Résumé

Background: Yo te rapòte ke jele wayal ta diminye sentèz melanin ak anpeche ekspresyon de pwoteyin ki gen rapò ak melanogenesis ak jèn. Nan etid sa a, nou evalye aktivite anti-melanogenic ak depigmantasyon asid 10-idwoksi-2-decanoic (10-HDA) ki soti nan jele wayal Apis mellifera.

Gen kèk etid ki sijere sasistanchka ede anpeche po aje padiminye estrès oksidatifepienflamasyon, tou de nan yo ki ka kontribye nanondilasyon, tach nwa, ak lòt siy aje. Sepandan, li pa klè si wi ou nonsistanchkapabaleje po aoswadiminye pigmantasyon. Nan ti bout tan, pandan ke cistanche ka gen kèk efè benefik sou po a, li pa klè si li ka itilize kòm yon serye.po-blanchimanajan. Li toujou pi bon pou konsilte yon dèrmatològ pou konsèy sou fason san danje epi efikas pou pran swen po ou.

Klike sou Cistanche Tubulosa pou blanchiman

Pou plis enfòmasyon:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Metòd:Nan etid sa a, nou evalye {{0}}aktivite blanchi HDA a an konparezon ak chanjman ki fèt nan aktivite tirozinaz intraselilè, kontni melanin, ak nivo pwoteyin ki gen rapò ak pwodiksyon melanin nan selil melanom B16F1 apre tretman ak {{4. }}HDA. Anplis de sa, efè blanchiman po a te evalye lè w aplike yon pwodui krèm ki gen 0.5 pousan, 1 pousan, ak 2 pousan 10-HDA sou po sourit (C57BL/6 J) pandan 3 semèn pou obsève efè DL. *-valè.

Rezilta:Rezilta yo te montre ke 10-HDA anpeche ekspresyon pwoteyin MITF (IC50 0.86 mM) nan selil melanom B16F1 yo. Analiz Western blot te revele ke 10-HDA anpeche aktivite tirozinaz ak ekspresyon pwoteyin 1 ki gen rapò ak tirozinaz (TRP-1), TRP-2, ak faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF) nan selil melanom B16F1. Anplis de sa, 10-HDA ki aplike sou po sourit yo montre yon mwayèn endèks blanchiman po (valè L) ogmante siyifikativman.

Konklizyon:Done validasyon yo te endike potansyèl 10-HDA pou itilize nan siprime pigmantasyon po a. 10-HDA pwopoze kòm yon kandida pou anpeche melanogenesis, kidonk li ta ka devlope kòm yon pwodui kosmetik swen pou po.

Mo kle:Jele wayal, 10-idwoksi-2-asid dekanoik, Melanogenesis, blanchi po, Inibitè Melanogenesis

Jan nou koumanse

Royal jele (RJ) se yon sekresyon jenn myèl travayè (Apis mellifera) ki pwodui nan glann ipofarinj ak mandibilè, myèl larenn ki devlope yo te manje li sèlman pou tout lavi li [1]. RJ bay gwo valè nitrisyonèl akòz kantite abondan pwoteyin, asid amine gratis, lipid, vitamin, ak sik [2, 3]. Pwoteyin byoaktif RJ yo se pi gwo pwoteyin jele wayal (MRJPs), apisimin, ak royalizing, ki te montre efè imunoregulatwa ak anti-bakteri nan plizyè etid [4-6]. 10-idwoksi-2- asid dekanoik (10-HDA) se te pi gwo asid gra nan RJ ki genyen plizyè efè benefis sante pou moun, ki te demontre aktivite anti-tumeur, anti-bakteri, ak imunomodulateur [7] –9]. 10-HDA yo jwenn sèlman nan RJ, kidonk yo te itilize li kòm yon makè kalite pwodwi jele wa [10, 11]. Plizyè aktivite famasi nan RJ te deja konfime pa eksperyans bèt, ak aktivite famasi yo ki gen ladan anti-oksidasyon [12, 13], anti-enflamasyon [14], anti-timè [15, 16], anti-agenèz [17], anti-bakteri [18-20], vasodilative [21, 22], ipèrtansif [21, 22], anti-hypercholesterolemic [23], nephroprotective [24] ak efè blanchi po [25]. Dapre valè nitrisyonèl li yo ak benefis li yo pou sante moun, gen plis ak plis pwodwi komèsyal RJ ki disponib nan mache yo.

