Sipresyon MiR-29b2/c mennen nan aje akselere ak neropwoteksyon nan sourit Maladi Parkinson la ki pwovoke MPTP.

Résumé

Etid yo revele yon lyen ant miR-29s nan aje ak maladi Parkinson la (PD). Isit la nou montre ke nivo serik miR-29s nan 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induit PD sourit montre chanjman dinamik. Yo te etidye wòl miR-29b2/c nan aje ak PD lè l sèvi avèk sourit knockout jèn miR{-29b2/c (miR{-29b2/c KO). Sourit miR-29b2/c KO yo te karakterize pa pwa ki pi lejè, sifoz, feblès nan misk, ak demach nòmal lè yo konpare ak sourit sovaj (WT). WT a tou devlope aparan epesman dèrm ak rediksyon tisi adipoz. Sepandan, defisi nan miR-29b2/c soulaje domaj MPTP-pwovoke nan sistèm dopaminèrjik la ak aktivasyon glial nan chemen nigrostriatal la epi kidonk amelyore fonksyon motè a nan sourit KO ki trete MPTP. Knockout nan miR-29b2/c anpeche ekspresyon faktè enflamatwa nan 1-methyl-4-phenyl pyridinium (MPP plis )-trete kilti prensipal nan glia melanje, astrosit prensipal, oswa LPS-trete. mikroglia prensipal. Anplis, deficiency miR-29b2/c amelyore aktivite AMPK men reprime siyal NF-κB p65 nan selil glial yo. Rezilta nou yo montre ke sourit miR-29b2/c KO montre fenotip ki sanble ak projerya. Selil glial mwens aktive ak neroenflamasyon reprime ta ka lakòz neropwoteksyon dopaminèjik nan sourit miR- 29b2/c KO. Definitivman, miR-29b2/c patisipe nan règleman aje epi li jwe yon wòl prejidis nan maladi Parkinson la.

Mo kle

MiR-29b2/c; neropwoteksyon; Maladi Parkinson la pwovoke MPTP;Cistanche benefis.

Klike la a pou jwennki efè Cistanche ye

Entwodiksyon

Maladi Parkinson la (PD) se dezyèm maladi neurodegenerative ki pi souvan, ki karakterize pa pèt pwogresif newòn dopaminèjik nan sibstans nwa par compacta (SNpc) nan mitan sèvo a, ak ogmante aktivasyon glial ak neroenflamasyon [1-3]. MicroRNA yo se molekil RNA kout ki pa kode ki kontwole ekspresyon jèn nan nivo post-transkripsyon [4, 5]. MicroRNA yo patisipe nan règleman devlopman sistèm nève, plastisit newòn, ak maladi neurodegenerative. Fanmi MicroRNA29 (miR- 29s) yo konpoze de de gwoup jèn: miR-29a/b1 ak miR-29b2/c, ki sitiye sou kwomozòm 6 ak kwomozòm1, respektivman, nan genomic sourit la. miR-29a ak miR-29c gen yon sèl diferans nukleotid, tandiske miR-29b1 ak miR-29b2 idantik nan sekans [6]. miR-29 yo patisipe nan plizyè pwosesis byolojik. Anpil jèn miR-29 yo te verifye eksperimantalman, tankou jèn siviv Procell Bcl-2, Mcl-1, Cdc42, ak p85-; jèn proapoptotik Puma, Bim, Bak, ak Bmf; ak pro-enflamatwa sitokin IFN- ak IL-12. Nan sistèm periferik la, etid yo montre ke miR-29 yo patisipe nan fibwoz tisi [7-9], metabolis, ak règleman iminitè [10-13].

MiR -29 yo eksprime anpil nan sistèm nève santral la, ak transkripsyon yo egziste tou de nan newòn ak selil glial [14, 15]. Asosyasyon ki genyen ant miR-29s ak maladi newolojik yo te de pli zan pli ilistre. miR-29 yo patisipe nan règleman pwodiksyon -amyloid, epi yo desann-reglemante nan sèvo pasyan AD [16, 17]; Nivo miR-29 yo tou diminye nan pasyan maladi Huntington (HD) ak sourit modèl HD [18, 19], tandiske yo ogmante nan pasyan ki gen esklewoz lateral amyotwofik (ALS) ak modèl sourit ALS [16, 20]. Tou de sourit miR-29a/b{-1-defisyan yo ak sourit miR-29 ki kontwole desann yo montre yon fenotip ki sanble ak Ataksya [6, 21]. Konsènan efè ekspresyon miR -29 yo sou neropwoteksyon ak pwomosyon lanmò newòn nan modèl wonjè ischemik rezilta opoze yo te rapòte [22, 23]. Nan etid anvan yo, nou te obsève ke nivo miR-29 yo te siyifikativman diminye nan serik la nan pasyan PD ak yon tandans diminisyon ki gen rapò ak Parkinsonism ki pi grav [24]. Anplis de sa, nivo miR-29 yo te gen rapò ak pèfòmans memwa nan pasyan PD [25]. Nou konkli ke miR-29b2/c lye ak PD, men fonksyon fizyolojik li yo ak mekanis patolojik ki enplike nan PD yo lajman enkoni.

