Izolasyon ak pirifikasyon nan glikozid feniletanoid soti nan Cistanche Deserticola pa gwo vitès Counter-kouran chromatografi

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Li a,b, Rong Tsao b,*, Raymond Yang b, Chunming Liu a, J. Christopher Young b, Honghui Zhu b

Résumé

Senk phenylethanoid glycosside (PhGs), echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside ak 20-acetylactoside, yo te izole ak pirifye soti nanCistanche deserticolapou premye fwa pa chromatografi gwo vitès kont-kouran (HSCCC) lè l sèvi avèk de sistèm bifaz, youn ki fòme ak acetate etil-etanòl-dlo (5:0.5:4.5, v/v/v) ak yon lòt. nan acetate etil-n-butanol-etanòl-dlo ({{10}}.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v). Yon total de 28.5 mg nan echinacoside, 18.4 mg nan cistanoside A, 14.6 mg nan acteoside, 30.1 mg nan isoacteoside ak 25.2 mg nan 20-acetylactoside yo te pirifye soti nan 1412 mg nan n-butanol ekstrè nan C. deserticola, chak. nan plis pase 92.5 pousan pite jan HPLC detèmine. Estrikti yo te idantifye pa tan retansyon yo, UV, LC-ESI-MS nan mòd iyon negatif la, epi yo te konfime pa eksperyans NMR. Yo diskite sou modèl fragmantasyon LC-ESI-MSn karakteristik senk konpoze yo, epi yo jwenn li se yon zouti trè spesifik ak itil pou idantifikasyon estriktirèl PhG nan plant medsin enpòtan sa a.

Mo kle:Cistanche deserticola; Phenylethanoid; Echinacoside; Cistanozid A; Akteozid; izoakteozid; 20-Asetilakteozid; HSCCC; LC–ESI-MS; RMN

1. Entwodiksyon

Cistanche deserticola YC Mase yon medikaman èrbal Chinwa byen koni e li te lajman itilize nan preparasyon tradisyonèl ki sanble ak engredyan manje fonksyonèl jodi a oswa sipleman manje (Wong, Li, Cheng, & Chen, 2006). Pi gwo konstitiyan bioaktif nan C. deserticola yo se glikozid phenylethanoid (PhGs), ki gen ladan echinacoside, acteoside, isoacteoside, 20-acetylatteoside, ak cistanoside A (Kobayashi, Karasawa, & Miyase, 1984; Kobayashi et al., 1987). PhGs yo lajman distribiye nan wayòm plant la, epi yo te etidye anpil pou divès fonksyon byolojik yo tankou epatoprotective (Xiong et al., 1998), anti-enflamatwa, aktivite antinociceptive (Schapoval et al., 1998), ak aktivite antioksidan. Cheng, Wei, Guo, Ni, & Liu, 2005; Li, Lau, Xu, Li, & Men, 2000; Li, Wang, & Wang, 1997; Li, Wang, Zheng, Liu, & Jia, 1993; Wang, Jiang, Wu, & Wang, 2001; Xiong, Kadota, Tani, & Namba, 1996), amelyore fonksyon seksyèl (Xie & Wu, 1993; Zong, He, Wu, & Chen, 1996), ak efè sedatif (Lu, 1998). ).

