Lèt Osteopontin pou zantray, iminite ak devlopman nan sèvo nan kochon pretèm
Jun 14, 2022
Pou aprann plis enfòmasyon tanpri kontaktedavid.wan@wecistanche.com
Résumé
Nivo ensifizan nan lèt osteopontin (OPN) nan fòmil tibebe a ka an pati reprezante diferans ki genyen ant devlopman tibebe ki gen fòmil oswa lèt matènèl. Nou upvote gwosè ke yon rejim lèt complétée ak lèt bèfOPNamelyore zantray, iminite, ak devlopman nan sèvo ak teste sa a nan yon modèl kochon anvan tèm. Kochon prematènèl yo te bay nan seksyon sezaryèn (90 pousan jestasyon) yo te manje lèt bèf anvan tout koreksyon (CON, n=19) oswa menm rejim alimantè a ki te konplete ak yon dòz OPN ki enpòtan pou fizyolojik (46 mg/(kg:d), n{). {3}}). Pwen final ki gen rapò ak rezilta klinik yo, iminite sistemik, ak devlopman nerokognitif yo te evalye pandan etid la, ak tisi zantray yo te kolekte yon jou 19. Modèl kwasans, devlopman motè bonè, ak pifò paramèt iminitè sistemik yo te menm jan an ant OPN akKONkochon. Kochon OPN yo te gen pi wo rapò villus-a-kripto pase kochon CON ak pi wo monosit ak lenfosit konte nan Jou 8. Fonksyon dijestif ak absòpsyon zantray ak pèfòmans mantal (tès T-labirent) te menm jan an ant kochon OPN ak CON. An konklizyon, sipleman dyetetik akOPNpi wo nivo baz lèt bovine pwovoke ti amelyorasyon nan estrikti zantray ak iminite sistemik san okenn efè sou pèfòmans mantal. Nivo minimòm OPN nan fòmil tibebe a pou asire pi bon adaptasyon nan peryòd neonatal imedya a rete pou detèmine.
Mo kle: osteopontin; pwoteyin lèt bioaktif; tibebe ki fèk fèt anvan tèm; sante entesten; iminite sistemik; devlopman nan sèvo; koyisyon
Klike la a pou aprann plis sou Cistanche
1. Entwodiksyon
Optimize nivo pwoteyin bioaktif nan fòmil tibebe yo ka ede diminye diferans ki byen etabli nan devlopman ak rezistans maladi ant tibebe ki te manje ak lèt manman an [1-3]. Osteopontin (OPN) se yon pwoteyin asid ki gen gwo glikozilasyon ak fosforilasyon ki konsidere kòm enpòtan pou ankouraje devlopman nan peryòd neonatal imedya a epi li prezan anpil nan lèt imen bonè [4-6]. Konsantrasyon lèt OPN yo varye konsiderableman ant espès, e nan lèt imen menm varyasyon entè-endividyèl ant manman yo wo. Yon bès pandan peryòd laktasyon an sanble menm si yon obsèvasyon ki konsistan [5,7]. Nan yon etid multisant, nivo OPN medyàn lan te 160 mg/L nan apeprè 13 semèn apre akouchman [7]. Pi wo nivo 25 pousan OPN nan lèt imen an te 230-495 mg/L, ki se pi wo pase nivo mwayèn yo rapòte pou lèt bèf (~18 mg/L) oswa fòmil tibebe (~9 mg/L)[ 4]. Kounye a, lèt bovine OPN aksesib nan komès epi yo ka ajoute nan fòmil tibebe pou rive nan nivo ki sanble ak nivo yo jwenn nan lèt imen.
Akòz trè konsève arjinin-glycine-aspartate (RDG) entegrin-obligatwa sit la nan OPN, efè byolojik yo ka espere yo sanble nan tout espès [8]. Fragman ki gen sekans RDG a trè rezistan a dekonpozisyon akòz glikozilasyon ki toupre motif integrin-obligatwa [9] la, kidonk sipòte potansyèl bioaktif OPN lèt natif natal nan zantray la. Nan vitro, lèt OPN kapab ankouraje pwopagasyon selil entesten ak fè egzèsis aktivite anti-bakteri kòm yon pati nan yon konplèks ak laktoferrin (LF), yon lòt pwoteyin lèt byoaktif enpòtan [10,11]. Efè benefisye nan lèt OPN nan zantray la te demontre tou nan vivo. Devlopman entesten nan makak rhesus ki fenk fèt yo te amelyore pa lèt bèf OPN ak transcriptome jejunal nan bèt ki te manje ak fòmil OPN te menm jan ak sa ki nan tokay tete [12]. Lèt dyetetikEfè OPN, tou de lokalman nan zantray la ak sistemikman apre absòpsyon minè entesten nan tibebe, yo te an pati atribiye a kapasite li nan estimile OPNlevels andojèn [5,13,14]. OPN yo jwenn nan pifò tisi kò ak likid kote li egzèse yon varyete fonksyon tankou byomineralizasyon ak modulasyon iminitè san konte patisipe nan pwopagasyon selil, migrasyon, adezyon, ak opsonizasyon [8,10,15,16]. Se OPN li te ye pou kontwole balans Th1/Th2, ki nan tibebe ki fenk fèt yo dekonpoze anvè yon polarizasyon Th2 [17]. OPN posede pwopriyete ki sanble ak cytokine epi li ka ankouraje iminite kalite Th1 pa endiksyon ekspresyon IL-12 ak anpèchman pwodiksyon IL-10, Th2cytokine, nan makrofaj [18]. Anplis de sa, OPN ka sipòte spirasyon nan sèvo, ki kapab kontribiye nan amelyore fonksyon koyitif yo nan tibebe ki tete kont tibebe ki gen fòmil [19-21]. Nan sipò sa a, tichyen sourit OPN-manje te montre pi bon kapasite aprantisaj ak pi wo nivo ekspresyon nan pwoteyin ki gen rapò ak myelination, ki gen ladan myelin debaz pwoteyin ak myelin ki asosye glycoprotein, ak OPN tou amelyore myelination nan vitro [14,22,23]. Nan kochon tèm, plizyè rejyon nan sèvo yo te afekte pa ogmante volim relatif apre sipleman dyetetik ak lèt bèf OPN men pa gen okenn efè sou paramèt koyisyon yo te obsève [24].