Nan etid sa a, yo te mezire nivo serik sourit miR-29 an repons a administrasyon MPTP jiska 120 jou apre piki. Efè defisyans miR-29b2/c sou tisi periferik yo te etidye lè l sèvi avèk sourit miR{-29b2/c KO. Dopaminergic neurotoxin MPTP te itilize plis pou pwovoke yon modèl sourit nan PD. Lè sa a, yo te envestige blesi nan sistèm dopaminèjik nigrostriatal, pèfòmans konpòtman, ak mekanis potansyèl yo. Nou te obsève ke nivo miR-29 nan serom sourit la te montre chanjman dinamik apre administrasyon MPTP. Sourit miR- 29b2/c KO te parèt akselere aje, ki endike pa pwa kò ki pi lejè, rediksyon tisi adipoz, sifoz, epesman po, feblès nan misk, ak anòmal demach. Sepandan, defisi nan miR-29b2/c te mennen nan soulaje domaj dopaminèjik la ak aktivasyon glial, ak konsekans amelyore pèfòmans konpòtman nan yon modèl bèt ki tankou PD.

Grenn Cistanche

Rezilta

1. Fenotip ki sanble ak projerya nan sourit miR-29b2/c KO

Sourit knockout miR-29b2/c (miR-29b2/c KO) yo te pwodwi ak teknik CRISPR-Cas9. Yo te prezante estrateji vize jèn ak jenotip sourit mutan nan Figi Siplemantè 1. Kat ak 16- mwa miR-29b2/c KO sourit yo te diminye pwa kò (Figi 1A). Nan twa mwa ki gen laj, karakteristik sourit miR-29b2/c KO yo te rete san okenn chanjman, jan sa pwouve pa yon eskanè radyografi mikwo-computed tomography (mikro-CT) (figi siplemantè 2A). Pa te gen okenn diferans nan dansite mineral zo (BMD), trabeculae vle di BMD, separasyon trabecular, epesè trabecular, ak endèks modèl estriktirèl (SMI) ant miR-29b2/c KO sourit ak kontrepati WT yo nan 13 mwa ( Figi siplemantè 2B). Pa tach ematoksilin ak eozin (H&E), nou te jwenn ke sourit 13-miR-29b2/c KO te parèt epesè dèrm ak ondilasyon ogmante ak apwofondi (Figi 1B, 1C). Epi sifoz te parèt nan sourit 16-miR-29b2/c KO (figi 1C). Sourit miR-29b2/c KO nan yon laj jèn (3 mwa) te gen tisi adipoz nòmal (figi siplemantè 2C, 2D). Sepandan, tisi adipoz nan vant (grès lar ak grès visceral konbine) ak tisi adipoz mawon yo te redwi dramatikman nan sourit miR-29b2/c KO konpare ak sourit WT a laj de 16 mwa (Figi 1D). Anplis de sa, yo te analize nivo transkripsyon makè senesans p21 ak p53 nan sèvo a. Yo te ogmante ansibleman nan ipokanp la, men se pa nan cortical sourit miR-29b2/c KO a laj de sis mwa. Nivo pwoteyin p53 ak p16 nan miR-29b2/c-defisi ipokanp la pa t diferan de kontwòl WT yo. Anplis de sa, aktivite -galactosidase, yon karakteristik li te ye nan senesans selilè, pa t 'diferan ant sèvo sourit WT twa mwa ak miR-29b2/c KO.

Feblès nan misk ak anòmal demach nan sourit miR- 29b2/c KO

Yo te evalye konpòtman miR-29b2/c-defisi yo. Fòs nan misk yo te mezire pa fil pandye a ak tès yo pandye Grid. Sourit miR-29b2/c KO yo te fè nòt pi ba pase sourit kontwòl yo nan tès Wire pandye (Figi 2A). Ak latansi a tonbe te dramatikman pi kout nan sourit miR-29b2/c KO lè yo konpare ak tokay sovaj nan tès pandye Grid la (Figi 2B), men pèfòmans tès Rotarod WT ak miR{{10} }b2/c KO sourit pa t diferan anpil (Figi 2C). Sistèm analiz Catwalk XT te detekte demach bèt. Etonan, tou de vitès ak longè stride sourit miR-29b2/c KO yo te pi wo pase sa yo nan tokay yo, tandiske sik etap la, kanpe, ak tan balanse te pi kout, ak sik devwa a redwi, nan miR{ {15}} b2/c-defisi sourit (Figi 2D).

Chanjman miR-29s nan serom sourit PD MPTP-induit la

Nivo miR-29s diminye nan serom pasyan ki gen PD konpare ak kontwòl ki an sante [24]. Nan etid sa a, nivo miR-29 nan serom sourit PD yo te mezire nan 3, 30, ak 120 jou apre administrasyon yon rejim subegi MPTP. Nivo miR-29a ak miR{-29b diminye nan 3 jou apre piki a epi refè nan valè debaz yo nan 30 jou, epi diminye ankò nan 120 jou. Sepandan, nivo miR-29c pa t chanje anpil (figi siplemantè 5).

Sipleman Cistanche

Defisi miR-29b2/c diminye blesi nigrostriatal MPTP-induit ak defisi motè nan sourit.