Akòz biyoaktivite enpòtan ki anwo yo, gwo kantite konpoze pi yo bezwen ijan kòm estanda referans ak pou divès etid in vitro ak in vivo ki gen rapò ak itilizasyon medikaman tradisyonèl Chinwa. Metòd efikas pou izolasyon, pirifikasyon, ak karakterizasyon estriktirèl PhG yo, kidonk vin nesesè. Sepandan, travay sa a anjeneral mande pou itilize plizyè etap kwomatografik pou netwaye echantiyon ak izolasyon (Gross, Lahloub, Anklin, Schulten, & Sticher, 1988; Nishimura, Sasaki, Inagaki, Chin, & Mitsuhashi, 1991; Ravn, Nishibe. , Sasahara, & Li, 1990; Shoyama, Matsumoto, & Nishioka, 1987), ki anjeneral rezilta nan pousantaj rekiperasyon ki ba akòz adsorption irevokabl nan PhGs sou sipò solid la pandan separasyon (Lei et al., 2001). Kontrèman, gwo vitès kwomatografi kont-aktyèl (HSCCC) te vin tounen yon altènatif efikas nan teknik kwomatografi konvansyonèl yo pou separasyon kèk PhG soti nan ekstrè plant (Lei et al., 2001; Li et al., 2005). Lei et al. byen separe akteozid ak 20-acetylacteoside deCistanches salsa(CA Mey.) G. Beck lè l sèvi avèk HSCCC (Lei et al., 2001). Otè yo nan papye sa a te deja rapòte separasyon nan acteoside ak isoacteoside soti nan Plantago psyllium L. pa HSCCC (Li et al., 2005). Sepandan, pa gen okenn rapò ki te pibliye sou separasyon ak pirifikasyon plizyè PhG nan C. deserticola lè l sèvi avèk HSCCC. Akòz mank de estanda, metòd LC-MS yo te devlope ak itilize kòm yon zouti analyse pwisan pou karakterizasyon rapid ak idantifikasyon kèk PhG nan ekstrè plant (Li et al., 2005; Wang et al., 2000).

Nan papye sa a, nou rapòte yon metòd HSCCC devlope pou preparasyon echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside ak 20-acetylactoside nan C. deserticola. Karakterizasyon ak analiz senk PhG ki separe yo te akonpli lè l sèvi avèk LC makonnen ak espektrometri mas ESI nan liy ak eksperyans NMR. Tan retansyon, pwa molekilè, ak iyon fragman karakteristik senk PhG yo prezante epi diskite nan papye sa a. Estrikti senk PhG yo idantifye nan ankèt sa a montre nan Fig. 1.

Engredyan efikas nan Cistanche deserticola

2. Eksperimantal

2.1. Pwodwi chimik ak reyaktif

Acteoside te achte nan men Sigma–Aldrich (Oak- Ville, ON), echinacoside te achte nan men ChromaDex (Santa Ana, CA). Isoacteoside te izole nan P. psyllium L. (Li et al., 2005). C. deserticola te achte nan Beijing TongRenTang Medsin Store (Lachin). Tout solvang yo te nan klas HPLC epi yo te achte nan men Caledon Laboratories Ltd. (Georgetown, ON).

2.2. Preparasyon echantiyon

C. deserticola (20 g) te ekstrè senk fwa nan tanperati chanm pou 12 èdtan chak ak 100 mL nan 80 pousan etanòl akeuz. Chak fwa yo te filtre melanj ekstraksyon an atravè yon papye filtre Whatman No.1 (Whatman International Ltd., Maidstone, Angletè). Filtrate konbine a te konsantre sou 100 mL nan vacuo nan <40 degre.="" solisyon="" akeuz="" ki="" te="" lakòz="" yo="" te="" degrase="" de="" fwa,="" chak="" ak="" 100="" ml="" hexane,="" ak="" lè="" sa="" a,="" ekstrè="" youn="" apre="" lòt="" pou="" senk="" fwa,="" chak="" ak="" 100="" ml="" n-butanol.="" kouch="" n-butanol="" yo="" te="" konbine="" epi="" konsantre="" nan="" sechrès="" nan="" vacuo="" nan=""><40 degre,="" ki="" bay="" 2.2="" g="" nan="" ekstrè="" n-butanol.="" ekstrè="" a="" te="" estoke="" nan="" -20="" degre="" anvan="" separasyon="">

2.3. Pwosedi separasyon HSCCC

HSCCC preparasyon an te fèt nan yon modèl CCC{{0}} kwomatografi kont-aktyèl gwo vitès (Pharma-Tech Research, Baltimore, Maryland USA). Aparèy sa a te gen twa bobin preparasyon, ki konekte nan seri (volim total, 325 mL). Vitès revolisyon aparèy la ka regle ant 0 ak 2000 rpm. Sistèm HSCCC la te ekipe ak yon ponp HPLC (Pharma-Tech Research, Baltimore, Maryland, USA), yon detektè UV Modèl 450 (Alltech, USA), yon achiv plat Modèl L 120 E (Linseis Inc., Princeton Jct, USA), yon pèseptè fraksyon (Advantec MFS Inc., USA) ak yon valv piki echantiyon ak yon bouk echantiyon 10-mL.