Koulè po bèt ak imen an gen rapò ak kontni pigman melanin nan po a. Wòl melanin se pwoteje po a kont domaj nan limyè UV, men akimilasyon twòp nan melanin lakòz maladi po grav tankou dekolorasyon ak aje po pigman ak akselere [26]. Melanin te sentèz nan melanosit yo ki sitiye nan kouch ki pi anndan epidèm la atravè mekanis melanogenesis [27]. Melanogenesis se yon chemen biosentetik konplèks ki kontwole pa tirozinaz, pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz 1 ak 2 (TRP-1 ak TRP{-2), ak faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF) [28, 29]. Tirozinaz se yon anzim ki limite pousantaj pou kontwole sentèz melanin. Premye etap pwodiksyon melanin se idroksidasyon L-tirozin nan L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) ak konvèsyon L-DOPA an dopaquinone [30]. TRP-2 katalize pwodiksyon 5,6- dihydroxy indol-carboxylic asid konvèti nan dopachrome, ak pwodwi TRP-2, 5,6- dihydroxy indole carboxylic asid kòm yon substra pou TRP-1 konvèti nan endol-5,6-quinone asid karboksilik, finalman sa ki lakòz sentèz melanin [31, 32]. Anpeche sentèz melanin atravè melanogenesis dezòd ta dwe pi gwo fason pou anpeche oswa amelyore maladi ipèpigmantè, tankou melasma, ak tach laj. Se poutèt sa, chèche yon konpoze potansyèl, san danje epi efikas pou kontwole faktè sa yo nan melanogenesis ta dwe remake nan endistri medikal ak kosmetik [25, 33, 34].

Royal jele te demontre ki ta ka diminye sentèz melanin [22], men pi gwo konpoze aktif la oswa mekanis ki kache aktivite sa yo nan RJ rete enkoni. Nan etid anvan nou an, nou te jwenn ke 10-HDA te kapab anpeche aktivite tirozinaz (done ki pa pibliye). Nan etid sa a, 10-HDA te evalye efè inhibisyon sou tirosinaz. Melanin byosentèz nan vitro modèl lè l sèvi avèk B16F10 melanom selil kilti ak yon modèl bèt nan yon sourit ak aplikasyon an po yo tou de fèt pou mennen ankèt sou efè a melanogenesis-anpeche nan 10-HDA.

