Efè terapi pwoton sou tiye selil timè ak mikroanviwònman iminitè pou karsinom epatoselilè

Résumé: Radyoterapi ak terapi pwoton (PT) gen avantaj dozimetrik sou terapi foton, ki ede elaji fenèt ki ka geri nan radyoterapi pou karsinom hepatocellular (HCC). Nou evalye repons HCC a PT epi egzamine mekanis ki kache yo. Liy selil kansè fwa imen HepG2 ak HuH7 ak liy selil kansè fwa murin Hepa1–6 yo te chwazi pou eksperyans selil ak bèt pou egzamine repons iradyasyon PT pwovoke. Chanjman byolojik ak repons iminolojik apre iradyasyon PT yo te egzamine. Eksperyans vitro yo pa montre okenn diferans enpòtan nan siviv selil apre PT konpare ak radyoterapi foton. Nan yon modèl timè murin, timè yo te pi piti nan gwosè 12 jou apre iradyasyon PT. Chanjman ki kache yo enkli ogmante domaj ADN, nivo IL-6 regilasyon, ak yon mikroanvironman timè iminitè kontwole. Analiz pwoteyin nan vitro ak nan vivo te montre ke PT te ogmante nivo pwograme selil lanmò ligand 1 (PD-L1) eksprime nan selil timè ak rekrite selil myeloid ki sòti nan suppressor (MDSCs). Ogmantasyon nan PD-L1 te pozitivman korelasyon ak dòz la iradyasyon. Nan modèl sourit Hepa1-6 syngeneic, konbinezon PT ak anti-PD-L1 ogmante reta kwasans timè konpare ak PT pou kont li, ki te asosye ak ogmante timè-enfiltre selil T ak atenue rekritman MDSC nan mikro-anviwònman an. Anplis de sa, lè PT te aplike nan timè HCC prensipal la, anti-PD-L1 antikò-trete sourit te montre pi piti timè synchrone unirradiated. An konklizyon, repons HCC a PT te detèmine pa touye selil timè ak repons iminolojik nan mikroanvironman timè a. Konbinezon an ak antikò anti-PD-L1 pou amelyore iminite antitumoral te responsab sinèrjis terapetik pou HCC trete ak PT. Dapre rezilta nou yo, nou sijere ke PT konbine avèk anti-PD-L1 ka yon politik pwomèt terapetik pou HCC.

Benefis cistanche tubulosa-Antitumor

Mo kle: HCC; terapi pwoton; PD-L1; iminitè

1. Entwodiksyon

Kansèm epatoselilè (HCC) se yon kansè ki fèt globalman ak yon ensidans relativman wo nan sidès Lazi [1]. Majorite pasyan yo gen yon move pronostik akòz timè avanse ak/oswa move fonksyon epatik. Tradisyonèlman, terapi radyasyon (RT) ak yon dòz definitif pou tretman kansè nan fwa te asosye ak yon gwo risk pou epatit radyasyon pwovoke. Amelyorasyon nan teknik livrezon radyoterapi te ede elaji fenèt terapetik RT pou HCC. Devlopman RT ak terapi pwoton (PT) te pote itilizasyon RT pou HCC nan dokiman Pwen Enpòtan an [2,3]. PT gen avantaj dozimetrik sou terapi foton konvansyonèl pou tretman kansè, espesyalman pou HCC, kansè nan tèt ak kou, ak kansè nan tete. Etid resan yo sijere ke ka gen diferans nan chanjman byolojik RT-induit, ki gen ladan nan endiksyon domaj ADN, estrès oksidatif, ak règleman an nan selil iminitè, ant PT ak foton nan dòz ekivalan efikasite byolojik relatif [4-7]. Plis envestigasyon sou efè radyobyolojik PT pral fasilite opòtinite pou bay devlopman estrateji PT pwomèt pou tretman kansè. Konbinezon RT ak imunoterapi nan anviwònman klinik pwomèt pou anpil endikasyon [8,9]. Kòm rezilta enflamasyon kwonik nan yon predispozisyon nan devlopman nan HCC, HCC se yon sib potansyèl pou imunoterapi [10]. RT gen tou de efè proimmunogenic ak imunosuppressive sou mikroanvironman timè a [9]. Malgre ke RT yo te montre yo deklanche lanmò selil iminitè yo ak amelyore enfiltrasyon selil iminitè antitumoral [11,12], plizyè etid te montre ke RT ka pwovoke cytokines ak selil iminitè regilasyon, sa ki lakòz yon mikwo-anviwònman timè plis imunosuppressive. Konbinezon imunoterapi ak RT te montre pou amelyore repons timè a konpare ak swa modalités pou kont li epi anile efè imunosuppressive RT-induit [13,14]. Plizyè etid preklinik ak klinik te montre ke tretman ak foton RT ak imunoterapi gen yon efè pozitif sou kontwòl timè nan HCC [15,16]. Dapre nou konnen, prèske tout rapò konsènan repons iminitè radyo-induit yo te jwenn ak iradyasyon ki baze sou foton. Yon pi bon konpreyansyon sou mekanis ki responsab repons a PT ta ka mennen nan apwòch ki pi pisan terapetik pou HCC. Efè byolojik PT ki responsab kontwòl timè ak repons iminitè a bezwen plis envestigasyon. Se poutèt sa, nou vize pou evalye efè radyasyon ak PT ak repons iminitè a nan mikroanvironman timè a. Nou te envestige tou si wi ou non konbinezon PT ak blokaj PD-L1 gen yon efè sinèrjetik sou kontwòl timè HCC.

2. Materyèl ak Metòd

2.1. Kilti Selil 

Liy selil kansè fwa imen HepG2 ak liy selil kansè fwa murin Hepa1–6 yo te jwenn nan Sant Koleksyon ak Rechèch Bioresource. Anplis de sa, selil HuH7, yon liy selil epatoma imen, yo te byen bay doktè Yen-Hao, Chen (Kaohsiung Chang Gung Memorial Hospital, Taiwan). Itilizasyon liy selilè yo te apwouve pa komite etik rechèch enstitisyonèl nou an (No. 00464-2021120952922). Liy selil yo te kiltive nan mwayen Dulbecco a modifye Eagle's (DMEM) complétée ak 10% serom fetal bovine (FBS). Anplis de sa, selil monositik THP-1 imen yo te konsève nan mwayen kilti RPMI 1640. THP-1 monosit yo ka diferansye nan makrofaj M1 oswa M2 lè yo enkube nan yon mwayen kondisyone [17,18]. Pou detèmine efè PT sou kapasite selil kansè yo pou pwovoke diferansyasyon makwofaj M2, selil HuH7 avèk oswa san iradyasyon PT yo te simen nan 6-plak byen 24 èdtan anvan fen polarizasyon makwofaj M2. Apre 24 èdtan nan kokilti, ekspresyon CD163, yon makrofaj M2, te analize ak makrofaj. Multikolor fluoresans-aktive analiz selil (FACS) te fèt lè l sèvi avèk yon FACS kalib koule cytometer (BD Biosciences) sou sispansyon sèl-selil prepare nan makrofaj yo diferansye, ak imunostaining pou CD163 te pote soti lè l sèvi avèk yon antikò monoklonal fluoresans ki make. Eksperyans yo an vitro yo te fèt nan laboratwa konjwen Chang Gung Memorial Hospital, ki te bay platfòm sèvis yo ki gen ladan triyatè selil, analizè selil miltikolor, ak mikwoskospi konfokal.

