Efè glikozid nan Cistanche sou ekspresyon de mitokondriyo précurseur Pwoteyin ak Keratin tip II Cytoskeletal 6A nan yon modèl rat nan demans vaskilè.

Plis enfòmasyon tanpri kontakte:Joanna.jia@wecistanche.com

Résumé

Entwodiksyon

Vaskilèdemansse dezyèm kalite demans ki pi komen (Neltner et al., 2014; Sachdev et al., 2014; Tatlisumak et al., 2014; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Reijmer et al., 2016). ). Domaj nan memwa san rete ak irevokabl ki rive nan pasyan ki gen demans vaskilè mennen nan yon deteryorasyon grav nan kalite lavi a epi mete yon gwo fado ekonomik sou fanmi pasyan an (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Chen et al., 2014; Chen et al. al., 2014; Brandenburg et al., 2016). Prevansyon ak tretman maladi a se de pli zan pli enpòtan nan peyi ki gen popilasyon ki aje. Se poutèt sa, gen ogmante enterè rechèch nan rechèch la pou dwòg efikas pou tretman demans vaskilè.

Cistanchese yon plant ki itilize kòm yon nootropic nan teyori medikal tradisyonèl Chinwa (Chen et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015). Glikozid nanCistanche(GC) se yon pweparasyon extrait deCistanche. Gen prèv konsiderab ki sipòte lide ke GC ka amelyore rejenerasyon axonal (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg et al., 2016; Gu et al., 2016). Anpil etid sou bèt yo montre ke GC amelyore fonksyon mantal (Procaccio et al., 2014; Talarowska et al., 2014; Fischer and Maier, 2015).

Nou te deja itilize bilateral oklizyon atè karotid komen pou etabli modèl rat nanvaskilèdemans. Nan modèl sa a, aprantisaj espasyal ak memwa yo amelyore anpil apre entèvansyon ak GC (Chen et al., 2015). GC kapab tou kontwole ak amelyoreiminitemen li pi byen li te ye kòm yon tonik nè ak amelyore memwa (Chen et al., 2014; Procaccio et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015; Brandenburg et al., 2016).

Sepandan, kèk etid te envestige mekanis molekilè ki kache efè GC nanvaskilèdemans. Isit la, nou itilize pwoteomik yo eksplore relasyon ki genyen ant pwoteyin ak demans vaskilè, pou detèmine mekanis ki kache efè neuroprotective nan GC.

Cistanchedeserticola gen anpil efè, klike isit la pou konnen plis

Materyèl ak Metòd

Bèt

Sis semèn granmoun gason ki san patojèn espesifik Wistar rat (n=37), ki peze 230-270 g, te bay nan Sant eksperimantal bèt, pwovens Hubei, Lachin (nimewo lisans: SYXK (E) { {7}}). Eksperyans lan te swiv Gid Nasyonal pou Swen ak Itilizasyon Bèt Laboratwa yo, ak Gid Otè Konsantman yo sou Etik ak byennèt bèt ki te pwodwi pa Asosyasyon Entènasyonal Editè Veterinè. Yo te prepare maniskri an akò ak direktiv Rechèch sou Animal: Rapò sou Eksperyans In Vivo (ARRIVE).

Rat yo te loje an gwoup twa pou chak kaj a 25 degre ak yon sik limyè/fè nwa 12 -èdtan ak aksè gratis nan manje ak dlo. Rat (n=37) yo te asiyen owaza nan yon gwoup kontwòl (n=10), yon gwoup demans vaskilè (n=12), ak yon gwoup demans vaskilè plis GC (GC-trete, n=15).

Etablisman modèl rat nan demans vaskilè

Anba anestezi gwo twou san fon ak 10 pousan idrat chloral, atè karotid komen bilateral rat nan demans vaskilè ak gwoup GC-trete yo te ak anpil atansyon separe de tisi ki antoure yo, Lè sa a, li byen sere lè l sèvi avèk 10-0 fil suture sou tou de bout, ak carotid komen an. atè yo te koupe. Rat yo nan gwoup kontwòl la te sibi menm pwosedi chirijikal eksepte ke atè carotid komen yo te ekspoze men yo pa ligated. Yo te fè labirent dlo Morris la dapre metòd ki dekri deja pou verifye si modèl bèt la te etabli avèk siksè (Chen et al., 2015).

Tretman farmakolojik

Cistanche poud(Sètifika Tèb Z20050216, Sinphar Tian-Li famasetik co, Ltd, Hangzhou, Lachin) te melanje ak dlo ultrapure ak extrait pa TF -2000C Ultrasonicator (Tuofen, Shanghai, Lachin) (pouvwa 100 pousan, 30 degre, 40 minit). Yo te mezire konsantrasyon GC lè w analize glikozid phenylethanoid. Apre aksidan an, tout rat nan gwoup GC-trete a te resevwa GC (10 mg/kg/jou, 1 mL, intraperitoneally, yon fwa chak jou) pou 14 jou youn apre lòt. Rat nan gwoup kontwòl ak demans vaskilè te resevwa saline (1 mL, intraperitoneally).

