rasin plant dikotiledone Haloxylon ammodendron Bunge ki lajman distribiye nan nòdwès Lachin. Kòm li se yon tonik enpòtan nan medikaman oriental, anpil eleman aktif ak aktivite famasi yo te reklame (Karasawa et al. 1986; Yoshizawa et al. 1990). Pwopriyete sa yo ta ka asosye ak kèk nan konpozan polisakarid yoCistancheki poko envestige. Polisakarid mitojèn pektik ak polisakarid net yo te izole ak karakterize soti nanCistanche deserticolasoti nan Mongoli (Radna et al. 1996; Anna et al. 1997; Bozena et al. 1999). Isit la nou rapòte pwopriyete chimik yon nouvo mannoglucan soti nanCistanche deserticolasoti nan Lachin, ki responsab pou eksitasyon modere nan pwopagasyon mitogen-induit T ak B lenfosit. Apre tij yo nanCistanche deserticolaYC Ma yo te ekstrè ak 95 pousan etanòl, dlo frèt distile yo te itilize yo ekstrè rezidi a. Ekstrè dlo frèt la te presipite ak EtOH, yo te retire pwoteyin nan epi dyalize, pou jwenn CCP polisakarid brit la. Polisakarid brit la te fraksyon sou yon kolòn DEAE ak yon kolòn Sephadex G-150 pou bay yon polisakarid san pwoteyin (CDP-6), ki gen ladan glikoz (89.2 pousan) ak mannoz (1{{58}). }.4 pousan ), e yo te estime mwayèn Mr a 6.8 -104. Polisakarid CDP-6 te montre [a 20 D 42 (c 1, H2O). Konfigirasyon absoli sik yo te detèmine pa GC nan TMS (– )-2-butil glikozid. CDP -6 te methylated (Needs et al. 1993), idrolize, konvèti nan acetates alditol yo, epi analize pa GC ak GC-MS (Tablo). Rezilta sa a ansanm ak done rapò molè ki soti nan analiz methylation sijere ke CDP-6 gen yon Glcp majorite 1,6-lye ak yon zo rèl do 1,6- lye nan yon pi piti limit branch nan O{{ 24}} nan mannoz. Analiz metilasyon de polymère (CDP-6-1, CDP{-6-2) ki soti nan idwoliz pasyèl konfime ke CDP-6 gen yon kolòn vètebral ki fòme ak 1,6-rezid glikozil ki lye ak 1,6-rezid mannosyl ki lye, ki ranplase nan O-3 mannoz pa branch ki fòme ak tèminal la, 1,6- résidus glikozil lye, ak 1,3,{{38} }rezid mannosyl ki lye. Dapre rapò molè ak literati a (Bozena et al. 1999; Bacon et al. 1996), spectre 13C NMR CDP-6 te montre siyal akòz kabòn anomerik nan a-d-Glcp (C{{45}). }} nan 98.4 ppm), bd-Map (C-1 nan 104.3–104.9 ppm) ak ad-Map (C{-1 nan 100.0 ppm). Spectre 1H RMN CDP-6-2 nan D2O te montre siyal pwoton ki koresponn ak ad-Glcp (H-1 nan 4.94-4.95 ppm) ak a-d-Map (H-1 nan 4.96-5.00 ppm). Spectre 13C NMR CDP-6-2 nan D2O te montre siyal pwoton ki koresponn ak aD-Glcp (C-1 nan 98.6 ppm) ak ad-Map (C-1 nan 98.4ppm). Yo rapòte mannoglukan yo gen yon 1,4-glukopyrannan lye ak 1,4-lye zo rèl do mannopyrannan (Radjabi Nassab et al. 1984; Tanabe et al. 2000). CDP-6 gen kèk karakteristik estriktirèl diferan grasa a-1,6-Glcp lye ak b-1,6-lye kat zo rèldo, epi li ranplase pa branch mannoglucan. (figi). Yo nan lòd yo mennen ankèt sou itilizasyonCistanche deserticolanan medikaman popilè, yo te evalye efè CDP-6 sou sistèm selil T ak B yo. Yo te jwenn li léjèrman estimile mitogen-induit T ak B pwopagasyon lenfosit.