Benefis cistanche tubulosa-Antitumor

2.2. Iradyasyon

Efikasite Byolojik relatif pwoton yo te fikse nan 1.1, epi yo te kalkile dòz relatif efikasite byolojik (RBE) lè yo miltipliye dòz pwoton an pa valè sa a [19]. Nan etid la prezan, nou te itilize dòz RBE a pou evalye efè RT pwovoke. Dòz nan radyoterapi pwoton preskri kòm Gy (RBE) lè yo ogmante dòz fizik la pa 10%, sa vle di, dòz pwoton RBE=dòz fizik pwoton × 1.1. Selil ak sourit yo te resevwa RT lokal swa pa iradyasyon foton oswa PT ak dòz RBE a. Yo te fè iradyasyon foton lè l sèvi avèk planifikasyon tretman Varian 21EX ak Eclipse. Nan vitro, selil ki grandi eksponansyèlman yo te iradyasyon ak yon sèl dòz 0, 3, 6, ak 9 Gy lè l sèvi avèk yon gwo bout bwa 6 MV pou analiz radyasyon foton. Pou PT, iradyasyon pa eskanè gwo bout bwa kreyon (PBS) te fèt nan diferan dòz pwoton (0, 3, 6, 9, ak 12 Gy (RBE)), ak yon enèji ki koresponn ak 93.6-109.2 MeV ak 72-143.2 MeV pou selil yo. ak sourit, respektivman. Selil ak iradyasyon sourit yo te fèt lè yo mete selil yo nan mitan pik Bragg ki gaye (SOBP; 1 cm lajè pou selil PT, 6 cm lajè pou iradyasyon sourit PT) pou simulation kondisyon klinik yo (Figi 1a, b). Siklotron ki te itilize nan lopital nou an (Sumitomo Heavy Industries, Ltd., Tokyo, Japon) te delivre iradyasyon pwoton, ki jenere yon gwo bout bwa pwoton kontinyèl ak gwo entansite. Gwosè jaden RT la te 20 × 10 cm2 pou egzamine efè abscopal, 20 × 15 cm2 pou egzamine efè tumorisid PT an vivo, oswa 20 × 20 cm2 pou egzamine efè PT an vitro. Ray Station se te sistèm planifikasyon tretman yo itilize pou kalkil dòz RT (vèsyon 8.1, Ray Search Laboratories, Stockholm, Syèd).

Figi 1. Modèl preklinik pou PT. Desen eksperimantal pwoton gwo bout bwa a pou in vitro (a) ak modèl timè bèt (RT jaden pou iradyasyon timè fwa, liy ble; RT jaden pou egzamine efè abscopal, liy wouj) (b).

2.3. T-Selil Pwoliferasyon Essay

Pou egzamine si PT te kapab kontwole efè selil kansè yo ak selil mieloid ki sòti nan sipresyon (MDSC) sou pwopagasyon selil T CD8+, nou mezire pwopagasyon selil T CD8+ apre eksitasyon. Selil T CD8+ yo izole lè l sèvi avèk mikwòb anti-CD8 yo te make ak carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) epi yo te simen nan 96-plak byen ak selil CD11b+ nan prezans oswa absans selil kansè yo 48 èdtan apre PT. Pwopagasyon selil CD8+ T yo te ankouraje pa pèl anti-CD3/CD28 (Invitrogen, Waltham, MA, USA). Tach fluorescent CFSE la te analize lè l sèvi avèk sitometri koule 3 jou apre eksitasyon.

2.4. Endiksyon CD14+HLA-DR-soti nan selil mononikleyè san periferik (PBMCs)

Yo te idantifye yon nouvo gwoup MDSC ki baze sou prezans ekspresyon CD14 men absans ekspresyon antijèn leukosit imen (HLA)-DR (CD14+HLA-DR-) nan san periferik pasyan kansè yo. Akimilasyon an nòmal nan selil CD14+HLA-DR- nan PBMC yo rapòte kontribye nan evazyon iminitè timè yo ak korelasyon ak pronostik kansè [20–22]. Pou evalye wòl iradyasyon PT a nan endiksyon MDSC yo, yo te evalye pousantaj selil CD14+HLA-DR-myeloid nan PBMC yo enkubate ak selil kansè PT-iradyasyon pou 24 èdtan. Yo te analize pwopòsyon selil CD14+HLA-DR− myeloid ak nivo ekspresyon PD-L1 lè l sèvi avèk FACS (BD Biosciences, San Jose, CA, USA).

2.5. Esè klonojenik

Yo te itilize tès klonojenik pou egzamine efè RT (PT kont foton RT) sou pèt siviv selil repwodiktif. Kilti selil yo te iradyasyon ak Lè sa a, enkubasyon nan 37 ◦C pou fòmasyon koloni. Apre 10 jou, koloni yo te fiks ak tache ak kristal vyolèt pou konte koloni yo. Koloni yo te bay nòt pou detèmine efikasite plating ak fraksyon ki siviv yo nan yon dòz RBE bay yo. Fraksyon siviv la se kantite koloni apre ekspoze RT, ak yon koreksyon pou efikasite plating la.

2.6. Modèl timè sinjenik (ektopik ak ortotopik).

Tout etid sou bèt yo te respekte tout règleman etik ki enpòtan pou rechèch sou bèt epi yo te apwouve pa komite bèt eksperimantal lopital nou an. Eksperyans bèt yo te fèt nan Sant Animal Laboratwa nan Chang Gung Memorial Hospital, ki te akòde akreditasyon konplè nan Asosyasyon an pou Evalyasyon ak Akreditasyon nan Laboratory Animal Care International (AAALAC). Nou itilize sourit C57BL/6J kòm modèl enplantasyon timè fwa a. Nan modèl timè ektopik ak ortotopik la, selil timè yo (Hepa 1–6 1 × 106 selil) yo te implante anba lar nan rejyon kwis dwat la epi/oswa enplante intraoperatively nan zòn dome fwa a. Pou egzamine repons timè fwa yo nan PT nan vivo, yo te bay timè 12 Gy (RBE) iradyasyon lokal PT 14 jou apre enplantasyon ak selil kansè Hepa1-6 (Figi 1b). Sourit kontwòl yo te sibi iradyasyon simulation. Pou adrese efè abskopal PT sou lame imunokonpetan ki gen timè, nou te implante selil kansè Hepa1-6 an menm tan nan kwis dwat la (timè prensipal) ak anwo do (segondè timè synchrone). Katòz jou apre enplantasyon timè, yo te administre PT ak 12 Gy (RBE) nan timè prensipal la men se pa nan timè segondè synchrone a. Lè sa a, nou obsève kwasans timè a (ki gen ladan timè prensipal iradyasyon ak synchrone unirradiated) nan pwen tan yo endike yo. Pou mennen ankèt sou efè anti-PD-L1 sou kontwòl timè lokal PT-medyatè ak efè abskopal, sourit ki gen timè yo te bay yon dòz entraperitoneal 250 µg antikò antiPD-L1 imedyatman apre iradyasyon PT ak chak 2 jou jouk nan fen. eksperyans yo. Antikò anti-sourit PD-L1 (B7-H1, 10F.9G2) te jwenn nan Bio X Cell (Liban, NH, USA).

benefis cistanche pou gason-ranfòse sistèm iminitè

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Enhance Immunity

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.7. MDSC Flow Cytometric analiz in vivo

MDSC yo karakterize pa ko-ekspresyon antijèn diferansyasyon myeloid-selil Gr1 ak CD11b. Se poutèt sa, nou te itilize yon antikò espesifik anti-Gr1, ki reyaji ak yon epitop komen sou Ly-6G ak Ly{-6C, ak yon antikò espesifik pou CD11b (BD Pharmingen) pou defini MDSC sourit kòm CD11b. + Gr1+ [23]. Anplis de sa, antijèn diferansyasyon myeloid Gr-1 konsiste de de epitop yo rekonèt pa anti-Ly-6G ak anti-Ly6C. Popilasyon CD11b+Gr-1+ MDSC yo te genyen de gwo gwoup: selil ki gen yon fenotip granulositik ki eksprime Ly-6G, ak selil ki gen yon fenotip monositik ki eksprime Ly6C. Yo te idantifye yon nouvo gwoup MDSC kòm MDSC monositik, ki defini kòm CD11b + Ly6G- nan sourit. Nou te fè analiz FACS ak imunofluoresans pou egzamine efè iradyasyon sou rekritman MDSC apre sourit yo te resevwa iradyasyon. FACS te pote soti sou sispansyon sèl-selil ki te prepare nan timè antye ak larat apre dijesyon ak imunostaining pou CD11b, Gr1, ak LY6G ak antikò monoklonal ki make fluoresans (BD PharMingen). Pousantaj MDSC te mezire atravè sitometri koule milti koulè ak antikò monoklonal yo mansyone anwo a. Yo te itilize antikò izotip espesifik kòm kontwòl negatif nan FACS.

