Dènye pwogrè nan Dekouvèt Antijèn Tik ak Devlopman Vaksen kont Tik Pati 2

2.4. Kandida Antigen ki asosye ak Malpighian

Nan òganis vivan yo, 50 -nukleotidaz yo se yon gwoup anzim ki lajman distribiye nan divès espès tik. Gen konsiderab resanblans ant 50 -nukleotidaz tik ak anzim ki prezan nan vertebre yo, epi anzim sa yo fè yon seri fonksyon, tankou patisipasyon nan chemen sovtaj purin yo [108]. Pami tik, gwoup sa a nan anzim yo jwenn nan anpil tisi diferan, tankou zantray, glann saliv, ak òvèj.

Sepandan, yo pi abondan nan tubul Malpighian yo, patikilyèman sou sifas tubul Malpighian yo ak selil ovè yo. Karakteristik 50 -nukleotidaz yo endike ke yo se yon sib potansyèl pou antikò [109]. Hope et al. te envestige 50 -nukleotidaz pou patisipasyon posib yo nan vaksen lame a, epi yo te jwenn ke piki nan 50 -nukleotidaz recombinant pou kont li nan mouton te lakòz yon ogmantasyon enpòtan nan antikò anti-nukleozidaz, ki sijere ke yo ka bon antijèn pou la. devlopman yon vaksen [104].

Sepandan, lè menm gwoup chèchè yo te analize fonksyon yo kòm antijèn nan bèt, pa te gen okenn ogmantasyon nan nivo antikò. Se poutèt sa, 50 -nukleotidaz yo pa te envestige plis kòm antijèn pou devlopman vaksen. Sepandan, yon etid resan yon lòt gwoup chèchè te fè te jwenn ke nivo pwodiksyon 50 -nukleotidaz/apyrase ogmante nan O. erraticus apre yo fin manje [110]. Anplis de sa, yo sigjere ke bloke fonksyon apyraz la pa vaksinasyon lame ak yon pwoteyin apyrase recombinant ka redwi anpil manje nan tik O. moubata, sa ki montre ke 50 -nukleotidaz/apyrases yo potansyèlman pwomèt antijèn kandida pou devlopman yon anti-tik. vaksen [110,111].

Nukleotidase se yon anzim ki ka katalize reyaksyon idroliz nan nukleotid, kraze nukleotid nan nukleozid ak fosfat inòganik. Nukleotid gen fonksyon byolojik enpòtan nan òganis yo, tankou konstriksyon, depo, ak transmisyon ADN ak RNA, transfè enèji, ak transdiksyon siyal selil. Se poutèt sa, nukleotidaz jwe yon wòl enpòtan nan òganis vivan yo. Iminite se kapasite kò a pou reziste kont patojèn nan anviwònman ekstèn, ki enplike yon varyete de pwosesis byolojik, ki gen ladan ekspansyon, diferansyasyon, ak règleman selil iminitè yo. Plizyè etid yo montre ke nucleotidases ka afekte fonksyon sistèm iminitè a e konsa iminite.

Pou egzanp, kèk varyant nan nukleotidaz yo te lye nan devlopman nan maladi otoiminitè. Anplis de sa, nukleotidaz kapab tou afekte pwopagasyon ak aktivasyon selil iminitè yo, epi ankouraje fonksyon selil iminitè yo. Se poutèt sa, gen yon sèten relasyon ant nukleotidaz ak iminite. Soti nan pwen de vi sa a, nou dwe peye anpil atansyon sou amelyorasyon nan iminite. Cistanche gen yon efè enpòtan sou amelyore iminite. Sann vyann gen yon varyete de engredyan biyolojik aktif, tankou polisakarid, de dyondyon, Huang Li, elatriye engredyan sa yo ka ankouraje sistèm iminitè a. Plizyè kalite selil nan sistèm nan ogmante aktivite iminitè yo.

Klike sou benefis cistanche tubulosa

2.5. Tik-Siman-Asosye Kandida Antijèn

Tik siman se yon melanj de glikol ak lipoprotein ki sekrete nan lame a atravè krache tik yon ti tan apre atachman ak lame a, epi li se yon sous valab nan antijèn ki sòti tik pou devlopman vaksen [112]. Anplis de kole pati bouch tik sou po lame a [113], yo montre siman tik aji kòm yon depo pou B. burgdorferi sensu lato (sl) ak viris ansefalit tik la [114,115]. Jiskaprezan, divès antijèn yo te idantifye ak karakterize soti nan siman tik ki te tou te montre yo dwe efikas nan kontwole enfeksyon tik ak maladi tik.

Konstwi tronke nan 64P (64TRPs), yon pwoteyin siman 15 kDa sekrete pa glann saliv Rhipicephalus appendiculatus, te montre pwoteksyon kwa kont Rhipicephalus sanguineus ak Ixodes ricinus lè yo vize antijèn nan midgut ak glann saliv, sa ki lakòz nenf ak mòtalite nan adilt. Vaksen an nan lame tik-naïf ak recombinant 64P redwi siyifikativman kantite nymphal ak tik adilt enfestasyon, sa ki lakòz 48 pousan ninfal ak jiska 70 pousan mòtalite adilt, ak kèk efè sou pwa engorgement ak mas ze tou [116].

Apati rezilta sa yo, li parèt ke pwoteyin sa a se yon antijèn vaksen gwo spectre epi li efikas kont etap adilt ak frelikè nan diferan espès tik, ki gen ladan I. ricinus [100]. Antijèn siman sa a te fè yon fonksyon doub (i) kòm yon vaksen nan modèl amstè, kochon Gine, ak lapen lè li te afekte atachman ak manje epi (ii) lè li te reyaji kwaze ak antijèn midgut "kache" yo, finalman lakòz lanmò tik engorged. [100,117]. Antijèn sa a pa sèlman ranfòse tit antikò an repons a enfeksyon tik, men tou gen kwa-reaktivite ak tisi tik diferan; Se poutèt sa, li konbine benefis tou de "kache" ak "ekspoze" antijèn [118].

3. Kalite Vaksen kont Tik yo

Tik yo se parazit atwopod ki pi souvan manje moun ak bèt epi ki transmèt maladi [19]. Maladi zoonotik yo reprezante plis pase 60 pousan nan tout maladi enfektye ki afekte moun, epi li estime ke 22.8 pousan nan enfeksyon sa yo transmèt pa vektè tik [131]. Genyen tou pèt ekonomik masiv pou kiltivatè bèt atravè lemond akòz maladi tik yo vektè ki afekte bèt yo [132,133].