Metòd

Preparasyon 10-HDA ki soti nan jele wa

Royal jele te prepare pa Fu-Chang Beekeeping nan Hualien, Taiwan. Lav ki gen laj 3-jou yo te transfere nan gode selil larenn sou ankadreman yo, epi chak ankadreman te genyen 30 tas larenn. Ankadreman yo te transfere nan ruch myèl, epi yo te kolekte RJ a 72 èdtan apre yo fin transfere lav yo. Chak ruch gen apeprè 25,000 myèl [35]. Yo te kenbe echantiyon RJ yo kolekte nan -20 degre jiskaske plis analiz. Royal jele (40 g) te refluxed ak metanol (400 mL × 4 × 30 min), ak supernatant la te rekòlte atravè santrifujasyon nan 4500 xg pou 30 min. Supernatant la te konsantre anba yon presyon redwi pou jwenn ekstrè brit (10.76 g) yo te rele RJM. RJM sispann nan metanol te pirifye pa kwomatografi kolòn jèl silica (SiO2 CC) ak Lè sa a, eluye ak klowofòm ak gradyan metanol (300:1 a 1:1) pou jwenn dis fraksyon analize pa TLC. Fraksyon 4 ak 5 parèt tach enpòtan, ak Se poutèt sa yo te sibi plis pirifikasyon ak analiz. Fraksyon 4 ak 5 yo te repete pirifye pa SiO2 CC (eluye ak klowofòm/metanòl, 300:1 a 1:1) epi yo te kristalize plis ak asetòn pou jwenn 10-idwoksi-2-asid dekanoik ({{32} } HDA). Estrikti chimik pwodwi pirifye a te konfime pa analiz spectre NMR ak GC-mas. 10-Analiz quantitative HDA te detèmine pa segondè-pèfòmans likid chromatography (HPLC) ak yon sistèm ponpe Waters 1525 ekipe ak yon detektè Water 2489, yon kolòn RP-8 GP250 (4.6 mm), ak yon Waters. 717plus autosampler. Faz mobil lan te solisyon metanol (60:40 v / v ak dlo ultrapure ak deyonize) ajiste ak asid fosfò a pH 2.5, filtre nan yon manbràn (0.45 μm), ak degaze pou 5 min. Pousantaj koule faz mobil la te ajiste a 1.0 mL / min, epi deteksyon an te fèt nan 225 nm. Kontni 10HDA nan echantiyon pirifye final la se 90 pousan, ki itilize pou plis analiz.

Kilti selilè ak tretman 10-HDA

Selil melanom B16F10 (nimewo BCRC: 60,031) yo te kiltive nan mwayen Eagle's modifye Dulbecco a (DMEM) siplemantè ak 10 pousan (v/v) serom fetal bovine nan 37 degre nan yon enkibatè imidite, CO2-kontwole (5 pousan). . Selil yo te simen nan yon dansite selil ki apwopriye nan yon 24-pi oswa yon plak 6-pou. Apre 1 d enkubasyon, selil yo te trete ak divès konsantrasyon 10-HDA. Yo te itilize mwayen an nan gwoup kontwòl olye de 10-HDA. Apre sa, selil yo te rekòlte epi yo te itilize pou divès kalite tès.

Mezi viabilite selil

Vitabilite selil yo te mezire pa {{0}}(4,5-dimethylthiazol-2- yl)-2,5 -diphenyltetrazolium bromur (MTT) assay dapre metòd rapòte pa Carmichael et al. [36]. B16F10 selil melanom yo te kiltive nan DMEM ki gen 10 pousan FBS ak 1 pousan L-glutamin (4 mM) nan yon enkibatè 5 pousan CO2 a 37 degre. Selil kiltive yo (1 × 104 selil/pi) yo te simen nan yon plak 96-byen, 10-HDA (dissoud nan dimethyl sulfoxide (DMSO)) dilye pa mwayen an nan yon konsantrasyon 1, 0.5, 0.1. mM ak asid kojik 1 mM yo te ajoute nan pwi yo. Yo te itilize mwayen an kòm vid la. Apre 24- enkubasyon nan 37 degre anba 5 pousan CO2, yo te retire medya yo nan chak pi, epi yo te lave pwi yo ak PBS (1 M fosfat-tanpon saline) de fwa. 200 ul nan solisyon MTT (2 mg / ml) te ajoute nan chak pi. Reyaksyon an te sispann lè w ajoute 100 μL DMSO apre 4-h enkubasyon. Yo te mezire absorbans chak pi nan 540 nm lè l sèvi avèk yon lektè imunoessai (BIO-TEK, Winooski, VT) [20-23]. Selilè viabilite te detèmine pa ekwasyon sa a: Selil viabilite (pousan)=[(AB)/C] × 100 pousan, A: echantiyon absòbe volim, B: blanch absòbe volim ance, C: kontwòl absòbe volim.