2.8. Analiz estatistik

Yo te analize echantiyon yo lè l sèvi avèk tès t Student la. Done yo prezante kòm mwayèn ± erè estanda nan mwayen an (SD). Tout eksperyans selilè yo te gen twa replike byolojik pou chak kondisyon [24] epi yo te fèt omwen twa fwa poukont yo. Pou eksperyans yo an vivo, yo te itilize sis bèt pou chak gwoup, epi omwen de eksperyans endepandan yo te fèt. Yo te pran yon nivo pwobabilite p < 0.05 pou endike siyifikasyon estatistik sòf si yo di otreman.

3. Rezilta:

3.1. Repons HCC a PT Repons HCC

Selil kansè imen ak murin yo te ekspoze a yon sèl dòz PT nan 0, 3, 6, oswa 9 Gy (RBE), epi yo te egzamine ak konpare lanmò selil la nan 48 èdtan ak fraksyon siviv nan selil ki fòme koloni. ak foton-RT. Pa te gen okenn diferans enpòtan nan siviv selil nan RBE ekivalan ant PT ak foton-RT (Figi 2a, b). Fòmasyon p-H2AX se yon repons selilè pou kraze ADN doub-strand, ak prezans nan ekspoze calreticulin ak gwo gwoup mobilite Box 1 (HMGB1) sèvi kòm karakteristik yo nan lanmò selil iminojenisite RT-induit [25-27]. Jan yo montre nan Figi 2c, PT amelyore calreticulin ak ekspresyon HMGB1 ki asosye ak ogmante domaj ADN 24 èdtan apre RT. Yon etid anvan [28] rapòte ke foton-RT upregulated IL-6, ki te gen rapò ak rezistans nan HCC a RT. Done yo (Figi 2c, d) revele ke PT te kontwole nivo IL-6 nan selil kansè fwa yo analize lè l sèvi avèk IF ak RT PCR an tan reyèl nan 24 ak 48 èdtan apre PT. Pou plis karakterize si ogmantasyon nan IL-6 pa PT te lye ak aktivite pwomotè IL6, nou te fè tès aktivite luciferase lè l sèvi avèk selil HepG2 ak HuH7 ki estab transfekte ak yon vektè eksprime IL{32}} pwomotè konstwi (Figi 2e) . Done quantitative yo sijere ke PT ogmante aktivite pwomotè IL-6 nan 48 èdtan apre 6 Gy (RBE) konpare ak selil kontwòl yo.

3.2. Repons nan Tretman PT nan Lame Immunokonpetan an

Nan vivo, modèl timè bèt yo se zouti esansyèl nan predi efikasite nan nouvo estrateji antikansè. Nou itilize modèl timè sourit syngeneic pou mennen ankèt sou efè PT sou kontwòl timè HCC. Ki baze sou obsèvasyon aktivite timè atravè tès fluoresans tomografi molekilè (FMT) in situ ak mezi gwosè timè, nou te jwenn ke te gen siyifikativman diminye aktivite glikoz timè ak pi piti timè 12 jou apre PT konpare ak sham-RT (Figi 3a, b). Pou plis egzaminen mekanis ki responsab repons PT a, nou te fè analiz FACS ak imunofluoresans lè l sèvi avèk timè 3 jou apre PT oswa iradyasyon sham. Yo te rapòte ke ekspoze a calreticulin se yon endikatè iminojenik nan pi ba dòz RT-induit apoptoz, ak HMGB1 se lye nan pi wo dòz RT-induit lanmò selil [29]. Anplis de sa, IL-6 yo te rapòte jwe yon wòl nan modulasyon iminitè RT-induit [30]. Nou te deja rapòte ke ekspresyon IL-6 te ogmante pa foton RT e ke ogmantasyon IL6 te korelasyon ak repons radyasyon timè fwa [28]. Jan yo montre nan Figi 3c, d, PT ogmante lanmò selil timè ki asosye ak domaj ADN ogmante, ak ekspresyon IL6 ak HMGB1 konpare ak iradyasyon simulation.

3.3. Efè iminomodulatwa pwovoke pa PT

Yo te rapòte endiksyon an nan polarizasyon macrophage M2 yo se eleman kle imunosuppressive nan mikroanvironman timè iradyasyon [17,18]. Pou teste si PT amelyore diferansyasyon monosit nan selil M2, nou enkube monosit THP-1 nan etap repo a (M0) nan mwayen kondisyone a pou 72 èdtan pou polarizasyon M2. Lè sa a, nou analize nivo makè M2 nan makrofaj ki soti nan monosit pa kokilti nan sipènatant kilti avèk oswa san selil HuH7 iradyasyon PT 24 èdtan anvan fen polarizasyon makrofaj M2. Jan yo montre nan Figi 4a, adisyon selil kansè PT-iradyasyon nan kilti makrofaj la ogmante ekspresyon makè M2 CD163 nan makrofaj nan vitro. Nou plis fè rechèch sou wòl PT nan kapasite selil kansè yo pou pwovoke MDSC nan monosit nan san periferik donatè pa kokilti ak selil kansè avèk oswa san PT pou 48 èdtan. Selil CD14+HLA-DR- nan PBMC yo te idantifye yon nouvo gwoup MDSC yo. Figi 4b revele ke iradyasyon PT te asosye ak yon pi gwo frekans nan selil CD14+ HLA-DR-myeloid an konparezon ak kontwòl la. Anplis de sa, te gen yon ekspresyon ki pi wo nan iNOS, yon makè fonksyonèl nan MDSC-medyatè imunosuppression, nan sous-ansanm nan selil ki te kokultur ak selil kansè PT-iradyasyon (Figi 4c). Anplis de sa, CD163 konfime yo dwe yon makè fenotip nan makrofaj M2 ki ka itilize yo distenge makrofaj M2 ak M1. Jan yo montre nan Figi 4d,e, PT te mennen nan ogmantasyon nan selil CD163+ nan timè PT-iradyasyon ki asosye ak endiksyon nan MDSCs monositik nan sourit ki gen timè. Yo te rapòte ke RT deklanche lanmò selil iminitè ak amelyore enfiltrasyon selil iminitè yo. Pou plis teste wòl PT nan konsekans fonksyonèl selil kansè yo sou MDSC-medyatè repwesyon selil T, yo te evalye pwopagasyon selil T CD8+ triés an prezans selil timè avèk oswa san 6 Gy (RBE). ) PT iradyasyon. Done yo revele ke selil MDSC-CD11b + diminye pwopagasyon selil T, ak enkubasyon ak selil timè PT-iradyasyon ranvèse pwopagasyon CD8+ selil T apre eksitasyon (Figi 4f).

