Efè polisakarid Cistanche Deserticola sou pwoliferasyon lenfosit

Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Runlan, Li Xiaohong, Yang Meihua, Shi Yue

(Enstiti pou plant medsin, Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing 100193)

ObjektifTo etidye efèCistanche deserticola polisakarid(CDPS) sou pwopagasyon lenfosit nan sourit. 

MetòdYo te itilize tès MTT pou detekte pwopagasyon lenfosit lasèn nan sourit yo. Cyclophosphamide (Cy) te itilize pou repwodui modèl bèt nan bèt imunokonpwomi, epi yo te mezire endis larat ak tim nan bèt nòmal ak imunokonpwomi. Aktivite interleukin-2 (IL-2) te mezire pa tès pwopagasyon thymocyte. Rezilta yoCistanche deserticola polisakaridsiyifikativman ankouraje pwopagasyon mitogen (ConA ak LPS) aktive lenfosit ak selil nòmal ki pa aktive, ak ankouraje sekresyon IL-2 nan lenfosit. Administrasyon Entraperitoneal te montre saCistanche deserticola polisakaridsiyifikativman ogmante endèks larat nan sourit nòmal ak iminitè, epi tou li te gen yon efè antagonis enpòtan sou rediksyon nan endèks timis ki te koze pa Cy. KonklizyonCistanche deserticola polisakaridka siyifikativman ankouraje pwopagasyon lenfosit larat nan sourit, ki ka gen rapò ak pwomosyon li nan sekresyon IL-2.

Dezè vivan cistanche

[Mo kle]Cistanche deserticola polisakarid; Endèks larat; Endèks timis; Pwopagasyon lenfosit; Interleukin-2

Polisakarid plant yo te atire atansyon toupatou akòz efè imunomodulatwa yo toupatou ak toksisite relativman ba [1].Cistanche deserticola ma, ke yo rekonèt kòm "Desert Ginseng", se tij kal, sèk, charnèl nan Cistanche deserticola., yon plant nan Orobaceae yo, ki gen anpil efè famasi.Dekoksyon dlo li yo ka ogmante siyifikativman pousantaj fagositik ak endèks fagositik makwofaj yo.Plis etid yo te montre ke baz materyèl li se total polisakarid Cistanche deserticola[3]. Zeng Qunli et al. [4] te jwenn ke yon sèl eleman nanCistanche deserticola polisakaridgen yon efè proliferatif enpòtan sou lenfosit timik sourit nan vitro. Efè a nanCistanche deserticola polisakaridsou pwopagasyon lenfosit yo te obsève nan vivo ak nan vitro.

Fòmil molekilè Cistanche deserticola

1. Materyèl ak Metòd

1.1 Dwòg ak reyaktif

Polisakarid ki soti nan Cistanche deserticola bay nan Depatman Plant ak Chimik nan Enstiti Medsin ak Plante, Kolèj Medikal. Li se ekstrè soti nanCistanche ekstrè poud, ak kontni an polisakarid se 87 pousan .

Cistanche ekstrè poud

Anvan ou sèvi ak eksperyans nan vivo, fonn ak delye ak saline fizyolojik nan konsantrasyon ki nesesè yo, epi bouyi pou esterilizasyon. Anvan yo sèvi ak eksperyans nan vitro, yo te fonn mwayen kilti RPMI-1640 ak dilye, epi yo te fè esterilizasyon wo-presyon. Lipopolysaccharide (LPS), konkanavalin (ConA), dexamethasone (DEX), ak MTT se tout pwodwi Sigma Corporation. Cyclophosphamide, yon antrepriz Sino-Ameriken nan Shanxi Taisheng Pharmaceutical Co, Ltd serom fetal bovine, mwayen kilti RPMI1640, ak tripsin se tout pwodwi Gibco. Lòt reyaktif yo se reyaktif analyse domestik.

1.2 Bèt

Viton Lihua Experimental Animal Technology Co., Ltd. [SCXK (Beijing) 2002-2003] bay sourit BALB c jèn (nivo SPF). Bèt SPF-klas yo leve soti vivan nan yon chanm epi yo lib manje ak bwè.

