Chanjman nan aktivite antioksidan pandan fèmantasyon anzim

Chapit 4 Chanjman nan aktivite antioksidan pandan fèmantasyon anzim

Fwi yo rich nan eleman nitritif ak vini nan varyete anpil. Pwodiksyon sibstans ki sou pandan fèmantasyon an konplèks ak varye, e gen anpil etid sou yoAktivite antioksidan. Moun yo toujou eksplore ak dekouvri, kap chèche manje ki benefisye yosante moun, se konsa anzim yo te vin yon sijè cho nan dènye ane yo. Pwosesis pwodiksyon anzim tradisyonèl la se pou jwenn anzim pa fèmantasyon natirèl nan fwi ak legim. Baze sou rechèch anvan yo, atik sa a ajoute 4 bakteri fèmantasyon benefisye. Sa a bakteri tèt li tou egziste nan anzim la. Apre adisyon adisyonèl nan bakteri, nimewo a ak kalite mikwo -òganis nan pwosesis la fèmantasyon yo chanje. Ki efè chanjman sa a pral genyen sou aktivite antioksidan li yo? Nan chapit anvan an, nou te pran pòm kòm yon egzanp pou yon eksplikasyon detaye. Konparezon an nan aktivite a antioksidan nan gwoup la eksperimantal ak gwoup la kontwòl nan konsantrasyon anzim diferan te montre ke aktivite a antioksidan nan anzim la nan gwoup la eksperimantal te pi gran pase sa yo ki an gwoup la kontwòl. Entansite a nan aktivite antioksidan tou reflete fyab la nan anzim la nan yon sèten fason.

Nouvo remèd fèy Cistanche ak pouvwa antioksidan fò

 

Sèvis ki bay sipò nan Wecistanche-pi gwo ekspòtatè nan Cistanche nan Lachin nan:
Imèl: wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/Tel: +86 15292862950

 

Chapit sa a ajoute fwi komen ak Citrus nan eksperyans orijinal la, ak tren ak detekte chanjman ki fèt nan yoAktivite antioksidanpandan fèmantasyon. Sou baz diminye depans yo, nan eksperyans yo, nou espere plis konplètman reflete aktivite a byolojik nan anzim apre ajoute bakteri, epi yo bay yon sèten baz teyorik ak sipò done pou pwodiksyon an nan anzim microbes B.y inokulasyon atifisyèl nan tansyon.

 

 

 

4.1 Materyèl ak Metòd

4.1.1 Materyèl

(1) Materyèl eksperimantal

Lave pòm fre, pwa ak fwi Citrus ak dlo esteril anba kondisyon esteril, seche yo natirèlman sou yon tab opere esteril, kale yo ak tranch yo pou itilize pita. Add sik blan ak fwi nan yon bokal vè esterilize nan yon rapò mas nan 1: 1. Aktive bakteri ki nesesè pou eksperyans lan ak inokule yo nan anzim la dapre konplo a pi bon (se etap operasyon sa a omisyon pou gwoup la kontwòl), sele li epi mete li nan yon kote ki fre epi sèk. Pran echantiyon nan peryòd tan diferan nan fèmantasyon nan tanperati chanm nan jwenn tout likid la anzim ki gen kaka fwi, ak filtre li. Pran supernatant la kòm echantiyon eksperimantal la, epi sèvi ak li nan mezire done ki enpòtan apre santrifuje li nan 10, 000 rpm nan yon santrifije gwo vitès pou 15 minit. Li se vo anyen ki nan pwosesis la nan fè anzim, yo nan lòd pou fè pou evite kontaminasyon nesesè, tout operasyon nou yo te pote soti nan kondisyon esteril.

(2) Enstriman prensipal yo

Enstriman ki nesesè pou eksperyans lan se menm jan ak 3.1.1 (2).

 

4.1.2 Metòd

(1) Chanjman nan kontni fenol total pandan fèmantasyon

450μl nan solisyon echantiyon te ajoute ak dlo distile fè volim nan 46ml, ak Lè sa a, 1ml nan folin-phenol reyaktif te ajoute. Melanje byen epi reyaji pou 3min. Lè sa a, 3ml nan 20% NaCO3 te ajoute. Te melanj lan souke nan yon beny dlo konstan tanperati nan 25 degre pou 2h. Dlo distile te itilize kòm kontwòl vid. Absorption A a te mezire nan 760nm pa spektrofotomètr. Twa repwodiksyon yo te fèt pou chak tretman. Te kontni an fenol total kalkile dapre ekwasyon an koub estanda.

(2) Chanjman nan diminye pouvwa pandan fèmantasyon

Add 45 0 μl nan echantiyon 2.5ml nan tanpon fosfat ak yon konsantrasyon nan 0. (w/v) ak yon konsantrasyon mas nan 10%, santrifijez nan 3000rpm pou 10 minit, pran deyò epi yo imedyatman trase 2.5ml nan supènant nan yon flakon joje, ajoute 2.5ml nan dlo distile ak 0.5ml nan klori ferrik (w/v) ak yon konsantrasyon mas nan 0.1%. Sèvi ak dlo distile kòm yon kontwòl vid, ak mezire absorption a A nan yon longèdonn nan 700nm ak yon spektrofotomètr. Fè 3 repwodiksyon pou chak tretman. Se fòs la nan diminye pouvwa detèmine ki baze sou valè a absorption.