MiR-29b2/c knockout sourit ak littermates WT yo te sou fòm piki ak MPTP pou pwovoke modèl PD la. Nivo ekspresyon p21, p53, ak Pai1 nan striatum tou de sourit miR-29b2/c KO ak kontwòl WT pa t chanje apre administrasyon MPTP. Ekspozisyon MPTP te lakòz rediksyon enpòtan nan newòn dopaminèjik TH-pozitif yo nan SNpc [F(1, 20)=5.441, P=0.0302], ak tèminal nè TH-pozitif yo, pwoteyin TH. [F(1, 20)=10.5, P=0.0041] ak nivo dopamine, DOPAC ak HVA nan striatum a (Figi 3A-3D). Sepandan, blesi nigrostriatal yo nan sourit miR-29b2/c KO ki te trete ak MPTP yo te soulaje dramatikman lè yo konpare ak kontwòl WT ki te trete MPTP kòm kantite newòn dopaminèjik yo, dansite tèminal nè dopaminèjik yo, ak nivo pwoteyin TH striatal yo. konsantrasyon dopamine yo te siyifikativman pi wo; Anplis de sa, chanjman ki fèt nan rapò DOPAC ak DA ak HVA ak DA [F(1, 19)=12.64, P=0.0021] te ansibleman bese (Figi 3A-3D). Nan sourit nòmal miR-29b2/c KO ki te enjekte ak saline, konsantrasyon striatal 5-HT ak metabolit li 5-HIAA yo te ogmante konpare ak tokay WT yo, epi konsantrasyon NE yo te fèmen ant yo. sourit sovaj ak miR-29b2/c KO (Figi 3D). Yo te itilize tès Rearing ak Pol pou evalye aktivite vètikal espontane [26, 27] ak aktivite locomoteur sourit [28], respektivman. De jou apre dènye piki MPTP la, frekans elvaj diminye nan sourit WT pandan 2 dènye minit yo lè yo konpare ak kontwòl WT nòmal ki trete saline. Eksperyans ki sanble pa t 'revele yon efè nan miR- 29b2/c deficiency sou chanjman MPTP-induit nan frekans elvaj (Figi 3E). Menm jan an tou, tan total pase nan vire ak grenpe desann nan sourit WT yo apre administrasyon MPTP nan tès Pol la, tandiske tan total la te fèmen ant sourit nòmal saline ak MPTPtreated miR-29b2/c KO (Figi 3F) .

Defisi miR-29b2/c diminye deklanchman glial MPTP-induit nan sourit

Aktivasyon selil glial ak neroenflamasyon selil glial medyatè yo patisipe nan patoloji PD [29]. Astrocytes ogmante ansibleman nan chemen nigrostriatal sourit WT yo, tandiske GFAP plis astwosit ogmante nan striatum la men pa nan SNpc [F(1, 8)=5.412, P=0.0484] nan miR. -29b2/c KO sourit twa jou apre piki MPTP. Miyò, dansite astrocytic pa t diferan nan de rejyon yo nan sourit WT ak miR-29b2/c KO trete ak MPTP (Figi 4A, 4B). Iba 1 plis microglia ogmante nan substantia nigra sourit WT yo, ak nan striatum [F(1, 8)=12.74, P=0.0073] tou de WT ak miR{{21} }b2/c KO sourit apre administrasyon MPTP. Anplis, nan miR-29b2/c KO sourit MPTP piki redwi dansite microglial anpil (Figi 4C, 4D).

2. Efè miR-29b2/c deficiency nan astrosit prensipal kiltive

Yo te itilize yon tès grafouyen pou teste si yon defisi nan miR{0}}b2/c afekte pwopagasyon ak migrasyon astrocytic. Prensipal miR-29b2/c KO astwosit pa te montre okenn diferans nan kapasite nan pwopagasyon ak migrasyon. Viabilite selil prensipal WT ak miR-29b2/c KO astrosit yo pa manifeste okenn diferans nan debaz. Apre MPP plis entoksikasyon, viabilite selil WT astrosit yo te pi wo konpare ak kontwòl yo, tandiske viabilite astrosit mutan yo pa t chanje [F(1, 18)=5.727, P=0.0278. ]. Yo te obsève pwodwi ROS amelyore ak absorption glikoz nan astrosit WT ak miR-29b2/c KO trete MPP plis.