1.3 Aparèy

Multikan Ascent anzim makè, yon pwodwi nan Thermo Electron Company, USA. Leici PHS-3B Precision pH Meter, Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd. Napco 5410 enkibatè gaz kabonik, NAPCO, USA. BCN-1360 Ultra Clean Workbench, Beijing Donglianhar Instrument Manufacturing Co., Ltd. XDS-1B Inverse Microscope, Chongqing Optoelectronic Instrument Co, Ltd.

1.4 Metòd

1.4.1 Efè sou pwopagasyon lenfosit [5]:

Preparasyon woutin nan lenfosit larat soti nan sourit BALL c, lè l sèvi avèk RPMI -1640 pou ajiste konsantrasyon selil la a 1 × 107 mL, vaksinen sou yon plak kilti 96 byen, ak 100 sispansyon selil ajoute nan chak pi μ 50. Li te ko -kilti ak diferan konsantrasyon nanCistanche deserticola polisakarid(konsantrasyon final la nanCistanche deserticola polisakaridpou pwopagasyon lenfosit ki pa aktive yo te 6.25, 12.5, 25, 50, ak 100 mg / L nan lòd; konsantrasyon final la nanCistanche deserticola polisakaridpou pwopagasyon lenfosit T ConA-aktive te 3.9, 7.8, 15.6, 31.2, ak 62.5 mg / L nan lòd; ak konsantrasyon final la nanCistanche deserticola polisakaridpou pwopagasyon LPS aktive B lenfosit te 1.56, 3.13, 6.25, 12.5, ak 25 mg / L nan lòd) ak ConA oswa LPS, RPMI -1640 mwayen yo te itilize kòm kontwòl. Volim total chak twou se 200 μ L, lè yo ajoute mitogen ConA ak LPS (kontwòl la se RPMI-1640 ki gen konsantrasyon korespondan nan ConA oswa LPS), konsantrasyon final tou de yo se 2.5 mg L ak 10 mg L, respektivman. Twa twou paralèl yo te fè pou plizyè tretman. Mete plak kilti a nan yon enkibatè 37 degre, 5 pousan CO2 satire imidite pou 68 èdtan, ajoute MTT, epi kontinye kiltive pou 4 èdtan. Mezire valè A540 nm ak yon makè anzim lè l sèvi avèk metòd MTT pou detekte pwopagasyon. Lè w konpare chak gwoup, konvèti valè A540nm an nan pousantaj pwopagasyon lenfosit dapre fòmil sa a:to pwopagasyon lenfosit=Yon echantiyon A kontwòl × 100 pousan .

Efè Cistanche - Amelyore iminite

1.4.2 Efè sou pwa ògàn iminitè nan sourit nòmal [6,7]:

Jèn sourit BALB c (gason, 4-semèn, ak yon pwa kò de 10-15 g) yo te divize owaza nan yon gwoup kontwòl vid (saline) ak diferan gwoup dòz (125 mg (kg · bw) ak 250 mg (kg · bw)), ak 11 rat nan chak gwoup. Yo te administre dwòg la yon fwa pa jou pandan 7 jou youn apre lòt. Sourit yo te touye apre debwatman nan matris. Yo te pran larat la ak tim, yo te retire grès ak tisi fascia, epi likid sifas la te cheche ak papye filtre. Apre w fin peze, endèks larat=100 × Pwa larat (mg) Pwa kò (mg); Endèks timis=100 × Pwa timis (mg) Pwa kò (mg) Kalkile endèks larat ak endèks timis pou chak 100 mg pwa kò, respektivman.