Mezi kontni melanin selilè

Kontni melanin entraselilè nan selil melanom B16F10 yo te mezire lè l sèvi avèk metòd modifye ki dekri pa Bilodeau et al., [37]. Nan fen kiltivasyon selil melanom B16F10, selil yo te rekòlte epi lave ak PBS. Selil yo rekòlte yo te lysed nan tanpon lysis frèt (20 mM fosfat sodyòm (pH 6.8), 1 pousan Triton X -100, 1 mM phenylmethylsulfonyl fliyò (PMSF), 1 mM Ethylenediaminetetraacetic asid (EDTA)). Apre santrifugasyon nan 15,000×g pou 30 min, granules yo te fonn nan 1 N NaOH ki gen 20 pousan DMSO pou 1 èdtan nan 60 degre. Kontni pwoteyin nan supernatant la te detèmine lè l sèvi avèk tès Bradford la. Yo te mezire absorbans nan 405 nm, epi yo te kalkile kontni melanin la kont yon estanda li te ye nan melanin sentetik. Melanin nivo ( pousan )=[(AB)/ C] × 100 pousan ; A: volim absòbe echantiyon; B: volim absòbe vid; C: kontwòl volim absorption.

Mezi nan aktivite tirozinaz selilè

Yo te fè yon tès aktivite tirozinaz dapre metòd Martinez-Esparza et al., [38] ki dekri deja, ak ti modifikasyon. Selil melanom B16F10 yo te lysed nan 20 mM fosfat sodyòm (pH 6.8), 1 pousan Triton X -100, ak 1 mM phenylmethane sulfonyl fliyò oswa PMSF, ak santrifuje nan 14, 000 rpm pou 15 min. Yo te detèmine kontni pwoteyin chak supernatant lè l sèvi avèk tès Bradford ak Albumin serik bovin (BSA) kòm estanda pwoteyin. Aktivite tirozinaz te detèmine nan yon melanj reyaksyon (1 mL) ki gen 50 mM tanpon fosfat (pH 6.8), 2 mM L DOPA, ak 300 ug pwoteyin supernatant. Apre enkubasyon nan 37 degre pou 15 min, yo te mezire absòbe a nan 475 nm lè l sèvi avèk yon lektè microplate. Aktivite tirozinaz ( pousan )=[(AB)/ C] × 100 pousan ; A: volim absòbe echantiyon; B: volim absòbe vid; C: kontwòl volim absorption.

Analiz Western blot

Selil yo te lave 3 fwa nan PBS frèt epi liz nan tanpon RIPA (pH 7.4, 50 mM tris, 0.1 pousan SDS, 50 mM NaCl, 1 pousan NP-40, 1 mM PMSF, 10 ug/mL aprotinin ak 10 ug/mL leupeptin). Yo te itilize yon aliquot nan lysate la pou detèmine kontni pwoteyin pa metòd Bradford tès ki itilize albumin serom bovin kòm estanda. Pwoteyin yo (40 ug) yo te separe sou 10 pousan elèktroforèz jèl poliakrilamid SDS ak efase sou Hybond-C Siplemantè manbràn nitrocellulose (Amersham Bioscience, UK). Manbràn yo te bloke ak 5 pousan lèt ki pa gen anpil grès nan Tris-tanpon saline (TBS) ki gen 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, ak 150 mM NaCl pou 30 min. MITF, tirozinaz, dopachrome tautomerase 2 (TRP-2), TRP-1, ak -aktin (kòm yon kontwòl entèn) yo te detekte lè l sèvi avèk antikò poliklonal lapen, respektivman. Manbràn yo te plis enkube ak antikò segondè polyclonal kabrit pou lapen IgG-H&L (HRP). Lè sa a, tout antikò mare yo te detekte lè l sèvi avèk Super Signal® West Pico Chemiluminescent Substrate (ECL) (Thermo Scientific). Entansite siyal chak gwoup te quantifye ak yon sistèm densitomètr Gel Doc TM / Chemi Doc TM Inivèsèl Hood II (Bio-Rad) ekipe ak yon entegre ak nòmalize ak sa yo ki nan kontwòl entèn la.