Tibebe ki twò bonè (nesans<37 weeks="" of="" gestation)="" are="" particularly="" diet-sensitive="" due="" to="" their="" relatively="" immature="" gut,="" immune="" system,="" and="" brain.="" such="" infants="" are="" susceptible="" to="" developing="" both="" short-and="" long-term="" complications="" such="" as="" necrotizing="" enterocolitis="" (nec),="" feeding="" intolerance,="" infections,="" and="" impaired="" neurodevelopment="" [25-28].="" bovine="" milk="" opn="" supplementation="" has="" previously="" been="" shown="" to="" reduce="" nec="" severity="" in="" formula-fed="" preterm="" piglets="" [29],="" and="" other="" milk="" factors="" have="" proven="" to="" support="" brain="" structure="" and="" cognitive="" development,="" particularly="" in="" preterm="" newborns="" [30,31].="" on="" this="" background,="" we="" hypothesized="" that="" preterm="" newborns,="" fed="" a="" standard="" milk="" diet="" with="" relatively="" natural="" bioactivity,="" would="" benefit="" from="" further="" opn="" supplementation.="" following="" an="" initial="" in="" vitro="" demonstration="" of="" opn="" antimicrobial="" activity,="" we="" used="" diet-sensitive="" preterm="" pigs="" [32-34]to="" investigate="" if="" an="" opn-enriched="" bovine="" milk="" diet="" would="" improve="" gut,="" immunity,="" and="" brain="" development="" in="" the="" first="" three="" weeks="" after="" preterm="">
2. Materyèl ak Metòd 2.1.In Vitro Anti-bakteri Assay
Premyèman, yo te itilize yon tès anti-bakteri [35] pou evalye byoaktivite aOPNlè yo mezire kapasite li pou anpeche kwasans, oswa touye, Staphylococcus, sa vle di, yon patojèn Gram-pozitif komen neonatal [36]. Menm lèt bèf entak non pasterize yo itilize kòm baz pou alimantasyon enteral nan etid kochon an te dekonjle ak santrifuje youn apre lòt nan 500 × g ak 3000 × 8,4 degre pou 15 min, aspirasyon kouch akeuz la chak fwa yo retire kontni an grès pandan y ap. minimize pèt pwoteyin lèt [37]. Apre tès esterilite nan lèt bovine ekreme, laOPNpoud (Lacprodan⑧ OPN-10, Arla Foods Ingredients, Viby, Denmark) te fonn nan konsantrasyon 1.6 (menm ak kantite lajan an te ajoute nan Jou 1 nan etid la kochon nan lèt la OPN), 2.8,5, 10 ak 20g. /L, kreye 6 alimantasyon tès, ki gen ladan lèt bèf ekreme san sipleman, ki te estoke nan alikòt 1 mL nan -80 degre jiskaske analiz. Estok kilti jele mitan-bouch [35] nan S.epidermidis(WT1457 [38], dousman bay Dr Xiaoyang Wang, University of Gothenburg, Sweden) yo te dekonjle, santrifuje nan 3200 × g, ak resuspend nan saline esteril anvan enkubasyon ak. 6 alimantasyon tès yo (anplis de yon fòmil lèt anvan tèm ki disponib nan komèsyal, ki enkli kòm yon kontwòl negatif [1]) nan yon dòz kalkile 10 degre ak 106 CFU/mL pou 2, 4, 6 ak 24 èdtan. nan 37 degre. Dòz final inokulasyon yo ak kwasans bakteri nan rejim tès yo ak fòmil tibebe yo apre diferan tan enkubasyon yo te detèmine [35]. Yo te fè triplicate endepandan nan tès anti-bakteri.
2.2. Bèt ak konsepsyon eksperimantal
Tout pwosedi bèt yo te apwouve ak fèt anba yon lisans (lisans nimewo 2014-15-0201-00418) ki te bay pa Danish Animal Experiment Inspectorate. Karant-uit porsele (Danish Landracex Yorkshire Duroc) ki soti nan de simen elve komèsyal yo te delivre anvan tèm pa seksyon sezaryèn nan apeprè 90 pousan jestasyon (tèm konplè: 117± 2 d). Lè yo te reanimasyon siksè ak pandan ke yo te toujou anestezi nan anestezi matènèl, yo te fè plasman chirijikal nan yon katetè atè lonbrit ki rete pou fasilite nitrisyon paranteral (PN) ak yon tib manje orogastric pou fasilite nitrisyon enteral (EN) te fè jan sa te dekri deja 32]. Sis porsele yo te elimine imedyatman apre nesans akòz reanimasyon echwe epi yo te konsekans eskli nan etid la. An total, karant-de porsele yo te stratifye selon sèks ak pwa nesans epi yo te asiyen nan youn nan de gwoup: yon gwoup k ap resevwa lèt bèf anvan tout koreksyon siplemantè ak OPN (OPN, n=21) ak yon gwoup kontwòl k ap resevwa bèf kri san sipleman. lèt (KON, n=21)(Figi 1). Plasma matènèl yo te enfuze nan 3 bolus (total 25 mL/kg) atravè katetè lonbrit la nan premye 24 èdtan yo pou asire vaksen pasif. Kochon yo te elve endividyèlman pandan peryòd etid la nan 19 jou. Soti nan jou 1-5 yo te elve nan enkibatè ayere chofe (plis oksijenasyon pandan premye 24 èdtan yo), epi nan jou 5 ak 11 yo te deplase nan pi gwo kaj. Tout envestigatè klinik yo te avèg nan tretman rejim alimantè yo pandan peryòd eksperimantal la.
2.3. Nitrisyon ak Manje
Rejim enteral yo te bay tout kochon yo te baze sou lèt bèf entak ki pa pasterize, yo te kolekte nan de pakèt nan yon fèm letye bèf Jersey lokal epi yo te estoke nan -20 degre. Lèt bèf la te fòtifye ak mineral ak vitamin (15 g / L Pedyat Seravit, Nutricia, Utrecht, Netherlands) ak elektwolit (6 g / L Revolyte Nutrition, Gunnar Kjems ApS, Copenhagen, Denmark). Baz lèt sa a te sèvi kòm rejim konplè enteral pou porsele nan gwoup CON. Pou kochon nan gwoup OPN, baz lèt bèf la te konplete plis ak lèt bèf OPN (Lacprodan⑧ OPN-10) nan yon sipleman medyàn.OPNkonsantrasyon 319 mg/L (IQR 272-445) pou jwenn yon dòz OPN fiks chak jou 46 mg/(kg·jou). Konsantrasyon an se nan seri lèt imen OPN [4]. Konsantrasyon OPN nan lèt bèf kolekte te 91 mg/L jan yo mezire pa likid chromatografi-tandem mas spèktrometri (LC-MS/MS, Alphalyse A/S, Odense, Denmark). Dòz siplemantè OPN yo te chwazi pou yo rete nan limit ki pi wo nan seri lèt imen an pou asire yon diferans rezonab ak rejim alimantè kontwòl lèt bovine. Preparasyon chak jou nan rejim enteral yo te fè epi estoke nan 4 degre jiskaske yo itilize (<24 h).="" pigs="" received="" gradually="" increasing="" volumes="" of="" en="" from="" 32="" ml/(kg.