Reaktive Memwa Ipokanp yo pandan Rekonsolidasyon Pou Deranje Laperèz Pati 3

Entèferans dDG espesifik nan memwa laperèz la epi li pa afekte lòt souvni ipokanp yo

Relasyon ki genyen ant memwa laperèz ak memwa enpòtan paske yo gen yon enpak siyifikatif sou rezilta lavi nou. Malgre ke laperèz yo souvan konsidere kòm negatif ak dezagreyab, li ka amelyore memwa nou ak kapasite mantal.

Memwa laperèz se yon fòm memwa pwisan paske li akonpaye pa yon eksperyans emosyonèl entans. Rechèch montre ke nou gen plis chans sonje enfòmasyon ki enpòtan lè nou fè fas ak laperèz oswa menas pase ak lòt evènman nan lavi chak jou nou an. Kapasite memwa sa a fè nou pi vijilan nan sitiyasyon ki kapab menase lavi pou nou ka pi byen reponn a menas nan lavni.

Anplis de sa, memwa laperèz ka amelyore kapasite mantal nou yo. Paske fòm memwa sa a gen emosyon ak siyifikasyon, li konbine avèk lòt enfòmasyon, ki fè li pi fasil pou sonje ak konprann. Sa a ede tou amelyore konsantrasyon nou ak ladrès panse, plis amelyore aprantisaj nou ak kapasite memwa.

Se poutèt sa, konprann wòl ak valè memwa laperèz esansyèl pou moun ki vle amelyore memwa yo. Pandan ke laperèz ka yon eksperyans difisil pou aksepte, si nou adopte yon atitid pozitif, li ka vin zanmi nou ak alye nan fè pwomosyon kwasans mantal ak pèsonèl nou. Kèlkeswa laperèz nou fè fas a, nou ka jwenn eksperyans nan li, aprann simonte li epi amelyore rezistans mantal ak sikolojik nou an.

Se konsa, pandan ke souvni laperèz ka santi akablan ak twoublan, nou pa ta dwe wè yo kòm yon bagay negatif. Olye de sa, nou ta dwe aprann kijan pou sèvi ak li pou kwasans nou ak pwogrè. Lè nou senpleman rete pozitif epi reflechi byen, nou ka aprann plis nan efè laperèz ak amelyore memwa nou ak kapasite mantal. Li ka wè ke nou bezwen amelyore memwa, ak Cistanche deserticola ka siyifikativman amelyore memwa paske Cistanche deserticola se yon materyèl tradisyonèl Chinwa medsin ki gen anpil efè inik, youn nan ki se amelyore memwa. Efikasite Cistanche deserticola soti nan plizyè engredyan aktif li genyen ladan l, tankou asid tannik, polisakarid, glikozid flavonoid, elatriye. Engredyan sa yo ka ankouraje sante nan sèvo atravè yon varyete chemen.

Klike sou konnen sipleman pou amelyore memwa

Pou detèmine si manipilasyon nou an, ki deranje memwa laperèz, ta tou afekte lòt kalite memwa medyatè ipokanp, nou fòme sourit sou yon travay memwa referans espasyal.

Menm jan ak eksperyans anvan an, nou te enjekte sourit ak AAV5-CaMKIIa-(hChR2-H134R)-eYFP ki pa dilye pou mete etikèt sou newòn DG owaza (Fig. 5a). Lè sa a, sourit ki gen restriksyon sou dlo yo te antrene pou jwenn yon rekonpans dlo nan youn nan bra yo nan yon 8-labirent radial bra.

Yo te resevwa 4 esè jiskaske yo te rankontre yon seri kritè pèfòmans. Apre sa, pou evalye efè eksitasyon an sou memwa laperèz, yo te sibi menm pwotokòl konpòtman ak eksperyans anvan yo.