Detèminasyon aktivite depigmantasyon nan sourit

Aktivite depigmantasyon an te teste atravè sistèm modèl sourit pa pwotokòl modifye Tai et al. [39]. Etid la te apwouve pa Komite Etik nan National Formosa University (nimewo apwobasyon: 10,401). Sourit nwa fi senk semèn (C57BL/6 J), ki peze 20 a 25 g, yo te achte nan Sant Laboratwa Animal Nasyonal, Taipei. Pandan tout eksperyans, bèt yo te loje nan yon chanm ki gen èkondisyone ak tanperati konstan (25 degre ± 2 degre) epi yo te kenbe sou yon 12 èdtan limyè: sik nwa. Bèt yo te aklimate pou 7 jou anvan eksperyans lan. Apre yo fin kale cheve yo, bèt yo te bay 1-jou repo. Echantiyon jèl ki gen 10-HDA yo te prepare lè yo dispèse dwòg yo nan vazlin. Yo te divize yon total de karant sourit egalman an senk gwoup epi yo te pase chak gwoup de fwa pa jou ak 0.1 g vazlin (kontwòl), 1 pousan asid kojik nan vazlin, 0.5 pousan, 1 pousan, oswa 2 pousan 10-HDA nan vaselin. . Aplikasyon yo te kontinye pandan 3 semèn, epi yo te mezire endèks blanchi po a (valè L) sou menm zòn po a chak jou ak yon DermaLab® Combo (Cotex Technology, Denmark), ki se yon enstriman kolorimetrik ki sèvi ak yon gwo entansite blan. Dirije kòm yon sous limyè. Enstriman kolorimetri a konekte ak yon òdinatè [40]. Nou konsidere sèlman paramèt L la, ak valè L la te klète relatif la, sòti nan total nwa (L=0) rive nan total blan (L=100). Inisyal po blanchi endèks L-valè te teste nan po a nan chak sourit anvan yo te aplike ak sibstans ki sou yo teste.

Analiz estatistik

Tout rezilta nan etid sa a te analize lè l sèvi avèk pwosedi jeneral modèl lineyè ki disponib nan pakè lojisyèl Sistèm analiz estatistik vèsyon 9.1 (Statistical Analysis System Institute, 2002). Tès miltip Duncan a [41] te itilize pou detekte diferans ki genyen ant mwayen tretman yo. Chak eksperyans te fèt an triple.

Rezilta yo

Efè 10-HDA sou rantabilite selil melanom B16F1

Dòz la pi bon nan tès viabilite selil MTT nan selil melanom B16F1 yo montre nan Fig. 1. Li montre klèman ke 10-HDA pa t 'sitotoksik nan selil melanom B16F1 nan konsantrasyon nan 0.1, { {8}}.5, ak 1 mM, ak asid kojik pa t 'sitotoksik nan selil melanom nan yon konsantrasyon nan 1 mM. Viabilite selil yo diminye anpil (20 pousan rediksyon) nan selil melanom ki ekspoze a 1.5 mM 10-HDA (P <0.{05) (done yo pa montre) ak 5 mM asid kojik. Se poutèt sa, konsantrasyon yo nan 0.1, 0.5, 1 mM nan 10-HDA, ak 1 mM nan asid kojik yo te aplike nan eksperyans ki vin apre.

Anpèchman aktivite tirozinaz ak sentèz melanin nan selil melanom B16F10 pa 10-HDA

Kojic asid se yon efikas ak byen li te ye anti-melanogenesis ajan e li te itilize kòm yon kontwòl pozitif nan etid sa a. 10-HDA siyifikativman (p <0.05) siprime sentèz melanin ak aktivite tirozinaz konpare ak kontwòl selil melanom B16F1 ki pa trete yo. Nan dòz 1 mM, 10- HDA pwovoke 28 ± 2.4 pousan rediksyon nan aktivite tirozinaz selilè (P <0.01) ak 40.4 ± 3 .0 pousan rediksyon nan sentèz melanin selilè (P <0.001), pandan y ap asid kojik (1 mM) tou siyifikativman redwi aktivite tirozinaz ak sentèz melanin pa 14.4 ± 3.7 pousan (P <0.05) ak 19.3 ± 1.5 pousan (P). <0.001), respektivman (figi 2 ak 3).