Se poutèt sa, li enpòtan pou kontwole tik pou redwi fado sosyoekonomik la. Kontwòl tik yo vin difisil, paske tik yo ka devlope rezistans kont akarisid ki disponib nan komès [134-136]. Teknoloji inovatif kontwòl anviwònman an nesesè akòz enkyetid sou sekirite akarisid pou travayè yo, manje, ak anviwònman an ak ogmantasyon pri ki asosye ak dekouvèt akarisid, devlopman ak maketing. Vaksen yo gen anpil avantaj sou akarisid yo paske jeneralman yo pa toksik, yo pa polisyon, epi yo pa chè konpare ak pwodui chimik yo.

Sepandan, yo gen tandans yo trè espesifik-espès. Endistri pharmaceutique a ka jwe yon wòl enpòtan nan sipòte rechèch pou devlope yon vaksen ki ka bay maksimòm pwoteksyon lame a epi ki efikas kont plizyè espès tik [133,137]. Pwogram rechèch vaksen yo ap fèt nan plizyè peyi e rès atik sa a pral konsantre sou pwogrè nouvo teknoloji vaksen yo ak sou sa ki deja disponib (Figi 2).

Menm jan ak aplikasyon chimik yo, rezistans vaksen yo pa ka inyore, epi vaksen ki egziste deja yo ka modifye lè l sèvi avèk pwosedi sekans ak klonaj pou izole nouvo antijèn oswa chanje antijèn ki egziste deja pou retabli efikasite yo. Li posib tou pou mete de oswa plis antijèn ki pa gen rapò nan yon sèl pwodwi vaksen pou redwi risk pou yo devlope rezistans nan nenpòt sèl antijèn oswa detèminan antijèn.

3.1. Vaksen anti-tik ki baze sou ADN

Envansyon vaksen ADN ak itilizasyon li yo te soulve enkyetid sekirite; an patikilye posiblite pou transfè ki estab nan materyèl jenetik (ADN) nan selil somatik oswa menm jèm, ki ka lakòz ekspresyon jèn ak mitasyon chanje. Yon vektè luciferase ekstrakwomozòm ki kode plasmid te detekte nan misk skelèt pou plis pase 19 mwa apre tretman miskilè (138). Anplis de sa, piki miskilè apre elektwoporasyon ogmante pousantaj transfèksyon an jeneral. Entegrasyon kwomozòm ADN vektè a nan sit o aza ki gen rapò ak nenpòt ki ogmantasyon nan pousantaj transfeksyon an (139) Dapre etid sa yo, frekans entegrasyon an te byen pi ba pase kantite mitasyon jèn espontane yo.

Sepandan, Manam et al. te jwenn ke majorite nan ADN plasmid administre nan misk yo skelèt diferan rat yo rete nan sit la piki. Fraksyon minè yo te detekte tou nan gonad yo men yo pa te entegre nan genòm nan (140). Repete aplikasyon nan miskilè yon vektè repòtè kodaj luciferase nan primat te lakòz ekspresyon repòtè alontèm men pwovoke pa gen okenn antikò anti-ADN (141,142). Malgre sa, li ta dwe remake ke enkyetid yo mansyone pi wo a ak sekirite adisyonèl ki gen rapò ak vaksen ADN yo ta dwe konsidere konsènan tradiksyon yo nan pratik klinik (143).

Pandan de dènye deseni yo, divès gwoup chèchè yo te konsantre sou devlope yon vaksen ADN pou kontwole enfeksyon tik, e jiskaprezan, plizyè vaksen ADN yo te prezante pou iminize lame (130,144,145). Vaksen ADN, ki diferan de vaksen tradisyonèl ki baze sou pwoteyin paske yo baze sou plasmid bakteri ki kode pwoteyin antijenik, epi transkripsyon an kontwole pa pwomotè ekaryotik efikas, gen avantaj ki genyen nan yon konsepsyon senp, gwo estabilite, ak administrasyon an sekirite (143). ] Nan vaksinasyon ADN, yo panse molekil ADN plasmid ki enjekte yo antre aktivman nan nwayo a epi yo rete la pandan tout lavi kòm ADN epizomal, jenere antijèn pwoteksyon yo kontinyèlman pou toutotan selil la vivan (146). Pwoblèm nan repete ranfòse kenbe. yon tit antikò segondè ta ka rezoud pa sentèz la kontinyèl, pwosesis, ak prezantasyon nan antijèn nan selil T in vivo nan bèt ki pran vaksen ADN.

Anplis de sa, depi yon vaksen ADN sèlman gen ADN plasmid epi li pa gen okenn pwoteyin ki kontamine, li sanble posib ke resevwa vaksen miltip oswa repete pa ta lakòz yon reyaksyon iminitè nan ADN vektè a (147). Ka antijèn eksprime a dwe prezante pa MHC klas I ak konplèks, ki ka pwovoke CD4 plis ak CD8 plis selil T, enteresan repons iminitè selilè ak umoral, respektivman (148).

Prèv la te soti nan etid De Rose et al. [144], kote mouton kwaze Merino yo te pran vaksen kont B. micro plis lè l sèvi avèk yon vaksen ADN. Lè yon plasmid ki gen yon sekans jèn tout longè Bm86 yo te administre swa poukont ou oswa avèk yon plasmid ki pote jèn ovin yo pou cytokines yo, granulocyte-macrophage koloni-stimulating factor (GM-CSF) oswa interleukin (IL) -1beta pwovoke yon nivo pwoteksyon relativman ba kont enfeksyon tik ki vin apre. Anplis de sa, ko-vaksinasyon ak plasmid Bm86 ak GM-CSF te lakòz yon rediksyon estatistik enpòtan nan fètilite tik. Nan tout gwoup yo te enjekte ak vaksen ADN Bm86, tit antikò kont Bm86 te ba. Anplis de sa, yon nivo ki ba nan eksitasyon antijèn espesifik nan lenfosit san periferik ki te fèt nan gwoup sa yo. Vaksen ADN, sepandan, te lakòz yon repons antikò fò apre yon sèl piki nan pwoteyin recombinant Bm86 nan adjuvant. Pwodiksyon an nan antikò, sepandan, te parèt yo dwe yon ti kras mwens efikas pase apre de vaksen ak pwoteyin recombinant.