="" day)="" on="" day="" 1="" to="" 180ml/(kg:="" day)on="" day="" 15="" and="" until="" euthanasia.="" the="" enteral="" diets="" were="" given="" as="" boluses.="" during="" the="" daytime,="" the="" boluses="" were="" given="" every="" second="" hour,="" and="" during="" the="" night="" every="" third="" hour="" until="" day="" 9.="" thereafter,="" the="" feeding="" frequency="" was="" reduced="" to="" every="" third="" hour,="" day="" and="" night.="" the="" en="" was="" given="" through="" the="" orogastric="" feeding="" tube="" until="" day="" 5="" when="" pigs="" were="" taught="" to="" drink="" from="" troughs.="" the="" pn="" was="" given="" as="" a="" continuous="" infusion="" in="" decreasing="" amounts="" from="" days="" 1-8="" (144-148="" ml/(kg.="" day))to="" counterbalance="" the="" small="" enteral="" volumes="" the="" piglets="" can="" cope="" with.="" the="" pn="" solution="" was="" a="" commercially="" available="" human="" parenteral="" nutrition="" product="" (kabiven,="" fresenius="" kabi,="" uppsala,="" sweden)="" adjusted="" to="" the="" requirements="" of="" piglets="" as="" previously="" described="" [32].="" after="" removal="" of="" the="" orogastric="" feeding="" tube="" on="" day="" 11="" and="" onwards,="" all="" pigs="" had="" free="" access="" to="">
2.4. Evalyasyon klinik ak koleksyon tisi
Pandan tout peryòd etid la, kochon yo te kontwole ak anpil atansyon (omwen chak 3 èdtan) ak nòt klinik yo te asiyen de fwa chak jou jan sa te dekri deja [33]. Sou endikasyon klinik, tretman ki enpòtan yo te inisye, pa egzanp, administrasyon an nan analgesic nan miskilè (meloxicam: Metacam, 5 mg / mL Boehringer Ingelheim, Ingelheim am Rhein, Almay oswa butorphanol: Torbugesic Vet, 10 mg / mL, Zoetis, Parsippany, NJ, USA).Nan ka mank repons nan tretman, kochon yo te euthanized. Pwa kò yo te mezire chak jou, epi yo te kalkile ogmantasyon pwa kò an mwayèn ki eksprime kòm g/(kg.d), dapre fòmil la: (pwa nan etanasya-pwa nan nesans)/(mwayèn pwa kò × tout lavi). De fwa chak jou, poupou yo te bay nòt jan sa a: 1 (poupou fèm), 2 (poupou mou/paste), 3 (poupou krèm), ak 4 (dyare). Yo te bay yon solisyon elektwolit oral (Revolyte Nutrition) ant manje nan ka dyare pou evite dezidratasyon. Pwofilaktik antibyotik oral (metronidazole: Flagyl, 40 mg/mL, Sanofi-Aventis, Paris, Frans; amoxicillin, 500mg, ak asid clavulanic, 125 mg: Bioclavid, Sandoz GmbH, Copenhagen, Denmark; gentamicin: Gentocin Vet, 4.35 mg/mL , Scanvet, Fredensborg, Denmark) yo te bay de fwa pa jou apati jou 8-10, apre yo te retire katetè atè lonbrit la. Se menm konbinezon an nan antibyotik oral yo te administre terapetik, sou endikasyon. Nan jou 19, 60 minit anvan Etanazi, kochon yo te bay yon dènye bolus ofisyèl nan rejim respektif yo. Kochon yo te anestezi ak yon piki nan miskilè zolazepam / tiletamin (Zoletil 50,25 mg / mL zolazepam ak 25 mg / mL tiletamin, Virbac, Carros, Frans), ketamin (Ketaminol, 50 mg / mL, MSD Animal Health, Kenilworth, NJ). , USA) ak butorphanol (Torbugesic Vet), epi apre sa yo te euthanized ak sodyòm pentobarbital (Euthanimal, 400 mg/mL, Scanvet) pa piki entrakad. Touswit apre Etanazi, ògàn entèn yo te diseke ak peze, tou de ògàn antye ak rejyon ògàn espesifik (egzanp, lestomak plen/vid, ti trip, kolon, tout sèvo, rejyon nan sèvo, fwa, larat, ren, poumon, ak kè). Fraksyon dlo serebral la te estime nan peze emisfè serebral gòch la anvan ak apre dezidratasyon pandan 14 jou nan 50 degre. Chak nan senk rejyon gastwoentestinal yo (vant, proximal ti trip (Prox), mitan ti trip (Mid), distal ti trip (Dist), ak kolon) yo te evalye macroscopically epi yo te bay yon nòt NEC [39]. Echantiyon tisi ki soti nan chak rejyon gastwoentestinal yo te kolekte epi jele nan nitwojèn likid oswa fikse nan fòmaldeyid 4 pousan epi estoke nan -80 degre jiskaske plis analiz. Konsepsyon etid la ak rezilta yo montre nan Figi 1.
2.5. Estrikti mukoza entesten ak aktivite anzim fwontyè bwòs yo
Estrikti mukoza nan ti trip la te evalye pa mezire wotè villus ak pwofondè kript nan tisi histoloji Prox, Mid, ak Dist fikse nan paraformaldehyde ak tache ak ematoksilin ak eozin jan yo dekri deja [40]. Yo te itilize tach imunohistochimik pou Ki-67 replike nan seksyon Prox, Mid, ak Dist, pou evalye pwopagasyon enterosit nan ti mukoza entesten an jan yo dekri deja [41]. Kat imaj chak replike yo te jwenn nan yon mòd sistematik o aza lè l sèvi avèk yon mikwoskòp limyè (Ortho-plane, Leitz, Almay), tache ak yon kamera ak yon lantiy objektif 10 ×. Yo te fè analiz imaj lè l sèvi avèk Fiji: Imaj](NIH Imaj, Bethesda, Maryland) epi yo te kalkile sipèfisi total ki-67-nwayo tache pozitif kòm yon fraksyon nan zòn total nwayo a. Aktivite a nan 6 anzim fwontyè bwòs (maltaz, sikraz, laktaz, aminopeptidase N (ABN), aminopeptidase A (APA), ak dipeptidyl peptidase IV (DPPIV)) te detèmine nan omojene nan mitan tisi lè l sèvi avèk spectrophotometry [42].
2.6.Biochimi san, ematoloji, ak iminite sistemik
Echantiyon san pou byochimik ak paramèt ematolojik yo te analize nan Jou 1 soti nan kòd lonbrit la pandan C-seksyon, nan Jou 8 soti nan katetè patant lonbrit atè, oswa altènativman venn nan jigular, ak nan Jou 19 nan pike kadyak pandan etanasya. Plasma pou byochimik te jwenn pa yon vacutainer san eparinize (BDDiagnostics, Oxford, UK) ki te swiv pa santrifujasyon (2500 × g, 4 degre pou 10 min) te analize lè l sèvi avèk ADVIA 1800 Chemistry System (Siemens Healthcare GmbH, Erlangen, Almay). San plen pou ematoloji ak konte selil iminitè yo te jwenn pa yon vacutainer san EDTA-kouvwi (BD Diagnostics), yo te analize lè l sèvi avèk ADVIA 2120i Hematology System (Siemens Healthcare GmbH).