1.4.3 Efè sou pwa ògàn iminitè nan sourit iminitè yo [7,8]:

Jèn BALB c rat (gason, 6 semèn, pwa kò 15-20 g) yo te owaza divize an 12 gwoup dapre pwa kò. Eksepte pou gwoup la kontwòl nòmal (entraperitoneal piki nan yon volim ekivalan nan saline fizyolojik), lòt gwoup yo te sou fòm piki ak Cy 50 mg (kg · bw) chak jou intraperitoneally, epi yo te administre solisyon dwòg tès la intraperitoneally [125 ak 250Mg (kg · bw)], yo te bay gwoup kontwòl nòmal la ak gwoup modèl la menm volim saline fizyolojik pou 13 jou youn apre lòt, yon fwa pa jou. Chanjman yo nan pwa bèt yo te obsève pandan eksperyans la. 24 èdtan apre dènye administrasyon an, endis larat ak tim yo te mezire ak kalkile lè l sèvi avèk menm metòd ak nan 1.4.2.

1.4.4 Enpak sou aktivite IL-2:

① Endiksyon IL-2 [9]: Ajoute 50 nan chak pi nan yon 96-plak selilè μ L Diferan konsantrasyon nanCistanche deserticola polisakarid(konsantrasyon final yo nan lòd: 3.91, 7.82, 15.63, 31.25, 62.5, 125 mg / L, ajoute 50 mg / L nan kontwòl la byen μ L mwayen kilti) ak 50 μ L ConA (konsantrasyon final 5 mg / L), ajoute 1 plis pou chak pui × 106 selil larat. Enkube nan yon enkibatè imidite 37 degre, 5 pousan CO2 satire pou 24 èdtan, santrifize pou 20 minit nan 2500 r min, epi pran supernatant selil la epi estoke li nan - 20 degre pou sibstiti. ② IL-2 deteksyon aktivite [9,10]: Metòd debaz la baze sou literati [9], epi ajisteman apwopriye yo fèt dapre literati [10]. Preparasyon konvansyonèl nan sispansyon BALB c sourit thymocytes, 96 byen plak kilti selil, 1 inokulasyon pou chak pi × 106 thymocytes, pandan y ap ajoute 50 selil pou chak byen μ L ConA (konsantrasyon final 2.5 mg / L), ak Lè sa a, ajoute IL{34 ki te prepare. }} supernatant 50 μ L (ajoute 50 nan twou vid kontwòl μ L solisyon kilti), enkubasyon ansanm pou 54 èdtan, ajoute MTT, kontinye enkubasyon pou 4 èdtan, santrifuje pou 10 a 15 minit nan 1000 r min, jete supernatant la, epi ajoute DMSO 100 pou chak pi μ L, souke ak yon mikwo osilator pou 8 min, epi mezire valè A540 nm ak yon makè anzim.

1.5 Analiz estatistik

Done yo te eksprime kòm mwayen ak devyasyon estanda (x ± s). Yo te itilize lojisyèl Microsoft Excel pou rasanble done yo, epi yo te fè yon tès t. P<0.05 and P<0.01 were significant differences, both of which were statistically significant.

2.Rezilta yo

2.1 Efè sou pwopagasyon lenfosit

Kòm ou ka wè nan tablo 1, ajouteCistanche deserticola polisakaridnan mwayen kilti a nan lenfosit larat sourit kiltive nan vitro nan yon konsantrasyon ki pi wo a 25 mg / L ka siyifikativman estimile pwopagasyon lenfosit, ki endike keCistanche deserticola polisakaridtèt li gen yon efè mitotik. An menm tan,li ka wè nan Tablo 2 ak Tablo 3 ke CDPS gen yon efè pwomosyon enpòtan sou pwopagasyon lenfosit T ki pwovoke ConA oswa lenfosit B ki pwovoke LPS..

Tab.1 Enfliyans nanCistanche deserticola polisakaridsou pwopagasyon lenfosit ki pa aktive (x ±s, n =3)

Nòt: konpare ak gwoup kontwòl la,＊P <0.05. 

Tab.2 Enfliyans nanCistanche deserticola polisakaridsou pwopagasyon Tlymphocytes induit pa ConA (x ±s, n =3)

Remak: konpare ak gwoup la ConA,＊P <0.05, ＊＊P <0.01.