Anplis de sa, anpil lòt chèchè te envestige efikasite antijèn ki baze sou ADN pou iminize lame kont enfeksyon tik. Pou egzanp, Sayed et al. [149] extrait ADN nan ze Argas persicus epi li itilize li pou vaksin poul ak dòz 200-800 µg ADN/kg pwa kò poul. Rezilta a te sipòte, kòm siksè nan manje tik yo te redwi pa 74.64 pousan (50 µg ADN/kg pwa kò ti poul) ak 89.39 pousan (100 µg ADN/kg pwa kò ti poul) lè yo te ekspoze a ADN-iminize poul. Anplis de sa, otè yo rapòte ke serom nan poul iminize ak ADN gen aktivite kont pwoteyin yo zantray nan A. koute chè; sepandan, plis analiz ki sèvi ak lòt espès tik te endike ke aktivite serik la se espesifik espès yo. Modèl elektwoforetik nan serom poul iminize a te montre twa nouvo gwoup pwoteyin, ki te sipoze patisipe nan devlopman defans iminitè poul la kont tik [149]. Apre sa, anpil etid te konsantre sou vaksen ADN espesifik pou antijèn; sepandan, nivo pwoteksyon yo varye ak diferan kalite antijèn. Yo te montre ke sourit BALB/c yo te enjekte ak Plasmid pBMC2-kode antijèn Bm86 te montre rezistans kont Boophilus microplus.

Yon dòz pi wo nan pwodiksyon antikò Anti-Bm86 pwovoke pa vaksen ak pi wo nivo interleukin (IL) (IL-4, IL-5, ak IL{-12 (p40)) ak nivo entèferon-gama (IFN-) nan sera sourit iminize ak pBMC2. Sourit iminize ak pBMC2 te montre eksitasyon antijèn espesifik nan splenosit dapre enkòporasyon an nan bromodeoxyuridine ak IFN g sekresyon. Aplikasyon vaksen sa a nan bèt te lakòz pwodiksyon antikò, sa ki sijere ke vaksen ADN Bm86 pwovoke yon repons iminitè fò kont B. micro plus [150]. Yon lòt etid evalye pwoteksyon iminitè a te pwovoke pa plasmid recombinant kode Paramyosin (Pmy) nan H. longicornis (pcDNA3.1(plus)-Pmy) nan lapen. Lapen yo devlope yon wo nivo IgG, ki sijere ke yon repons iminitè umoral pwovoke pa vaksinasyon. Gen kèk tik (27.31 pousan) ki te manje sou lapen yo pran vaksen an te mouri, tandiske pwa angorjman mwayèn tik ki rete yo ak ovipozisyon adilt fi yo te redwi pa 36 ak 39 pousan, respektivman.

Kidonk, li sanble ke yon vaksen Pmy ADN ka pwovoke yon repons iminitè umoral efikas sepandan li bay epi li pasyèlman pwoteje lapen kont enfeksyon H. longicornis [151]. Enteresan, yon vaksen ADN milti-epitop ki enkòpore tou de CD4 plis ak CD8 plis epitop lenfosit T sitotoksik bay 100 pousan pwoteksyon mouton nan kondisyon laboratwa kont Ehrlichia ruminantium. Sepandan, rezilta yo pa te repete nan kondisyon jaden. Nan etid sa a, pLamp ko-administrasyon ak MPL atravè wout la miskilè, anplis aplikasyon aktualite, pwoteje mouton yo jiska 60 pousan kont tik pa pwovoke deklanchman nan repons selil T memwa [152].

Plizyè lòt antijèn, tankou Salp14 ak lipokalin, swa poukont yo oswa an konbinezon ak lòt antijèn yo te fèk evalye kòm vaksen ADN, ki plis bay espwa pou devlope yon vaksen ADN kont tik [130,153]. Li te montre ke salp14 ADN vaksen an te pwovoke eritem nan sit la mòde tik apre defi a tik [153]. Menm jan an tou, yon vaksen lipokalin (LIP) ki gen ladann plasmid recombinant pcDNA3.1-HlLIP homolog LIP ki soti nan H. longicornis (HlLIP) te aplike pou iminize yon lapen lapen. Malgre ke aplikasyon sa a te pwovoke iminite umoral nan lame a epi tou li te enfliyanse pwa angorjman, ovipozisyon, ak kouve H. longicornis, efikasite a te twò ba, sijere ke antijèn sa a pa apwopriye pou vaksen paske li bay pwoteksyon pasyèl pou lame a [130]. ].

Finalman, objektif prensipal la nan devlope yon vaksen ADN ta dwe konsepsyon vaksen an nan yon fason ke li polarize repons iminitè a nan lame a nan direksyon pou repons lan Th2 paske repons iminitè a umoral jwe yon gwo wòl nan iminite tik. Nan bèf ki te pran vaksen ak B. micro plis antijèn midgut, yo te jwenn nivo espesifik IgG1, ki modulasyon pa selil Th2, yo te korelasyon ak pwoteksyon an. Gen yon posibilite ke si se sekans siyal sekretè a mete yon fason ki apwopriye anba jèn nan sib, Lè sa a, antijèn sib la ta ka sekrete soti nan lòj ekstraselilè a epi pwovoke yon pi gwo repons iminitè umoral. Li posib tou ke seleksyon an nan selil Th2 ta favorize si yo ko-enfekte ak lòt jèn imunomodulateur tankou IL4 ak IL10.

3.2. Vaksen mRNA

Nan dènye ane yo, yo te fè anpil tantativ pou dekouvri nouvo antijèn pwoteksyon ki ka itilize nan devlopman yon vaksen anti-tik, ak anpil amelyorasyon. Pou teste efikasite kandida vaksen an, pwoteyin recombinant yo, kèlkeswa si wi ou non yo asosye ak lòt pwoteyin oswa adjuvant, yo te platfòm chwa pou teste efikasite yo atravè itilizasyon òganis modèl yo.