Yon melanj acetate etil-etanòl-dlo (5:0.5:4.5, v/v/v) te souke kouray nan yon antonwa separasyon epi kite kanpe epi separe nan tanperati chanm. De faz yo te itilize nan HSCCC apre yo te rive nan ekilib. Tout kolòn mawonnen an premye te ranpli ak kouch siperyè a, ki sèvi kòm faz estasyonè a. Lè sa a, kouch ki pi ba a (faz mobil) te ponpe nan tèt-fen kolòn nan nan yon vitès koule nan 1.5 mL / min. Vitès wotasyon an te fikse a 1050 rpm. Yo te chaje yon echantiyon (apeprè 230 mg chak fwa) ki fonn nan 8 ml melanj etil acetate-etanòl-dlo (5:0.5:4.5, v/v/v) nan tiyo piki a apre sistèm lan rive nan idrodinamik. ekilib. Sistèm sòlvan bifaz sa a te chwazi ki baze sou koyefisyan patisyon (K), ki te 0.87, 1.11, ak 1.32 pou acteoside, isoacteoside, ak 20 asetilakteozid, respektivman. Valè K a se rapò konsantrasyon yo nan kouch anwo ak anba nan menm konpoze an jan HPLC detèmine (Fig. 2). Efluan ki soti nan priz kolòn nan te kontinyèlman kontwole pa yon detektè UV nan 254 nm epi kolekte nan tib tès ak yon pèseptè fraksyon mete nan 4 min pou chak tib.

2.4. LC kondisyon yo

Oto-echantiyon estatik ak yon detektè fotodiode etalaj (DAD) yo te itilize pou analiz la nan PhGs nan ekstrè n-butanol nan C. deserticola ak fraksyon yo kolekte nan separasyon an HSCCC. Separasyon an te pote soti nan yon kolòn Phenomenex ODS-C18 (250 × 4.6 mm, 5 lm) ak yon kolòn gad C18. Faz mobil binè a fèt ak asetonitrile (sòlvan A) ak dlo ki gen 2 pousan asid acetic (sòlvan B). Tout solvang yo te filtre nan yon

{{0}}.45 lm filtè anvan w itilize. Yo te kenbe vitès koule a konstan nan 1.0 mL/min pou yon tan total kouri 25 min. Sistèm nan te kouri ak yon pwogram gradyan: 0–20 min: 90 pousan B a 60 pousan B; 20–22 min: 60 pousan B rive 0 pousan B; ak 22–25 min, 0 pousan B a 90 pousan B. Volim piki echantiyon an te 10 lL. Pik enterè yo te kontwole nan 320 nm pa yon detektè DAD.

2.5. Eksperyans LC-ESI-MS

Eksperyans LC-MS yo te pote soti lè l sèvi avèk yon espektromèt mas pèlen iyon Finnigan LCQ DECA (Thermo Finnigan, San Jose, CA, USA) ekipe ak yon sous ionizasyon electrospray (ESI). Echantiyon yo te analize nan menm kondisyon kwomatografik la. Yo te itilize yon modèl negatif pou koleksyon done yo. Pousantaj gaz djenn ak koule oksilyè yo te fikse nan 96 ak 7 (inite abitrè), respektivman. Yo te fikse vòltaj kapilè a nan 29 V epi yo te kontwole tanperati li nan 350 degre. Yo te fikse vòltaj lantiy antre a nan 40 V epi anplitid RF multipol la te fikse nan 540 V. Yo te kontwole vòltaj zegwi ESI a nan 4.5 kV. Lantiy lantiy tib la te 16 V, lantiy miltipol 1 la te 8.20 V ak lantiy multipol la 2 te 10.5 V. Yo te fikse vòltaj miltiplikatè elèktron nan 980 V pou deteksyon ion.