Imunohistochimi

Apre 14 jou nan administrasyon GC (oswa saline), sèt rat nan chak gwoup yo te dekapite ak sèvo yo ekstrè. Yo te retire kortik serebral yo epi yo te ak anpil atansyon diseke tisi ipokanp yo epi koupe an 3- μm seksyon epè lè l sèvi avèk mikrotom jele. Seksyon tisi ipokanp yo te fikse ak 4 pousan paraformaldeyid pou 30-60 minit, yo te lave ak PBS, epi yo te enkube nan 3 pousan H2O2 pou 10 minit ki te swiv pa serom kabrit pou 15 minit, tout nan tanperati chanm.

Lè sa a, seksyon yo te enkube nan lapen anti-rat phosphorilate antikò prensipal p-tau

(1:1,000 nan PBS; Bioworld Technology, Inc., TX, USA) ak antikò prensipal lapen anti-rat amyloid-beta (A ) (1:1,000; Bioworld Technology, Inc.) nan yon bwat mouye nan 37 degre pou 2-3 èdtan, anvan enkubasyon nan antikò segondè a (kabrit anti-sourit IgG; Bioworld Technology, Inc.) pou 15 minit nan tanperati chanm. Espesimèn yo te vizyalize ak 3,3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride (Dako, Tokyo, Japon). Imaj yo te pran avèk yon mikwoskòp limyè (Olympus, Tokyo, Japon) epi yo te trete avèk Photoshop (vèsyon 7.0; Adobe, San Jose, CA, USA).

Patikil imunopozitif yo te mawon, kidonk tach mawon nan sitoplasm la te chwazi kòm yon reyaksyon pozitif, epi yo te fè semi-quantifikasyon lè l sèvi avèk yon sistèm analiz imaj HMIAS-2000 (Qianpin Co., Wuhan, Lachin). Nan chak echantiyon, yo te chwazi senk jaden owaza epi yo te chwazi senk selil pozitif nan chak vi epi yo te mezire mwayèn valè gri kòm yon seri valè relatif.

Cistancheka amelyoreiminiteak anpechekadyovaskilèepiserebwo vaskilèmaladi

Elektwoforèz jèl ki genyen de dimansyon (2-DE)

Apre 14 jou nan GC oswa administrasyon saline, uit rat nan chak gwoup yo te anestezi ak dekapite, ak tisi ipokanp yo te byen vit rekòlte epi imedyatman jele nan nitwojèn likid. Tout tisi yo te omojeneize nan nitwojèn likid lè l sèvi avèk yon mòtye ak pilon epi yo kolekte nan tanpon lysis (7 M ure, 2 M thiourea, 2 pousan CHAPS, 20 mM Tris). Patikil ki pa ka fonn yo te retire pa santrifujasyon nan 13,000 × g pou 20 minit nan 4 degre. Asid nikleyik ki kontamine te deranje pa osilasyon sonik tanzantan pou 5 minit. Echantiyon yo te santrifuje ankò nan menm kondisyon yo epi yo te kolekte supernatant yo. Konsantrasyon pwoteyin yo te mezire lè l sèvi avèk tès Bradford (Beyotime Inc., Lachin) ak echantiyon yo te estoke nan -80 degre jiskaske yo itilize.

Pou envestige pwofil ekspresyon pwoteyin nan ipokanp la, 2-DE te fè dapre enstriksyon manifakti a (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, USA). Solisyon pwoteyin lan (120 ug/echantiyon) te ajiste ak tanpon reyidratasyon pou yon volim final 350 μL. Yo te fè konsantre izoelektrik lè l sèvi avèk bann IPG (pH 4-7, gwosè 22 cm) sou yon sistèm Ettan IPG oswa II (tout soti nan GE Ettan IPGphor3, GE Healthcare). Apre sa, bann yo te ekilibre pou 15 minit.

{{0}}DE te fèt lè l sèvi avèk 12.5 pousan jèl poliakrilamid sodyòm dodecyl sulfat (SDS) (24 cm × 19.5 cm × 1.0 mm) ak 0.5 pousan agarose lakòl sele nan yon elektwoforèz Ettan DALTSix. sistèm (GE, Ettan DALTSix, GE Healthcare).

Elektwoforèz te pote soti nan 2 W pou 45 minit, ki te swiv pa separasyon nan 17 W pou 4 èdtan jiskaske ble bromophenol la te prèske rive nan pati anba a nan 2-DE jèl la.

Jèl yo te tache lè l sèvi avèk nitrat ajan (Damao Chemical Reagent Factory, Tianjin, Lachin) epi yo te kaptire imaj sou yon 2-sistèm eskanè imaj DE (VT, USA).

Image Master 2D Platinum 5.0 lojisyèl (GE, Inc., PA, USA) te itilize pou eskane ak analize 2-DE imaj la.

enfòmasyon yo te jwenn lè l sèvi avèk yon espektwomèt mas 4700 MALDI TOF/TOF (GE, Inc.).