Tab.3 Enfliyans nanCistanche deserticola polisakaridsou pwopagasyon Blymphocytes pwovoke pa LPS (x ±s, n =3)

Nòt: konpare ak gwoup LPS la,＊P <0.05 , ＊＊P <0.01. 

2.2 Efè sou pwa ògàn iminitè nan sourit nòmal yo

Jan yo ka wè nan tablo 4 la,Cistanche deserticola polisakaridka siyifikativman ogmante endèks larat nòmal BALB c jèn rat men pa gen okenn efè sou glann timis la.

2.3 Efè sou pwa ògàn iminitè nan sourit iminitè

Soti nan Tablo 5,li ka wè ke endèks larat ak timis ògàn sourit nan gwoup imunosuppressive Cy yo pi ba pase sa yo ki nan gwoup kontwòl la, akCistanche deserticola polisakarid(125, 250 mg / kg) ka amelyore siyifikativman larat ak timis endèks yo.

2.4 Efè sou aktivite IL-2

Jan yo ka wè nan tablo 6,lè dòz la nanCistanche deserticola polisakaridrive nan 7.82 mg/L, li ka ogmante siyifikativman liberasyon IL-2 nan selil larat sourit yo.

Tab.4 Efè a nanCistanche deserticola polisakaridsou pwa ògàn iminitè yo nan sourit nòmal (x ±s, n =11)

Nòt: konpare ak gwoup kontwòl la,＊＊P <0.01.

Tab.5 Efè a nanCistanche deserticola polisakaridsou pwa ògàn iminitè yo nan sourit iminodeprime (x ±s, n =12)

Nòt: konpare ak gwoup kontwòl la,## P <0.01;compared with the model group , ＊＊P <0.01.

Tab.6 Enfliyans nanCistanche deserticola polisakaridsou pwodiksyon IL-2 pa lenfosit larat nan sourit (x ±s, n =3)

Nòt: konpare ak gwoup kontwòl la,＊＊P <0.01. 

3. Diskisyon

ConA ak LPS-pwovoke pwopagasyon lenfosit lasèn nan sourit se yon eksperyans in vitro pou detekte fonksyon lenfosit T ak B epi li se yon endikatè enpòtan nan kapasite iminitè espesifik. Etid yo montre ke lè konsantrasyon final la nanCistanche deserticola polisakaridse pi wo a 25 mg / L, li ka siyifikativman ankouraje pwopagasyon lenfosit, ki endike ke li gen yon sèten efè mitotik. Nan prezans mitogen (ConA oswa LPS), yon dòz ki pi piti nanCistanche deserticola polisakaridka amelyore iminite kò a, montre siyifikatif aktivite proliferatif. Nou konnen ke ConA ak LPS sitou pwovoke pwopagasyon lenfosit T oswa lenfosit B, respektivman. Etid yo montreBenefis sante poud cistanche: Cistanche deserticola polisakaridka ankouraje tou de pwopagasyon lenfosit T ak pwopagasyon lenfosit B, men efè proliferasyon li sou lenfosit B se siyifikativman pi fò pase sa ki sou lenfosit T.

Benefis sante poud Cistanche-Improvee iminite

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Improve Immunity

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Timis la ak larat yo se ògàn iminitè prensipal bèt yo. Selil iminitè yo nan larat la se sitou lenfosit B ki gen matirite, pandan y ap timus la se sitou lenfosit T frelikè. Timis ak endis larat ka reflete devlopman ògàn iminitè yo ak estati fonksyonèl selil iminitè yo. Piki intraperitoneal nan polisakarid Cistanche deserticola ka ogmante siyifikativman endèks larat sourit nòmal ak imunodeprime epi li gen yon efè antagonis enpòtan sou atrofi timik pwovoke pa Cy nan sourit.Cistanche deserticola polisakaridpa gen okenn efè enpòtan sou endèks timik la nan bèt nòmal, ki konsistan avèk rezilta eksperyans nan vitro nan kiCistanche deserticola polisakaridankouraje pwopagasyon lenfosit B olye ke lenfosit T.