2.6. RMN pou Idantifikasyon

Yo te anrejistre espèk RMN sou yon espektromèt Bruker Avance-600 (Bruker BioSpin Ltd., Milton, Kanada). Se sèlman konpoze 2 ak 5 (pa gen okenn estanda ki disponib) yo te sibi eksperyans NMR. Echantiyon yo te fonn nan CD3OD.

Engredyan aktif nan cistanche: echinacoside ak acteoside

3. Rezilta ak diskisyon

Yon separasyon HSCCC siksè depann lajman sou yon sistèm sòlvan apwopriye de-faz ki bay yon koyefisyan patisyon ideyal (K) alantou 1 pou konpoze an vle. Yon sistèm bifaz konsa ta dwe tou bay yon tan rezonab kout (Chen, Games, & Jones, 2003; Foucault & Chevolot, 1998; Oka, Oka, & Ito, 1991). Nan eksperyans nou an, nou chwazi kat seri sistèm sòlvan selon solubility nan konpoze sib yo nan C. deserticola. HPLC te itilize pou mezire konsantrasyon nan chak faz, ki soti nan ki valè K yo nan konpoze sib yo te kalkile. De sistèm, etil acetate-n-butanol-etanòl-dlo (4:0.6:0.6:5, v/v/v/v) ak etil acetate-dlo (1:1, v/v), yo te deja itilize nan HSCCC pou separe acteoside ak 20-acetylacteoside de

C. salsa, ak acteoside ak isoacteoside soti nan P. Psyllium,

respektivman (Lei et al., 2001; Li et al., 2005). Malgre ke premye sistèm nan te gen yon tan relativman kout, li te gen move pèfòmans nan separe PhG yo nan C. deserticola, akòz valè K ki ba pou konpoze 1 ak 2, ak valè K segondè pou konpoze 3-5. Valè K yo te trè ba pou konpoze 1-4 nan dezyèm sistèm nan, men trè wo pou konpoze 5 (Tablo 1). Yon sistèm modifye ki gen acetate etil-etanòl-dlo (5:0.5:4.5, v/v/v), te bay yon valè K ideyal pou konpoze 3-5 nan 0.87, 1.11, ak 1.32, respektivman, e li te lakòz yon bon separasyon. nan twa konpoze sa yo (Fig. 3A ak B). Sistèm sa a, sepandan, te pwodwi

twò piti yon valè K pou konpoze 1 ak 2, sa ki lakòz de konpoze yo ko-elye tou pre devan sòlvan an (fraksyon 1 nan Fig. 3A). Yon lòt modifikasyon nan sistèm lan (acetate etil-n-butanol-etanòl-dlo (0.5:0.5:0.1:1, v/v/v/). v) ogmante valè K yo pou konpoze 1 ak 2 a 0.52 ak 0.92, respektivman, epi li mennen nan separasyon konplè (Fig. 3C). Fig. 3A montre separasyon HSCCC nan yon echantiyon ki genyen 230 mg ekstrè n-butanol C. deserticola lè l sèvi avèk acetate etil-etanòl-dlo (5:0.5:4.5, v/v/v). Fraksyon ki te konfime pa HPLC pou genyen sèlman konpoze 3, 4, oswa 5 yo te konbine separeman, ak sa yo ki gen konpoze 3 ak 4 yo te pisin, friz-seche, ak re-simèt HSCCC a pou plis separasyon (Fig. 3B). Separasyon HSCCC ki dekri pi wo a bay yon total de 14.6 mg, 30.1 mg, ak 25.2 mg nan konpoze 3-5 soti nan 1412 mg n-butanol ekstrè. Fig. 3C montre separasyon an HSCCC nan yon echantiyon ki gen konpoze 1. ak 2 (fraksyon 1 nan premye separasyon an) lè l sèvi avèk acetate etil-n-butanol-etanòl-dlo (0.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v). Yon total de 28.5 ak 1 Yo te jwenn 8.4 mg nan konpoze 1 ak 2. Pite kwomatografik konpoze 1-5 seche friz yo te plis pase 92.5 pousan, ki te itilize dirèkteman pou analiz LC-ESI-MS ak NMR.