Matris-asistans lazè desorption/ionization tan-of-vol mas spèktrometri

Pou anprent mas peptide ak analiz ki vin apre, jèl yo te tranche epi yo te sibi yon pwotokòl nan jèl yon ti kras modifye jan sa dekri nan enstriksyon manifakti a. Te gen metanol (Fisher M/4056/17), asetonitrile (Fisher A/0626/17), tripsin (Promega V5280), solisyon rezolisyon tripsin (Promega V530), bikabonat amonyòm (Sigma A6141), C-18 ZipTip (Millipore ZTC18M096), ak asid trifluoroacetic (GE HealthCare).

Yon ti tan, tach pwoteyin yo te tache ak solisyon destaining (30 mM K3Fe(CN) 6:100 mM NaS2O3=1:1) ak dezidrate ak 100 mm bikabonat amonyòm ak asetonitrile, redwi ak fosfat trichloromethyl pou 20 minit nan tanperati chanm, ak Lè sa a, alkylated nan asid iodoacetic pou 30 minit nan fè nwa a. Jèl la te enkube nan 50 μL nan 12 ng / μL modifye trypsin solisyon nan 25 mM bikabonat amonyòm, pH 8.6, nan 37 degre lannwit lan. Peptides yo te ekstrè nan ploge jèl la ak 1 pousan asid fòmik / 2 pousan acetonitrile epi konsantre lè l sèvi avèk C-18 Zip-Tips. Apre sa, echantiyon yo te prepare lè l sèvi avèk yon sib Prespotted AnchorChip (PAC96) ak yon matris asid alfa-cyano-4-hydroxycinnamic pou 96 tach echantiyon ak 24 tach kalibrasyon. Enfòmasyon sou peptide mas spectre yo te jwenn lè l sèvi avèk yon espektromèt mas 4700 MALDI TOF/TOF. Done ki kapab lakòz yo te analize lè l sèvi avèk yon GPS Explorer (Applied Biosystems Inc., NY, USA), ki envoke yon rechèch baz done MASCOT (Matrix Science, London, UK) lè l sèvi avèk yon sourit sourit nan baz done Sant Nasyonal pou Enfòmasyon sou Biotechnology.

Cistancheka anti-bakteri ak anpechevaskilèdemans

Esè Western blot

Yo te prepare ipokanp la epi yo te mezire konsantrasyon pwoteyin jan sa dekri pi wo a. Echantiyon pwoteyin yo te chaje sou yon jèl SDS poliakrilamid, electrophoresed, epi transfere nan yon manbràn polyvinylidene difluoride. Yo te lave manbràn nan nan saline ki gen Tris-tampon ak Tween 20, bloke nan 10 pousan lèt ki pa gen anpil grès, ak 0.05 pousan Tween nan saline ki gen tanpon fosfat. Manbràn yo te enkube lannwit lan nan 4 degre ak lapen anti-mitokondrial precurseur pwoteyin antikò poliklonal (1:2,000; Proteintech Inc., Chicago, IL, USA) ak lapen anti-keratin tip II cytoskeletal 6A (KRT6A) antikò poliklonal (1:1,000; Proteintech Inc.) nan 10 pousan lèt ki pa gen anpil grès. Antikò segondè, kabrit anti-lapen ki konjige peroksidaz ak refor (Google Biotechnology Inc., Wuhan, pwovens Hubei, Lachin) te dilye (1:2,000) nan 10 pousan lèt ki pa gen anpil grès ak enkubasyon nan 25 degre. pou 1 èdtan. Yo te itilize antikò monoklonal sourit anti-rat -aktin (1:2,000; Google Biotechnology Inc.) kòm yon referans entèn. Yo te itilize yon sistèm analiz Western blot (V300; EPSON, Nagano-ken, Japon), ak AlphaEaseFC Adobe PhotoShop (Alpha Innotech, CA, USA) pou detèmine pwoteyin precurseur mitokondriyo ak nivo ekspresyon KRT6A ki eksprime kòm dansite optik entegre nòmalize nan -aktin.

Analiz estatistik

Done kantite yo te eksprime kòm mwayen ± SD. ImageMaster 2D Platinum 5.0 lojisyèl (GE, Inc.) te itilize pou eskane ak analize 2-DE enfòmasyon yo. Yo te fè yon analiz de-fason sou divèjans lè l sèvi avèk GraphPad Prism 6.0 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA). P < 0.05="" te="" konsidere="" kòm="" estatistik="">

Rezilta yo

Efè GC sou p-tau ak yon iminoreaktivite nan ipokanp modèl rat nan demans vaskilè

Immunohistochemistry te montre ke p-tau ak A ekspresyon te pi gwo apre 14 jou nan tretman ak GC pase nan gwoup kontwòl la. Sepandan, ekspresyon de pwoteyin sa yo nan gwoup GC-trete a te siyifikativman pi ba pase sa nan gwoup demans vaskilè (P < 0.05;="" figi="">

GC reglemante ekspresyon de pwoteyin précurseur mitokondriyo ak KRT6A nan ipokanp modèl rat nan demans vaskilè.