Egzamen sistemik ki gen rapò ak iminite pou etidye sou-selil T nan san, fonksyon fagositoz netrofil, ak konpetans iminitè pa eksitasyon san ex vivo Toll-like receptor(TLR) te fèt sou echantiyon san plen yo kolekte nan yon vacutainer san heparinized (BD Diagnostics) sou de. jou; Jou 8 soti nan katetè atè lonbrit oswa altènativman venn jigular ak Jou 19 soti nan venn jugulaire la. Yo te mezire karakterizasyon sous-selil T nan san jan yo dekri deja [43]. Yon ti tan, eritrosit yo te lysed lè l sèvi avèk 1 X BD FACS Lysing solisyon (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) ak leukocytes yo te enkube ak tanpon fiksasyon / pèmeabilizasyon (Invitrogen, Carlsbad, Kalifòni) pou 30 min nan 4 degre nan fè nwa a. Apre lave ak tanpon pèmeabilizasyon (Invitrogen), selil yo te bloke ak serom porsin (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA) pou 15 min 4 degre nan fè nwa a epi imedyatman tache ak kat antikò monoklonal fluorescent ki make; PE-Cy7-antikò CD3 anti-kochon sourit konjige (klonaj BB23-8E{6-8C8, BD Biosciences), antikò CD4 anti-kochon sourit ki konjige ak FITC (klonaj MIL17, Bio- Rad Laboratories, Hercules, Kalifòni), PE-konjige sourit anti-kochon CD8 antikò (klonaj MIL12, Bio-Rad Laboratories) ak APC-konjige rat anti-sourit antikò FOXP3 (klonaj JFK-16s, ThermoFisher Scientific). Echantiyon yo te analize lè l sèvi avèk yon sitomèt koule BD Accuri C6 (BDBiosciences) ak popilasyon selil T (CD3 plis lenfosit), selil T sitotoksik (CD3 plis CD4-CD8 plis lenfosit), selil T asistan ( CD3 plis CD4 plis lenfosit CD8-) ak selil T regilasyon (CD3 plis CD4 plis FoxP3 plis lenfosit) yo te idantifye. Fonksyon fagositik netrofil san yo te analize pa sikometri koule lè l sèvi avèk pHrodo Red Escherichia coli (560/585). nm)Bioparticles Phagocytosis Twous pou Flow Cytometry (ThermoFisher Scientific)34]. Pousantaj netrofil ki fè fagositoz nan popilasyon neutrofil yo (pHrodo plus) te endike pousantaj fagositik la e yo te endike kapasite fagositik netwofil yo pa entansite medyàn fliyoresan (MFI). Pou evalye repons enflamatwa sistemik nan yon gram ansyen viv. negatif bakteri defi, 294 μL plen san yo te enkube ak yon agonist TLR4 （lipopolysaccharide (LPS), E.coli O127:B8, Sigma Aldrich, St.Louis, MI, USA) pou 5 èdtan nan 37 degre, 5 pousan CO,. Lè sa a, yo te santrifuje san ki pa ankouraje ak ki pa ankouraje nan 2000 × g, 4 degre pou 10 min, epi yo te analize supernatant plasma pou faktè necrosis timè (TNF)- ak Interleukin (IL) -10 pa ELISA (Kits Porcine Specific Duoset, R&D). Systems, Abingdon, UK), swiv direktiv manifakti a. Echantiyon plasma yo te dilye 2-2.5 fwa anvan analiz. Se sèlman echantiyon ki gen nivo absorpsyon cytokine nan seri estanda yo te enkli pou kalkil nivo cytokine mwayèn ak rapò. Sepandan, echantiyon ki gen nivo absorpsyon cytokine anba estanda ki pi ba a men ki pi wo pase vid la yo te bay yon valè abitrè mwatye nan nivo ki pi ba detekte nan plak la epi yo enkli nan analiz estatistik la.
2.7. Devlopman Motè Bonè, Konpòtman, ak Koyisyon
Tan pou premye kanpe ak premye mache apre nesans te mezire kòm estimasyon akizisyon konpetans motè debaz yo. Kamera enfrawouj ki sansib pou mouvman yo te enstale anlè chak kaj lakay yo te kontinyèlman anrejistre aktivite motè kochon an soti nan Jou 1 a 21: 00 pm lè kochon yo te konplètman refè anba anestezi matènèl jiska Jou 11 [33]. Yo te kalkile pwopòsyon mwayèn tan aktif pandan yon èdtan nan anrejistreman 12-entèval èdtan pandan lajounen (9:00 am jiska 9:00 pm) ak lannwit (apati 9:{{12}). }} pm jiska 9:00 am). Yo te evalye konpòtman eksplorasyon chak kochon nan 9yèm jou a nan yon tèren nan jaden ouvè (1.2 m × 1.2 m) ak yon kamera videyo ki anrejistre nan gade yon zwazo pandan yon {{ 20}}min peryòd anrejistreman ak kochon nan lòd owaza. De obsèvatè avèg yo te bay kochon yon nòt jeneral an tan reyèl ki baze sou kat paramèt objektif: kontak etaj, kontak miray, tantativ chape, ak yon kantite demach. Apre sa, videyo akeri yo te analize lè l sèvi avèk EthoVision XT10 (Noldus Information Technology, Wageningen, Netherlands). Rezilta yo te total distans deplase ak vitès kalkile pou chak kochon. Apre bon jan devlopman vizyèl ak yon peryòd abitye, yo te evalye koyisyon espasyal chak kochon nan yon lòd owaza pandan Jou 12-18, lè l sèvi avèk tès koyisyon T-labirent nan espasyal ofisyèl [44]. Yo te teste aprantisaj ak memwa ki depann de ipokanp pandan 1-2 akizisyon yon jou, yo chak ki gen 10 esè. Siyal vizyèl siplemantè-labirent yo te aplike pou kochon yo navige pou jwenn yon rekonpans lèt fiks. Altène pozisyon kòmanse nan kochon yo te itilize pou fè pou evite mekanis repons ego-santre ak lèt yo te mete nan tou de bra rekonpans. Pou maske siyal olfactif, lèt la te sèlman aksesib nan youn nan bra yo. Kantite chwa kòrèk pou chak akizisyon te anrejistre pandan yon faz estanda (Acha 1-6, Jou 12-17) ak yon faz ranvèse (Acha 7-9, Jou 17-18). Nan faz lan ranvèse, rekonpans lèt la te chanje nan bra opoze a. Yo te defini yon minimòm de 80 pousan chwa kòrèk (8 chwa kòrèk sou 10 esè) kòm kritè aprantisaj la [30].
