Efè ekstrè Cistanche Tubulosa sou fonksyon repwodiksyon gason nan rat dyabetik strèptozotocin-nikotinamid-induit-Ⅱ

3.2. In Vivo analiz

3.2.1. Efè CTE sou pwa kò ak konsomasyon kalori

Apre 6 semèn nan eksperimantasyon, gwoup dyabetik la (HFD-DM) te montre pi wo pwa kò pase gwoup kontwòl la. Gwoup HFD-DME4 te montre yon pwa kò pi ba pase gwoup HFD-DM ak HFD-DMER (Figi 7a). Konsomasyon kalori gwoup kontwòl la te siyifikativman pi ba pase nan lòt gwoup yo. Pa te gen okenn diferans enpòtan ant konsomasyon kalori lòt senk gwoup yo (Figi 7b).

3.2.2. Tès Tolerans Glikoz Oral (OGTT) Pou Detèmine Siksè Endiksyon Dyabèt

Tès oral tolerans glikoz (OGTT) yo itilize kòm yon zouti pwomèt pou detekte dyabèt melitus. Ogmantasyon nivo glikoz nan san an endike kondisyon dyabetik la. Jan yo montre nan Figi 8a, nivo glikoz nan plasma te pi ba nan gwoup CTE yo pase nan gwoup DM nan 0, 30, 90, ak 120 min. Anplis de sa, zòn ki anba koub (AUC) konsantrasyon glikoz plasma a te montre ke nan gwoup CTE ak RSG yo te ogmante pousantaj absorption glikoz nan san (Figi 8b).

3.2.3. Total Glikoz Plasma, Kolestewòl, ak Trigliserid Kontni

Nivo glikoz nan san jèn nan plasma te pi wo nan gwoup DM a ak pi ba nan gwoup DME2 a (eksepte kontwòl) pase nan lòt moun. Pa te gen okenn diferans enpòtan nan kolestewòl total ant gwoup yo eksepte pou gwoup DME4 la. Nan gwoup DME4, nivo kolestewòl la te pi ba pase lòt yo. Nivo trigliserid yo te pi wo nan gwoup DM a ak pi ba nan gwoup DME4 ak kontni trigliserid la te diminye ak yon ogmantasyon nan konsantrasyon CTE (Tablo 2). Rezilta yo montre ke nivo glikoz plasma, kolestewòl, ak trigliserid te pi wo nan gwoup DM a ak nivo a te siyifikativman diminye sou tretman ak CTE.

3.2.4. Nivo Plasma Ensilin, Nivo Plasma Leptin, Ak Evalyasyon Modèl Omeyostaz–Valè Rezistans Ensilin (HOMA-IR)

Nivo plasma ensilin, leptin, ak valè HOMA-IR yo montre nan Tablo 3. Gwoup DM a te gen pi wo nivo ensilin plasma ak leptin plasma pase gwoup kontwòl la. Endèks HOMA-IR la te tou siyifikativman pi wo nan gwoup DM la. Valè ensilin plasma, leptin, ak HOMA-IR yo te diminye ak yon ogmantasyon nan konsantrasyon CTE. Plasma leptin te siyifikativman redwi nan gwoup CTE men gwoup dwòg RSG (DMR) pa t montre okenn diferans enpòtan ak gwoup DM.

3.2.5. Efè CTE sou Plasma LH ak Nivo Testostewòn nan rat dyabetik

Jan yo montre nan tablo 4 la, konsantrasyon testostewòn nan rat dyabetik (DM) te siyifikativman diminye, pandan y apkonsantrasyon testostewòn yo te ogmante anpilnan plizyè dòz CTE. Pli lwen, rezilta yo te montre yon ti diminisyon nan nivo LH nan gwoup DM an konpare ak DMR, DME1, DME2, ak DME4. Pwodiksyon LH a te pi wo nan gwoup DME4.