Cistanche sipleman tou pre mwen—Improveiminite

IL-2 se yon sitokin ki pwodui pa lenfosit T soti nan faz G1 nan sik selilè a rive nan faz S la. Li se yon gwo faktè kwasans selil T ki aji kòm yon faktè kwasans otokrin. Anplis de sa, IL-2 ka ankouraje pwopagasyon selil B ak sentèz antikò [11,12].Cistanche deserticola polisakaridankouraje liberasyon IL-2 nan lenfosit, ki se evidamman ki gen rapò akCistanche deserticola polisakaridankouraje pwopagasyon lenfosit larat.

Rechèch medikal montre ke Cistanche gen polisakarid,Echinacosides ak Acteoside, ki ka aktive lenfosit ak iamelyore iminite kò ay; eleman fonksyonèl yo nan cistanche Phenylethanoid Glycosides gen yon efè enpòtan sou rekiperasyon selil apre 60 Co gamma ray domaj, epi tou ka amelyore fonksyon iminitè a kont domaj radyasyon.Lè w pran sipleman Cistanche deserticola chak jou ka reyalize efè a nan amelyore iminite.

Cistanche sipleman tou pre mwen—Amelyore iminite

referans

[1] Schepetkin IA,Quinn MT .Botanik polisakarid: Makrofaj imunomodulasyon ak potansyèl terapetik [J]. Int Immunopharmacol, 2006, 6(3): 317-333.

[2] Li Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen, et al. Etid sou efè Cistanche deserticola sou tonifye ren an ak pwomosyon yang anvan ak apre pwosesis [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 1996, 21 (9): 534-537

[3] Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Runlan, et al. Aktivasyon macrophage nan polisakarid Cistanche deserticola [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2009, 25 (6): 421-424

[4] Zeng Qunli, Zheng Yifan, Lv Zhiliang. Aktivite iminolojik ak mekanis polisakarid Cistanche deserticola [J]. Journal of Zhejiang University (edisyon medikal), 2002, 31 (4): 284-287

[5] Xu Shuyun, Bian Rulian, Chen Xiu. Methodoloji eksperimantal farmakolojik [M]. 3yèm edisyon, Beijing: People's Health Publishing House, 2002, 1427-1428

[6] Zhang Xu, Zhang Guorong, Che Wei, et al. Efè kolagen polypeptide chromium (Ⅲ) chelate sou iminite sourit dyabèt [J]. Chinese Journal of Experimental Animals, 2008, 16 (1): 10-14

[7] Chen Qi. Methodoloji rechèch farmakolojik Medsin tradisyonèl Chinwa [M]. Premye edisyon. Beijing: People's Health Publishing House, 1993:779

[8] Guo Jing, Xu Jianning, Wang Quankai, et al. Efè ekstrè soya (CKBN) sou fonksyon iminitè nan sourit iminitè [J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2008, 18 (12): 45-49

[9] Xu Shuyun, Bian Rulian, Chen Xiu. Methodoloji eksperimantal farmakolojik [M]. 3yèm edisyon, Beijing: People's Health Publishing House, 2002: 1440-1441

[10] Zhou Daohong, Shen Yuanshan, Zhao Manrui. Yon nouvo metòd pou detèmine transfòmasyon lenfosit ak aktivite sourit interleukin 2 - MTT kolorimetri analiz [J]. Chinese Journal of Imunoloji, 1986, 2 (1): 39-43

[11] Wang MQ, Guilbert LJ, Li J, et al.Yon ekstrè propriétaires de ginseng Nò Ameriken (Panax quiquefolium) améliore IL-2 ak IFN-pwodiksyon nan selil murin larat induit pa Con-A [J] . Int Immunopharmacol ,2002 , 4 (2): 311-315.

[12] Tingjun H, Rongliang Z. Pwomosyon polisakarid sophora subprosrate sou pwodiksyon oksid nitrique ak entèleukin-2 nan lenfosit T murin: enplike Ca 2 plis ak pwoteyin kinaz C [J] .Int Immunopharmacol ,2004 , 4 (1): 109-118.