2.8. Analiz estatistik
Yo te itilize lojisyèl estatistik R (vèsyon 3.6.0) pou tout analiz estatistik yo. Pou tès anti-bakteri yo, yo te analize diferans ki genyen nan kwasans S. pami 6 alimantasyon tès yo ak fòmil tibebe yo atravè 2-24 èdtan nan enkubasyon, yo te analize lè l sèvi avèk yon modèl lineyè efè melanje (fonksyon Ime) ak dòz inokulasyon, tan, ak rejim tès. / fòmil kòm efè fiks (ki gen ladan entèraksyon ki genyen ant de dènye yo) ak peryòd eksperimantal la kòm yon efè o aza, ki te swiv pa konparezon par nan chak pwen tan (ls vle di pake). Mezi kontinyèl repete nan etid kochon an (sa vle di, pwa kò, aktivite kay kay la, chwa kòrèk nan tès koyisyon espasyal T-labirent la, ak ti paramèt entesten yo mezire atravè plizyè rejyon) yo te analize lè l sèvi avèk yon modèl lineyè efè melanje (fonksyon m) ki gen ladan estrikti a korelasyon apwopriye ak kochon kòm yon efè o aza. Pake a te fasilite konparezon ki vin apre nan chak rejyon ti entesten. Yo te itilize yon modèl danje pwopòsyonèl Cox (fonksyon) pou done kontinyèl tan-a-evènman (sa vle di, akizisyon de ladrès debaz motè ak premye fwa prezante ak dyare). Tout lòt done kontinyèl yo te analize lè l sèvi avèk yon modèl regresyon lineyè miltip (fonksyon lm). Holm koreksyon an te aplike nan tout done byochimik san yo korije pou tès konparezon miltip ak kontwole to a erè fanmi ki gen bon konprann. Done diskrè tan-a-evènman (sa vle di, pousantaj kochon ki te rive nan kritè aprantisaj T-labirent) yo te analize lè l sèvi avèk yon modèl regression lineyè jeneralize miltip (fonksyon) ak yon repons binomyal ak yon lyen konplemantè log-log. Sèks, fatra, ak pwa nesans yo te idantifye kòm konfonn potansyèl biyolojik ki enpòtan anvan etid la epi konsa yo te enkli kòm efè fiks nan tout modèl yo mansyone anwo a. Anplis de sa, pou tout paramèt byochimik san ak ematolojik, nivo debaz yo mezire nan Jou 1 anvan randomizasyon gwoup yo te enkli kòm efè fiks nan modèl miltip regression lineyè korespondan yo. Validasyon modèl modèl regression lineyè yo te fèt pa ekspozisyon grafik nòmal ak omossedastisite nan rezidyèl yo ak valè ekipe yo, ak transfòmasyon done (log oswa sqrt) pou satisfè sipozisyon sa yo, yo te fèt si sa nesesè. Pou varyab ki pa t 'kapab konfòme yo ak yon distribisyon nòmal, yo te aplike tès nonparametric Mann-Whitney. Modèl regresyon ak varyab repons kategorik yo te valide pa mennen ankèt sou rezidyèl yo kimilye lè l sèvi avèk tès la bonte-of-fit (nan pake). Sòf si yo di otreman, done anvan tout koreksyon yo prezante kòm vle di ± SD ak p-valè<0.05 are="" considered="" statistically="">
3. Rezilta yo
3.1.In vitro esè anti-bakteri
Efè lèt bèf ekreme ki konplete ak OPN nan diferan konsantrasyon, sou kwasans ak viabilite S., yo te evalye epi konpare ak fòmil tibebe. Apre 4, 6, ak 24 èdtan nan enkubasyon ak fòmil tibebe, konsantrasyon S. ogmante pa apeprè 10, 50 ak 1 × 10 plis -pliye, respektivman, pou tou de dòz vaksinasyon (10) ak 10 degre FU. ). Pa te gen okenn diferans ant 6 rejim tès yo ak fòmil anvan 4 èdtan nan enkubasyon ak dòz la vaksinasyon nan 105 CFU (Figi 2). Sepandan, yon efè bakterisid aparan nan rejim tès ki baze sou lèt bèf yo te evidan konpare ak fòmil tibebe, kòm konsantrasyon nan S. rete estatik nan sa yo pandan 1-4 èdtan nan enkubasyon. Nan 4 èdtan nan enkubasyon, apre menm dòz inokulasyon an, konte bakteri yo te pi ba nan tout rejim tès 6 konpare ak fòmil (apeprè 10 fwa, p <0.01). sipleman="" opn="" a="" te="" egzèse="" efè="" bakteryostatik="" alontèm="" ki="" depann="" de="" dòz="" kont="" s.="" kòm="" kantite="" bakteri="" apre="" 6="" èdtan="" nan="" enkubasyon="" te="" siyifikativman="" pi="" ba="" nan="" rejim="" tès="" yo="" ki="" gen="" 4="" dòz="" opn="" ki="" pi="" wo="" yo=""><0.05,10>dòz vaksinasyon). Se sèlman lèt bèf ekreme san sipleman ki pèdi kapasite li pou yon ti tan pou anpeche kwasans bakteri lè yo enkube pou 6 èdtan (dòz vaksinasyon 105 CFU). Nan 24 èdtan nan enkubasyon, konte bakteri yo te pi ba nan tout 6 rejim tès yo konpare ak fòmil (p.<001, 105="" cfu="" inoculation="" dose).="" all="" 6="" test="" diets="" exerted="" bacterial="" inhibitory="" effects="" (initially="" bactericidal)="" against="" s.,="" inoculated="" at="" 10°cfu,="" at="" all="" tested="" time=""><2 h="" of="" incubation=""><0.07,>2 h nan enkubasyon p<>
3.2. Rezilta klinik ak kwasans
Sèt kochon (5/21 OPN konpare ak 2/21 CON, p=0.4) soti nan 42 kochon yo te euthanized/mouri kòm yon konsekans immaturite ki gen rapò ak konplikasyon iatrogenic nan kòmansman an nan eksperyans la (
3.3. Estrikti ak Fonksyon zantray
Wotè villus ak pwofondè kript, evalye nan pati proximal, mitan, ak distal nan ti trip la te sanble ant de gwoup yo (Tablo 2). Konpare ak CON, yo te mezire yon rapò jeneral vil-a-kripte ki pi wo atravè twa rejyon ti entesten yo nan OPN(p<0.05, figure="" 4a).="" similar="" amounts="" of="" proliferative="" enterocytes="" were="" observed="" between="" the="" two="" groups,="" indicated="" by="" the="" same="" relative="" area="" of="" ki-67="" positive="" stained="" nuclei="" in="" the="" three="" small="" intestinal="" regions="" (figure="" 4b,="" c).="" further,="" the="" gastric="" emptying="" ability="" indicated="" by="" the="" gastric="" content="" weights="" at="" euthanasia="" as="" well="" as="" the="" activity="" of="" lactase,="" maltase,="" sucrase,="" apa,="" abn,="" and="" dppiv="" measured="" in="" the="" middle="" part="" of="" the="" small="" intestine="" were="" comparable="" between="" the="" groups="" (table="">
3.4. Byochimik san, ematoloji, ak iminite sistemik