Pou evalye efè eksitasyon dDG sou memwa referans espasyal, nou teste sourit sou pèfòmans memwa espasyal apre yo fin pè-kondisyone ak apre rapèl epi kouri yon tès rido apre EXT2 pou asire sourit yo te itilize siyal siplemantè labirent pou fè travay la. Enteresan, sourit nan eksperyans sa a demontre pi ba konjelasyon postshock pandan pè-kondisyone konpare ak lòt sourit nan etid la, ki nou kwè se yon rezilta dirèk nan yo te okipe plis souvan nan fòmasyon sou travay la referans espasyal (Fig. 5b ak SupplementalFig. 1g).

Sepandan, pandan rapèl, sourit eYFP te montre konjelasyon nòmal, alòske jan yo te espere, sourit ChR2- te montre diminye an tan reyèl nan friz (figi 5c). Sa a laperèz diminye reponn pandan disparisyon (figi 5d) ak sourit ChR2 ki montre mwens konjelasyon nan premye 3 minit nan EXT1 (figi siplemantè 1g) ak nan tout sesyon an antyeEXT2. Pa gen okenn diferans ki te wè pandan chòk imedya (figi 5e), e jan yo espere, gwoup ChR2-yo te demontre mwens friz pandan reyenstale (figi 5f, g).

Pou pèfòmans labirent, tout sourit met kritè ant 5 ak 14 jou (figi 5h) ak amelyore atravè akizisyon tan, an tèm de latansi jwenn rekonpans la, kantite devyasyon bra (sou premye vizit yon sourit nan yon bra), kantite erè referans. (sa vle di, antre nan move bra) ak repete erè referans (k ap travay erè memwa) te fè (figi 5i-p, panno ki pi agoch).

Pèfòmans yo te divize an de kategori: esè 1, ki te entèprete kòm yon evalyasyon nan memwa alontèm nan jou anvan an, ak esè 2-4, ki te entèprete kòm yon evalyasyon nan memwa kout tèm nan esè anvan an nan menm jou a. . Sourit yo te premye teste nan labirent la 3 èdtan apre pè-kondisyone pou konfime ke kondisyone pè tèt li pa t afekte memwa espasyal.

Nou pa wè okenn efè (figi 5i–p, panno mitan yo). Travay nan sipozisyon ke entèvansyon optik nou an deranje memwa laperèz la rive paske kondisyon yo prezan pou memwa sibi rekonsolidasyon, obsève yon andikap memwa espasyal ta ka kache si memwa sa a. pa tou sibi rekonsolidasyon.

Pou teste avèk presizyon si entèvansyon nou an te espesifik nan memwa laperèz la, nou t ap chèche ogmante chans pou kondisyon limit ki pèmèt rekonsolidasyon memwa pou memwa espasyal la te rankontre64. Pou sa, nou te bay mwatye sourit yo (gwoup rapèl) yon sesyon rapèl (esè 1) 5 minit anvan tès la sonje fearmemory.

Pandan sesyon rapèl sa a, nou ranplase planche nan sant labirent la ak papye sab pou kreye yon erè prediksyon 65. Sa pa t afekte kote rekonpans lan, men li te prezante sourit yon siy inatandi pandan jijman an. Sourit rapèl yo te resevwa esè 2-43 èdtan apre sesyon rapèl la, pandan ke lòt mwatye sourit la (Pa gen gwoup rapèl) pa t resevwa yon sesyon rapèl, epi olye yo te resevwa tout 4esè regilye 3 èdtan apre sesyon rapèl la.

Yon fwa ankò, nou pa wè okenn diferans pèfòmans ak tout sourit fè byen nan seri kritè (figi 5i-p, panno mitan). Tout sourit yo te teste sou labirent la jou apre a epi 3 èdtan apre yo te bay premye sesyon disparisyon an. Nonasures yo te afekte pandan tès sa a eksepte devyasyon bra (Fig. 5k, l).

Nan esè 1, tou de sourit ChR2 ak eYFP nan gwoup rapèl yo te gen pi gwo devyasyon bra ki sijere sesyon rapèl la, ki potansyèlman mennen nan rekonsolidasyon memwa espasyal la, yon ti tan afekte mezi pèfòmans sa a.