3.2.6. Efè CTE sou paramèt espèm rat dyabetik

Rezilta eksperimantal yo te montre ke gwoup DM a te gen yon diminisyon enpòtan nan kantite espèm ak mobilite pase gwoup kontwòl la tandiske to anòmal espèm yo te siyifikativman ogmante nan gwoup DM a. Enteresan, nimewo espèm, mobilite espèm, ak pousantaj anomali nan espèm nan gwoup DMR amelyore men mobilite espèm la pa rive nan yon nivo enpòtan an konparezon ak DME4. DME2 te montre pi bon konte espèm pase yo tout e yo te ogmante pousantaj mobilite nan gwoup DME4 la. Pa te gen okenn diferans enpòtan ant kantite espèm nòmal ant gwoup RSG ak CTE-trete (Tablo 5).

3.2.7. Efè CTE sou mòfoloji tubul seminifèr nan rat dyabetik

Figi 9 montre tach H&E nan seksyon tèstikul la. Flèch nwa a vle di selil Leydig ak flèch blan an vle di selil Sertoli. Tou de selil Leydig la ak selil Sertoli nan gwoup DM a te montre siyifikatif atrofi epi yo te wè yon kavite nan lumèn nan. Yo te retabli estrikti selil Leydig ak Sertoli nan gwoup CTE- ak RSG-trete. Epesè tubul seminifè a te pi wo nan gwoup CTE ak RSG pase nan gwoup DM.

3.2.8. Efè CTE sou MRNA KiSS1, GPR54, SOCS-3, ak SIRT1 nan ipotalamus rat dyabetik

Ekspresyon KiSS1 (Figi 10a), GPR54 (Figi 10b), SOCS -3 (Figi 10d), ak SIRT1 (Figi 10c) yo te montre nan Figi 10. Ekspresyon mRNA KiSS1 ak reseptè GPR54 nan rat dyabetik te montre. siyifikativman pi ba pase nan gwoup kontwòl la. Nivo ekspresyon mRNA KiSS1 ak GPR 54 nan DMR, DME1, DME2, ak DME4 te ogmante anpil. An patikilye, ekspresyon mRNA GPR54 te ogmante siyifikativman nan DME4 e li te prèske menm jan ak gwoup kontwòl la.

NATIRÈL CISTANCHE TUBULOSA POU PWOTEJE PWODIKSYON TESTOSTERÒN PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Eksperyans sa a plis eksplore kantite SOCS-3 ak SIRT1 mRNA nan ipotalamus rat yo. Ekspresyon SOCS-3 mRNA nan rat dyabetik te ogmante anpil, sa ki endike ke enpedans leptin la te pi grav. Gwoup DMR, DME1, DME2, ak DME4 te montre amelyorasyon enpòtan lè yo konpare ak gwoup dyabetik la. Ekspresyon mRNA SIRT1 nan gwoup DM a te diminye anpil e li te ogmante anpil nan gwoup DME1 ak DME4 yo.

3.2.9. Efè CTE sou anzim antioksidan nan plasma ak tèstikul rat dyabetik

Tablo 6 montre ke aktivite SOD nan plasma, aktivite GPx, ak aktivite katalaz nan rat dyabetik yo te diminye anpil ak aktivite yo te ogmante nan gwoup CTE- ak RSG-trete. Anplis de sa, DME4 te montre amelyorasyon enpòtan nan aktivite GPx pase lòt moun. Rezilta yo te montre ke aktivite SOD ak katalaz nan rat dyabetik yo te siyifikativman diminye apre sis semèn. SOD ak aktivite katalaz gwoup DMR pa rive nan yon nivo enpòtan. Gwoup CTE-trete yo te montre amelyorasyon enpòtan nan aktivite SOD ak katalaz. Aktivite yo ogmante nan katalaz ak SOD nan gwoup CTE yo te wè tou nan tèstikul (Tablo 7). Yo te obsève aktivite ki pi wo nan SOD ak katalaz nan gwoup DME1 ak gwoup DME2 respektivman.

3.2.10. Efè CTE sou estrès oksidatif ak enflamasyon nan plasma a ak tèstikul rat dyabetik

Pwodiksyon oksid nitrique (NO) nan plasma (Figi 11a) ak tèstikul (Figi 11b) yo te montre nan Figi 11. Pwodiksyon NO nan gwoup DM an te siyifikativman ogmante tou de nan testis ak plasma kòm konpare ak gwoup kontwòl la. Yo te obsève yon rediksyon gradyèl nan pwodiksyon NO nan gwoup DME1, DME2, ak DME4 (nan plasma). Gwoup DMR la te montre tou yon rediksyon enpòtan nan pwodiksyon NO. Nan ka a nan tèstikul la, te gen yon ti rediksyon nan pwodiksyon NO te obsève nan gwoup CTE, tandiske gwoup la DMR pa t 'siyifikativman redwi pwodiksyon NO.