Akòz fasilite ak platfòm vaksen ADN ak mRNA yo ka pwodwi, te gen devlopman enpòtan nan itilizasyon platfòm vaksen jenetik (ADN ak mRNA) nan dènye ane yo [130,145]. Yon vaksen mRNA ki kode yon bwason nan pwoteyin saliv tik pwovoke "iminite tik" nan kochon Gine, kidonk konsiderableman diminye transmisyon Borrelia burgdorferi ki bay tik, ajan ki lakòz maladi Lyme (borrelioz). Menmsi yo te demontre anpil kandida antijèn tik yo pwovoke repons iminitè nan yon lame, li poko posib pou repwodui iminite tik solid lè l sèvi avèk vaksen. Gen yon posibilite ke sa a ka paske, nan diferan etap nan manje, konpozisyon an nan pwoteyin saliv nan tik ka chanje dinamik, pètèt jere chanjman entèn lame yo. Enfòmasyon sa a te bay nan yon etid resan, kote yon gwoup chèchè idantifye ak rasyonèl chwazi 19 pwoteyin saliv nan tik nwa-janb I. scapularis, ki se yon vektè komen pou maladi Lyme nan imen. Yo te kreye mRNA nukleozid ki modifye ki kode pwoteyin sa yo.

Pou pwodui vaksen mRNA-LNP 19ISP (19 pwoteyin saliv Ixodes), sa yo te encapsulé nan kantite egal nan nanoparticules lipid (LNP). Pou evalye enpak vaksen an sou konpòtman manje I. scapularis, kochon Gine yo te vaksinen intradermally twa fwa nan 4-semenn entèval, ki te lakòz repons antikò solid nan omwen dis nan antijèn kode yo. Nan pwochen etap eksperyans lan, bèt yo te defye ak nenf I. scapularis ki pa enfekte. Bèt yo te pran vaksen an devlope konsiderab eritem nan 24 èdtan.

Anplis de sa, tik sou bèt ki te pran vaksen yo te manje mal epi yo te kòmanse detache nan 48 èdtan, ak 80 pousan nan tik detache nan bèt ki te pran vaksen apre 96 èdtan, konpare ak 20 pousan sou bèt ki pa te pran vaksen an. Pou plis egzamine si konpòtman an manje chanje afekte transmisyon patojèn, B. burgdorferi-enfekte I. scapularis nenf yo te mete sou kochon Gine ki te pran vaksen swa ak 19ISP oswa ak yon vaksen mRNA kode luciferase koukouy. Chak bèt sa yo te resevwa twa tik ki te enfekte. Lè nou konsidere ke moun gen anpil chans pou yo retire yon tik ki lakòz gratèl ki gen rapò ak eritem, tik yo te detache nan yon fason doub avèg le pli vit ke woujè parèt.

Yon total de 46 pousan nan bèt kontwòl yo te enfekte ak B. burgdorferi twa semèn apre defi a, tandiske pa youn nan bèt yo pran vaksen yo te enfekte ak patojèn sa a. Yon analiz ekspresyon jèn yo te montre ke vaksen an aktive plizyè chemen iminitè, ki gen ladan reseptè selil T ak B, chemokine, FcεRI, ak IL-17 siyal, osi byen ke toksisite natirèl asasen nan medyatè. Anplis, analiz sit mòde yo te montre tou ke vaksen an te pwovoke repons selil T [154].

An menm tan, menm gwoup chèchè yo te itilize Salp14 kòm yon antijèn modèl pou egzamine iminite tik lè l sèvi avèk mRNA nanopartikul lipid (LNPs), ADN plasmid, oswa platfòm pwoteyin recombinant [153]. Nan etid sa a, vaksinasyon ki gen ladan nukleozid modifye mRNA lipid nanopartikul kode (mRNA-LNPs) Salp14 te delivre intradermally, ak de ogmantasyon chak 4 semèn. Devlopman Salp14-antikò espesifik yo te konpare pami diferan estrateji vaksinasyon yo. Vaksinasyon Salp14 mRNA se te platfòm ki pwovoke pi fò repons umoral la konpare ak vaksen ADN ak pwoteyin. Kochon Gine te vaksinen ak salp14 mRNA a te pwovoke eritem ki pi solid ak entans yo te obsève nan sit mòde a nan tout gwoup vaksinasyon yo; sepandan, li pa t afekte pousantaj detachman tik epi li pa t chanje pwa angorjman [153]. Yon vaksen tik ta dwe pwovoke eritem efikas, ak yon apwòch pou chanje aspè pita nan manje tik, ki gen ladan atachman ak engorgement, se sèvi ak yon vaksen ki gen plizyè antijèn tik saliv [154].

Se poutèt sa, li sanble ke vaksinasyon ak nukleozid modifye mRNALNP salp14, ki ka itilize kòm yon kandida vaksen potansyèl, ka mennen nan pi wo tit antikò ak yon pi bonè ak pi wo degre nan wouj pase vaksen ak swa ADN oswa pwoteyin, ki sijere ke Salp14 ta ka. dwe yon bon kandida pou yon vaksen, swa poukont li ak optimize oswa nan konbinezon ak lòt antijèn kandida [154].

An jeneral, li parèt ke yon vaksen mRNA miltivalan ka gen kapasite pou pwovoke rezistans tik nan bèt laboratwa tankou kochon Gine ak pou anpeche enfeksyon tik ak enfeksyon tik, pwobableman pa limite dire tan an nan tik manje sou lame yo. Li sigjere tou ke yon fòmilasyon mRNA-LNP ki pèmèt livrezon antijèn ralanti ak kontinyèl, ka imite mòde tik natirèl. Si estrateji sa a kapab tradui pou moun, li ta premye vaksen an ki pa vize dirèkteman yon patojèn oswa sib mikwòb, men pito vektè li yo. Anplis, piske vaksen anti-tik yo toujou ap devlope pou ede moun nan prevansyon nan transmisyon maladi tik yo, estrateji vaksen an ak seleksyon an antijèn pou vaksinasyon bezwen pran an konsiderasyon.

3.3. Vaksen ki baze sou pwoteyin

Gen kèk vaksen ki baze sou pwoteyin ki disponib nan komès epi yo efikas. Yon pwogram vaksen te kòmanse premye nan ane 1970 yo lè chèchè yo te kòmanse fè eksperyans ak de diferan kalite fòmilasyon vaksen pou iminize lame a kont tik la (D. Anderson) nan moman an. Premye a enkli antijèn ki te jwenn nan zantray la ak ovè, pandan y ap dezyèm nan enkli tout ògàn entèn yo ekstrè nan semi-engorged fi D. Anderson.