Suppression nan ekspresyon pwoteyin tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2 nan selil melanom B16F10 pa 10-HDA

Pou envestige si 10-HDA ka enfliyanse ekspresyon pwoteyin melanojèn, yo te fè analiz Western blotting lè l sèvi avèk lysate selil melanom B16F10 trete ak 10-HDA (figi 4). 10-HDA a dramatikman anpeche ekspresyon tirozinaz, TRP-1 ak TRP-2 nan selil melanom B16F1 konpare ak selil ki pa trete yo (figi 4b-d). -aktin a, yon pwoteyin nan kay ki te itilize kòm yon kontwòl entèn, pa montre okenn chanjman. 10-HDA a anpeche nivo ekspresyon pwoteyin nan anzim melanojèn ki sanble ak asid kojik.

Efè inhibition 10-HDA sou nivo pwoteyin ki gen rapò ak faktè melanojèn nan selil B16F10 yo.

Pandan pwosesis melanogenesis nan selil mamifè yo, MITF jwe wòl regilatè pi gwo nan sentèz chemen TRP yo, tankou TYR, TRP{{0}}, ak TRP-2 [25, 26]. Yo te evalye efè 10-HDA sou ekspresyon MITF lè l sèvi avèk Western blot. B16F1{{10}} selil melanom yo te ekspoze a divès konsantrasyon 10- HDA (0.1, 0.5, ak 1 mM), sa ki lakòz downregulation nan ekspresyon MITF pa 10-HAD ( Fig. 4e). Valè IC50 pou 10-sipresyon HDA ekspresyon MITF yo te estime a 0.86 mM. Rezilta prezan yo sijere ke nivo pwoteyin MITF yo redwi pa 10-HDA a. Efè ipopigmantasyon 10-HDA a ka se rezilta ekspresyon jèn MITF ki reglemante anba, ki ta ka reprime ekspresyon jèn yo ak pwoteyin tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2.

Evalyasyon aktivite depigmantasyon 10-HDA an vivo atravè sourit

Pou espekile dòz imen an, nou te itilize sourit kòm yon modèl bèt pou mennen ankèt sou aktivite depigmantasyon {{0}}HDA. Apre yo fin bab, sourit yo te trete ak 1 pousan asid kojik nan vazlin, 0.5 pousan, 1 pousan, oswa 2 pousan 10-HDA nan vazlin, epi yo te mezire ak anrejistre endèks po a. Pou etid sa a nan vivo, nou te itilize sid kojic kòm yon kontwòl pozitif. Kojic asid lajman itilize kòm yon ajan terapi depigmantasyon po atravè mond lan. Apre premye semèn nan tretman an, degre blanchiman po a te ogmante siyifikativman nan sourit yo trete ak 10- HDA, konpare ak kontwòl la, ak ogmantasyon sa a kontinye jouk nan fen eksperyans la. Aktivite depigmantasyon 0.5, 1, ak 2 pousan 10-HDA te konparab ak 1 pousan asid kojik. Rezilta nou yo te revele ke 10-HDA te kapab pwomouvwa siyifikativman blanchiman po sou po sourit nan osi ba ke yon konsantrasyon nan 0.5 pousan (Fig. 5). Se poutèt sa, 10-HDA parèt yon bon kandida kòm yon ajan blanchiman pou trete ipèpigmantasyon po.

Diskisyon

Sentèz Melanin kontwole pa kaskad konplèks anzimatik tirozinaz, TRP1, ak TRP2. Degre anpèchman jèn ki gen rapò ak melanogenesis ak pwoteyin jwe yon wòl enpòtan nan efikasite yon ajan depigmantasyon, ki anjeneral itilize nan tretman ipèpigmantasyon oswa pwodui kosmetik [28]. Pou elicide vre efè inhibition 10-HDA sou melanogenesis, kontni melanin ak aktivite tirozinaz intraselilè selil B16F10 yo te teste nan menm ranje konsantrasyon. Rezilta yo nan Fig. 2 ak 3 te endike ke 10-HDA te montre yon aktivite anpèchman ki pi wo sou sentèz melanin nan selil B16F10 pase asid kojik. Done yo revele ke 10- HDA bloke melanogenesis nan selil melanom B16F10 yo.