Ekspresyon de pwoteyin yo te siyifikativman diferan nan gwoup GC-trete pase nan gwoup demans vaskilè: pwoteyin précurseur mitokondriyo (ke yo rele tou pwoteyin chòk chalè (HSP) 75 kDa) te regilasyon, ak KRT6A te downregulated (Figi Figi 22, 33). ). Enfòmasyon sou pwoteyin yo endike nan Tablo 1.

Diskisyon

Demans vaskilè se yon sendwòm ki karakterize pa andikap nan memwa, konpòtman, ak koyisyon, epi li se sitou ki te koze pa maladi serebwo vaskilè (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Oliveira et al., 2014; Szalárdy et al., 2015). Patoloji komen nan tout kalite demans, ak responsab pou pwogresyon li yo, se neurodegeneration (Foster et al., 2014; Fischer and Maier, 2015; Kalaria et al., 2015;

Cistancheka amelyore iminite akanpechevaskilèdemans

Chen et al., 2016; Pérez -Hernández et al., 2016). Anpil ekstrè plant gen pwopriyete ki ka geri ou. Byoaktivite konpoze sa yo kont neurodegeneration se sitou akòz efè antioksidan ak anti-amiloidojenik yo (Fischer and Maier, 2015; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016).

Cistanchese yon zèb Chinwa ki itilize kòm yon nootropic nan medikaman tradisyonèl Chinwa. Rechèch émergentes endike saCistanchese benefisye nan amnésie, espesyalman nan anpèchman nan pwogresyon pèt memwa (Procaccio et al., 2014; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016). Gen prèv konsiderab ke GC ka ankouraje rejenerasyon axonal ak aji kòm yon modilatè kwasans nè (Talarowska et al., 2014; Gu et al., 2016; Xu et al., 2016). Nan travay anvan nou an lè l sèvi avèk labirent dlo Morris, nou te jwenn ke latansi chape nan modèl rat nan demans vaskilè diminye apre tretman ak GC, ki endike ke GC amelyore kapasite aprantisaj espasyal. Malgre ke GC yo te itilize anpil pou efè neuroprotective li yo (Chen et al., 2015), mekanis ki kache efè sa a rete klè.

Li se byen li te ye ke A peptides ak p-tau yo trè eksprime nan plak senil ak tangle neurofibrillary. Pwoteyin A ak tau jwe wòl kle nan mòfogenesis newòn yo, men nan sèten sitiyasyon patolojik, yo jenere total aberan ki nerotoksik (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Wang et al., 2015; Reijmer et al., 2016). Rezilta imunohistochimik prezan yo endike ke ekspresyon p-tau ak A pwoteyin nan modèl rat trete GC nan demans vaskilè te siyifikativman pi gran pase sa ki nan rat kontwòl men pi ba pase sa ki nan rat modèl ki pa trete. Se poutèt sa, efè neuroprotective nan GC ka rive nan diminye toksisite nan A ak p-tau.

Etid pwoteomik nou an nan ipokanp rat la te revele gwo diferans nan ekspresyon pwoteyin précurseur mitokondriyo, keratin, ak KRT6A. An tèm de fonksyon, nou espekile ke efè neuroprotective nan GC ka asosye ak renovasyon nan estrikti kolòn vètebral dendritic.

Pwoteyin précurseur mitokondrial yo fè pati fanmi HSP70 (Rao et al., 2014; Gutiérrez -Aguilar and Baines, 2015; McGeer and McGeer, 2015). HSP75 patisipe nan aktivasyon molekilè chaperone ak spirasyon epi li kenbe estabilite ak fonksyon nòmal selil yo (Booth et al., 2014, 2016; Tavallai et al., 2015).

Pwoteyin précurseur mitokondrial la panse jwe yon wòl enpòtan nan transdiksyon kèk chemen siyal (Reid et al., 2014; Booth et al., 2015a, b). Etid resan yo te revele ke fanmi HSP90 kontwole anviwònman an fonksyone nan plisman pwoteyin mitokondriyo (An et al., 2014; Liu and Landgraf, 2015; Roberts et al., 2015; Stary and Giffard, 2015). HSP75 lokalize nan mitokondri ak anpeche jenerasyon radikal gratis oksijèn (Radu et al., 2014; Holloway et al., 2016). Rezilta nou yo montre ke ekspresyon HSP75 nan gwoup GC trete a te ogmante 2.54-pliye, sa ki sijere ke GC jwe yon wòl antioksidan, amelyore balans oksidatif selilè, ak reta apoptoz. Konklizyon sa a bay endikasyon enteresan sou entèraksyon pwoteyin chaperone mitokondriyo ak lòt pwoteyin.