Idantifikasyon pwovizwa konpoze 1, 3, ak 4 yo te reyalize pa tan retansyon kongriyan ak done espektral UV ak sa yo ki nan echinacoside natif natal, acteoside, ak isoacteoside (Fig. 2). Konpoze 2 ak 5 yo te enkoni, sepandan, spèkt UV yo nan tout senk konpoze yo te trè menm jan, ki endike karakteristik estriktirèl menm jan an.

Pou plis envestige estrikti senk konpoze sa yo, yo te eseye eksperyans LC-ESI-MSn ak rezilta yo montre nan Fig. 4 ak Tablo 2. Konpoze ki gen rapò ak pik yo (1-5) nan Fig. 2 ekspoze entans deprotonate iyon molekilè. [MH]— nan m/z 785, 799, 623, 623, ak 665, respektivman, nan mòd negatif. Yo te obsève iyon dimerik [2M H]— tou pou pik 1–4 nan Fig. 2. Sa yo te konfime pwa molekilè pik 1–5 yo se 786, 800, 624, 624, ak 666, respektivman. Done LC-MSN yo (Tablo 2) te bay enfòmasyon estriktirèl trè itil pou senk PhG yo, tankou pèt net nan yon pwosedi eksperimantal: yo te peze apeprè 1 mg nan chak echantiyon nan yon tib tès 10 mL kote 1 mL nan chak faz. nan pre-ekilibre sistèm sòlvan de-faz la te ajoute. Tib tès la te bouche ak souke kouray pou 1 minit, epi li te kite kanpe jiskaske li separe nèt. Yo te retire yon alikòt 100 lL nan chak kouch epi evapore separeman nan sechrès nan vacuo.<40 °c.="" the="" residue="" was="" dissolved="" in="" 10="" ll="" methanol="" and="" analyzed="" by="" hplc="" for="" determining="" the="" partition="" coefficient="" (k)="" of="" compounds="" 1–5.="" the="" k="" value="" was="" expressed="" as="" the="" peak="" area="" of="" the="" target="" compound="" in="" the="" upper="" phase="" divided="" by="" that="" in="" the="" lower="">

LC-ESI-MS nan pik 1 yo montre nan Fig. 4A. Iyon molekilè deprotonasyon [MH]— nan m/z 785 ak yon gwo abondans ak yon molekilè deprotonasyon dimerik.ion [2M H]— nan m/z 1571 te obsève nan mòd negatif, sigjere yon pwa molekilè nan 786, ki te menm jan ak sa yo ki nan echinacoside. Plis envestigasyon nan eksperyans LC-MS2 nan iyon m/z 785 yo te bay yon sèl iyon pitit fi prensipal nan m/z 623 (figi 4B) ki te pwodwi dirèkteman nan m/z 785 pa pèt yon moso kafeyil oswa yon moso hexose kòm [M. 162 H]—. Spectre LC-MS3 nan m/z 623 te montre de gwo iyon nan m/z 477 ak 461, ak de iyon minè nan m/z 315 ak 179 (Fig. 3C, Tablo 2). Diferans mas ant m/z 623 ak iyon fragman m/z 477 ak 461 yo te 146 ak 162, respektivman, ki koresponn ak pèt yon inite rhamnose ak yon moso glikoz oswa yon moso kafeyil [M 162 H]—. Iyon m/z 623 yo te pèdi tou yon ti kafeyil ak yon ti moso rhamnose pou pwodui iyon m/z 315 yo. Iyon an nan m/z 179 te pwodwi nan klivaj la nan moyet kafeyil la, ak chaj negatif ki rete sou pati nan moyeoil la. Eksperyans LC-ESI-MSN sou echinacoside natif natal la te montre menm modèl fwagmantasyon an. Se poutèt sa, pik 1 te konfime kòm echinacoside.