Cistanche tubulosa

Nivo ekspresyon faktè nerotwofik yo, molekil ki gen rapò ak enflamasyon, kalite astrositik A1, ak jèn makè kalite A2 nan MPP plis trete astrosit yo te mezire. Nan 12 èdtan apre defi a, ekspresyon BDNF te elve nan astrosit WT ak miR -29b2/c KO (Figi 5A). Nivo ekspresyon TGF- 1 te ogmante siyifikativman nan astwosit WT apre ekspoze a MPP plus, pandan ke li te downregulated nan miR- 29b2/c KO astwosit lè yo konpare ak astwosit sovaj tou de nan debaz ak apre. Entoksikasyon an (Figi 5B). Nivo baz transkripsyon TNF la te pi ba nan miR-29b2/c KO astrosit lè yo konpare ak astrosit WT. Apre 12 h-tretman, nivo ekspresyon IL-1, IL-6, ak COX{-2 ogmante anpil nan WT ak miR{-29b2/c astwosit, tandiske transkripsyon TNF. te ogmante sèlman nan astrosit WT, ak IL-1, TNF, ak COX-2 transkripsyon diminye nan selil miR{-29b2/c KO astrocytic lè yo konpare ak tokay sovaj (Figi 5C) . A1 makè H2-T23 ak A2 makè CD14 te pi ba anpil nan astwosit miR- 29b2/c KO trete PBS lè yo konpare ak kontwòl WT. Apre 12 h-tretman, makè A1 H2-D1, Ggta1, ak C3, ak makè A2 Clcf1 ak S{100 10 yo te ogmante tou de nan WT ak miR{-29b2/c KO astrosit; H2-T23 ogmante sèlman nan astwosit WT; Gbp2 ak CD14 pa t chanje nan de jenotip astwosit yo. Anplis, transkripsyon H2-T23, H{2-D1, ak CD14 yo te desann nan miR{-29b2/c KO astrosit lè yo konpare ak kontwòl WT (Figi 5D, 5E). 12 èdtan ak 24 èdtan apre tretman an, nivo pwoteyin AMPK ak pwoteyin fosforil-AMPK pa t chanje nan astrosit WT, tandiske, nan 24 èdtan apre defi MPP plis, nivo pwoteyin AMPK diminye nan miR-29b2/. c KO astwosit, ak rapò p-AMPK ak AMPK nan astrosit mutan yo te ogmante an konparezon ak astrosit WT ak astrosit mutan trete PBS tou (Figi 5F). Anplis de sa, yo te itilize mwayen kondisyone ki soti nan selil BV2 trete ak PBS oswa LPS (yon ti tan yo te rele CM ak LCM) pou estimile astrosit prensipal sourit WT ak miR-29b2/c KO. Menmsi ekspresyon pwoteyin p-AMPK pa te chanje apre 12 èdtan tretman nan LCM, li te siyifikativman pi wo nan miR-29b2/c KO astrosit konpare ak astrosit WT. Nou te obsève ke pwoteyin pAMPK yo te ogmante nan tou de jenotip astrosit apre 24 tretman LCM. Eksitasyon LCM ogmante ekspresyon pwoteyin COX- 2 [F(2, 18)=10.29, P=0.0010], sepandan, nivo pwoteyin COX{-2 nan miR-29b2/c KO astrosit diminye konpare ak astrosit WT (Figi 5G). Konsantrasyon nitrit nan astrosit miR-29b2/c KO ki te trete ak LCM yo te siyifikativman pi ba tou konpare ak astrosit WT ki te trete ak LCM [F(2, 30)=17, P.<0.0001] (Figure 5H). Further, the expression of senescence marker genes was evaluated. 12 h-treatment of MPP+ increased p53 transcript levels in both WT and miR- 29b2/c KO astrocytes. p19 and Pai1 transcripts were elevated only in WT astrocytes, and Pai1 expression levels in miR-29b2/c KO astrocytes were decreased compared to WT astrocytes after the treatment. Moreover, Bcl-2, Bax protein levels, and the ratio of Bcl-2 to Bax did not change in WT and miR-29b2/c KO astrocytes.

3. Efè miR-29b2/c deficiency nan mikroglia prensipal kiltive

Pou mezire repons miR-29b2/c-defisi microglia a stimuli enflamatwa, yo te itilize LPS. Nivo ekspresyon BDNF te pi ba nan miR-29b2/c KO microglia nan debaz. Kat ak uit èdtan apre tretman LPS, kantite transkripsyon IL-1, IL{-6, TNF, ak COX-2 yo te reglemante, pandan y ap ekspresyon IGF-1 yo te kontwole nan WT. ak miR-29b2/c KO selil microglial, ekspresyon BDNF sèlman diminye nan WT microglia [F(2, 27)=41.5, P<0.0001]. IL-10 transcript increased in WT and miR-29b2/c KO microglia [F(2, 27) = 3.753, P=0.0365], and TGF-β1 transcript decreased in WT microglia at eight hours after the LPS challenge. BDNF and TGF-β1 transcripts were not changed in miR-29b2/c KO microglia. In addition, IL-6 transcripts were significantly reduced in miR-29b2/c KO microglia after the challenge compared to WT controls, IGF-1 and IL-10 transcripts were markedly higher in miR-29b2/c KO microglia after four and eight hours of intoxication, respectively (Figure 6A–6C). At baseline, the p-AMPK protein level and pAMPK to AMPK ratio were dramatically elevated in miR-29b2/c KO microglia when compared with WT microglia. 24 h after the treatment of LPS, p-AMPK level [F(1, 17) = 5.066, P=0.0379] and the ratio [F(1, 17) = 5.537, P=0.0309] were elevated only in WT microglia (Figure 6D). At one hour after the treatment, the phosphorylated-NF-κB p65 (p-p65) proteins and pp65 to p65 ratio, but not p65 proteins, increased in wildtype and miR-29b2/c KO microglial cells, yet the ratio decreased modestly in miR-29b2/c KO microglial cells when compared with WT microglia (p=0.071) (Figure 6E). The expression of COX-2 was enhanced in the two genotypes of microglial cells; whereas, the level of COX-2 in mutant microglia decreased when compared with WT controls after 24 h-treatment of LPS [F(1, 17) = 5.33, P=0.0338] (Figure 6D). Nitrite product was induced by the treatment of LPS in both genotypes of microglia, however, it was dramatically lower in miR- 29b2/c KO microglia at baseline and after the treatment of LPS [F(1, 20) = 14.03, P=0.0013] (Figure 6F).