Echantiyon san kòd yo te revele yon kantite total lekosit ak bazofil ki pi wo nan Jou 1 (p<0.05)of pigs="" later="" assigned="" the="" opngroup="" relative="" to="" pigs="" assigned="" the="" con="" group.="" no="" other="" immune="" cell="" counts,="" blood="" biochemistry,="" or="" hematology="" variables="" differed="" between="" the="" two="" groups="" prior="" to="" receiving="" their="" specific="" dietary="" interventions(data="" not="" shown).="" blood="" biochemistry="" variables="" measured="" on="" days="" 8="" and="" 19="" did="" not="" differ="" between="" groups(table="" s1,="" supplementary="" materials),="" and="" accompanied="" hematology="" parameters="" and="" immune="" cell="" counts="" are="" presented="" in="" table="" 3.="" compared="" with="" con="" pigs,="" opn="" pigs="" had="" a="" higher="" lymphocyte="" and="" monocyte="" count="" on="" day=""><0.05, figure="" 5a,="" b).="" the="" lymphocyte="" and="" monocyte="" count="" increased="" from="" day="" 8="" to="" day="" 19,="" with="" no="" final="" differences="" between="" the="" groups(figure="" 5a,="" b).="" the="" remaining="" immune="" cell="" counts="" and="" nonimmune-related="" hematological="" parameters="" were="" similar="" between="" opn="" and="" con="" pigs="" (table="" 3).="" innate="" and="" adaptive="" immune="" parameters="" were="" evaluated="" on="" days8="" and="" 19.="" on="" day="" 8,="" the="" blood="" neutrophil="" phagocytic="" rate="" and="" capacity="" were="" similar="" between="" opn="" and="" con="" (table="" 3).="" conversely,="" on="" day="" 19="" they="" had="" a="" higher="" frequency="" of="" neutrophils="" exerting="" phagocytosis="" compared="" with=""><0.05). the="" phagocytic="" capacity="" was="" though="" not="" different="" between="" groups="" (figure="" 5c,="" d).="" the="" t-cell="" subset="" characterization="" on="" days="" 8="" and="" 19="" did="" not="" reveal="" any="" differences="" between="" t="" helper="" cells,="" cytotoxic="" t="" cells,="" and="" regulatory="" t="" cells="" in="" the="" two="" groups="" (table="" 3).="" a="" representative="" facs="" gating="" is="" shown="" in="" figure="" s1,="" supplementary="" materials.="" the="" tlr4-mediated="" il10="" and="" tnf-α="" cytokine="" production="" of="" full="" blood="" from="" days="" 8="" and="" 19="" was="" evaluated.="" tnf-α="" and="" il10="" were="" detected="" at="" similar="" levels="" between="" opn="" and="" con="" in="" unstimulated="" plasma="" obtained="" on="" day="" 8="" and="" there="" were="" no="" group="" differences="" in="" the="" response="" to="" lps="" stimulation="" indicated="" by="" a="" similar="" tnf-α/il10="" ratio(table="" s2,="" supplementary="" materials).="" tnf-α="" was="" not="" detectable="" in="" unstimulated="" plasma="" obtained="" on="" day="" 19="" from="" either="" group.="" however,="" both="" groups="" responded="" equally="" to="" lps="" stimulation,="" indicated="" by="" similar="" tnf-α="" and="" il-10="" plasma="" levels="" (table="" s2,="" supplementary="">
3.5. Rezilta estriktirèl ak fonksyonèl nan sèvo
Rezilta estriktirèl ki gen rapò ak sèvo ki gen ladan valè absoli ak relatif pwa total nan sèvo, pwa rejyonal nan sèvo, ak kontni dlo serebral la te sanble ant gwoup OPN ak CON (Tablo 4). Pa gen okenn diferans nan devlopman motè bonè yo te obsève, kòm tan an premye kanpe, premye mache a, ak premye konsomasyon volontè nan yon bolus plen lèt ansanm ak pwopòsyon tan aktif nan kalòj lakay yo te mezire pa kamera ki sansib nan mouvman soti nan Jou { {3}}, yo te menm jan an ant OPN ak CON (Figi 6A-D). Konpòtman eksplorasyon kochon yo te evalye nan tèren an louvri nan Jou 9 la te konparab ant de gwoup yo, kòm nòt an jeneral, distans total deplase ak vitès yo te sanble (Tablo 4). Anplis de sa, yo te obsève yon pèfòmans mantal menm jan an pandan faz estanda ak ranvèse nan tès koyisyon espasyal T-labirent la ki te fèt sou 9 akizisyon soti nan jou 12- rive 18 (Figi 7A, B). Pwopòsyon an mwayèn nan chwa kòrèk yo te ogmante pou tou de gwoup yo nan tou de faz (Figure 7A).Nan faz estanda a, tou de OPN ak CON te rive nan kritè aprantisaj predefini sou Akizisyon 5 (80 pousan chwa kòrèk, Figi 7A). Tout kochon te rive nan kritè aprantisaj la, epi pa te gen okenn diferans nan tan yo te pran pou rive nan kritè aprantisaj la (Figi 7B).
4. Diskisyon
Efè multifonksyonèl nan OPN, patikilyèman an tèm de aktivite proliferasyon, regilasyon iminitè, ak aktivite anti-bakteri, men potansyèlman tou nan sipòte devlopman nan sèvo, ka ede amelyore sante ak devlopman ògàn nan tibebe ak tibebe sansib. Nivo OPN ki wo nan lèt imen bonè ak konsantrasyon plasma OPN korespondan tibebe yo defann yon rezèv ase OPN nan peryòd neonatal imedya lè tibebe yo manje lèt imen [5]. Okontrè, pi ba konsantrasyon OPN nan lèt bèf ak fòmil tibebe 4 bay yon fenèt opòtinite pou ogmante kontni OPN nan fòmil lèt, epi sipleman ak OPN ka ede diminye diferans devlopman ki egziste ant lèt matènèl ak lèt matènèl. -manje tibebe [2,3]. Nan etid sa a, nou te montre ke sipleman OPN nan yon rejim lèt bèf ak kontni OPN fondamantal te byen tolere, men se sèlman ti amelyorasyon nan estrikti zantray ak iminite sistemik yo te obsève, epi pa gen okenn lòt efè sou estrikti nan sèvo ak fonksyon yo te obsève. Yo te chwazi baz lèt bèf la pou asire yon rejim alimantè ki enpòtan bioaktif an konparezon ak yon fòmil lèt, ki anlè kontni OPN ki pi ba a tou te diminye byoaktivite. Lèt OPN rekonèt kòm yon pwoteyin enpòtan byolojik aktif, sitou akòz kapasite li nan modile iminite ak estimile pwopagasyon selil [18,45]. Kapasite OPN pou fòme konplèks ak laktoferrin ki chaje pozitivman yo jwenn nan lèt