Yon lòt pwoteyin eksprime yon fason diferan te KRT6A. Keratin yo, ki rele tou cytokeratin, se pwoteyin filaman entèmedyè ki kreye yon may ensolubl nan sitoplasm la, ki bay sipò estriktirèl nan selil epitelyal la (Haricharan et al., 2014; Rorke et al., 2015; Szymanski et al., 2015). . Sepandan, cytokeratin tou jwe yon wòl aktif nan plizyè pwosesis siviv selilè (proliferasyon ak apoptoz) (Zhu et al., 2013; Schwingshackl et al., 2015; Popov and Komianos, 2016). Pwoteyin sa yo ka sibi fosforilasyon epi yo fè pati kontak pont ant selil epitelyal la ak mikro-anviwònman li yo (Lessard et al., 2013; Gil Lorenzo et al., 2014; Zhou et al., 2014; Chakrabarti et al., 2015) . CK6a se izofòm dominan nan glann mamè (Bramanti et al., 2015a, b, 2016) epi li regilasyon nan geri kwen blesi nan po a, ki endike ke cytokeratin patisipe nan pwopagasyon selilè ak migrasyon. Sepandan, nou se premye moun ki montre downregulation nan KRT6A nan ipokanp la; Ekspresyon KRT6A te diminye 1.58-pliye nan gwoup GC-trete a konpare ak gwoup demans vaskilè a.

Se poutèt sa, efè neuroprotective nan GC ka asosye ak anpèchman nan hyperplasia neuroglial pandan iskemi serebwo vaskilè.

Ansanm, rezilta etid nou yo sijere ke GC egzèse efè aprantisaj ak memwa pwomosyon nan modèl rat nan demans vaskilè pa diminye ekspresyon A ak p-tau, kidonk febli akimilasyon de pwoteyin toksik sa yo epi, an vire, diminye. toksisite newòn. Anplis de sa, GC ta ka kontwole ekspresyon de pwoteyin précurseur mitokondriyo ak KRT6A, ki asosye ak morfogenesis cytoskeleton sinaptik ak metabolis enèji mitokondriyo. Se poutèt sa, done nou yo bay nouvo insight sou mekanis ki kache nan GCs, mete aksan sou posibilite pou GCs gen sib miltip, ki ofri yon nouvo opsyon terapetik pwomèt pou tretman demans vaskilè.

Nòt anba a

Finansman:Etid sa a te sipòte pa Fondasyon Nasyonal Syans Natirèl Lachin nan, No 30960520; Fondasyon Syans Natirèl nan Inner Mongolia Otonòm Rejyon Lachin nan, No 2016MS0837.

Konfli enterè: Okenn deklare.

Etik rechèch:Pwotokòl etid la te apwouve pa Komite Etik bèt nan Premye Lopital Wuhan. Pwosedi eksperimantal la te swiv Gid Enstiti Nasyonal Sante pou Swen ak Itilizasyon Bèt Laboratwa (NIH Piblikasyon No. 8023, revize 1978), ak "Konsansis Otè Gid sou Etik ak byennèt bèt" ki te pwodwi pa Asosyasyon Entènasyonal pou Editè Veterinè (IAVE). ). Tout efò yo te fè pou minimize kantite ak soufrans bèt yo te itilize nan eksperyans yo. Papye a te prepare an akò ak "Rechèch sou bèt: Rapò sou Gid Eksperyans In Vivo" (RIVE Guidelines).

Akò kontribitè: Yon deklarasyon "Akò Piblikasyon" te siyen pa yon otè otorize sou non tout otè anvan piblikasyon.

Tcheke plagiat: Yo tcheke papye sa a de fwa ak lojisyèl iThenticate pou tcheke duplication.

Revizyon parèy:Yo te fè yon pwosesis revizyon parèy doub-avèg ak sevè pou asire entegrite, kalite, ak siyifikasyon papye sa a.

Kopiye pa Slone-Murphy J, Franse B, Yu J, Li CH, Qiu Y, Song LP, Zhao M.

Referans

1. Yon J, Haile WB, Wu F, Torre E, Yepes M. Tissu-type plasminogen activator medyatè kouple neuroglial nan sistèm nève santral la. Nerosyans. 2014;257:41–48.

2. Barker R, Ashby EL, Wellington D, Barrow VM, Palmer JC, Kehoe PG, Esiri MM, Love S. Fizyopatoloji nan perfusion matyè blan nan maladi alzayme a ak demans vaskilè. Sèvo. 2014;137:1524–1532.

3. Booth L, Roberts JL, Cruickshanks N, Grant S, Poklepovic A, Dent P. Règleman toksisite OSU -03012 pa pwoteyin estrès ER ak dwòg ki pwovoke estrès ER. Mol Kansè Ther. 2014;13:2384–2398.

4. Booth L, Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Chuckalovcak J, Carter J, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012, ak tretman Viagra inibit aktivite plizyè pwoteyin chaperon ak deranje baryè san-sèvo. : enplikasyon pou terapi anti-kansè. J Cell Physiol. 2015a;230:1982–1998.