Diskisyon

Ekspresyon manm fanmi miR-29 yo reglemante nan plizyè tisi lè moun ap vin pi gran [30–32]. Travay nan laboratwa nou an ak lòt moun te montre yon lyen ant miR-29s ak maladi Parkinson la [33]. Nan etid sa a, yo te etidye wòl miR- 29b2/c nan aje ak maladi Parkinson la. miR-29fè efè pro ak anti-aje depann de tisi yo, espès yo, ak etap devlopman yo. Nou te jwenn ke sourit 3-miR-29b2/c KO te gen yon eskèlèt nòmal ak tisi adipoz, ak sourit 4-miR- 29b2/c KO ki te gen yon mwa. parèt pi lejè pwa kò konpare ak kontrepati WT yo, ki an akò ak lòt etid [11, 34]. Yo te detekte feblès nan misk ak demach enstab nan sourit 3-miR- 29b2/c KO ki gen yon mwa. Sourit miR-29b2/c KO ki gen trèz mwa te montre epesman dèrm. Sepandan, yo te gen estrikti nòmal amann zo femoral la. Rediksyon pwa kò a te egziste nan sourit 16-miR-29b2/c KO ki gen yon mwa. Nan laj sa a, sourit miR-29b2/c KO te gen mwens grès nan vant ak grès mawon epi yo te parèt aparan sifoz. miR-29 yo patisipe nan p53-arestasyon sik selilè [35, 36] ak p16/Rb-kondwi senesans selilè [37]. Sepandan, senesans selilè pa t evidan nan sèvo sourit miR-29b2/c KO. Se poutèt sa, menmsi miR-29b2/c kontribye nan règleman aje, wòl li nan tisi periferik yo ak sèvo a ta ka diferan.

Nivo serik miR-29 yo te desann nan pasyan ki gen PD konpare ak kontwòl ki an sante [24]. Isit la, nou te jwenn ke ekspresyon miR-29 nan serom sourit PD varye ant 3 a 120 jou apre administrasyon MPTP. miR-29 yo abondan nan sèvo a [6, 30]. Atravè pwofil GEO a, yo jwenn ekspresyon miR-29c yo regilasyon nan sibstans nigra pasyan PD (p=0.0059, pa tès Mann-Whitney), anplis, miR{{12 }}c ekspresyon nan gyrus frontal siperyè a pa t diferan (p=0.47, pa Student-T-test), lè yo konpare ak sijè kontwòl yo (figi siplemantè 10). Isit la, sourit miR-29b2/c KO te defye ak MPTP pou pwovoke blesi tankou PD. Sourit mutan yo te montre mwens blesi grav nan sistèm dopaminèrjik nigrostriatal la ak pi modere deklanchman glial, epi apre sa rezistans konpòtman nan yon sèten mezi. Kidonk, miR-29b2/c gen yon wòl prejidis nan patoloji PD. Nou te obsève ke nan modèl MPTPinduced sourit PD la, nivo striatal transkripsyon p21, p53, ak Pai1 pa t chanje, sa ki sijere senesans selilè pa ka rive. Aje konsidere kòm yon faktè ki gen gwo risk pou devlopman PD [38], sepandan, chanjman ki gen rapò ak aje nan sèvo a, espesyalman sistèm dopaminèrjik la ta ka yon faktè ki pi enpòtan.

Yo te kiltive glia prensipal ki soti nan sourit WT ak miR-29b2/c KO pou mennen ankèt sou mekanis ki kache yo. MPP plis tretman ogmante ekspresyon GDNF ak diminye ekspresyon IL-1 nan glia melanje miR-29b2/c-defisi. MPP plis ogmante ekspresyon jèn proenflamatwa nan astrosit WT men se pa nan astrosit miR- 29b2/c-defisi. Menm jan an tou, astwosit mutan yo te pwodwi mwens NO konpare ak astwosit WT apre yo te fin ekspoze a mwayen kondisyone selil BV2 yo trete ak LPS. Nan kilti microglia prensipal, konpare ak kontwòl WT trete LPS, transkripsyon sitokin anti-enflamasyon IL-10 ak faktè nerotwofik IGF-1 yo te pi wo anpil, ak transkripsyon sitokin pro-enflamasyon IL{ {15}} diminye nan LPStreated miR-29b2/c KO microglia. NO nivo yo te diminye nan miR-29b2/c KO microglia nan debaz ak apre entoksikasyon nan LPS. Etid yo montre ke miR-29 ak anpil jèn sib prevwa yo patisipe nan pwosesis metabolik [34, 39-41]. Kòm yon regilatè esansyèl, AMPK te pwouve yo dwe pwoteksyon nan PD lè aktive [42]. Aktivasyon AMPK stimul Sirtuin 1 ak inibit aktivasyon NF-κB ak jèn enflamatwa sib endirèkteman [43]. Nou te obsève ke nivo pwoteyin fosforile-AMPK ak rapò p-AMPK ak AMPK yo te regilasyon nan astrosit miR- 29b2/c KO trete LCM ak MPP plis trete respektivman. Nivo pwoteyin COX-2 te diminye nan astrosit mutan LCM-trete yo konpare ak astrosit WT. Nan debaz, aktivite AMPK te ogmante nan miR-29b2/c KO microglia. Kantite pwoteyin COX-2 te redwi anpil nan miR-29b2/c KO microglia lè yo konpare ak kontwòl WT apre tretman LPS. Anba tretman LPS, rapò p-p65 ak p65 te yon ti kras downregulated nan mikroglia mutan, sa ki vle di yon chemen siyal NF-κB diminye. Rezilta nou yo endike ke aktivite AMPK amelyore ak repons enflamatwa redwi nan glia pwoteje chemen nigrostriatal la nan sourit miR-29b2/c KO (Figi 6G). Definitivman, miR-29b2/c jwe yon wòl enpòtan nan aje ak domaj nan sistèm dopaminergic nigrostriatal la.