Figi 2. Repons HCC a PT nan vitro. Efè tretman PT sou lanmò selil HuH7 selil yo. (a) Fliyoresans aktive selil klasman ak yòd propidium ak Annexin V tach 48 èdtan apre PT pou dòz ki endike a (RBE), ak (b) fraksyon selil siviv pa tès klonojèn prezante ak rapò a nòmalize pa fraksyon nan siviv anba kondisyon kontwòl. Nimewo selil plak yo pou 0, 3, 6, ak 9 Gy (RBE) te 500, 1000, 1500, ak 3000 pou chak pi, respektivman. (c) Imunofluoresans pou domaj ADN PT-induit ak makè pou lanmò selil iminojenisite yo montre pa glisad reprezantan ak done quantitative (DAPI, ble; pH 2AX ak calreticulin, vèt; HMGB1 ak IL6, wouj). Aks y a reprezante chanjman relatif pliye nan ekspresyon pwoteyin sib yo. (d) Yo te egzamine nivo IL-6 atravè RT-PCR an tan reyèl 48 èdtan apre PT. (e) Transfè ki estab nan selil HepG2 ak HuH7 ak plasmid ki gen IL-6 pwomotè-repòtè konstwi. Valè yo reprezante kòm pliye aktivasyon nan aktivite luciferase nan plasmid repòtè a nan kondisyon ki endike a. Done yo prezante kòm mwayen ± erè estanda nan mwayen an. * p < 0.05

Figi 3. Repons nan tretman PT nan sourit imunokonpetan. Imaj reprezantan ak done quantitative yo te detèmine atravè analiz FMT nan absòpsyon glikoz nan 0, 3, oswa 12 jou avèk oswa san iradyasyon PT (a). Aks y-a reprezante rapò nòmalize pa valè timè a nan 0 jou ak iradyasyon simulation. Imaj reprezantan ak done quantitative nan foto timè (b) ki soti nan sourit pote timè sc 12 jou apre 12 Gy (RBE) PT oswa iradyasyon sham yo montre. Aks y a reprezante chanjman relatif pliye nan gwosè timè nan moman ki endike apre PT. Domaj ADN pa IF (c) ak lanmò selil pa FACS (d) te evalye nan 3 jou apre PT. Aks y-a se chanjman relatif pliye nan ekspresyon pwoteyin sib ak pousantaj lanmò selil la nan 3 jou apre PT. Done yo prezante kòm mwayen ± erè estanda nan mwayen an. * p < 0.05

3.4. Wòl PT nan ekspresyon ligand lanmò selil pwograme 1 (PD-L1)

PD-L1 se yon detèminan kritik nan balans nan mikro anviwònman timè iminitè a [31]. PT ogmante ekspresyon PD-L1 nan selil timè fwa yo, e nivo ekspresyon an te gen rapò pozitivman ak dòz RBE PT nan vitro (Figi 5a, b). Pou plis valide efè PT sou PD-L1 nan vivo, nou egzamine nivo ekspresyon PD-L1 nan timè HCC murin lè l sèvi avèk IF ak FACS. Done yo nan Figi 5c,d revele siyifikativman ogmante ekspresyon PD-L1 nan timè 3 jou apre PT. Nou te egzamine tou si PT te regle ekspresyon PD-L1 nan MDSC yo lè l sèvi avèk selil myeloid CD11b + ki soti nan timè. Rezilta yo te endike ke PT ogmante ekspresyon PD-L1 nan selil CD11b + yo klase (Figi 5e, f).

3.5. Efè PD-L1 sou repons HCC a PT In Vivo

Pou detèmine si PD-L1 jwe yon wòl nan radyosansiblite timè fwa yo nan PT nan lame imunokonpetan yo, yo te administre RT lokal ak PT 12 Gy (RBE) nan timè implante anba lar nan sourit avèk oswa san tretman anti-PD-L1. Jan yo montre nan Figi 6a-c, anti-PD-L1 ogmante efè anpèchman timè PT-induit ki asosye ak pwopagasyon selil diminye ak ogmante lanmò selil apre iradyasyon. Anplis de sa, pou valide efè regilasyon anti-PD-L1 sou microenvironment timè iminitè apre PT, nou egzamine repons iminitè a lè l sèvi avèk yon modèl timè ortotopik murin HCC. Done yo montre ke anti-PD-L1 diminye rekritman MDSC ak ogmante CD3+ TIL ki asosye ak pi piti timè konpare ak PT pou kont li (Figi 6d-f)

3.6. Blokaj PD-L1 Amelyore Efè Abskopal sou Kansè Fwa apre PT

Yo te rapòte radyasyon pwovoke efè abscopal sou sit kansè byen lwen, ki pa trete ki anplifye pa itilizasyon dwòg imunomodulateur [32-34]. An konsekans, nou te egzamine plis efè abscopal pwovoke pa PT sou timè fwa ak enpak tretman konbine avèk antikò anti-PD-L1 la. Jan yo montre nan Figi 7a, b ak Figi Siplemantè S1, aplikasyon PT lokal nan timè a pou kont li te pwovoke pi piti timè ak metabolis glikoz ki pi ba nan timè iradyasyon sou kwis dwat la, men pa te montre okenn anpèchman timè siyifikatif sou timè segondè unirradiated nan do anwo a. , konpare ak gwoup la sham-RT. Tretman konbine avèk antikò anti-PD-L1 imedyatman apre PT amelyore efè tumorisid nan jaden PT-iradyasyon an e li te lakòz regression timè segondè deyò jaden an iradyasyon. Analiz de selil iminitè ki enfiltre timè yo te montre ke anti-PD-L1 atenue rekritman MDSC, ogmante CD3+ TIL, ak diminye pwopagasyon selil nan timè san irradiation (Figi 7c, d) sourit ki te resevwa PT lokal nan timè prensipal yo. Rezilta sa yo sijere ke anti-PD-L1 amelyore repons iminitè antitumoral la ak ogmante efè abskop nan lame iminokonpetan apre iradyasyon lokal PT.

Figi 4. Repons iminitè ki asosye ak PT. Ekspresyon makè CD163 nan selil yo nan fen polarizasyon makwofaj M2 yo te analize atravè FACS (a) (I: kontwòl; II: + surnatant kilti selil kansè yo; III: + selil kansè yo; IV: +6 Gy (RBE) Sipènatant kilti selil kansè PT-iradyasyon; V: +6 Gy (RBE) selil kansè PT-iradyasyon). Pousantaj selil CD14+HLA-DR− ki soti nan PBMC yo enkubate avèk oswa san selil HuH7 iradyasyon ak 0, 3, oswa 6 Gy (RBE) pou 48 èdtan yo te analize (b), epi ekspresyon an. nan iNOS nan selil CD14+HLA-DR− ki klase yo te analize atravè IF (DAPI, ble; iNOS, wouj) (c). Kantite selil CD163+ nan timè iradyasyon 12 jou apre yo te egzamine PT atravè IF (DAPI, ble; CD163, wouj) (d), epi yo te evalye efè iradyasyon PT sou rekritman monositik-MDSC atravè FACS ( e). Anplis de sa, pousantaj pwopagasyon selil T yo te egzamine atravè FACS avèk oswa san enkubasyon ak selil kansè PT-iradyasyon. Yo montre imaj reprezantatif ak done quantitative (f). Tretman endike CD8+ selil T ak pèl eksitasyon anti-CD3/CD28 nan prezans MDSC konbine avèk selil kansè avèk oswa san iradyasyon PT. Done yo prezante kòm mwayen ± erè estanda nan mwayen an. * p < 0.05.