la ka ajoute plis pwopriyete fonksyonèl nan kontribiye nan defans kont patojèn nan zantray tibebe a [10]. Yo jwenn konplèks OPN-lactoferrin nan lèt imen ak bèf, men li ka fòme tou nan pwoteyin endividyèl yo [10]. Pou dokimante potansyèl byoaktif OPN nan yon rejim alimantè ki baze sou lèt bèf, okòmansman nou te teste kapasite anti-bakteri in vitro nan lèt bovine OPN te ajoute nan diferan konsantrasyon nan lèt Jersey ekreme esteril. Rezilta nou yo montre ke alimantasyon lèt siplemantè OPN yo fè egzèsis tou de kapasite anti-bakteri kout ak alontèm nan yon fason ki depann de dòz lè yo anpeche kwasans S.epidermidis, yon patojèn komen neonatal ki lakòz sepsis an reta apre translokasyon zantray [46,47]. ]. Sa a bay yon opòtinite pou ankouraje devlopman zantray pa sipleman OPN nan rejim alimantè lèt neonatal la. Nivo pi bon OPN dyetetik nan rejim ki baze sou lèt yo pa klè, ak varyasyon nan kontni OPN nan lèt imen an gwo, tou de ant manman yo, ak peyi yo, ak sou peryòd laktasyon [7. Etid sou bèt anvan yo te sitou envestige efè yo nan ajoute OPN nan yon rejim kontwòl san OPN, nan nivo ki konparab ak kontni an mwayèn lèt imen [14,22,24]. Nan etid kochon preklinik sa a, nou konsantre sou aspè ki enpòtan nan klinik pou ajoute plis OPN nan yon rejim alimantè ki gen yon nivo OPN fondamantal pou rive nan nivo lèt imen ki wo. Sipleman OPN nan etid sa a ogmante dòz OPN pou chak jou nan yon dòz ki reprezante konsomasyon nan tibebe ki soti nan manman ki gen konsantrasyon lèt OPN relativman wo, ak pi lwen pase sa yo resevwa nòmalman nan fòmil tibebe [4]. Kontni OPN nan lèt Jersey yo te ranmase a te vin gen yon kontni OPN ki pi wo pase yo te mezire deja nan lèt bèf. Li enpòtan pou sonje metòd LC-MS/MS yo itilize diferan de metòd ELISA yo te itilize nan etid anvan yo [48]. Mank efè mantal nan etid aktyèl la ka bay manti nan lefèt ke kochon kontwòl yo deja resevwa OPN nan konsantrasyon 91 mg / L, kòm natirèlman prezan nan lèt Jersey la, ak siplemantè OPN an pa bay okenn benefis adisyonèl. Nou te jwenn ke sipleman lèt bèf ak OPN te byen tolere epi konfere efè minè sou zantray ak spirasyon iminitè, tandiske paramèt estriktirèl ak fonksyonèl nan sèvo yo pa chanje. Tou de kochon OPN ak CON yo te montre pousantaj kwasans ki konparab oswa pi wo pase sa yo obsève nòmalman nan porsele anvan tèm nan etid ki sanble ak rejim lèt bovins [49-51]. Pousantaj kwasans yo ak estati klinik relativman bon ak nòt NEC ki ba yo reyalize nan kochon preterm sa yo, bay kondisyon pi bon pou dokimante efè dyetetik sou chanjman nan fonksyon ògàn yo ak devlopman mantal nan sèvo nan tibebe ki fèk fèt sansib.
Gen yon gwo resanblans ant sekans OPN moun, bèf, ak kochon [52], ak nati omniprésente nan OPN byen etabli nan kochon. OPN eksprime pa yon varyete de tisi porsin ki an sante ak pi gwo abondans yo jwenn nan tisi ileal [53], men konsantrasyon lèt porsin yo pa konnen. Nou te deja montre efè minè benefik nan yon fòmil OPN-anrichi nan porsele preterm an relasyon ak rekiperasyon nan enflamasyon prenatal [43]. Ansanm, sa a mete aksan sou itilizasyon kochon an kòm yon modèl preklinik pou mennen ankèt sou efè sipleman OPN dyetetik yo. Relatif ak CON, kochon OPN te gen yon pi wo rapò villus-a-kripto atravè ti trip la. Yo te rapòte yon diferans mòfolojik menm jan an ki baze sou echantiyon duodnal ki soti nan 10-pitit sourit ki gen yon jou ki te bay tete pa baraj sovaj oswa baraj knock-out OPN ki te konplete ak lèt bèf OPN parapò ak ti sourit ki pa t resevwa okenn OPN[22]. Etid anvan tèm kochon yo te korelasyon ogmante wotè villus ak yon kapasite amelyore nitritif absòpsyon nan, egzanp, galaktoz [51,54], ki ka kritik pou asire kwasans optimal. Sèvi ak liy selil kochon IPEC-J2 nou te deja demontre nan vitro kapasite OPN pou ogmante pwopagasyon selil yo nan yon fason ki depann de dòz [43]. Amelyore estrikti mukozal entesten brit yo te obsève nan mitan kochon OPN nan etid aktyèl la pa t 'kapab eksplike pa yon ogmantasyon nan enterosit proliferatif ki baze sou tach Ki-67 nan ti trip la epi li pa t' lakòz chanjman nan aktivite anzim dijestif yo. Konklizyon pi bonè nan makak rhesus ki fenk fèt OPN te konplete avèk fòmil, yo te montre chanjman entesten ak pwofil ekspresyon jèn jejunal yo pi sanble ak tokay tete [12]. Menm trajectoire devlòpmantal konsènan konte selil iminitè yo te obsève nan kochon OPN ak CON. Tout selil iminitè, eksepte konte basofil ak eozinofil, ak nivo ki ba menm jan an nan porsele tèm [34], te ogmante nan kantite soti nan Jou 8 rive nan Jou 19, ki endike yon kapasite ranfòse nan tou de gwoup yo monte yon repons iminitè ase nan yon patojèn potansyèl. Nivo monosit ak lenfosit sikile nan kochon OPN nan Jou 8 te pi wo parapò ak kochon CON, men se pa nan Jou 19. Depi kondisyon klinik la te menm jan an ant kochon nan tou de gwoup yo ak NECscores ki ba, nivo monosit ak lenfosit yo pwobableman gen rapò ak tretman. efè ak sijere yon devlopman iminitè akselere nan kochon OPN. Yon pwopòsyon ki pi wo nan monosit sikile yo te obsève tou nan yon jijman kontwole owaza nan tibebe sis mwa ki resevwa fòmil ak OPN lèt bovine te ajoute nan konsantrasyon nan 65 mg / L ak 135 mg / L, parapò ak kontwòl tete [55]. OPN kapab kominike avèk selil iminitè yo atravè reseptè li yo epi li aji kòm yon ajan chimyotaktik pou monosit IL-1-aktive, ki ka fizyolojik ki enpòtan pandan enflamasyon [16]. OPN ka plis jwe yon wòl nan iminite natirèl nan medyatè fagositoz atravè reseptè a integrin, bèf 2, ki eksprime sou sifas monosit [16]. Plis etid k ap mennen ankèt sou wòl OPN sou fonksyon monosit ak fason sa a tradwi nan yon benefis pou tibebe ki manje fòmil yo rete pou envestige.