Referans

1. Braak H, Del Tredici K. Atik Envite: Patoloji sistèm nève nan maladi Parkinson sporadik. Newoloji. 2008; 70:1916–25.

2. Wang Q, Liu Y, Zhou J. Neuroinflammation nan maladi Parkinson la ak potansyèl li kòm yon sib ki ka geri ou. Transl Neurodegener. 2015; 4:19.

3. Wang Z, Dong H, Wang J, Huang Y, Zhang X, Tang Y, Li Q, Liu Z, Ma Y, Tong J, Huang L, Fei J, Yu M, et al. Prosurvival ak wòl anti-enflamatwa nan NF-κB c-Rel nan modèl maladi Parkinson la. Redox Biol. 2020; 30:101427.

4. Zhu S, Wu H, Wu F, Nie D, Sheng S, Mo YY. MicroRNA- 21 vize jèn timè nan envazyon ak metastaz. Selil Res. 2008; 18:350–59.

5. Qiu L, Zhang W, Tan EK, Zeng L. Dechifre fonksyon ak règleman microRNAs nan maladi alzayme a ak maladi Parkinson la. ACS Chem Neurosci. 2014; 5:884–94.

6. Papadopoulou AS, Serneels L, Achsel T, Mandemakers W, Callaerts-Vegh Z, Dooley J, Lau P, Ayoubi T, Radaelli E, Spinazzi M, Neumann M, Hébert SS, Silahtaroglu A, et al. Defisi nan gwoup miR-29a/b{-1 la mennen nan karakteristik ataksik ak chanjman serebeleux nan sourit yo. Neurobiol Dis. 2015; 73:275–88.

7. Hyun J, Choi SS, Diehl AM, Jung Y. Wòl potansyèl de siyal Lerison ak microRNA -29 nan fibwoz fwa nan IKK -deficient sourit. J Mol Histol. 2014; 45:103–12.

8. Qin W, Chung AC, Huang XR, Meng XM, Hui DS, Yu CM, Sung JJ, Lan HY. Siyal TGF-/Smad3 ankouraje fibwoz ren pa anpeche miR-29. J Am Soc Nephrol. 2011; 22:1462–74.

9. Xiao J, Meng XM, Huang XR, Chung AC, Feng YL, Hui DS, Yu CM, Sung JJ, Lan HY. miR-29 inibit fibwoz pulmonè bleomicin-induit nan sourit yo. Mol Ther. 2012; 20:1251–60.

10. Steiner DF, Thomas MF, Hu JK, Yang Z, Babiarz JE, Allen CD, Matloubian M, Blelloch R, Ansel KM. MicroRNA-29 kontwole faktè transkripsyon T-box ak pwodiksyon entèferon nan selil T k ap ede yo. Iminite. 2011; 35: 169–81.

11. Dooley J, Garcia-Perez JE, Sreenivasan J, Schlenner SM, Vangoitsenhoven R, Papadopoulou AS, Tian L, Schonefeldt S, Serneels L, Deroose C, Staats KA, Van der Schueren B, De Strooper B, et al. Fanmi microRNA-29 Dikte Balans Ant Manyen Glikoz Omeostatik ak Patolojik nan Dyabèt ak Obezite. Dyabèt. 2016; 65:53–61.

12. Adoro S, Cubillos-Ruiz JR, Chen X, Deruaz M, Vrbanac VD, Song M, Park S, Murooka TT, Dudek TE, Luster AD, Tager AM, Streeck H, Bowman B, et al. IL-21 pwovoke antiviral microRNA-29 nan selil T CD4 pou limite enfeksyon VIH-1. Nat Commun. 2015; 6:7562.

13. Ma F, Xu S, Liu X, Zhang Q, Xu X, Liu M, Hua M, Li N, Yao H, Cao X. MicroRNA miR-29 kontwole repons iminitè natirèl ak adaptasyon nan enfeksyon bakteri intraselilè. pa vize interferon-. Nat Immunol. 2011; 12:861–69.