Jan yo montre nan Figi 12 ak 13, nivo TNF- ak IL-6 te ogmante siyifikativman nan rat dyabetik (tou de nan plasma ak tèstikul), ki endike ke enflamasyon an pi grav. Nan plasma, nivo TNF- se menm jan an nan gwoup CTE- ak RSG-trete (Figi 12a). Gwoup CTE yo siyifikativman (sitou DME2) redwi nivo TNF- nan testis la (Figi 12b). Nivo IL-6 te redwi anpil nan plasma gwoup CTE ak RSG (Figi 13a). Nan tèstikul la, te gen yon tandans nan yon rediksyon nan nivo IL-6, men sa a pa t 'rive nan yon nivo enpòtan (Figi 13b).

3.2.1.1. Efè CTE sou estrès oksidatif ak enflamasyon nan spèmatozoa nan rat dyabetik pwovoke pa rejim alimantè ki gen anpil grès

Figi 14 montre kontni anion superoksid nan espèm rat. Rezilta yo te montre ke pwodiksyon anion superoksid nan espèm rat dyabetik ogmante anpil e pa te gen okenn amelyorasyon siyifikatif obsève nan gwoup DMR la. Gwoup DME1 ak DME4 te montre siyifikativman redwi pwodiksyon anion superoksid.

3.2.12. Efè CTE sou peroksidasyon lipid nan spèmatozoa rat dyabetik pwovoke pa rejim alimantè ki gen anpil grès

Etid yo montre ke peroksidasyon lipid la te ogmante nan tou de pasyan dyabèt tip 1 ak tip 2 [19]. Nivo malondialdehyde (MDA) nan plasma, espèm, ak tèstikul yo montre nan tablo 8. Nivo MDA nan plasma, tèstikul, ak espèm nan gwoup DM a te siyifikativman pi wo ak tretman an ak CTE ak RSG redwi pwodiksyon an nan MDA. Yo te obsève yon rediksyon enpòtan nan gwoup DME4 ak DMEI nan plasma. Etid sa a te jwenn ke rat dyabetik pa sèlman ogmante degre nan peroksidasyon lipid nan plasma, men tou ogmante nan tèstikul ak espèm. Yo te obsève amelyorasyon siyifikatif nan plizyè dòz CTE.

4. Diskisyon

Dyabèt se yon maladi kwonik ki asosye ak yon wo nivo sik nan san an. Dezekilib ant nivo antioksidan ak ROS ap mennen nan kondisyon ki rele estrès oksidatif. Superoksid, radikal idroksil, oksijene idwojèn, oksid nitrique, ak oksijèn singlet se kèk nan egzanp ROS ki pral kontribye nan kondisyon dyabèt atravè estrès oksidatif [20].Cistanche tubulosase yon plant dezè ki gen konpozan aktif tankoupolisakarid, oligosakarid, glikozid feniletanoid (echinacoside, verbascoside), asid palmitik, asid linoleik, iridoid, alditols, ak lignans. Plant sa a kapab pwodwi anti-enflamatwa, neropwotektif, anti-bakteri, antiviral, antioksidatif, anti-timè, ak efè imunomodulateur [21]. Etid literati yo montre ke glikozid feniletanoid ki soti nan Cistanche tubulosa se pi gwo rezon ki fè aktivite antioksidan [22]. Resveratrol (RES) ak rosiglitazone (RSG) yo te pran kòm kontwòl pozitif pou etid in vitro ak in vivo respektivman. RSG se yon sansibilize ensilin pwisan epi li gen yon afinite nan direksyon izoform reseptè peroxisome proliferator-activated (PPARc). Li kontwole ipèglisemi nan pasyan dyabetik [23]. RES gen aktivite antioksidan natirèl epi li aji kòm yon vazodilatatè, reglemante metabolis lipoprotein, anpeche agregasyon plakèt, ak anpeche kansè [24,25]. Ankèt nou an te endike ke ECH a montre pi bon aktivite radikal pase CTE ak RES (Figi 1). Li konprann tou ke ECH a pa lakòz okenn toksisite enpòtan nan selil LC-540 ak TM3 Leydig (Figi 2).