Sepandan, efè sa a te konpòtman epi li pa se rezilta eksitasyon optik nan selil dDG o aza paske te gen okenn diferans ant ChR2 ak sourit eYFP. Nan esè 2-4, sourit nan gwoup ChR2 (tou de Rapèl ak Pa gen rapèl) te demontre pi bon pèfòmans (mwens devyasyon bra) konpare ak gwoup eYFP ki sijere pèfòmans labirent amelyore kòm rezilta rekonsolidasyon kèlkeswa si yo te bay yon sesyon rapèl.

Sa ki enpòtan, sa a te demontre tou ke efè deranje manipilasyon nou an te espesifik nan memwa laperèz la (figi 5i-p, panno mitan). Pou asire nou t ap teste memwa ipokanp nan medyatè kote souris yo t ap itilize siyal siplemantè labirent pou jwenn rekonpans la. yo te bay sourit sa yo yon tès sonde rido.

Kòm espere, tout sourit yo te montre pèfòmans diminye sou sond la konpare ak dènye 3 d nan fòmasyon ak pèfòmans rive nan nivo li te nan lè yo te kòmanse travay la premye (figi 5i-p, panno ki pi adwat yo).

Reekri memwa laperèz orijinal la

Apre sa, nou t'ap chache detèmine si rediksyon nan kondisyonedfear te akonpaye pa yon chanjman nan dinamik ansanbl nan engram laperèz orijinal la. Pou evalye si manipilasyon nou an te chanje memwa laperèz orijinal la, nou konbine de sistèm ki baze sou viris (Fig. 6a).

Tout sourit yo te sou fòm piki ak c-Fos-tTA-TRE-mCherry pou tag dDG selil ki enplike nan kode epòk la pè-kondisyone. Sourit yo te tou enjekte swa AAV5-CaMKIIa-hChR2-H134R-eYFP san dilye oswa AAV5-CaMKIIa-eYFP san dilye pou mete etikèt sou yon seri newòn dDG. Lè sa a, sourit yo te sibi pwotokòl eksperimantal menm jan ak anvan kote yo te FC demontre konjelasyon apre chòk (figi 6b ak Figi siplemantè 1h).

Pandan rapèl, eksitasyon optik pwodui diminisyon an tan reyèl nan konjelasyon nan sourit ChR2 konpare ak kontwòl eYFP (Fig. 6c), ak diferans sa yo pèsiste nan disparisyon (Fig. 6d) ki gen ladan premye 3 minit nan EXT1 ak dènye 3 minit nan EXT2. (Siplemantè Figi 1h). Pa gen okenn diferans gwoup yo te obsève pandan chòk imedya (figi 6e). Pandan reyentegrasyon, sourit ChR2 kontinye montre konjelasyon diminye (figi 6f, g).

Pou detèmine si sourit sa yo te gen mwens newòn sipèpoze soti nan epòk orijinal la pè-kondisyone nan tès la reyentegrasyon konpare ak kontwòl eYFP, sourit yo te perfused 90 minit apre retabli, ak nivo c-Fos yo te kantite. Fig. 7a–d ak Figi Siplemantè 5a–e) epi yo itilize pou jwenn konte selil yo.

Nou premye kalkile kantite total selil DAPI ki make pou chak gwoup (Fig. 7e, f). Pou eksperyans kote wetagged yon epòk konpòtman lè l sèvi avèk yon pwomotè c-Fos (Fig. 1-3, 6), yo te detèmine gwosè tèz nan engram nan kòm yon pousantaj nan newòn DAPI ki make (Fig. 7g, eYFP; Fig. 7h, Cherry) .

Kèlkeswa valans, selil ki make ki asosye ak yon eksperyans konpòtman patikilye, ki gen ladan yon eksperyans kalòj lakay38, se apeprè 8% newòn ki gen etikèt DAPI nan dDG (M=8.015, SD=0.572). Pousantaj selil ki make kòm c-Fos+, ki reprezante seri selil ki aktif pandan tès reyentegrasyon an (Fig. 7g, i, RFP; Fig. 7h, j, RFP & BFP) te apeprè 1.5% (M=1 .438, SD=0.21).