14. Jovičić A, Roshan R, Moisoi N, Pradervand S, Moser R, Pillai B, Luthi-Carter R. Analiz konplè ekspresyon miRNAs espesifik selil neral idantifye nouvo detèminan spesifikasyon ak antretyen fenotip newòn yo. J Neurosci. 2013; 33:5127–37.

15. Ouyang YB, Xu L, Lu Y, Solèy X, Yue S, Xiong XX, Giffard RG. MiR-29a ki gen astrosit yo vize PUMA epi redwi vilnerabilite newòn nan iskemi nan sèvo an. Glia. 2013; 61:1784–94.

16. Shioya M, Obayashi S, Tabunoki H, Arima K, Saito Y, Ishida T, Satoh J. Aberrant ekspresyon microRNA nan sèvo maladi neurodegenerative: miR-29a diminye nan sèvo maladi alzayme vize navigatè newòn 3. Neuropathol Appl Neurobiol. 2010; 36:320–30.

17. Hébert SS, Horré K, Nicolaï L, Papadopoulou AS, Mandemakers W, Silahtaroglu AN, Kauppinen S, Delacourte A, De Strooper B. Loss of microRNA cluster miR-29a/b-1 in sporadic Maladi alzayme a gen rapò ak ogmante ekspresyon BACE1/beta-sekretaz. Proc Natl Acad Sci USA. 2008; 105:6415–20.

18. Johnson R, Zuccato C, Belyaev ND, Guest DJ, Cattaneo E, Buckley NJ. Yon chemen dysregulation jèn ki baze sou mikroRNA nan maladi Huntington la. Neurobiol Dis. 2008; 29:438–45.

19. Packer AN, Xing Y, Harper SQ, Jones L, Davidson BL. MicroRNA bifonksyonèl miR-9/miR-9* kontwole REST ak CoREST epi li desann nan maladi Huntington a. J Neurosci. 2008; 28:14341–46.

20. Nolan K, Mitchem MR, Jimenez-Mateos EM, Henshall DC, Concannon CG, Prehn JH. Ogmantasyon ekspresyon microRNA-29a nan sourit ALS: analiz fonksyonèl nan anpèchman li yo. J Mol Neurosci. 2014; 53:231–41.

21. Roshan R, Shridhar S, Sarangdhar MA, Banik A, Chawla M, Garg M, Singh VP, Pillai B. Knockdown espesifik nan sèvo miR-29 rezilta nan lanmò selil newòn ak ataksya nan sourit. RNA. 2014; 20:1287–97.

22. Khanna S, Rink C, Ghoorkhanian R, Gnyawali S, Heigel M, Wijesinghe DS, Chalfant CE, Chan YC, Banerjee J, Huang Y, Roy S, Sen CK. Pèt miR-29b apre yon konjesyon serebral ischemik egi kontribye nan lanmò selil neral ak gwosè enfaktis. J Cereb Blood Flow Metab. 2013; 33:1197–206.

23. Shi G, Liu Y, Liu T, Yan W, Liu X, Wang Y, Shi J, Jia L. Upregulated miR-29b ankouraje lanmò selil newòn lè yo anpeche Bcl2L2 apre blesi iskemik nan sèvo. Exp Brain Res. 2012; 216:225–30.

24. Bai X, Tang Y, Yu M, Wu L, Liu F, Ni J, Wang Z, Wang J, Fei J, Wang W, Huang F, Wang J. Downregulation nan san serom microRNA 29 fanmi nan pasyan ki gen maladi Parkinson la . Sci Rep 2017; 7:5411.

25. Han L, Tang Y, Bai X, Liang X, Fan Y, Shen Y, Huang F, Wang J. Asosyasyon fanmi serom microRNA-29 ki gen pwoblèm mantal nan maladi Parkinson la. Aging (Albany NY). 2020; 12:13518–28.

26. Chinta SJ, Woods G, Demaria M, Rane A, Zou Y, McQuade A, Rajagopalan S, Limbad C, Madden DT, Campisi J, Andersen JK. Selilè senesans pwovoke pa Paraquat Neurotoxin anviwònman an epi li kontribye nan neropatoloji ki lye ak Maladi Parkinson la. Rep selilè 2018; 22:930–40.

27. Willard AM, Bouchard RS, Gittis AH. Diferans degradasyon nan defisi motè pandan deplesyon dopamine gradyèl ak 6-idoksidopamin nan sourit. Nerosyans. 2015; 301:254–67.

28. Kam TI, Mao X, Park H, Chou SC, Karuppagounder SS, Umanah GE, Yun SP, Brahmachari S, Panicker N, Chen R, Andrabi SA, Qi C, Poirier GG, et al. Poly(ADP-ribose) kondui neurodegenerasyon patolojik-synuclein nan maladi Parkinson la. Syans. 2018; 362:eaat8407.

29. Huang D, Xu J, Wang J, Tong J, Bai X, Li H, Wang Z, Huang Y, Wu Y, Yu M, Huang F. Chanjman dinamik nan chemen Nigrostriatal nan modèl sourit MPTP Maladi Parkinson la. Maladi Parkinson la. 2017; 2017:9349487.