Melanogenesis domine omwen pa twa pwoteyin regilasyon, tirozinaz, TRP1, ak TRP2 nan melanosit mamifè [29]. Ekspresyon TRP-1, TRP-2, ak MITF yo tout te anpeche nan selil melanom B16F10 yo, ki te trete ak 10-HDA. MITF se yon gwo faktè transkripsyon pou kontwole ekspresyon anzim melanojèn, tankou tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2 [42, 43]. Dapre done Western blotting nou yo (Fig. 4), selil mamifè yo trete ak 10-HDA ta diminye ekspresyon tout anzim ki limite vitès, tankou tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2 , ak anpeche akimilasyon nòmal nan melanin pandan pwosesis la melanogenesis. Done sa yo sigjere ke 10- HDA te kapab anpeche pwosesis melanogenesis la pa anpeche ekspresyon MITF. Nan etid sa a, nou te demontre ke 10-HDA anpeche melanogenesis nan downregulating MITF pwoteyin, tirozinaz, ak pwodiksyon melanin. Chemen inhibition 10-HDA sou ekspresyon MITF te diferan de lòt inibitè melanogenesis yo, tankou asid kojik, arbutin, ak asid ascorbic, ki pa afekte ekspresyon MITF [44, 45]. Sa a sijere ke 10-HDA gen yon potansyèl ekselan yo dwe itilize kòm yon ajan ki an sekirite ak natirèl blanchi po pou pwodui kosmetik fonksyonèl [46].

Melanoma, yon kansè po rive nan trans malfezan ki fòme nan melanosit yo. Melanom ki te parèt nan po kwonik ki domaje solèy la, sifas mukozal yo, ak po akral yo te koze pa twòp aktive BRAF ak NRAS [47], pèt lokal CDKN2A [48], twòp eksprime MITF [49], twòp aktive Twous [50]. ], twòp aktive mGluR1 [51, 52] ... et al. Nan etid sa a, 10-HDA te kapab anpeche ekspresyon MITF nan selil melanom B16F10 yo. Sa a te endike ke 10-HDA gen potansyèl pou yo vin engredyan pou medikaman po oswa anti-kansè kont melanom.

RJ te itilize pou anpil preparasyon dèrmatolojik ki gen ladan rafrechisman po, rejenerasyon po, rajenisman, boule pou geri, oswa geri blesi [53, 54]. Anplis, yo te rapòte ke kèk asid gra enstore nan RJ ta ka anpeche sentèz melanin ak aktivite tirozinaz, ki mennen nan downregulation nan melanogenesis [55], epi nou demontre ke efè a depigmantasyon nan RJ ta ka rezilta nan prezans nan {{3 }}HDA. Paske po sourit yo sanble ak moun, kidonk nou te itilize sourit kòm yon modèl bèt in vivo pou egzamine aktivite depigmantasyon 10-HAD. Jan yo montre nan Fig. 5, endèks blanchiman po a nan koulè po a te ogmante siyifikativman nan sourit trete ak 10-HAD, konpare ak kontwòl la. Anplis de sa, Koya-Miyata et al. yo te evalye aktivite pwomosyon pwodiksyon kolagen an nan 10-HDA nan liy selil fibroblast ki pwodui faktè kwasans transfòmasyon- 1 (TGF{- 1), ki se yon faktè enpòtan pou pwodiksyon kolagen an [55] . Se poutèt sa, 10-HDA parèt tankou yon konpoze natirèl trè pwomèt pou rejenerasyon po ak tretman ipèpigmantasyon.