Etid sa a te dekouvri ke repons iminitè antikò yo aktive kont tisi entesten tik lè yo vaksinen bèt bèt yo ak ekstrè yo jwenn nan granmoun R. microplus fi [155]. Premye etid sa a pou evalye efikasite fòmilasyon vaksen an te ankouraje chèchè atravè lemond pou konsantre sou devlopman yon vaksen pou kontwole tik ak maladi tik. Kidonk, nan ane 1980 yo, de gwoup chèchè separe te fè premye envestigasyon syantifik yo lè l sèvi avèk fòmilasyon vaksen pou analize repons iminitè bovins kont R. microplus [156].

Apre etid ki anwo yo, li te jwenn ke yon glikoprotein tik ki asosye ak zantray ka pwovoke iminopwoteksyon nan lame a [157]. Nan yon etid ki vin apre, menm gwoup rechèch la te izole yon glikoprotein ki gen yon pwa molekilè 89 kDa, ki te rele Bm86 e ki te rapòte yo asosye ak selil zantray R. microplus [158,159]. Pwoteyin recombinant Bm86 te pwodui sou yon gwo echèl lè l sèvi avèk yon sistèm ekspresyon ledven.

Jiskaprezan, sèlman vaksen ki baze sou Bm86-ki komèsyalize ak diferan non mak, pa egzanp, li vann an Ostrali ak non mak TickGARD® ak nan Kiba anba Gavac® [160,161]. Vaksen sa yo lajman itilize nan diferan peyi pou diminye presyon tik sou bèt yo. Yo te montre ke itilizasyon vaksen sa yo ka diminye popilasyon tik la jiska 74 pousan epi efikasite jeneral yo varye ant 51 pousan ak 91 pousan, ki varye selon popilasyon tik la ak kondisyon nitrisyonèl bèt yo [160–163]. Gen prèv ki montre kèk souch tik R. micro plus kolombyen, Meksiken ak brezilyen montre yon pi ba efikasite an jeneral konpare ak souch tik kiben ak Ostralyen R. micro plus, e menm souch A Argentinyen R. micro plus a sanble rezistan a vaksen ak Bm86 [34,164]. Yo te fè plis analiz sou varyasyon efikasite vaksen Bm86 sou popilasyon menm espès tik nan diferan pati nan mond lan, epi yo te konkli ke diferan popilasyon tik gen plis chans gen yon polimòfis nan Bm{ {12}} jèn antijèn an tèm de sekans asid amine nan jèn nan, e sa a se rezon prensipal ki fè vaksen ki baze sou Bm86-ki deja egziste yo pa tèlman efikas.

Pa egzanp, te gen yon polimòfis nan jèn ki omològ ak Bm86 (ki deziyen kòm Bm95) te idantifye nan popilasyon tik nan Ajantin, sa ki lakòz diferans nan sekans Bm86 ant popilasyon tik tankou sa yo. yo te jwenn nan Kiba ak Ostrali, ki ka eksplike poukisa vaksen Bm86 la pa t efikas kont tik Ajantin [34]. Lè nou konsidere pwoblèm rezistans vaksen Bm86 yo, chèchè yo te pwodwi yon vaksen recombinant Bm95 ki te pwouve yo trè efikas, ak yon efikasite jeneral 89 pousan nan Kiba ak Ajantin ak 81 pousan nan peyi Zend an tèm de diminye enfeksyon tik. [34,102,120,165].

Anplis vaksen komèsyal ki mansyone anwo a ak esè efikasite li yo, anpil lòt etid konsantre sou plis amelyore efikasite vaksen ki baze sou Bm86-. Kèk etid resan yo te sentèz peptides, ki gen ladan SBm4912, SBm7462®, ak SBm19733, ki te jwenn nan Bm86, epi tou ki te pwodwi yon peptide recombinant rSBm7462®, epi analize efikasite yo. Pousantaj efikasite nan peptides sa yo te varye ant 35.87 pousan ak 81.05 pousan, sa ki sijere ke peptides sa yo, an patikilye, SBm7462® ak rSBm7462®, jwe yon wòl enpòtan nan pwovoke iminite lame epi yo ka komèsyalize paske yo trè efikas an tèm de diminye tik. enfeksyon [121,122]. Anplis de sa, pou amelyore efikasite vaksen pwoteyin recombinant Bm86, dènyèman, Lapisa SA te prezante yon vaksen Bovimune Ixovac® ki baze sou Bm86-nan Meksik. Sepandan, vaksen sa a pa te etidye an tèm de efikasite li kont tik; Se poutèt sa, etid yo nesesè pou detèmine efè li sou diferan popilasyon tik pou detèmine efikasite li yo.

Yon vaksen ki baze sou omològ Bm86 (TickGard) parèt apwopriye, paske vaksen sa a gen yon aplikasyon laj epi li ka deklanche antikò kwa-reyaktif nan diferan espès tik, tankou Rhipicephalus sanguineus, Hyalomma anatolicum anatolicum, Rhipicephalus (Boophilus). ) decoloratus, Rhipicephalus (Boophilus) annulatus, ak Hyalomma dromedary [166–168]. Sepandan, vaksen sa a pa kapab pwovoke pwoteksyon kwa-reyaktif nan kèk lòt espès tik (egzanp, Rhipicephalus appendiculatus, Amblyomma variegatum, ak Amblyomma cajennense) [169,170]. Li enteresan pou remake ke vaksen Bm86 la gen yon efikasite 100 pousan kont R. annulatus, sa ki lakòz pi gwo efikasite pase efikasite vaksen omològ la rapòte ak R. microplus. Rezon ki fè sa a ta ka akòz faktè fizyolojik (egzanp, mwens engorgement san ak nivo pi ba nan aktivite proteaz nan kò a) oswa tik faktè jenetik. Faktè sa yo ka enfliyanse nivo pwoteyin BM86 oswa pwosesis fizyolojik tik tankou manje ak degradasyon pwoteyin, ki mennen nan entèraksyon antikò-antijèn ki pi efikas [171]. Vaksen Bm86 bay yon pwoteksyon ekselan kont tik R. microplus, men li difisil pou ekstrapolasyon eksperyans sa yo nan yon vaksen tik Ixodes.