30. Ugalde AP, Ramsay AJ, de la Rosa J, Varela I, Mariño G, Cadiñanos J, Lu J, Freije JM, López-Otín C. Aging, ak kwonik repons ADN domaj aktive yon chemen regilasyon ki enplike miR{{2} } ak p53. EMBO J. 2011; 30:2219–32.

31. Hu Z, Klein JD, Mitch WE, Zhang L, Martinez I, Wang XH. MicroRNA-29 pwovoke senesans selilè nan misk ki aje a atravè plizyè chemen siyal. Aging (Albany NY). 2014; 6:160–75.

32. Fenn AM, Smith KM, Lovett-Racke AE, Guerau-deArellano M, Whitacre CC, Godbout JP. Ogmantasyon microRNA 29b nan sèvo ki aje a korelasyon ak rediksyon faktè kwasans ki sanble ak ensilin -1 ak ligand fractalkine. Neurobiol Aging. 2013; 34:2748–58.

33. Wang R, Yang Y, Wang H, He Y, Li C. MiR-29c pwoteje kont enflamasyon ak apoptoz nan modèl maladi Parkinson an in vivo ak in vitro pa vize SP1. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2020; 47:372–82.

34. Caravia XM, Fanjul V, Oliver E, Roiz-Valle D, Morán- Álvarez A, Desdín-Micó G, Mittelbrunn M, Cabo R, Vega JA, Rodríguez F, Fueyo A, Gómez M, LoboGonzález M, et al. Aks regilasyon microRNA-29/PGC1 enpòtan anpil pou kontwòl metabolik fonksyon kadyak. PLoS Biol. 2018; 16:e2006247.

35. Varela I, Cadiñanos J, Pendás AM, Gutiérrez-Fernández A, Folgueras AR, Sánchez LM, Zhou Z, Rodríguez FJ, Stewart CL, Vega JA, Tryggvason K, Freije JM, LópezOtín C. Aje akselere nan sourit ki manke nan Zmpste24 se pwoteaz lye ak aktivasyon siyal p53. Lanati. 2005; 437:564–68.

36. Park SY, Lee JH, Ha M, Nam JW, Kim VN. miR-29 miRNA yo aktive p53 lè yo vize p85 alfa ak CDC42. Nat Struct Mol Biol. 2009; 16:23–29.

37. Martinez I, Cazalla D, Almstead LL, Steitz JA, DiMaio D. miR-29 ak miR-30 kontwole ekspresyon B-Myb pandan senesans selilè. Proc Natl Acad Sci USA. 2011; 108:522–27.

38. Collier TJ, Kanaan NM, Kordower JH. Aje ak maladi Parkinson la: diferan kote nan menm pyès monnen an? Mov Dezòd. 2017; 32:983–90.

39. Massart J, Sjögren RJ, Lundell LS, Mudry JM, Franck N, O'Gorman DJ, Egan B, Zierath JR, Krook A. Ekspresyon miR- 29 chanje nan dyabèt tip 2 enfliyanse glikoz ak metabolis lipid nan skelèt. Misk. Dyabèt. 2017; 66:1807–18.

40. Dooley J, Lagou V, Garcia-Perez JE, Himmelreich U, Liston A. miR-29a-deficiency pa modifye kou a nan kansinòm acinar pankreyas murin. Oncotarget. 2017; 8:26911–17.

41. Kwon JJ, Factora TD, Dey S, Kota J. A Systematic Review of miR -29 in Cancer. Mol Ther Oncolytics. 2018; 12:173–94.

42. Lu M, Su C, Qiao C, Bian Y, Ding J, Hu G. Metformin anpeche lanmò newòn dopaminèjik nan modèl sourit MPTP/PInduced Maladi Parkinson atravè otofaji ak clearance mitokondriyo ROS. Int J Neuropsychopharmacol. 2016; 19:pyw047.

43. Salminen A, Hyttinen JM, Kaarniranta K. AMP-aktive pwoteyin kinaz inibit siyal NF-κB ak enflamasyon: enpak sou sante ak lavi. J Mol Med (Bèl). 2011; 89:667–76.

Xiaochen Bai 1,2, Xiaoshuang Zhang 1, Rong Fang 1, Jinghui Wang 1, Yuanyuan Ma 1, Zhaolin Liu 1, Hongtian Dong 1, Qing Li 1, Jingyu Ge 1, Mei Yu 1, Jian Fei 3,4, Ruilin Sun 4, Fang Huang 1

1. Depatman tradiksyon nerosyans, Jing'an distri sant lopital nan Shanghai, eta kle laboratwa nan newwobyoloji medikal ak MOE fwontyè sant pou syans sèvo, Institute of brain science, Fudan University, Shanghai 200032, Lachin.

2. Depatman Medsin Reyabilitasyon, Shanghai Jiao Tong University Afilye Lopital Sizyèm Pèp la, Shanghai 200233, Lachin

3. Lekòl Syans lavi ak Teknoloji, Tongji University, Shanghai 200092, Lachin

4. Shanghai Jeni Research Center pou Òganis ki gen konpòtman egzanplè, Shanghai Modèl Òganis Center, INC, Shanghai 201203, Lachin