Figi 5. Efè PT sou ekspresyon PD-L1. Nivo PD-L1 yo te evalye lè l sèvi avèk (a) IF (DAPI, ble; PD-L1, vèt), (b) tach FACS pou selil kansè fwa moun ak murin nan 48 èdtan apre PT in vitro ak (c) FACS, ak (d) IF pou timè fwa murin nan moman ki endike apre PT pou 12 Gy (RBE) nan vivo. Aks y a se chanjman relatif pliye nan ekspresyon PD-L1 nan kondisyon ki endike apre PT. Done yo prezante kòm mwayen ± erè estanda nan mwayen an. * p < 0.05. Anplis de sa, ekspresyon PD-L1 nan selil murin CD11b + apre iradyasyon PT yo te evalye atravè (e) IF ak (f) analiz FACS (selil CD11b +, tach ble)

Figi 6. Efè PD-L1 sou repons HCC a PT nan vivo. (a) Efè terapi anti-PD-L1 sou reta kwasans timè a. Aks y a se chanjman relatif pliye nan gwosè timè lar ki pwovoke pa anti-PD-L1 apre PT. Done reprezante mwayen eksperyans yo, * p < {{10}}.05. (b) Efè in vivo apoptoz tretman-pwovoke jan yo evalye lè l sèvi avèk FACS ak tach Annexin V-PI. Aks y a se chanjman relatif pliye nan pousantaj lanmò selil apre PT. Done yo prezante kòm mwayen ± erè estanda nan mwayen an. * p < 0.05. (c) Imunohistochimi pou domaj ADN RT-pwovoke ak Ki-67 nan timè nan moman yo endike apre PT pou 12 Gy (RBE). (d) Yo te evalye efè terapi anti-PD-L1 sou anpèchman timè nan yon modèl timè ortotopik. Imaj reprezantatif ak done quantitative yo montre 12 jou apre iradyasyon lokal PT oswa iradyasyon simulation. Aks y a se chanjman relatif pliye nan gwosè timè fwa a. Done reprezante mwayen eksperyans yo, * p < 0.05. (e) Kantite selil ki67+, CD{3+TIL, ak CD11b+ nan timè iradyasyon 12 jou apre yo fin egzamine PT lè l sèvi avèk IF (DAPI, ble; ki-67 ak CD3, vèt). ; CD11b, wouj). (f) Efè anti-PD-L1 konbine avèk iradyasyon PT sou rekritman MDSC yo te evalye lè l sèvi avèk FACS.

Figi 7. Efè abscopal sou kansè nan fwa apre PT. Kwasans timè san irradiasyon sou do anwo a te detèmine atravè analiz FMT nan absorption glikoz (a) ak foto timè (b) nan moman endike soti nan sourit ki te resevwa PT pou 12 Gy (RBE) nan timè prensipal la sou kwis dwat la sèlman ( PT (+): sourit yo te resevwa 12 Gy (RBE) nan timè prensipal la sou kwis dwat la, men se pa nan timè segondè a sou do anwo a). Yo montre imaj reprezantatif ak done kantite timè ki pa irradie nan 0, 3, ak 12 jou apre iradyasyon PT avèk oswa san terapi anti-PD-L1. Aks y-a reprezante chanjman relatif pliye nan valè FMT ak gwosè timè nan moman ki endike apre PT. Anplis de sa, yo montre imaj reprezantatif nivo ki-67 ak enfiltrasyon selil CD11b+ ak selil CD3+ nan timè segondè ki pa irradie 12 jou apre PT lokal ki itilize IF (DAPI, ble; ki{{16}). }} ak CD3, vèt; CD11b, wouj) (c). Akimilasyon MDSCs (d) nan timè segondè unirradiated la te analize lè l sèvi avèk sikometri koule. Aks y-a se chanjman relatif pliye. Done reprezante mwayen eksperyans yo, * p < 0.05

4. Diskisyon

Rezilta etid sa a montre ke pèt selil ki fòme koloni pwovoke pa PT depann de dòz la e menm jan ak sa ki te koze pa iradyasyon foton. Nivo domaj ADN ki pa repare ki te koze pa radyasyon se yon gwo detèminasyon repons radyasyon espesifik tisi a. Done nou yo revele ke lanmò selil la pwovoke pa PT korelasyon ak ogmantasyon nan nivo makè domaj ADN yo. Plizyè sitokin ki asosye ak timè yo rapòte ke yo dwe reglemante pa iradyasyon epi yo kapab rekrite ak polarize subsets iminitè nan mikroanvironman timè a [35,36]. Nou te deja rapòte ke ekspresyon IL-6 te ogmante pa foton RT e ke ogmantasyon nan IL6 te gen rapò ak repons nan radyasyon nan timè fwa [28]. Etid preklinik yo montre ke gen yon règleman diferans nan faktè enflamatwa apre PT kont radyasyon foton, ki gen ladan pou IL -6 [6,7,37]. Nou montre lè l sèvi avèk eksperyans selilè ke iradyasyon PT ogmante nivo ekspresyon IL-6 nan yon fason ki depann de dòz la. Se reyaksyon timè a nan tretman enfliyanse pa pwopagasyon selil timè ak mikroanvironman timè a. Sèvi ak modèl sourit se yon estrateji pi bon pou evalye repons tretman an. Dapre nou konnen, kèk seri preklinik te prezante repons timè fwa a PT jiska kounye a. Done an vivo sou lanmò selil timè ak reta kwasans timè pwovoke pa PT nan sourit ki gen timè fwa te demontre nan etid prezan an. Anplis radyosansibilite intrinsèque selilè, repansyon timè apre radyoterapi in vivo ka afekte anpil pa plizyè faktè enflamatwa ak stromal [38,39]. Yon varyete de efè en iminitè ki gen rapò ak RT pwovoke, ki gen ladan efè imunostimulatwa ak imunosuppressive. RT stimul iminite antikansè atravè endiksyon lanmò selil imunojèn, lage nouvo antijèn nan eleman sistèm iminitè a, ki mennen nan amelyore priming ak aktivasyon selil T efèktè yo. Nan lòt men an, RT mennen nan efè imunosuppressive, tankou rekritman nan MDSCs nan mikwo-anviwònman an iradyasyon [39,40]. Rekritman MDSC yo se yon detèminan nan mikro-anviwònman timè imunosuppressive apre RT. MDSC yo te parèt kòm pi gwo regilatè nan repons iminitè nan kansè ak lòt kondisyon patolojik. Prèv sipòte kontribisyon kle nan MDSC nan pwogresyon timè. Nou te deja rapòte ke ogmante MDSC ta ka deklanche pa RT e ke ogmantasyon an te asosye ak rezistans RT nan yon modèl bèt HCC [28]. Etid la prezante demontre ke PT mennen nan aktivasyon an nan rekritman MDSC ki asosye ak endiksyon nan MDSCs monositik nan sourit ki gen timè. Yon nouvo gwoup MDSC yo idantifye kòm MDSC monositik defini kòm CD14+HLA-DR-monosit ki soti nan san periferik pasyan yo ak CD11b + Ly6G- nan sourit [20,23,41]. Ekspresyon iNOS kòm yon makè fonksyonèl nan anpèchman selil T se estanda lò pou evalyasyon fonksyon MDSC [42]. Eksperyans ki itilize enkubasyon PBMC ak selil kansè yo te montre ke PT te ogmante kapasite selil kansè yo pou pwovoke MDSC nan monosit yo epi ogmante ekspresyon iNOS nan sou-ansanm selil yo. Anplis de sa, done nou yo revele ke kokilti ak selil CD11b + diminye pwopagasyon selil T, ak kansè PT-iradyasyon diminye kapasite sipresyon selil CD11b + sou pwopagasyon selil T nan eksperyans kokilti.