5. Booth L, Roberts JL, Cash DR, Tavallai S, Jean S, Fidanza A, Cruz-Luna T, Siembiba P, Cycon KA, Cornelissen CN, Dent P. GRP78/BiP/HSPA5/Dna K se yon sib terapetik inivèsèl. pou maladi imen. J Cell Physiol. 2015b;230:1661–1676.

6. Booth L, Shuch B, Albers T, Roberts JL, Tavallai M, Proniuk S, Zukowski A, Wang D, Chen CS, Bottaro D, Ecroyd H, Lebedyeva IO, Dent P. milti-kinase inhibiteurs ka asosye ak chòk chalè. pwoteyin atravè NH2-tèmin yo kote yo siprime fonksyon chaperone. Oncotarget. 2016;7:12975–12996.

7. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Raciti G, Viola M, Avola R. Modulation nan kinaz ki gen rapò ak siyal ekstraselilè, siklin D1, pwoteyin glial fibrilè asid, ak ekspresyon vimentin nan kilti astrosit estradiol-pretrete trete ak

konpetans ak pwogresyon faktè kwasans. J Neurosci Res. 2015a;93:1378–1387.

8. Bramanti V, Grasso S, Tomassoni D, Traini E, Raciti G, Viola M, Li Volti G, Campisi A, Amenta F, Avola R. Efè faktè kwasans ak òmòn esteroyid sou heme oksijenaz ak siklin D1 ekspresyon nan astroglial prensipal. kilti selil yo. J Neurosci Res. 2015b;93:521–529.

9. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Pappa R, Brundo MV, Tomassoni D, Viola M, Amenta F, Avola R. Molekil neroaktif ak faktè kwasans modile ekspresyon pwoteyin sitoskelèt pandan pwopagasyon selil astroglial ak diferansyasyon nan kilti. J Neurosci Res. 2016;94:90–98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. Rezidan microglia olye ke macrophages periferik ankouraje vaskularizasyon nan timè nan sèvo epi yo se yon sous faktè altènatif pro-angiogenic. Acta Neropathol. 2016;131:365–378.

11. Burke MJ, Nelson L, Slade JY, Oakley AE, Khundakar AA, Kalaria RN. Morfometri nan mikwovaskulasyon ipokanp nan pòs-konjesyon serebral ak demans ki gen rapò ak laj. Neuropathol Appl Neurobiol. 2014;40:284–295.

12. Chakrabarti KR, Whipple RA, Boggs AE, Hessler LK, Bhandary L, Vitolo MI, Thompson K, Martin SS. Règleman farmakolojik AMPK nan kansè nan tete afekte pwopriyete sitoskelèt ki enplike nan fòmasyon mikrotentacle ak re-

atachman. Oncotarget. 2015;6:36292–36307.

13. Chen A, Akinyemi RO, Hase Y, Firbank MJ, Ndung'u MN, Foster V, Craggs LJ, Washida K, Okamoto Y, Thomas AJ, Polvikoski TM, Allan LM, Oakley AE, O'Brien JT, Horsburgh K. , Ihara M, Kalaria RN. Entansite frontal matyè blan, klasmatodendroz, ak anomali neovaskilè nan aje ak demans apre konjesyon serebral. Sèvo. 2016;139:242–258.

14. Chen J, Zhou SN, Zhang YM, Feng YL, Wang S. Glycosides nan Cistanche amelyore aprantisaj ak memwa nan modèl rat nan demans vaskilè. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015;19:1234–1240.

15. Chen S, Yin ZJ, Jiang C, Ma ZQ, Fu Q, Qu R, Ma SP. Asiaticoside atténue andikap memwa pwovoke pa pasan serebral ischemi-reperfusion nan sourit atravè yon mekanis anti-enflamatwa. Pharmacol Biochem Konpòtman. 2014;122:7–

16. Fischer R, Maier O. Interrelation nan estrès oksidatif ak enflamasyon nan maladi neurodegenerative: wòl nan TNF. Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:610813.

17. Foster V, Oakley AE, Slade JY, Hall R, Polvikoski TM, Burke M, Thomas AJ, Khundakar A, Allan LM, Kalaria RN. Newòn piramidal nan cortical prefrontal nan post-konjesyon serebral, vaskilè, ak lòt demans ki gen rapò ak aje. Sèvo. 2014;137:2509–2521.

18. Gil Lorenzo AF, Bocanegra V, Benardon ME, Cacciamani V, Valles PG. Règleman Hsp70 sou Nox4 / p22phox ak entegrite cytoskeletal kòm yon efè losartan nan selil misk vaskilè lis. Chaperones estrès selil. 2014;19:115–134.

19. Gu C, Yang X, Huang L. Cistanches herba: yon revizyon nerofarmakoloji. Devan Pharmacol. 2016;7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. Mekanis estriktirèl nan cyclophilin D-depandan kontwòl nan pò a tranzisyon pèmeyabilite mitokondriyo. Biochim Biophys Acta. 2015;1850:2041–2047.