Pou pik 2, LC-ESI-MS te montre m/z 799 kòm iyon molekilè deprotonasyon [MH]— ak m/z 1599 kòm ion dimerik li, ki montre yon mas molekilè 800. Pandan eksperyans MS2, m/z la. 799 iyon te fòme twa pitit fi nan m/z 637, 623, ak 475 (Tablo 1). Iyon nan m/z 637 te pwodwi dirèkteman nan paran ion nan m/z 799 ankò akòz pèt net nan kafeyil la [M—162—H]—oswa yon glikoz moety [M—162—H]—. Iyon an nan m/z 623 te soti nan pèt yon radikal CH2. Iyon an nan m/z 475 te fòme apati pèt net nan tou de mwatye kafeyil la [M 162 H]— ak mwatye nan glikoz ki soti nan ion paran an. Eksperyans MS3 sou m/z 637 te pwodui twa iyon nan m/z 619, 491, ak 475, ki koresponn ak pèt yon sèl dlo, yon inite rhamnose, ak yon moso glikoz, respektivman. Iyon pitit fi m/z 623 te pwodwi m/z 461 ak 315 nan etid MS3, ki te swiv menm chemen fragmentation ak echinacoside jan yo te diskite pi wo a. Done LC– ESI-MSN yo te sipòte yon idantifikasyon pwovizwa pou pik 2 kòm cistanoside A. Tou de pik yo te montre menm [MH]—ion nan m/z 623 ak dimè nan m/z 1247 nan mòd negatif (Tablo 1), ki endike yo se pètèt izomè ak menm pwa molekilè nan

624, menm jan ak acteoside ak isoacteoside. Spectre MS2 iyon [MH]— yo te montre tou yon menm iyon pitit fi m/z 461, ki te endike pèt moyet kafeyil la nan paran ion m/z 623 (Tablo 1). Yo te jwenn menm espèk MS3 pou de konpoze yo. Pou pik 3, spectre MS3 nan iyon an nan m/z 461 te fòme twa iyon nan m/z 315, 161, ak 135. M/z 315 la fòme apre li te pèdi rhamnose jan yo te diskite pi bonè. Iyon m/z 161 a te pwodwi nan klivaj nan moyet kafeyil la, ki te swiv pa yon pèt plis nan yon sèl dlo; chaj la te rete sou pati kafeyil la. Iyon nan m/z 135 [aglikon 18 H]— te soti nan klivaj lyezon glikozidik la nan pozisyon C1 ak yon pèt adisyonèl nan yon sèl dlo, kite chaj la nan pati nan pati aglikon an. Spectre MS3 nan pik 4 la te swiv menm wout fwagmantasyon ak pik 3 eksepte ion ki manke a nan m/z 135. Iyon molekilè a ak modèl fwagmantasyon de konpoze sa yo konsistan avèk done literati sou acteoside ak isoacteoside (Wang et al. ., 2000), byenke yo te jwenn yon ion adisyonèl m/z 153 ak done Proton NMR nan cistanoside A ak 20-acetylatteoside yo te asiyen kòm [aglycone H]- pa Wang et al. (Wang et al., 2000). Iyon sa a te ka enstab epi li te pèdi dlo pou bay m/z 135 nan eksperyans nou an. Dapre done MS yo ak tan retansyon kongriyan pik 3 ak 4 ak estanda yo, yo idantifye yo kòm aktozid ak izoakteozid, respektivman.