Yo rapòte linyon selil myeloid la ki konstitye yon rezo selil iminitè ki nan pifò pasyan kansè yo epi ki anpeche jenerasyon iminite antitumoral yo. Makwofaj, selil iminitè abondan nan mikroanvironman timè a, se regilatè enpòtan nan enflamasyon kwonik. Li te sijere ke makrofaj yo ka polarize nan direksyon fenotip M2 a, ki kontribye nan mikwo-anviwònman imunosuppressive [43]. Selil mononikleyè nan timè gen anpil chans egziste nan divès faz diferansyasyon soti nan monosit / monositik-MDSCs nan makrofaj M2 ki asosye ak timè. Rezo sa a ant MDSC yo ak makrofaj M2 ki asosye ak timè revele ke M2 ka distenge ak MDSC monositik. Prèv sijere ke RT jwe yon wòl regilasyon nan makrofaj ak polarizasyon M1 / ​​M2 pou modile repons iminitè a [44,45]. Nou te montre ke kokilti ak selil PT-iradyasyon te lakòz ogmante ekspresyon de makè M2 nan vitro ak timè PT-iradyasyon nan vivo. Aktivasyon an nan repons iminitè antikansè se kritik nan efikasite nan RT.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

Plizyè mekanis iminitè yo enpòtan nan devlopman ak pwogresyon HCC ak korelasyon ak pronostik. Inibitè Checkpoint ki vize PD1 ak PDL1 yo aktif, tolerab, ak klinikman benefisye kont HCC avanse [46]. PD-L1, yon gwo biomarker selilè, jwe yon wòl nan evazyon iminitè, ki gen ladan anpèchman nan siveyans iminitè T-selil medyatè ak règleman nan polarizasyon macrophage M2 [13,31,47]. Yo te obsève regilasyon aks PD-1/PD-L1 pou siprime aksyon sitotoksik selil T yo, ki ka lakòz repons iminitè lame ki evite timè yo ak touye selil timè enkonplè apre iradyasyon. PD-L1 te lajman lokalize nan selil ematopoyetik, ki gen ladan selil T, makrofaj, ak selil timè. PD-1/PD-L1 se yon pòs iminitè remakab ki mennen nan anergy selil T. Antikò PD-L1, yon blokaj iminitè, yo te apwouve pou terapi adjuvant nan kèk kansè ak kòm yon iminoterapi pwomèt pou pasyan HCC avanse [48,49]. Inibitè PDL1 yo se youn nan kolòn vètebral terapi sistemik nan pratik klinik oswa sou devlopman pou HCC. Anplis de sa, efè imunosuppressive RT-induit yo revele potansyèl pou konbine avèk siksè radyasyon ak divès fòm imunoterapi pou elimine efè imunosuppressive sa yo. MDSC yo ka kontribye nan rezistans pasyan an nan anpèchman iminitè pòs. Nou demontre ke PT ogmante ekspresyon PD-L1 nan timè ak MDSC nan yon fason ki depann de dòz nan vitro ak nan vivo. Efè imunosuppressive RT-pwovoke yo revele potansyèl pou konbine avèk siksè radyasyon ak divès fòm imunoterapi pou elimine efè imunosuppressive sa yo. Rechèch preklinik yo montre ke konbinezon foton RT ak imunoterapi montre sinèji terapetik pou amelyore kontwòl timè [15]. Kòm nou konnen, konbinezon an nan RT ak imunoterapi se toujou nan etap preliminè li yo, epi pa gen okenn espesifikasyon optimal nan dòz RT, kalite RT, oswa sekans pou RT ak imunoterapi. Pou klarifye pwoblèm sa a nan iradyasyon PT konbine avèk imunoterapi, nou konbine terapi anti-PD-L1 ak iradyasyon PT nan timè fwa nan modèl timè syngeneic. Nou te jwenn ke konbinezon an ak anti-PD-L1 antikò sansibilize kansè nan fwa nan iradyasyon PT, jan yo demontre pa yon timè ki pi piti ki asosye ak lanmò selil timè ogmante. Anplis de sa, terapi anti-PD-L1 anpeche rekritman MDSC ak ogmante filtraj selil T CD3+ nan timè PT-iradyasyon.

RT se klasikman konsidere kòm yon terapi lokal, touye selil timè atravè domaj intrinsèques ADN nan jaden an radyasyon. Anplis de sa, repons abskopal nan radyasyon se yon fenomèn byen etabli kote timè deyò yon jaden radyasyon tou reponn a tretman. Efè abscopal la panse yo dwe iminitè-medyatè. Yon pòsyon nan selil kansè yo ki nan yon timè ap mouri atravè lanmò selil iminojenik lè yo itilize radyasyon nan dòz ki ka geri. Lanmò selil timè RT-induit la asosye ak jenerasyon siyal molekilè espesifik ak plis antijèn yo prezante bay eleman sistèm iminitè a. Yo te rapòte ke RT ka deklanche yon efè abscopal ki gen rapò ak iminitè, ki vle di ke RT pa sèlman gen yon efè tumorisid sou timè sib la, men tou li gen yon efè antitumoral sou sit byen lwen, ki pa trete nan kansè [32,50,51]. Pami faktè RT-pwovoke yo, kapasite radyasyon an pou ankouraje rekonesans selil kansè yo pa selil T yo gen anpil chans pou gen yon enpòtans patikilye pou efè abscopal la. Efè sa a asosye ak lanmò selil timè pou ankouraje iminite antitumoral ki ka anplifye lè yo sèvi ak ajan imunomodulateur yo. Anplis de sa, pembrolizumab pwodui yon pousantaj 15-20% nan remisyon objektif ki asosye ak siviv pwolonje nan HCC [46]. Yon pwen enpòtan konsènan inibitè pòs se efikasite ak sekirite yo. Li klè ke imunoterapi pa bay benefis pou tout pasyan yo. Ki jan yo simonte rezistans timè a nan imunoterapi se yon pwoblèm enpòtan. Kòz potansyèl rezistans timè yo enkli rezistans intrinsèques ak devlopman antikò anti-dwòg ki netralize aktivite imunoterapi. Pou jwenn yon eksitasyon iminitè fò, diferan terapi lokal yo ka konbine sekans oswa ansanm ak imunoterapi sistemik. Iminoterapi gen anpil chans pou fè sinèrji ak entèvansyon lokal nan HCC. HCC se souvan miltifokal ak zòn potansyèl prekansè devlope kòm metachrone toupatou. Isit la, nou plis egzamine si konbinezon an nan PT ak anti-PD-L1 amelyore efè a abscopal nan PT ogmante kontwòl la nan timè fwa metachrone. Done nou yo revele ke konbinezon an nan PT ak anti-PD-L1 pwovoke pi piti gwosè timè nan timè segondè unirradiated yo konpare ak sa yo pwovoke pa swa PT oswa anti-PD-L1 pou kont li. Done nou yo montre tou ke konbinezon an ak anti-PD-L1 te asosye ak TILs ogmante ak rekritman MDSC atenue nan timè byen lwen unirradiated nan sourit ki te resevwa PT lokal yo. Rezilta sa yo sijere ke anti-PD-L1 ogmante iminite anti-tumeur, ki te medyatè ogmante aktivite prensipal yo pou touye timè yo ak efè abskop nan sourit ki gen timè ki te resevwa iradyasyon lokal PT.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

5. Konklizyon

Rezon ki fè pou konbine radyoterapi ak imunoterapi se ke radyasyon ta ka pwodui iminite sinèrjetik antitumoral ak ke imunoterapi simonte repons yo repwesyon iminitè nan mikroanvironman timè iradyasyon an. An rezime, nou sijere ke anplis efè byolojik sou selil kansè yo, PT tou gen yon efè modulation iminitè sou mikroanvironman timè a. Done nou yo revele ke anti-PD-L1 pwovoke iminite antikansè epi imedyatman ogmante repons timè prensipal ak byen lwen nan iradyasyon PT. Aplikasyon an nan anti-PD-L1 konbine avèk PT ta ka yon estrateji pwomèt pou tretman HCC.