 

(3) Chanjman nan kapasite superoksid anyon radikal yo pandan fèmantasyon
Mete 4.5 ml nan 0. Apre 20 min, ajoute 1 mL nan solisyon echantiyon anzim ak 0.4 mL nan solisyon pyrogallol ak yon konsantrasyon molè nan 25 mmol/L. Melanje byen epi mete yo nan yon beny dlo 25 degre pou 5 min. Add 1.0 mL nan 8 mol/L HCl mete fen nan reyaksyon an. Sèvi ak TRIS-HCL tanpon kòm yon referans epi sèvi ak yon spektrofotomètr ki mezire absorption A nan 299 nm pou kalkile pousantaj la netwayaj. Gwoup la kontwòl vid sèvi ak 1 ml nan sòlvan olye pou yo echantiyon. Se pousantaj la suroksid anyon radikal netwayaj kalkile dapre fòmil 4.1: superoksid anyon pousantaj netwayaj radikal (%)=(A 1- A2)/A1 × 100 (4.1) kote: A1 se absorption nan gwoup la kontwòl vid; A2 se absorption nan solisyon an echantiyon anzim nan gwoup la eksperimantal.

 

(4) Chanjman nan idroksil kapasite netwayaj radikal pandan fèmantasyon

 

Add water to 450μL sample solution to 2mL, then add it to 1.4mL of hydrogen peroxide with a molar mass concentration of 6mmol/L, then add 0.6mL of sodium salicylate with a molar mass concentration of 20mmol/L and 2mL of ferrous sulfate with a molar mass concentration of 1.5mmol/L, and heat in a constant temperature water Bath nan 37 degre pou 1h. Zewo ak dlo distile, ak mezire absorption A a nan yon longèdonn nan 562nm ak yon spektrofotomètr. Twa repwodiksyon yo te fèt pou chak tretman. Yo te kalkile to idroksil radikal la kalkile dapre fòmil 4.2: idroksil radikal to netwayaj (%) {{16} A2 se absorption an mwayèn nan solisyon an echantiyon.

 

(5) Chanjman nan DPPH gratis kapasite netwayaj radikal pandan fèmantasyon
Transfere avèk presizyon 2 ml solisyon echantiyon anzim nan yon 1 0 ml flakon volim, Lè sa a, ajoute 2 mL nan 80% DPPH etanòl solisyon akeuz nan flak la joje, ak yon konsantrasyon mas molè nan 2 × 10-4 mol/L. Melanje byen epi kite kanpe nan tanperati chanm pou 30 min. Pran 80% solisyon etanòl kòm referans ak mezire absorption nan echantiyon an nan yon longèdonn nan 517 nm, ki se anrejistre kòm A1. Melanje 2 ml solisyon DPPH ak 2 mL 80% solisyon etanòl, ak mezire absorption yo nan menm longèdonn lan, ki anrejistre kòm A0. Melanje 2 ml solisyon anzim ak 2 mL 80% solisyon etanòl, ak mezire absorption yo nan menm longèdonn lan, ki se anrejistre kòm A2. Twa repwodiksyon yo te fèt pou chak tretman. Kalkile DPPH gratis pousantaj la netwayaj radikal dapre Fòmil 4.3:
DPPH gratis radikal netwayaj to (%) {{0}} [1- (A 1- A2)/A 0] × 100 (4.3) kote: A1 se absorption mwayèn nan 2 ml dpH 80% 80% ELEL ak ELEL ELACTHE 2 ml DPPH 80% ELAPHAN 80 ML 2 ml DPH 80% 80 ML DPPH 80% ELAPHAN 80 ML 2 ML DPPH 80% ELAPHAN 80 ML 2 ML DPH 80% ELAPHAN 80 ML 2 ML DPH 80% 80 ML DPPH 80%. A2 se absorption de 2 mL solisyon anzim ak 2 mL 80% etanòl solisyon melanje; A0 se absorption de 2 mL solisyon DPPH ak 2 mL 80% etanòl solisyon melanje.

(6) Chanjman nan ABTS gratis kapasite netwayaj radikal pandan fèmantasyon
8 μL solisyon echantiyon te complétée a 10 μl ak fosfat tanpon (5 mmol/L pH 7.4) ak Lè sa a, melanje respire ak 10 mL nan silfat potasyòm ak ABTS solisyon melanje reyaji nan yon tanperati reyaksyon nan 30 degre ak yon tan reyaksyon nan 5 min. Zewo solisyon an ak dlo distile ak mezire absorption A nan yon longèdonn nan 734 nm lè l sèvi avèk yon spektrofotomètr. Twa repwodiksyon yo te fèt pou chak tretman. Yo te kalkile pousantaj ABTS gratis radikal la kalkile dapre Fòmil 4.4:
ABTS gratis radikal netwayaj pousantaj (%)=[(A 1- A2)/a1] × 100 (4.4) kote: A1 se absorption nan gwoup la kontwòl vid; A2 se absorption nan echantiyon gwoup la eksperimantal.