Done LC-ESI-MS nan pik 5 yo montre nan Tablo 2. Yon iyon molekilè deprotonated [MH]— (m/z 665) se sèl iyon yo te jwenn nan mòd negatif la, ki vle di yon mas molekilè 666. Twa iyon pitit fi. yo te obsève nan m / z 623, 503, ak 461 nan eksperyans nan MS2 (Tablo 2). Iyon pitit fi yo nan m/z 623 ak 503 yo te fòme dirèkteman nan iyon paran an pa pèt yon gwoup COCH2 ak yon moyeu kafeyil, respektivman. Iyon an nan m/z 461 soti nan pèt tou de kafeyil la ak demi COCH2 [M 162 42 H]— soti nan iyon paran an. Nan eksperyans MS, m/z 623 pwodui m/z 461, ak m/z 503 bay twa iyon nan m/z 485, 461, ak 315. Spectre MS3 nan iyon pitit fi m/z 461 la te bay de iyon nan 443. ak 315. Lè nou konpare modèl fwagmantasyon LC– MSN nan pik 5 la ak lòt konpoze ki rapòte nan etid sa a ak lòt ki rapòte (Li et al., 2005; Wang et al., 2000), nou konkli ke pik 5 te gen anpil relasyon estriktirèl. a actoside ak diferans lan sèlman se inite COCH3 la sou pozisyon R3 la. Se poutèt sa, yon idantite pwovizwa te bay pik 5 kòm 20-acetylatteoside (figi 1).

1H RMN te konfime estrikti de konpozan yo idantifye, pik 2 (tankou cistanoside A) ak pik 5 (tankou 20-acetyl-acteoside). Chanjman chimik yo ak konstan kouple tout pwoton nan konpoze 2 ak 5, jan yo montre nan Tablo 3., matche ak done yo rapòte NMR pou cistanoside A ak 20-acetylatteoside, respektivman (Kobayashi et al., 1984, 1987) . Eksperyans 2D NMR (korelasyon COSY, ROESY ak CH) te fèt tou nan etid prezan an epi yo te konfime idantifikasyon an (done yo pa montre).

Acteoside soti nan Cistanche deserticola

4. Konklizyon

Nan papye sa a, HSCCC te itilize avèk siksè pou izòlman ak pirifikasyon nan echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside, ak 20-acetylactoside soti nan ekstrè n-butanol nan C. deserticola. Se poutèt sa se yon mwayen pwouve pou separasyon semi-preparatif bioaktif. Pandan se tan, yo te envestige estrikti senk PhG yo nan C. deserticola pa mwayen LC-ESI-MSN; kèk karakteristik karakteristik PhG yo te jwenn, ki te pèmèt nou detèmine gwoup fonksyonèl yo nan estrikti yo. Se poutèt sa, metòd LC-ESI-MSN a se yon zouti pwisan pou idantifikasyon rapid feniletanoid ak glikozid yo nan ekstrè C. deserticola, espesyalman lè done RMN pwouve.

Rekonesans

Otè yo ta renmen remèsye Jun Gu nan sant rezonans mayetik nikleyè, University of Guelph, Ontario, Kanada pou asistans li nan eksperyans NMR. Pwojè sa a te pasyèlman sipòte pa finansman ki soti nan Jilin Pwovens, Lachin (No. 20060904).

Referans

Chen, LJ, Games, DE, & Jones, J. (2003). Izolasyon ak idantifikasyon kat konstitiyan flavonoid nan grenn Oroxylum Indicum pa gwo vitès kwomatografi kont-kouran. Journal of Chromatography A, 988, 95-105.

Cheng, XY, Wei, T., Guo, B., Ni, W., & Liu, CZ (2005). Cistanche deserticola selil sispansyon kilti: Phenylethanoid glikozid bio-sentèz ak aktivite antioksidan. Pwosesis byochimik, 40, 3119– 3124.

Foucault, AP, & Chevolot, L. (1998). Kwomatografi kont-kouran: instrumentation, seleksyon sòlvan, ak kèk aplikasyon ki sot pase nan pirifikasyon pwodwi natirèl. Journal of Chromatography A, 808, 3–22.