Kontrèman ak I. ricinus ak I. scapularis, R. microplus se yon sèl tik lame ki manje sèlman bèf [168]. Li tou gen yon sik lavi tou kout, pa mue, epi li jwenn yon nouvo lame lè repa san an fini. Yo te envestige efikasite vaksen Bm86 la nan bèf ki te ekspoze a lav tik R. microplus, epi yo te fè mezi paramèt ki gen rapò ak iminite tik sou fi adilt ki angorje yo ki te tonbe apre vaksinasyon an. Kidonk, pwoteksyon mezire a se sòm enfliyans sou de peryòd molting ak twa etap tik. Yo te montre pou R. microplus vaksinasyon Bm86 lakòz domaj epi answit diminye pwa angorjman nan tik fi adilt [172]; poutan, enfliyans relatif vaksen kont Bm86 sou etap lavi frelikè R. microplus yo pa konnen byen presi. Bm86 homolog yo te izole ak idantifye tou nan tik Ixodes. I. ricinus gen de omològ Bm86, Ir86-1, ak Ir-86-2, epi I. scapularis tou gen de omològ Is86-1 ak Is{{10} } [173]. Yon etid ki vin apre te eksplore ke vaksinasyon nan pwoteyin Ir86 rekonbinan amelyore tit IgG nan serik kont pwoteyin Ir86 recombinan yo; sepandan, antikò yo pa t 'kapab pwoteje lapen kont defi a I. ricinus; ni kantite tik tache ni pwa tik yo te redwi [174].

Kidonk, vaksen kont Bm86 homolog nan Ixodes pa konsidere kòm yon apwòch efikas pou kontwole popilasyon Ixodes ricinus, menmsi vaksen Bm86 gen yon efè klè kont R. microplus. Menmsi vaksen Bm86 la montre anpil siksè, li enpòtan pou w konprann ke vaksen an pa gen anpil chans pou ranplase akarisid paske li pa gen "efè knock-out" ki asosye ak akarisid yo. Malgre sa, eksperyans nan jaden montre ke itilizasyon Bm86 konsiderableman redwi egzijans pou aplike tretman akarisid nan jaden an. Pa egzanp, règleman ki sere Kiba a nan pwogram kontwòl tik li a te mennen nan yon rediksyon nan kantite akarisid yo itilize nan peyi a pa 87 pousan, ki se konparab ak rezilta yo nan yon etid resan ki te fèt nan Venezyela [161,175,176].

Anplis de sa, itilizasyon vaksen Bm86 la te diminye tou konsiderableman maladi tik, tankou anaplasmoz Bovin ak Babesyoz Bovin. Aplikasyon vaksen sa a te ogmante pwodiktivite bèt yo, pa egzanp, bèf, epi kidonk li te redwi pèt ekonomik kiltivatè yo [160]. Aspè ki anwo yo nan vaksen Bm86 montre ke li se yon metòd ki trè pri-efikas konpare ak aplikasyon chimik nan fè fas ak enfestasyon tik. Kòm sa yo, vaksen sa a ka pwouve ke yo trè itil nan redui maladi tik transmèt osi byen ke nan amelyore jesyon nan epidemi tik nan fèm bèt pou diminye maladi tik transmèt yo.

4. Konklizyon Remak

Tik yo manje ak san pou devlopman, kwasans ak repwodiksyon, epi yo responsab pou transmisyon divès maladi tik transmèt. Tik Ixodes, pou egzanp, transmèt yon gwo kantite patojèn, tankou bakteri, pwotozoa, ak viris. Li enpòtan pou sonje ke vaksen anti-tik diminye enfeksyon tik ak anpeche transmisyon patojèn, epi anplis yo pi an sekirite pase kontwòl chimik, ki ka gen efè segondè negatif. Yo te idantifye plizyè antijèn roman ki soti nan yon varyete de tisi/ògàn epi yo te egzamine efikasite yo nan bèt laboratwa, sa ki te mennen nan pwogrè enpòtan nan direksyon pou devlope yon vaksen kont tik ki pa rapòte okenn efè segondè. Vaksen ki baze sou pwoteyin Bm86 yo te komèrsyalize nan plizyè peyi, epi itilizasyon yo kont R. microplus montre ke vaksen kont tik yo ka itilize avèk efikasite. Sepandan, vaksen ki baze sou Bm86-pa menm efikas kont lòt espès tik, tankou tik Ixodes. Yo te montre ke vaksinasyon ak Bm86 homolog nan I. ricinus pa gen okenn efè sou manje tik [174].

Anplis de sa, paske R. micro plus sèlman manje sou yon sèl lame, lav yo te itilize pou defye bèf, sa ki te lakòz tik fi adilt ki konplètman angorje, ki non sèlman redwi kantite tik men tou te gen yon enpak enpòtan sou tout twa etap lavi yo. tik. Kontrèman ak R. microplus, tik Ixodes chanje lame pandan tout sik lavi yo e se poutèt sa vaksinasyon tik Ixodes mande pou prevansyon efikas nan atachman ak/oswa manje tik pandan yon repa san sou yon sèl lame. Sepandan, vaksinasyon kont tik Ixodes sanble posib ak reyalis. Se konsa, li enpòtan sonje ke pwoteksyon kwa nan lame a ka yon travay difisil ak sa a kalite vaksen. Gen kèk lòt pwoteyin, san konte Bm86, ki ta ka genyen tou potansyèl terapetik kòm ajan imunosuppressive oswa antikoagulan [39,61].

Dènye pwogrè nan jenomik ak pwoteomik te pèmèt nou dekouvri nouvo antijèn ak anplwaye teknik molekilè pou manipile pwoteyin idantifye ak teste nouvo vaksen konsiderableman pi vit ak pri-efikas pase nan tan lontan an. Vaksen ADN se tou yon opsyon ekselan; sepandan, an jeneral, kalite vaksen sa a kapab sèlman mennen nan nivo ki ba nan ekspresyon antijèn epi limite selil ki pa pwofesyonèl ki prezante antijèn aktive CD4 plis selil T helper atravè chemen MHC klas II [177]. Sepandan, vaksen ADN non sèlman bay pwoteksyon enpòtan pou lame a, men li konsidere tou pou bay pwoteksyon kwa kont tik si li swiv pa yon vaksen chimerik oswa vaksen pwoteyin recombinant [178].