Yo te fè yon karakterizasyon sou-selil T nan Jou 8 ak 19 pou plis dekri popilasyon lenfosit la men li pa t revele okenn diferans nan fraksyon sou-seri ant de gwoup yo nan peryòd neonatal imedya sa a. Tibebe ki te resevwa fòmil tibebe ki konplete ak OPN (65 oswa 130 mg/L), te montre yon pwopòsyon ogmante nan selil T nan premye sis mwa nan lavi yo konpare ak fòmil fondamantal yo manje [55]. Repons sa a pa ka devlope deja nan premye semèn yo nan lavi, oswa nivo relativman wo nan OPN nan lèt bèf baz nou an (91 mg/L) ka limite plis chanjman. Kantite selil T, selil T asistan yo ak selil T cytotoksik yo pa t diferan ant OPN ak CON, epi kidonk pa ka eksplike diferans ki genyen nan lenfosit sikile ant de gwoup yo nan Jou 8. Nan etid sa a, nou tache pou CD3, CD4, CD8, ak Foxp3, epi li rete yo dwe envestige si pi wo konte lenfosit la ta ka soti nan yon pi wo konte B-selil oswa yon kantite ogmante nan selil asasen natirèl. Matirite iminite sistemik apre nesans gen ladan yon chanjman nan balans Th1/Th2, kote defans kont enfeksyon bakteri mande pou yon Th1 skewing [17]. OPN se yon chemoattractant ki pisan ak pwopriyete ki sanble ak cytokine epi li se li te ye pou kontwole balans Th1/Th2 [18]. Nan etid sa a, balans Th1/Th2 a yon ti tan apre nesans pa t 'modile pa rejim alimantè ki endike pa yon rapò TNF-/IL10 ki sanble nan Jou 8. Kòm nivo TNF-o yo pa detekte nan echantiyon plasma san stimulation soti nan Jou 19 la, TNF-/IL10 la. rapò nan pwen sa a pa t 'kapab kalkile. Dènyèman, etid ki itilize modèl bèt [14,22,24] te envestige wòl OPN lèt nan neurodevelopment pandan timoun piti. Lè l sèvi avèk yon modèl sourit knockout OPN, lèt ki gen nivo OPN ki sanble ak lèt imen yo te montre amelyore devlopman ladrès motè ak kapasite memwa ki depann de ipokanp nan 30-chik sourit ki gen yon jou konpare ak kontwòl dyetetik ki pa gen OPN. Rezilta fonksyonèl sèvo sa yo nan OPN ki gen rapò ak lèt dyetetik yo te lye nan nivo OPN nan sèvo andojèn amelyore ak yon pwopagasyon ki pi wo ak diferansyasyon nan nè / antijèn glial de selil nan oligodendrocytes ki mennen nan yon ekspresyon ogmante nan pwoteyin ki gen rapò ak myelin. Nan yon konfigirasyon eksperimantal menm jan an, ti chen sourit sovaj ki te bay tete pa baraj knockout OPN epi yo te bay siplemantè lèt bèf OPN (12 ug/g) te montre yon pi gwo kapasite memwa pase kontwòl san sipleman [22]. Ansanm, rezilta sa yo endike ke lèt OPN jwe yon wòl enpòtan nan devlopman nerokognitif e ke lèt bovine OPN ka egzèse efè benefik sa yo atravè espès yo. Nou te jwenn devlopman menm jan an nan akizisyon de ladrès debaz motè, aktivite kay-kaj, ak konpòtman eksplorasyon nan tèren an jaden an louvri ant gwoup yo. Pèfòmans gwoup nan tès espasyal T-labirent la te endike plis aprantisaj ak memwa ki depandan nan ipokanp yo epi kidonk kapasite mantal yo. Konklizyon nou yo an akò ak yon etid ki fèk fèt ki te konpare porsele tèm de jou ki te resevwa yon rejim alimantè fòmil ki baze sou pwoteyin soya ki pa gen OPN oswa ki te konplete ak 250 mg/L lèt bèf OPN [24]. Se sèlman diferans konpòtman limite yo te evidan ant de gwoup yo evalye pandan yon travay rekonesans objè roman fèt nan jou apre akouchman 30. Sa implique ke omwen nan kochon ki an sante, ki fèt tèm, sipleman lèt OPN pa amelyore plis devlopman ki gen rapò ak sèvo jan yo mezire pa. rekonesans nouvo objè. Menm jan ak tès espasyal T-labirent la [44], travay la rekonesans objè roman konsidere kòm ipokanp-depandan, ak Se poutèt sa tès konpòtman sa yo ta ka pi sansib pi pre tan an nan to maksimòm kwasans ipokanp, ki nan tèm kochon gason ak fi rive. nan apeprè apre akouchman Semèn 8 ak 3, respektivman [56]. Li pa konnen si amelyorasyon kognitif alontèm apre sipleman lèt OPN nan lavi bonè, jan yo demontre nan syans sourit-modèl [14,22], te kapab dokimante nan kochon yo nan moman pita.
Konsènan devlopman nan sèvo estriktirèl, li te deja dokimante nan imaj sonorite mayetik ke sipleman OPN dyetetik ogmante kantite volim rejyonal nan sèvo apre nòmalizasyon nan volim total nan sèvo [24]. Nan etid sa a, nou pa jwenn okenn diferans ki genyen nan rejim alimantè a nan pwa rejyonal nan sèvo, ni pwa absoli ni relatif nan pwa total nan sèvo. Se poutèt sa, nou pa t 'fè plis analiz apwofondi tankou mezire nivo ekspresyon jèn nan pwoteyin ki gen rapò ak myelin, tankou pwoteyin debaz myelin ak glikoprotein ki asosye ak myelin [14,23]. Li te deja dokimante ke OPN ekzojèn gen pwopriyete neropwotektif lè li diminye neuroenflamasyon emoraji entraserebral ki te pwovoke ki mennen nan amelyore nòt newolojik [57I. Gen plis rechèch ki jistifye pou mennen ankèt sou si lèt OPN kapab konfere efè benefik estriktirèl ak fonksyonèl nan sèvo a pandan kondisyon enflamatwa sistemik, souvan ki gen eksperyans pa tibebe anvan tèm [26]. Sa a te soti nan sijè ki abòde lan etid aktyèl la.
5. Konklizyon
Nan yon modèl kochon preterm nan tibebe ki fèk fèt sansib, nou te montre ke yon rejim alimantè byoaktif lèt bovine siplemantè OPN lèt bovine se byen tolere ak pwovoke ti amelyorasyon nan estrikti zantray ak iminite sistemik, ki pa gen okenn efè plis sou devlopman estriktirèl oswa fonksyonèl nan sèvo. Sipleman ak OPN pi wo pase sa yo resevwa nan lèt bèf fondamantal, kidonk rive nan nivo segondè nan fen fizyolojik sa tibebe natirèlman resevwa nan lèt imen, ka kidonk gen efè limite sou zantray, iminite, ak devlopman nan sèvo nan tibebe ki fèk fèt sansib nan peryòd neonatal imedya a. . Plis enfòmasyon sou benefis lèt OPN sipleman lèt bèf ki baze sou fòmil tibebe pou ankouraje devlopman tibebe ki fèk fèt konpwomèt yo rete pou detèmine.