Eksperimantal
1. Pwosedi jeneral yo
Wotasyon optik yo te mezire ak yon polarimèt otomatik W22-1S. Yo te detèmine espèk IR sou yon espektromèt Perkin-Elmer 599B. Yo te fè analiz GC sou yon enstriman Agilent HP6890N, ki ekipe ak yon detektè FID. GC-MS te fèt sou yon enstriman Finnigan Trace GC-MS. Omojeneite ak Mr nan CDP-6 yo te estime apati koub kalibrasyon volim elisyon estanda dèkstrans yo, ki te fèt sou
yon aparèy seri Agilent 1100 ak yon kolòn Shodex KS-805.1 H RMN ak 13C NMR spectre yo te anrejistre ak yon enstriman INOVA-500. Kontni pwoteyin te analize pa metòd Bradford (Andre et al. 1975). Monosakarid yo te analize kòm acetate alditol yo apre yo te idrolize (2 M TFA, 2 h, 110 C), redwi ak acetate. Yo te analize idrolizat yo lè l sèvi avèk TLC sou yon plak jèl silica ki gen 5 pousan sodyòm diidwojèn fosfat nan BuOH-EtOAc-isopropyl alkòl-HOAC--H2Opyridine (3.5: 10: 6: 3.5: 3: 3) ak sik yo te detekte pa flite ak orcinol. -H2SO4. GLC analize acetate alditol ki kapab lakòz yo lè l sèvi avèk yon kolòn kapilè HP-5 (30 m 0.32 mm). CDP -6 te methylated pa metòd la Ciucanu, ki te swiv pa idroliz, epi li te analize kòm pasyèlman methylated alditol acetates pa GC-MS. Apre idwoliz pasyèl, pwodwi yo te dyalize epi separe, yo te jwenn de polymère, CDP-6-1 ak CDP-6–2.
2. Plant materyèl
Plant lan te kolekte nan pwovens Inner Mongolia nan Lachin nan mwa Out 2001 e li te idantifye pa Hu-Biao Chen, Depatman Medsin Natirèl, Lekòl Syans famasetik, Peking University Health Science Center. Yo te depoze yon echantiyon bon [E-1-(9)] plant sa a nan School of Pharmaceutical Sciences, Peking University. 3. Ekstraksyon, izòlman, ak pirifikasyon nan polisakarid CDP-6 Tij la nanCistanche deserticolaYC Ma (15 00 g) yo te ekstrè ak 95 pousan etanòl (6 L) anba rflu. Seche etanòl-ensolubl rezidi a te macere twa fwa ak dlo frèt distile pou chak 12 èdtan. Ekstrè dlo frèt la te filtre ak filtraj la santrifuje. Apre presipitasyon ak kat volim EtOH (brase ak kanpe pou 24 èdtan nan 4 C), yo te jwenn pwodwi a presipite (35.5 g). Pwoteyin nan presipite a te retire pa metòd Savage a. Apre yap divòse nan dlo distile, rezidi a (25.5 g) te dyalize ak lyofilize (sede: 10.6 g). Polisakarid brit la (8 g) te fonn nan dlo distile (100 mL, 8 pousan w/v) epi separe avèk yon kolòn DEAE (70 5 cm, gradyan 0-2 M NaCl, pou chak 1.5 L). Yo te jwenn yon fraksyon dlo elite (600 mg). Yon echantiyon (250 mg) te pirifye pa kolòn jèl-permeation kwomatografi sou yon kolòn Sephadex G- 150 (4 - 80 cm, 1600 mL, 5 mL pou chak fraksyon). Fraksyon CDP-6 (1500–1600 mL) yo te mete pisin, dyalize, ak friz-seche. Apre yo te desale pa Sephadex G-25 (60 1 cm). CDP-6 (110 mg) te jwenn ak detèmine kòm yon sèl pik pa HPSGC.
Rekonesans:Otè a remèsye Doktè Baomei Shao ak Prof. Xiaoming Gao, Lekòl Syans Medikal Debaz, Sant Syans Sante Peking University, pou mezire aktivite imunomodulasyon CDP-6.