NATIRÈL CISTANCHE TUBULOSA POU FONKSYON SEKSYÈL GASON PHGS75% ECH 30% ACT 12%

AGE yo te itilize pou pwovoke kondisyon estrès nan selil Leydig yo. Pwodiksyon AGEs, enflamasyon, estrès oksidatif, ak dyabèt yo konekte. Kondisyon ipèglisemi dyabèt ankouraje blesi selil atravè pwodiksyon AGE ak estrès oksidatif. AGE yo pwovoke toksisite selilè, ki plis ankouraje rekritman selil iminitè ak lanmò selil. Yon nivo ki wo nan AGE yo ankouraje ekspresyon de kalite reseptè yo rele RAGE ak AGER1 [26]. Degoute ak transfè ki vin apre nan yon elèktron soti nan chèn respiratwa mitokondriyo a nan oksijèn molekilè pandan estrès oksidatif rezilta nan fòmasyon nan yon anyon superoksid. Rezilta nou yo montre ke pwodiksyon anion superoksid pwovoke pa AGE yo te ogmante nan gwoup kontwòl la ak plis amelyorasyon yo te obsève ak tou de tretman ECH ak RES. Dapre etid nou an, li te konprann ke pwodiksyon an superoksid (Figi 3) ak H2O2 (Figi 4) pwovoke pa AGEs te diminye nan prezans ECH ak RES.

NF-κB konnen kòm medyatè enpòtan nan enflamasyon ki asosye ak dyabèt [27]. Ekspresyon NF-κB mennen nan disfonksyon selilè ak lanmò selil. Aktivasyon NF-κB pa estrès oksidatif stimul repons pro-enflamatwa, regilasyon endotelin, ak apoptoz [28]. Ekspresyon RAGE ak NF-κB te ogmante nan gwoup ki ankouraje AGE epi yo te obsève rediksyon ki vin apre a nan selil trete ECH ak RES (Figi 5).

Testostewònse yon esteroyid anabolizan ak prensipalòmòn sèks gasonsentèz soti nan kolestewòl. Pwosesis la kòmanse ak klivaj oksidatif nan chèn bò kolestewòl la pa jèn nan kolestewòl klivaj bò chèn (CYP11A). Jèn sa a lokalize nan manbràn mitokondriyo a epi li konvèti kolestewòl la nan pregnenolone. Apre sa, jèn CYP17A1 ki soti nan retikul andoplasmik la retire de atòm kabòn siplemantè epi pwodui plizyè estewoyid C19. Anplis sa a, pregnenolone a soksid pou fòme androstenedione/pwojestewòn pa hydroxysteroid dehydrogenase (3- -HSD). Finalman, testostewòn pwodui pa rediksyon gwoup keto nan 17yèm pozisyon kabòn androstenedyon pa 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase (17- - HSD). Selil Leydig yo patisipe nan pi gwo pwodiksyon testostewòn. Transfè kolestewòl nan manbràn mitokondriyo enteryè a mande pou aksyon pwoteyin egi regilasyon steroidojèn (StAR). Etid prezan yo montre ke ekspresyon StAR, CYP11A1, CYP17A1, ak HSD17 3 te diminye nan selil AGE-trete (kontwòl) e te gen yon ogmantasyon fòmidab yo te montre nan selil ECH- ak RES-trete (Figi 6) . Kidonk, rezilta yo montre ke pwodiksyon an nantestostewòn te ogmante nan ECH- ak RES-trete gwoup yo. 