21. Haricharan S, Hein SM, Dong J, Toneff MJ, Aina OH, Rao PH, Cardiff RD, Li Y. Kontribisyon yon selil alveolè ki gen orijin nan fenotip segondè malfezan kansè nan tete gwosès ki asosye. Onkogene. 2014;33:5729–5739. [

22. Holloway KR, Sinha VC, Bu W, Toneff M, Dong J, Peng Y, Li Y. Vize onkojèn nan yon sous-ensemble defini nan selil mamè demontre ke inisye mitasyon onkojenik la defini fenotip timè ki kapab lakòz. Int J Biol

Sci. 2016;12:381–388.

23. Kalaria RN, Ferrer I, Love S. Maladi vaskilè, ipoksi, ak kondisyon ki gen rapò. Nan: Love S, Perry A, Ironside J, Budka H, ​​editè. Neuropatoloji Greenfield la. London: CRC; 2015.

24. Lessard JC, Pina-Paz S, Rotty JD, Hickerson RP, Kaspar RL, Balmain A, Coulombe PA. Keratin 16 kontwole iminite natirèl an repons a vyolasyon baryè epidèm. Proc Natl Acad Sci US A. 2013;110:19537–19542.

25. Liu W, Landgraf R. Phosphorylated ak unphosphorylated serine 13 nan CDC37 estabilize entèraksyon diferan ant kliyan li yo ak domèn obligatwa HSP90. Byochimi. 2015;54:1493–1504.

26. Lanmou S, Chalmers K, Ince P, Esiri M, Attems J, Kalaria R, Jellinger K, Yamada M, McCarron M, Minett T, Matthews F, Greenberg S, Mann D, Kehoe PG. Erratum: Devlopman, evalyasyon, validasyon, ak aplikasyon yon pwotokòl konsansis pou evalyasyon anjyopati amiloid serebral nan tisi nan sèvo pòs-mortem. Am J Neurodegener Dis. 2015;4:49.

27. McGeer PL, McGeer EG. Vize microglia pou tretman maladi alzayme a. Ekspè Opinyon Sib yo. 2015;19:497–506.

28. Neltner JH, Abner EL, Baker S, Schmitt FA, Kryscio RJ, Jicha GA, Smith CD, Hammack E, Kukull WA, Brenowitz WD, Van Eldik LJ, Nelson PT. Arterioloskleroz ki afekte plizyè rejyon nan sèvo se lye ak sklewoz ipokanp nan aje. Sèvo. 2014;137:255–267.

29. Oliveira NR, Marques SO, Luciano TF, Pauli JR, Moura LP, Caperuto E, Pieri BL, Engelmann J, Scaini G, Streck EL, Lira FS, Pinho RA, Ropelle ER, Silva AS, De Souza CT. Antrènman Treadmill ogmante nivo pwoteyin alfa SIRT-1 ak PGC-1 ak fosforilasyon AMPK nan kwadrisèps rat laj mwayen yo nan yon fason ki depann de entansite. Medyatè Enflamm. 2014;2014:987017. [Atik gratis PMC]

30. Pérez -Hernández J, Zaldívar -Machorro VJ, Villanueva-Porras D, Vega-Ávila E, Chavarría A. Yon altènatif potansyèl kont maladi neurodegenerative: phytodrugs. Oxid Med Cell Longev. 2016;2016:8378613. [PMC gratis

atik] [PubMed] [Google Scholar]

31. Popov K, Komianos J. MEDIAN: simulation mechanochemical nan kontraksyon ak aliyman polarite nan rezo aktomyozin. PLoS Comput

Biol. 2016;12:e1004877. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

32. Procaccio V, Bris C, Chao de la Barca JM, Oca F, Chevallier A, Amati-Bonneau P, Bonneau D, Reynier P. Perspectives neuroprotection ki baze sou dwòg vize mitokondri. Rev Neurol (Pari) 2014;170:390–400. [PubMed] [Google Scholar]

33. Radu M, Semenova G, Kosoff R, Chernoff J. PAK siyal pandan devlopman ak pwogresyon kansè. Nat Rev Kansè. 2014;14:13–25. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK, Carlson EA, Yan SS. Mitokondriyo pèmeyabilite tranzisyon pò se yon sib potansyèl dwòg pou neurodegeneration. Biochim Biophys Acta. 2014;1842:1267– 1272. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP, Shurtleff AC, Costantino JA, Tritsch SR, Retterer C, Spurgers KB, Bavari S. HSPA5 se yon faktè lame esansyèl pou enfeksyon viris Ebola. Res antiviral. 2014;109:171–174. [PubMed] [Google Scholar]