Anplis de sa, mRNA-LNP yo ka ede nan elicitation nan eritem nan sit la mòde tik, ki se youn nan endikatè ki pi enpòtan yo nan rezistans tik akeri. mRNA-LNP ki gen jèn tik yo se yon platfòm itil pou devlopman vaksen ki ka potansyèlman anpeche maladi tik yo chwazi [153,154]. Tou de vaksen ADN ak mRNA tou sanble yo se estrateji efikas epi gen esperans nan lavni ke yon vaksen mRNA oswa ADN pou kontwole enfeksyon tik ak maladi tik yo ka devlope epi tou bay pwoteksyon kwa. Sepandan, jiskaprezan pa te komèrsyalize vaksen, ki endike ke plis etid yo bezwen detèmine efikasite nan de pli zan pli plis antijèn pou itilize yo pou devlope yon vaksen ADN oswa mRNA. Idantifikasyon ak karakterizasyon nouvo kandida pou vaksen tik ka anpeche manje tik ak transmisyon patojèn. Sèvi ak antijèn sa yo nan vaksen pou bèt domestik ak bèt sovaj, kite pou kont moun, rete yon defi.

Kontribisyon otè:

MNA, MAJ, ak MK te fèt estrikti atik la. Tout otè yo te fè rechèch literati a epi yo te ekri pati maniskri a / rasanble done yo. MNA ak IM te kreye epi modifye figi yo. ID ak MK te fè revizyon kritik epi korije maniskri a. Tout otè yo te li epi yo te dakò ak vèsyon ki te pibliye maniskri a.

Finansman:

MK te resevwa finansman nan men Ajans Sibvansyon Repiblik Tchekoslovaki (sibvansyon {{0}}S) ak Fon ERD, pwojè CePaVip OPVVV (no. 384 CZ.02.1.01. /0.0/0.0/16_019/0000759). Fonksyonè yo pa te gen okenn wòl nan konsepsyon etid la, koleksyon done ak analiz, desizyon pou pibliye, oswa preparasyon maniskri a.

Deklarasyon Komisyon Konsèy Revizyon Enstitisyonèl: Pa aplikab.

Deklarasyon Konsantman Enfòme: Pa aplikab.

Deklarasyon Disponibilite Done: Pa aplikab

Konfli enterè: Otè yo deklare ke rechèch la te fèt nan absans nenpòt relasyon komèsyal oswa finansye ki ta ka entèprete kòm yon konfli enterè potansyèl.

Referans

1. de la Fuente, J.; Kocan, KM Avans nan idantifikasyon ak karakterizasyon antijèn pwoteksyon pou vaksen recombinant kont enfeksyon tik. Ekspè Rev Vaccines 2003, 2, 583–593. [CrossRef]

2. Weaver, GV; Anderson, N.; Garrett, K.; Thompson, AT; Yabsley, MJ Tik ak Tik-Borne Patojèn nan bèt Domestik, kochon sovaj, ak Off-Host echantiyon anviwònman nan Guam, USA. Devan. Veterinè. Sci. 2022, 8, 803424. [CrossRef] [PubMed]

3. Jones, KE; Patel, NG; Levy, MA; Storeygard, A.; Balk, D.; Gittleman, JL; Daszak, P. Tandans mondyal nan émergentes maladi enfeksyon. Nature 2008, 451, 990–993. [CrossRef]

4. Beugnet, F.; Marié, J.-L. Emerging maladi atwopòd nan bèt konpayon an Ewòp. Veterinè. Parasitol. 2009, 163, 298–305. [CrossRef] [PubMed]

5. Pyè, SG; Kariuki, HW; Aboge, GO; Gakuya, DW; Maingi, N.; Mulei, CM Prevalans tik ki enfekte bèf letye ak ajan patojèn yo bay nan fèm ti moun nan zòn peri-urban nan Nairobi, Kenya. Veterinè. Med. Ent. 2021, 2021, 9501648. [CrossRef]

6. Graf, J.-F.; Gogolewski, R.; Leach-Bing, N.; Sabatini, GA; Molento, MB; Bordin, EL; Arantes, GJ Tik kontwòl: Yon pwen de vi endistri. Parazitoloji 2004, 129, S427–S442. [CrossRef] [PubMed]

7. de la Fuente, J. Vaksen pou kontwòl vektè: posiblite enteresan pou lavni. Veterinè. J. 2012, 194, 139–140. [CrossRef] [PubMed]

8. Sparagano, O.; Földvári, G.; Derdáková, M.; Kazimírová, M. Nouvo defi tik ak maladi tik yo poze. Biyoloji 2022, 77, 1497–1501. [CrossRef]

9. Doolan, DL; Apte, SH; Proietti, C. Genome ki baze sou konsepsyon vaksen: Pwomès la pou malarya ak lòt maladi enfeksyon. Ent. J. Parasitol. 2014, 44, 901–913. [CrossRef]

10. Bragazzi, NL; Gianfredi, V.; Villarini, M.; Rosselli, R.; Nasr, A.; Hussein, A.; Martini, M.; Behzadifar, M. Vaccines Meet Big Data: Eta-of-atizay la ak kandida pou lavni. Soti nan Klasik 3Is ("Izole-Inaktive-Enjekte") Vaksinoloji 1.0 rive Vaksinoloji 3.0, Vaksinoloji, ak Beyond Yon Apèsi Istorik. Devan. Sante Piblik 2018, 6, 62. [CrossRef]

11. Zepp, F. Prensip konsepsyon vaksen—Leson ki soti nan lanati. Vaccine 2010, 28 (Suppl. 3), C14–C24. [CrossRef]

12. Bouazzaoui, A.; Abdellatif, A.; Al-Allaf, F.; Bogari, N.; Al-Dehlawi, S.; Qari, S. Estrateji pou vaksinasyon: apwòch vaksen konvansyonèl yo parapò ak estrateji nouvo jenerasyon an konbinezon ak adjuvant. Pharmaceutics 2021, 13, 140. [CrossRef] [PubMed]

13. D'Argenio, DA; Wilson, CB Yon dekad nan vaksen: Entegre imunoloji ak vaksenoloji pou konsepsyon vaksen rasyonèl. Iminite 2010, 33, 437–440. [CrossRef]

14. Merino, O.; Antunes, S.; Mosqueda, J.; Moreno-Cid, JA; de la Lastra, JMP; Rosario-Cruz, R.; Rodríguez, S.; Domingos, A.; de la Fuente, J. Vaksinasyon ak pwoteyin ki enplike nan entèraksyon tik-patojèn diminye enfeksyon vektè ak enfeksyon patojèn. Vaksen 2013, 31, 5889–5896. [CrossRef] [PubMed]

15. Blan, AL; Gaff, H. Revizyon: Aplikasyon Teknoloji Kontwòl Tik pou Tik Blacklegged, Lone Star, ak Chen Ameriken. J. Integr. Pest Manag. 2018, 9, 12. [CrossRef]