NATIRÈL CISTANCHE TUBULOSA POU AMELIORE POUVWA SÈKS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Pandan yon kondisyon dyabetik, transpò glikoz nan ògàn yo limite epi kòm yon rezilta, nivo glikoz yo ogmante [29]. Pakonsekan, kondisyon ipèglisemi a se youn nan makè enpòtan pou deteksyon dyabetik. Etid nou yo montre ke nivo glikoz nan plasma te ogmante nan gwoup dyabetik ak AUC nan gwoup DM a te siyifikativman pi wo pase lòt gwoup yo (Figi 8). Ansanm ak glikoz plasma, kolestewòl total ak kontni trigliserid yo te ogmante siyifikativman nan gwoup DM a (Tablo 2). Ateroskleroz fasilite pa yon nivo ogmante nan kolestewòl ak trigliserid [30]. Sepandan, nivo kolestewòl ak trigliserid yo te diminye nan gwoup CTE- ak RSG-trete. Kontni an trigliserid nan gwoup DME4 la rive nan valè prèske menm jan ak gwoup kontwòl la.

Ensilin se yon òmòn ki pwodui nan selil pankreyas yo epi ki fonksyonalize pou kontwole nivo sik nan san nan kò a, alòske leptin se yon òmòn ki pwodui nan adiposit yo ki kapab kontwole konsomasyon manje ak itilizasyon enèji. Etid yo endike ke leptin patisipe nan fizyopatoloji obezite e gen yon entèraksyon pozitif ant leptin ak ensilin [31]. Etid nou yo montre ke nivo nan plasma inulin ak leptin te pi wo nan gwoup la DM ak nivo ensilin la te diminye ak yon ogmantasyon nan konsantrasyon nan CTE. Gwoup RSG la pa montre okenn diferans enpòtan ak gwoup DM. Yo te evalye rezistans ensilin ak fonksyon selil pa metòd HOMA-IR. Valè HOMA-IR te ogmante nan gwoup DM a e li te diferan anpil de lòt gwoup yo (Tablo 3).

DM afekte fonksyon repwodiktif la atravè altènasyon ormon nan aks HPG ak etid yo te revele ke ekspresyon ensilin nan tèstikul la afekte tou pa dyabèt. Li karakterize pa vakuolizasyon selil Sertoli, ogmante fwagmantasyon ADN, spermatogenesis andikape, ak ogmante deplètman selil jèm. Estrès oksidatif tou kontribye nan anomali nan fonksyon repwodiktif [32]. Pwosesis fòmasyon espèm nan ògàn repwodiktif gason an (tètik) yo rele spermatogenèse. Testis la konpoze de tubul ki byen sere ki rele tubul seminifè. Selil Sertoli yo wè nan mi tubul seminifè a epi yo bay espèm frelikè yo nouriti. Ankèt la nan paramèt espèm yo endike ke kantite espèm ak mobilite diminye ak anomali yo ogmante nan gwoup DM a (Tablo 5). Yon efè opoze te obsève nan CTE- ak RSG-trete gwoup yo. Tou de selil Leydig la ak selil Sertoli yo nan gwoup DM a te montre siyifikatif atrofi ak kavite a te wè nan lumèn nan. Epesè tubul seminifè a tou diminye nan gwoup DM la. Yo te obsève yon rezilta amelyore nan gwoup CTE- ak RSG-trete (Figi 9). Anplis de sa, nivo LH ak testostewòn diminye nan gwoup DM a ak nivo yo ogmante nan gwoup CTE-trete (Tablo 4). Nan gason, ki ba testostewòn serik ak pi ba frekans batman LH yo te souvan asosye ak obezite ak dyabèt tip 2 [33].