Gross, G.-A., Lahloub, MF, Anklin, C., Schulten, H.-R., & Sticher, O. (1988). Teucrioside, yon glikozid fenilpropanoid ki soti nan Teucrium Chamaedrys. Phytochemistry, 27, 1459–1463.

Li, ZD, Lau, KM, Xu, HX, Li, PC, & Men, PPH (2000). Aktivite antioksidan nan glikozid phenylethanoid soti nan chans Brandisia. Journal of Etnofarmakoloji, 71, 483-486.

Kobayashi, H., Karasawa, H., & Miyase, T. (1984). Etid sou elektè yo nan Cistanchis Herba. III. Izolasyon ak estrikti nouvo glikozid phenylpropanoid, Cistanoside A ak B. Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 32, 3009–3014.

Kobayashi, H., Oguchi, H., Takizawa, N., Miyase, T., Ueno, A., Usmanghani, K., et al. (1987). Nouvo glikozid fenilethanoid ki soti nan Hook Cistanche tubulosa (Schrenk). FI. Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 35, 3309–3314.

Lei, L., Yang, FQ, Zhang, TY, Tu, PF, Wu, LJ, & Ito, Y. (2001). Preparasyon izolasyon ak pirifikasyon akteozid ak 2'-acetyl acteoside soti nan Cistanches salsa (CA Mey) G. Beck pa chromatografi kont-kouran. Journal of Chromatography A, 912, 181-185.

Li, L., Tsao, R., Liu, ZQ, Liu, SY, Yang, R., Young, JC, et al. (2005). Izolasyon ak pirifikasyon akteozid ak izoakteozid nan Plantago psyllium L. pa gwo vitès kwomatografi kont-kouran. Journal of Chromatography A, 1063, 161-169.

Li, LL, Wang, XW, & Wang, XF (1997). Antilipid peroksidasyon ak aksyon antiradikal nan glikozid nan herba Cistanches. Lachin Journal of Chinese Materia Medica, 22, 364-367.

Li, J., Wang, PF, Zheng, RL, Liu, ZM, & Jia, ZJ (1993). Pwoteksyon glikozid fenilpropanoid soti nan Pedicularis kont emoliz oksidatif nan vitro. Planta Medica, 59, 315–317.

Lu, MC (1998). Etid sou efè sedatif Cistanche deserticola. Journal of Etnopharmacology, 59, 161-165.

Nishimura, H., Sasaki, H., Inagaki, N., Chin, M., & Mitsuhashi, H. (1991). Nèf glikozid alkòl fenetil soti nan Stachys szeboldzz. Phytochemistry, 30, 965-969.

Oka, F., Oka, H., & Ito, Y. (1991). Yon rechèch sistematik pou sistèm sòlvan de-faz apwopriye pou gwo vitès kwomatografi kont-kouran. Journal of Chromatography, 538, 99-108.

Ravn, H., Nishibe, S., Sasahara, M., & Li, X. (1990). Konpoze fenolik soti nan Plantago Asiatica. Phytochemistry, 29, 3627–3631.

Schapoval, EES, Winter de Vargas, MR, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, & Henriques, AT (1998). Aktivite anti-enflamatwa ak antinociceptive nan ekstrè ak konpoze izole nan Stachytarpheta cayennensis. Journal of Etnofarmakoloji, 60, 53-59.

Shoyama, Y., Matsumoto, M., & Nishioka, I. (1987). Glikozid fenolik ki soti nan rasin malad nan Rehmannia glutinosa Var. Purpurea. Phyto Chimi, 26, 983–986.

Wang, XW, Jiang, XY, Wu, LY, & Wang, XF (2001). Efè dechaj nan glikozid nan Cistanche deserticola sou radikal gratis ak pwoteksyon li kont domaj ADN OH-induit nan vitro. Journal of Chinese Pharmacology, 36, 29-31.