Referans

1. Bray, F.; Ferlay, J.; Soerjomataram, mwen .; Siegel, R.-L.; Torre, L.-A.; Jemal, A. Estatistik mondyal kansè 2018: GLOBOCAN estimasyon ensidans ak mòtalite atravè lemond pou 36 kansè nan 185 peyi. CA Cancer J. Clin. 2018, 68, 394–424. [CrossRef]

2. Chuong, M.; Kaiser, A.; Molitoris, J.; Mendez Romero, A.; Apisarnthanarax, S. Terapi pwoton pou kansè nan fwa. J. Gastrointest. Oncol. 2020, 11, 157–165. [CrossRef]

3. Yoo, G.-S.; Yu, J.-I.; Park, H.-C. Terapi proton pou karsinom epatoselilè: konesans aktyèl ak pèspektiv nan lavni. Mondyal J. Gastroenterol. 2018, 24, 3090–3100. [CrossRef]

4. Yuan, T.-Z.; Zhan, Z.-J.; Qian, C.-N. Nouvo fwontyè nan terapi pwoton: Aplikasyon nan kansè. Kominote kansè. 2019, 39, 61. [CrossRef] [PubMed]

5. Deycmar, S.; Faccin, E.; Kazimova, T.; Knobel, P.-A.; Telarovic, I.; Tschanz, F.; Waller, V.; Winkler, R.; Yong, C.; Zingariello, D. relatif efikasite byolojik iradyasyon pwoton nan depandans reparasyon domaj ADN. Br. J. Radiol. 2020, 93, 20190494. [CrossRef] [PubMed]

6. Luhr, A.; von Neubeck, C.; Krause, M.; Troost, EGC Efikasite Byolojik relatif nan terapi travès pwoton-Konesans aktyèl ak defi nan lavni. Clin. Transl. Radye. Oncol. 2018, 9, 35–41. [CrossRef]

7. Girdhani, S.; Sachs, R.; Hlatky, L. Efè byolojik nan radyasyon pwoton: sa nou konnen ak sa nou pa konnen. Radye. Res. 2013, 179, 257–272. [CrossRef]

8. Van Limbergen, E.-J.; De Ruysscher, D.-K.; Olivo Pimentel, V.; Marcus, D.; Berbee, M.; Hoeben, A.; Rekers, N.; Theys, J.; Yaromina, A.; Dubois, L.-J.; et al. Konbine radyoterapi ak imunoterapi: sot pase a, prezan an, ak tan kap vini an. Br. J. Radiol. 2017, 90, 20170157. [CrossRef]

9. Shabason, J.-E.; Minn, A.-J. Blokaj Radyasyon ak Iminitè: Soti nan Ban rive nan Klinik. Semin. Radye. Oncol. 2017, 27, 289–298. [CrossRef] [PubMed]

10. Lu, C.; Rong, D.; Zhang, B.; Zheng, W.; Wang, X.; Chen, Z.; Tang, W. Pèspektiv aktyèl sou mikwo-anviwònman timè imunosuppressive nan karsinom epatoselilè: defi ak opòtinite. Mol. Kansè 2019, 18, 130. [CrossRef]

11. Baird, J.-R.; Monjazeb, A.-M.; Shah, O.; McGee, H.; Murphy, W.-J.; Crittenden, M.-R.; Gough, M.-J. Stimule iminite natirèl pou amelyore kontwòl timè ki soti nan terapi radyasyon. Ent. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2017, 99, 362–373. [CrossRef]

12. Bernstein, M.-B.; Krishnan, S.; Hodge, J.-W.; Chang, J.-Y. Iminoterapi ak radyoterapi ablatif estereyotaktik (ISABR): Yon apwòch gerizon? Nat. Rev Clin. Oncol. 2016, 13, 516–524. [CrossRef] [PubMed]

13. Pilones, K.-A.; Vanpouille-Box, C.; Demaria, S. Konbinezon radyoterapi ak inibitè pòs iminitè. Semin. Radye. Oncol. 2015, 25, 28–33. [CrossRef] [PubMed]

14. Ishihara, D.; Pop, L.; Takeshima, T.; Iyengar, P.; Hannan, R. Raison ak prèv pou konbine terapi radyasyon ak imunoterapi pou tretman kansè. Immunol kansè. Immunother. 2017, 66, 281–298. [CrossRef]

15. Lee, Y.-H.; Tai, D.; Jip, C.; Choo, S.-P.; Chew, V. Imunoterapi konbinasyonèl pou karsinom epatoselilè: Radyoterapi, blokaj iminitè ak pi lwen. Devan. Imunol. 2020, 11, 568759. [CrossRef] [PubMed]

16. Choi, C.; Yoo, G.-S.; Cho, W.-K.; Park, H.-C. Optimize radyoterapi ak blokaj iminitè nan karsinom epatoselilè. Mondyal J. Gastroenterol. 2019, 25, 2416–2429. [CrossRef]

17. Genin, M.; Clement, F.; Fattaccioli, A.; Raes, M.; Michiels, C. M1 ak M2 makwofaj ki sòti nan selil THP-1 diferan modil repons selil kansè yo nan etoposid. BMC Cancer 2015, 15, 577. [CrossRef] [PubMed]

18. Guo, F.; Feng, Y.-C.; Zhao, G.; Zhang, R.; Cheng, Z.-Z.; Kong, W.-N.; Wu, H.-L.; Xu, B.; Lv, X.; Ma, XM timè-asosye CD163(+) M2 enfiltrasyon makwofaj se trè ki asosye ak ekspresyon PD-L1 nan kansè nan matris. Kansè Manag. Res. 2020, 12, 5831–5843. [CrossRef]

19. Cassetta, L.; Non, R.; Swierczak, A.; Sugano, G.; Smith, H.; Wiechmann, L.; Pollard, J.-W. Izolasyon sourit ak makwofaj ki asosye ak timè imen. Adv. Eksp. Med. Biol. 2016, 899, 211–229.

20. Chikamatsu, K.; Sakakura, K.; Toyoda, M.; Takahashi, K.; Yamamoto, T.; Masuyama, K. Aktivite imunosuppressive nan selil CD14+ HLA-DR- nan karsinom selil squamous nan tèt ak kou. Kansè Sci. 2012, 103, 976–983. [CrossRef]

21. Chen, M.-F.; Kuan, F.-C.; Yen, T.-C.; Lu, M.-S.; Lin, P.-Y.; Chung, Y.-H.; Chen, W.-C.; Lee, K.-D. IL-6-stimile CD11b+ CD14+ HLA-DR- selil suppressor ki sòti nan myeloid yo asosye ak pwogresyon ak move pronostik nan karsinom selil squamous nan èzofaj la. Oncotarget 2014, 5, 8716–8728. [CrossRef]

22. Paganetti, H. Valè relatif efikasite byolojik (RBE) pou terapi gwo bout bwa pwoton. Varyasyon kòm yon fonksyon nan pwen final byolojik, dòz, ak transfè enèji lineyè. Phys. Med. Biol. 2014, 59, R419–R472. [CrossRef] [PubMed]

23. Bronte, V.; Brandau, S.; Chen, S.-H.; Colombo, M.-P.; Frey, A.-B.; Greten, T.-F.; Mandruzzato, S.; Murray, P.-J.; Ochoa, A.; Ostrand Rosenberg, S.; et al. Rekòmandasyon pou nomenklati selil suppressor ki sòti nan myeloid ak estanda karakterizasyon yo. Nat. Komin. 2016, 7, 12150. [CrossRef]

24. Curtis, M.-J.; Bond, R.-A.; Spina, D.; Ahluwalia, A.; Alexander, SPA; Giembycz, M.-A.; Gilchrist, A.; Hoyer, D.; Insel, P.-A.; Izzo, A.-A. Konsepsyon eksperimantal ak analiz ak rapò yo: Nouvo konsèy pou piblikasyon nan BJP. Br. J. Pharmacol. 2015, 172, 3461–3471. [CrossRef]

25. Haikerwal, S.-J.; Hagekyriakou, J.; MacManus, M.; Martin, O.-A.; Haynes, N.-M. Bati iminite kont kansè ak terapi radyasyon. Kansè Lett. 2015, 368, 198–208. [CrossRef] [PubMed]

26. Yuan, S.; Liu, Z.; Xu, Z.; Liu, J.; Zhang, J. Gwoup mobilite bwat 1 (HMGB1): Yon regilatè pivotal nan maladi ematopoyetik. J. Hematol. Oncol. 2020, 13, 91. [CrossRef] [PubMed]