Kisspeptins ki kode pa jèn KiSS1 yo konnen kòm stimulateur ki pisan nan aks HPG ak nenpòt mitasyon nan jèn kisspeptin ap mennen nan nivo ki ba nan estewoyid sèks ak gonadotropin. Etid yo montre ke nan rat dyabetik ki pwovoke STZ, nivo mRNA Kiss1 yo te diminye [33]. Inisyasyon ak antretyen nan lakòz mamifè yo konekte ak G-pwoteyin makonnen reseptè 54 (GPR54). Mitasyon nan GPR 54 karakterize pa absans spirasyon seksyèl ak nivo ki ba nan òmòn gonadotwòp (LH ak FSH). Sitokin pro-enflamatwa tankou IL-6 ak TNF-up-reglemante ekspresyon de siyal siyal cytokine 3 (SOCS3) ki enplike nan enflamasyon-medyatè rezistans ensilin nan fwa a ak adiposit [34]. SIRT 1 se yon jèn ki asosye ak règleman plizyè maladi aje. Jèn sa a eksprime byen klè nan selil pankreyas yo epi li kontwole sekresyon ensilin epi li anpeche apoptoz. Etid aktyèl yo endike ke ekspresyon KiSS1, GPR54, ak SIRT1 diminye nan gwoup DM a, men ekspresyon an ogmante nan gwoup CTE-trete (Figi 10). Yon ogmantasyon nan ekspresyon SOCS-3 nan gwoup DM a endike kondisyon enflamatwa a. Premye lyen molekilè idantifye ant obezite ak enflamasyon se te TNF-. Pakonsekan, yon nivo ogmante nan TNF- se yon endikatè nan enflamasyon. Nivo a diminye nan sitokin pro-enflamatwa tankou TNF- ak IL-6 yo te wè nan gwoup CTE-trete (Figi 12 ak 13).

Dezekilib ant ROS ak antioksidan mennen nan kondisyon dyabetik la. Superoxide dismutase (SOD), katalaz (CAT), ak glutatyon peroksidaz (GPX) yo konnen kòm antioksidan prensipal ki responsab pou kenbe pi gwo nivo ROS [35]. Soti nan rezilta yo, li te jwenn ke aktivite a nan antioksidan te siyifikativman pi ba nan gwoup la DM. CT-trete gwoup yo te montre amelyorasyon nan pwodiksyon an nan antioksidan. Gwoup ki te trete ak RSG la pa t montre okenn amelyorasyon enpòtan nan aktivite antioksidan (Tablo 6 ak 7).

Ksid nitrique (NO) konnen kòm yon ROS enpòtan ki kontribye nan enflamasyon. Etid nou yo fè remake ke nivo NO a te diminye nan gwoup CTE-trete (Figi 11). Rezilta yo te montre ke kontni anion superoksid nan espèm nan rat dyabetik te ogmante anpil e pa te gen okenn amelyorasyon siyifikatif apre administrasyon RSG la. Pwodiksyon superoxide te redwi nan gwoup CTE yo.

Detèminasyon MDA trè itil pou evalye peroksidasyon lipid. Peroksidasyon lipid se pwosesis oksidasyon nan lipid epi finalman rezilta nan domaj selilè. MDA pwodui kòm rezilta peroksidasyon lipid nan asid gra poliensature. Etid yo montre ke nivo MDA gen rapò ak laj ak nivo glikoz nan san jèn [36]. Etid aktyèl la endike ke CTE a amelyore peroksidasyon lipid nan plasma, tèstikul, ak espèm (Tablo 8).

NATIRÈL CISTANCHE TUBULOSA POU AMELIORE FONKSYON SEKSYÈL PHGS75% ECH 30% ACT 12%

5. Konklizyon

Estrès oksidatif pandan kondisyon dyabetik deranje sistèm repwodiktif gason an nan andikap espèm ak malfonksyònman gonadal. Cistanche tubulosa se yon plant dezè lajman aksepte nan medikaman Chinwa akòz efè famasi li yo.Echinacoside (ECH)se eleman prensipal la nan CTE ki responsab pou aktivite antioksidan ak anti-enflamatwa li yo. Rezilta in vitro nou yo te endike ke ECH la te retabli chemen sentèz testostewòn la epi li te bese nivo ekspresyon pwoteyin NF-κB ak RAGE. ECH efektivman anpeche pwodiksyon anion superoksid ak H2O2 nan selil Leydig yo. Etid yo an vivo te revele ke ECH a redwi nivo kolestewòl, trigliserid, TNF-, ak IL-6. Anplis de sa, ekspresyon mRNA nan ipotalamus rat dyabetik yo te amelyore anpil. Li se tou nan sonje ke ECH a redwi peroksidasyon lipid ak amelyore rezistans ensilin nan rat gason dyabetik. Aktivite antioksidan yo ogmante tou de nan plasma ak tèstikul. Se poutèt sa, etid nou yo sijere ke ECH a bay pwoteksyon efikas kont malfonksyònman repwodiktif nan rat gason dyabetik STZ-induit.