16. Willadsen, P. Vaksen anti-tik. Parazitoloji 2004, 129, S367–S387. [CrossRef]

17. de la Fuente, J.; Merino, O. Vaccinomics, nouvo wout pou tik vaksen yo. Vaksen 2013, 31, 5923–5929. [CrossRef] 18. Hill, CA; Wikel, SK Pwojè genòm Ixodes scapularis: Yon opòtinite pou avanse rechèch tik. Tandans Parasitol. 2005, 21, 151–153. [CrossRef]

19. Medina, JM; Abbas, MN; Bensaoud, C.; Hackenberg, M.; Kotsyfakis, M. Analiz byoenfòmatik Ixodes ricinus Long NonCoding RNAs predi yo kapasite obligatwa nan Host miRNAs. Ent. J. Mol. Sci. 2022, 23, 9761. [CrossRef]

20. Valle, MR; Guerrero, FD Vaksen anti-tik nan epòk omik yo. Devan. Biosci. (Elite Elit) 2018, 10, 122–136. [CrossRef]

21. Logullo, C.; Vaz, IDS; Sorgine, MHF; Paiva-Silva, GO; Faria, FS; Zingali, RB; DE Lima, MFR; Abreu, L.; Oliveira, EF; Alves, EW; et al. Izolasyon yon précurseur aspartic proteinase nan ze yon tik difisil, Boophilus microplus. Parazitoloji 1998, 116, 525-532. [CrossRef]

22. Kurlovs, AH; Li, J.; Cheng, D.; Zhong, J. Ixodes pacificus Tik kenbe anbrijenèz ak kouve ze apre tretman antibyotik Rickettsia Endosymbiont. PLoS ONE 2014, 9, e104815. [CrossRef] [PubMed]

23. Sappington, TW; Hays, AR; Raikhel, AS Mosquito vitellogenin reseptè: pirifikasyon, devlopman ak karakterizasyon byochimik. Ensèk Biochem. Mol. Biol. 1995, 25, 807–817. [CrossRef] [PubMed]

24. Vaz, IDS; Logullod, C.; Sorgine, M.; Velloso, FF; de Lima, MFR; Gonzales, JC; Masuda, H.; Oliveira, PL; Masudaa, A. Vaksinasyon bovins ak yon précurseur aspartic proteinase izole nan ze Boophilus microplus. Veterinè. Imunol. Imunopatòl. 1998, 66, 331–341. [CrossRef]

25. Leal, AT; Seixas, A.; Pohl, PC; Ferreira, CA; Logullo, C.; Oliveira, PL; Farias, SE; Termignoni, C.; Vaz, IDS; Masuda, A. Vaksinasyon bovins ak recombinant Boophilus Yolk pro-Cathepsin. Veterinè. Imunol. Imunopatòl. 2006, 114, 341–345. [CrossRef]

26. Leal, AT; Pohl, PC; Ferreira, CA; Nascimento-Silva, MC; Sorgine, MH; Logullo, C.; Oliveira, PL; Farias, SE; Vaz, IDS; Masuda, A. Pirifikasyon ak antigenicity de fòm recombinant nan Boophilus microplus jònze pro-cathepsin eksprime nan kò enklizyon. Pwoteyin Ekspr. Purif. 2006, 45, 107–114. [CrossRef] [PubMed]

27. Yamashita, O.; Indrasith, LS destin metabolik nan pwoteyin jònze pandan anbrijenèz nan arthropods. (Atwopod/anbrijenèz/pwoteyin jònze/proteolysis limite/proteaz). Dev. Kwasans diferan. 1988, 30, 337–346. [CrossRef]

28. Tellam, R.; Kemp, D.; Monte, G.; Briscoe, S.; Smith, D.; Sharp, P.; Irving, D.; Willadsen, P. Redwi ovipozisyon Boophilus microplus manje sou mouton vaksen ak vitellin. Veterinè. Parasitol. 2002, 103, 141–156. [CrossRef]

29. Boldbaatar, D.; Umemiya-Shirafuji, R.; Liao, M.; Tanaka, T.; ksuan, X.; Fujisaki, K. Vitellogenin miltip ki soti nan tik Haemaphysalis longicornis yo enpòtan anpil pou devlopman ovè. J. Ensèk Physiol. 2010, 56, 1587–1598. [CrossRef]

30. Seixas, A.; Dos Santos, PC; Velloso, FF; Vaz, IDS; Masuda, A.; Horn, F.; Termignoni, C. Yon Boophilus microplus vitellin-degrade sistèn endopeptidase. Parazitoloji 2003, 126, 155-163. [CrossRef]

31. Seixas, A.; Leal, AT; Nascimento-Silva, MCL; Masuda, A.; Termignoni, C.; Vaz, IDS potansyèl vaksen yon tik vitellin-degrading anzim (VTDCE). Veterinè. Imunol. Imunopatòl. 2008, 124, 332–340. [CrossRef] [PubMed]

32. Jarmey, J.; Monte, G.; Pearson, R.; McKenna, R.; Willadsen, P. Carboxydipeptidase soti nan Boophilus microplus: Yon antijèn "kache" ki gen resanblans ak anzim konvèti anjyotansin. Ensèk Biochem. Mol. Biol. 1995, 25, 969–974. [CrossRef] [PubMed]

33. Willadsen, P.; Smith, D.; Cobon, G.; McKenna, RV Vaksen konparatif bèt kont Boophilus microplus ak antijèn recombinant Bm86 pou kont li oswa an konbinezon ak recombinant Bm91. Parazit Imunol. 1996, 18, 241–246. [CrossRef]

34. García-García, JC; Montero, C.; Redondo, M.; Vargas, M.; Canales, M.; Boue, O.; Rodríguez, M.; Joglar, M.; Machado, H.; González, IL; et al. Kontwòl tik rezistan a vaksen ak Bm86 nan bèt ki pran vaksen ak antijèn recombinant Bm95 ki izole nan tik bèt la, Boophilus microplus. Vaccine 2000, 18, 2275–2287. [CrossRef]

35. Lambertz, C.; Chongkasikit, N.; Jittapalapong, S.; Ganguly, M. Repons iminitè Bos indicus bèt kont antijèn anti-tik Bm91 ki sòti nan tik microplus lokal Rhipicephalus (Boophilus) ak efè li sou repwodiksyon tik anba enfeksyon natirèl. J. Parasitol. Res. 2012, 2012, 907607. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com