36. Reijmer YD, van Veluw SJ, Greenberg SM. Blesi nan sèvo iskemik nan anjyopati amiloid serebral. J Cereb Blood Flow Metab. 2016;36:40–54. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K se yon sib pou Nexavar/ stivarga/votrient nan tretman malfezan moun, enfeksyon viral, ak maladi bakteri. J Cell Physiol. 2015;230:2552–2578. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA, Adhikary G, Young CA, Rice RH, Elias PM, Crumrine D, Meyer J, Blumenberg M, Eckert RL. Chanjman estriktirèl ak byochimik ki kache nan yon fenotip keratodèrma nan sourit ki manke fonksyon faktè transkripsyon suprabasal AP1. Lanmò selil Dis. 2015;6:e1647. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P, Kalaria R, O'Brien J, Skoog I, Alladi S, Black SE, Blacker D, Blazer DG, Chen C, Chui H, Ganguli M, Jellinger K, Jeste DV, Pasquier F, Paulsen J, Prins N, Rockwood K, Women G, Scheltens P. Sosyete Entènasyonal pou maladi vaskilè konpòtman ak kognitif (2014) Kritè dyagnostik pou maladi mantal vaskilè: yon deklarasyon VASCOG. Alzheimer Dis Assoc Disord. 28:206–218.

40. Sadigh-Eteghad S, Sabermarouf B, Majdi A, Talebi M, Farhoudi M, Mahmoudi J. Amyloid-beta: yon faktè enpòtan nan maladi alzayme a. Med Princ Pract. 2015;24:1–10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. TREK-1 kontwole sekresyon sitokin ki soti nan selil epitelyal alveolatè imen kiltive yo poukont yo pa chanje sitoskelèt yo. PLoS Youn. 2015;10:e0126781.

42. Sinclair LI, Tayler HM, Love S. Nivo pwoteyin sinaptik chanje nan demans vaskilè. Neuropathol Appl Neurobiol. 2015;41:533–543.

43. Stary CM, Giffard RG. Avansman nan apwòch ki vize astrosit pou terapi konjesyon serebral: yon wòl émergentes pou mitokondri ak microRNAs. Neurochem Res. 2015;40:301–307.

44. Szalárdy L, Z ádori D, Klivényi P, Toldi J, Vécsei L. Latwoublay transpò elektwon ak neurodegeneration: soti nan Konsèp Albert Szent-Gyorgyi a (Szeged) jiska nouvo apwòch pou ranfòse bioenèjik mitokondriyo. Oksid Med selil

Longev. 2015;2015:498401.

45. Szymanski WG, Zauber H, Erban A, Gorka M, Wu XN, Schulze WX. Konpozan cytoskeletal defini kote pwoteyin nan mikrodomains manbràn. Mol Cell Proteomics. 2015;14:2493–2509.

46. ​​Talarowska M, Bobinska K, Zajaczkowska M, Su KP, Maes M, Galecki P. Enpak estrès oksidatif / nitrosative ak enflamasyon sou fonksyon mantal nan pasyan ki gen maladi depresyon frekan. Med Sci Monit. 2014;20:110–115.

47. Tatlisumak T, Putaala J, Debette S. Kòz mwens komen nan konjesyon serebral: dyagnostik ak jesyon. Nan: Norrving B, editè. Liv Oxford nan konjesyon serebral ak maladi vaskilè. Oxford: Oxford University Press; 2014. pp 153–162. [Google Scholar]

48. Tavallai M, Hamed HA, Roberts JL, Cruickshanks N, Chuckalovcak J, Poklepovic A, Booth L, Dent P. Nexavar/Stivarga ak viagra kominike pou touye selil timè yo. J Cell Physiol. 2015;230:2281–2298. [Atik PMC gratis] [PubMed] [Google Scholar]

49. Thomas T, Miners S, Love S. Post-mortem evalyasyon nan hypoperfusion nan cortical serebral nan maladi alzayme a ak demans vaskilè. Sèvo. 2015;138:1059–1069. [PubMed] [Google Scholar]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. Overexpression nan mitokondriyo Hsp75 pwoteje selil souch neral kont mikroglia-sòti idrotoksisite faktè idrosolubl pwovoke pa reglemante mitokondriyo pèmeyabilite tranzisyon pò ouvèti nan vitro. Int J Mol Med. 2015;36:1487–1496.

51. Xu Q, Fan W, Ye SF, Cong YB, Qin W, Chen SY, Cai J. Cistanche tubulosa Pwoteje Newòn Dopaminergic atravè Règleman Apoptoz ak Faktè Neurotrophic Glial Cell-Derived: in vivo ak in vitro. Devan aje

Neurosci. 2016;8:295.

52. Ou SP, Zhao J, Ma L, Tudimat M, Zhang SL, Liu T. Efè prevantif nan glikozid phenylethanol soti nan Cistanche tubulosa sou fibwoz epatik serom albumin bovine pwovoke nan rat. Daru. 2015;23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. Represyon nan neovaskularizasyon choroidal atravè chemen sitoskelèt aktin pa microRNA -24. Mol Ther. 2014;22:378–389.

54. Zhu M, Lu C, Li W. Ekspozisyon pasajè nan echinakozid se ase pou aktive siyal Trk ak pwoteje selil newòn kont rotenone. J Neurochem. 2013;124:571–580.