Nan premye seri eksperyans yo, pousantaj sipèpoze (jòn) (figi 7g, k) ant engram ki te make la te itilize pou entèfere ak memwa laperèz pandan rapèl (eYFP) (figi 7g) ak engram nan retabli (RFP) (Fig. 7g, i) ka entèprete kòm yon mezi pou konnen si manipilasyon ki baze sou rekonsolidasyon nou an te lakòz fusion de memwa yo.

Nou te obsève yon pi gwo pousantaj sipèpoze pou eksperyans negatif konpare ak eksperyans net ki sijere eksperyans negatif yo pataje pi gwo resanblans ak memwa laperèz konpare ak eksperyans net yo.Sepandan, pa gen okenn diferans obsève ant pousantaj sipèpoze pou eksperyans negatif konpare ak eksperyans pozitif, oswa eksperyans pozitif. konpare ak eksperyans net.

Nou espekile ke degre sipèpoze ant eksperyans negatif ak memwa laperèz ka anpeche reyaktivasyon engram sa yo gwoup ki pa dilye konpare ak gwoup ki dilye ki baze tou senpleman sou kantite selil ki make.

Nan gwoup ki pa dilye yo, nou te make apeprè 40% (M=37.16, SD=5.5) newòn ki make DAPI epi nan gwoup ki dilye nou te make yon 8% menm jan an selil (M {{ 7}}.57, SD=0.4) asour engram ki asosye ak epòk (Fig. 7h). Finalman, nou t'ap chache detèmine si memwa laperèz orijinal la te chanje soti nan kondisyone nan reyenstalasyon akòz rediksyon nan laperèz, malgre yo pa te gen patipri pou enkòpore selil yo atifisyèlman aktive pandan rapèl.

Pousantaj sipèpoze (majenta) (figi 7h, l) ant seri newòn sa yo, sa ki make nan engram laperèz orijinal la (mCherry) (figi 7h) ak engram laperèz nan retablisman (BFP) (figi 7h, j) kapab dwe entèprete kòm yon mezi si entèvansyon ki baze sou rekonsolidasyon nou an te lakòz chanjman nan memwa laperèz orijinal la.

Nou te jwenn siyifikativman mwens sipèpoze nan memwa laperèz atravè kondisyone ak reyentegrasyon nan gwoup ChR2, sa ki sijere ke pandan ke nou pa t 'fusion memwa laperèz ak ansanbl yo entèfere (figi 7m), manipilasyon nou yo, sepandan, chanje memwa laperèz orijinal la (figi 7n), ki nou kwè ka ede eksplike rediksyon korespondan nan laperèz.

Nou espekile ke manipilasyon ki baze sou rekonsolidasyon nou an te lakòz disengagement nan ansanbl sa yo nan yon fason orthogonal, separe memwa sa yo nan popilasyon newòn disparate (Fig. 7m, n).

Enteresan, pwopòsyon selil ki make/aktive owaza (eYFP) ki te tou fè pati engram laperèz orijinal la (mCherry) te pi wo pase chans (jòn) ak pwopòsyon selil ki make/aktive owaza (eYFP) ki te tou fè pati engram laperèz. nan reyentegrasyon (BFP) te tou pi wo pase chans (cyan) kòm te sipèpoze nan tout 3 kalite selil (blan) nan gwoup la eYFP (figi 7l); sepandan, pa gen okenn diferans gwoup yo te wè.

Ansanm, konklizyon sa yo bay prèv preliminè pou efikasite terapetik potansyèl de memwa modulation atifisyèlman pou tou de ak anpil ak andire siprime repons laperèz lè yo chanje memwa laperèz orijinal la pandan peryòd rekonsolidasyon an.

For more information:1950477648nn@gmail.com