27. Suzuki, Y.; Mimura, K.; Yoshimoto, Y.; Watanabe, M.; Ohkubo, Y.; Izawa, S.; Murata, K.; Fujii, H.; Nakano, T.; Kono, K. Immunogenic timè selil lanmò pwovoke pa chimyoradyoterapi nan pasyan ki gen karsinom selil squamous nan èzofaj. Kansè. Res. 2012, 72, 3967–3976. [CrossRef]

28. Chen, M.-F.; Hsieh, C.-C.; Chen, W.-C.; Lai, C.-H. Wòl interleukin-6 nan repons radyasyon timè fwa yo. Ent. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2012, 84, e621–e630. [CrossRef] [PubMed]

29. Liao, Y.; Liu, S.; Fu, S.; Wu, J. HMGB1 nan radyoterapi: yon siyal de-tèt reglemante radyosansiblite timè ak iminite. Oncol. Sib Ther. 2020, 13, 6859–6871. [CrossRef]

30. Guo, Y.; Xu, F.; Lu, T.; Duan, Z.; Zhang, Z. Interleukin-6 chemen siyal nan terapi vize pou kansè. Trete kansè. Rev. 2012, 38, 904–910. [CrossRef]

31. Afreen, S.; Dermime, S. Molekil iminoinhibitè B7-H1 la kòm yon sib potansyèl nan kansè: Touye anpil zwazo ak yon sèl kout wòch. Hematol. Oncol. Tij. Selil. La. 2014, 7, 1–17. [CrossRef]

32. Formenti, S.-C.; Demaria, S. Terapi radyasyon pou konvèti timè a nan yon vaksen in situ. Ent. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2012, 84, 879–880. [CrossRef]

33. Rodriguez-Ruiz, M.-E.; Vitale, I.; Harrington, K.-J.; Melero, I.; Galluzzi, L. Enpak imunolojik nan siyal lanmò selil kondwi pa radyasyon sou mikroanvironman timè a. Nat. Imunol. 2020, 21, 120–134. [CrossRef]

34. Liu, Y.; Dong, Y.; Kong, L.; Shi, F.; Zhu, H.; Yu, J. Abscopal efè radyoterapi konbine avèk inibitè pòs iminitè. J. Hematol. Oncol. 2018, 11, 104. [CrossRef] [PubMed] 35. Hill, R.-P. Chanje paradigm nan repons timè a iradyasyon. Br. J. Radiol. 2017, 90, 20160474. [CrossRef]

36. Mukherjee, S.; Chakraborty, A. Radyasyon-induced bystander fenomèn: Insight ak enplikasyon nan radyoterapi. Ent. J. Radiat. Biol. 2019, 95, 243–263. [CrossRef] [PubMed]

37. Gameiro, S.-R.; Malamas, A.-S.; Bernstein, M.-B.; Tsang, K.-Y.; Vassantachart, A.; Sahoo, N.; Tayè, R.; Pidikiti, R.; Guha, C.-P.; Hahn, S.-M.; et al. Selil timè ki siviv ekspoze a pwoton oswa radyasyon foton yo pataje yon siyati modilasyon iminojenik komen, ki rann yo pi sansib pou touye moun ki gen mwayen selil T yo. Ent. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2016, 95, 120–130. [CrossRef]

38. Solèy, Y.; Nelson, P.-S. Chemen molekilè: Ki enplike repons domaj nan mikroanviwònman nan rezistans terapi kansè. Clin. Kansè Res. 2012, 18, 4019–4025. [CrossRef] [PubMed]

39. Kozin, S.-V.; Kamoun, W.-S.; Huang, Y.; Dawson, M.-R.; Jain, R.-K.; Duda, D.-G. Rekritman nan myeloid men pa selil précurseur andothelial fasilite repwann timè apre iradyasyon lokal yo. Kansè Res. 2010, 70, 5679–5685. [CrossRef] [PubMed]

40. Kao, J.; Ko, E.-C.; Eisenstein, S.; Sikora, A.-G.; Fu, S.; Chen, S.-H. Vize selil iminitè ki derive myeloid nan nkoloji. Kritik. Rev Oncol. Hematol. 2011, 77, 12–19. [CrossRef]

41. Hoechst, B.; Ormandy, LA; Ballmaier, M.; Lehner, F.; Krüger, C.; Manns, Deputy; Greten, TF; Korangy, F. Yon nouvo popilasyon myeloid ki sòti nan selil suppressor nan pasyan karsinom epatoselilè pwovoke CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) selil T. Gastroenterology 2008, 135, 234-243. [CrossRef] [PubMed]

42. Hsu, C.-Y.; Lin, Y.-C.; Chang, L.-Y.; Huang, S.-K.; Huang, C.-H.; Yang, C.-K.; Huang, C.-T.; Lin, C.-Y. Wòl ki ka geri nan Enduzibl Nitric Oxide Synthase eksprime Myeloid-Derivé Selil Sipresyon nan Acetaminophen-induit Murine Echèk Fwa. Devan. Imunol. 2020, 11, 574839. [CrossRef]

43. Pollard, J.-W. Makwofaj ki edike timè yo ankouraje pwogresyon timè ak metastaz. Nat. Rev. Kansè 2004, 4, 71–78. [CrossRef] [PubMed]

44. Wang, L.-X.; Zhang, S.-X.; Wu, H.-J.; Rong, X.-L.; Guo, J. M2b polarizasyon makrofaj ak wòl li yo nan maladi. J. Leukoc. Biol. 2019, 106, 345–358. [CrossRef] [PubMed]

45. Chiang, C.-S.; Fu, S.-Y.; Wang, S.-C.; Yu, C.-F.; Chen, F.-H.; Lin, C.-M.; Hong, J.-H. Iradyasyon ankouraje yon fenotip makrofaj m2 nan ipoksi timè. Devan. Oncol. 2012, 2, 89. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Sangro, B.; Sarobe, P.; Hervás-Stubbs, S.; Melero, I. Avans nan imunoterapi pou karsinom epatoselilè. Nat. Rev Gastroenterol. Hepatol. 2021, 18, 525–543. [CrossRef]

47. Lu, D.; Ni, Z.; Liu, X.; Feng, S.; Dong, X.; Shi, X.; Zhai, J.; Mai, S.; Jiang, J.; Wang, Z.; et al. Beyond T Cells: Konprann wòl PD-1/PD-L1 nan makwofaj ki asosye ak timè yo. J. Immunol. Res. 2019, 2019, 1919082. [CrossRef]

48. Cheng, A.-L.; Hsu, C.; Chan, S.-L.; Choo, S.-P.; Kudo, M. Defi terapi konbinezon ak inibitè pòs iminitè pou karsinom epatoselilè. J. Hepatol. 2020, 72, 307–319. [CrossRef]

49. Hack, S.-P.; Spahn, J.; Chen, M.; Cheng, A.-L.; Kaseb, A.; Kudo, M.; Lee, HC; Yopp, A.; Chow, P.; Qin, S. IMbrave 050: Yon jijman Faz III nan atezoli zumab plis bevacizumab nan karsinom epatoselilè ki gen gwo risk apre reseksyon gerizon oswa ablation. Future Oncol. 2020, 16, 975–989. [CrossRef]

50. Park, S.-S.; Dong, H.; Liu, X.; Harrington, S.-M.; Krco, C.-J.; Gram, M.-P.; Mansfield, A.-S.; Furutani, K.-M.; Olivier, K.-R.; Kwon, E.-D. PD-1 Limite Efè Abskopal Radyoterapi Pwovoke. Immunol kansè. Res. 2015, 3, 610–619. [CrossRef]

51. Demaria, S.; Ng, B.; Devitt, M.-L.; Babb, J.-S.; Kawashima, N.; Liebes, L.; Formenti, S.-C. Anpèchman radyasyon ionize nan timè byen lwen ki pa trete (efè abscopal) se iminitè medyatè. Ent. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2004, 58, 862–870. [CrossRef] [PubMed]