Konklizyon

10-HDA inibi non sèlman aktivite tirozinaz la, men tou ekspresyon anzim melanojèn yo, tankou tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2, nan siprime MITF nan selil melanom B16F10 yo. Kontinwe, pigman nan melanin te redwi nan selil melanom B16F10. Anplis de sa, modèl bèt nan vivo te montre aktivite depigmantasyon 10-HDA nan aplikasyon aktualite. Rezilta sa yo sigjere ke 10-HDA gen yon kandida ki ta ka yon inibitè melanogenesis san danje epi natirèl pou endistri pwodui kosmetik, kote rechèch pou yon konpoze natirèl ak efikas se youn nan objektif trè enpòtan pou devlope yon pi bon pwodwi swen pou po. .

Abreviyasyon yo

10-HDA: 10-idwoksi-2-asid decanoic; BSA: Albumin serik bovin; DMEM: Dulbecco's modifye Eagle's medium; DMSO: Dimethyl sulfoxide; EDTA: Ethylenediaminetetraacetic asid; L-DOPA: L-3,4- dihydroxyphenylalanine; MITF: faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi; MRJP: gwo pwoteyin jele wa; MTT: 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,{5- bromur diphenyltetrazolium; PBS: fosfat-tanpon saline; PMSF: phenylmethane sulfonyl fliyò oswa phenylmethylsulfonyl fliyò; TLC: Kwomatografi kouch mens; TRP-1: pwoteyin 1 ki gen rapò ak tirozinaz; TRP- 2: pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz 2

Rekonesans

Nou remèsye Madam Li-Yu Lee nan Fu-Chang Beekeeping pou prepare wayal jele

Finansman

Travay sa a te sipòte pa yon sibvansyon Ministè Syans ak Teknoloji, Taiwan, ROC (MOST102–2622-B-150-002-CC2 & MOST 103–2313-B-150 -001 -MY2 pou CC Peng).

Disponibilite done ak materyèl

Tout done ki te pwodwi oswa analize pandan etid sa a yo enkli nan atik sa a pibliye ak dosye enfòmasyon siplemantè li yo.

Kontribisyon otè yo

CCP te vin ansent ak fèt eksperyans yo. HZS ak IPL te fè eksperyans yo. CCP ak PCK analize done yo. CCP, PCK, ak JCL kontribye reyaktif / materyèl / zouti analiz. CCP ak IPL te ekri ak revize papye a. Tout otè yo te apwouve vèsyon final maniskri a.

Enfòmasyon otè yo

CCP, Doktè nan Biotechnologie, pwofesè asosye nan Depatman Biotechnologie, National Formosa University. HZS, Mèt nan Biotechnologie, gradye nan Depatman Biotechnologie, National Formosa University. IPL, Doktè nan Biotechnologie, Manadjè nan Depatman Rechèch ak Devlopman, Challenge Bioproducts Co, Ltd PCK, Doktè nan Chimi, pwofesè asosye nan Depatman Biotechnologie, National Formosa University. JCL, Manadjè Jeneral nan Honey Bee Town Co., Ltd.

Apwobasyon etik

Tout eksperyans bèt yo te apwouve pa Komite Etik nan National Formosa University (nimewo apwobasyon: 10,401) ak konfòme yo ak Gid yo pou swen ak itilizasyon bèt laboratwa.

Konsantman pou piblikasyon

Pa aplikab nan seksyon sa a. Atik sa a se pa yon etid klinik ki enplike patisipan imen ak maniskri sa a pa genyen okenn done klinik endividyèl.

Enterè konpetisyon

Otè yo deklare ke yo pa gen okenn enterè konpetisyon

Nòt Piblikatè a

Springer Nature rete net sou reklamasyon jiridiksyon nan kat pibliye ak afilyasyon enstitisyonèl.

Detay otè

1 Depatman Biotechnologie, National Formosa University, Huwei, Yunlin, Taiwan. 2 Depatman rechèch ak devlopman, Challenge Bioproducts co, Ltd., Douliou, Yunlin, Taiwan. 3 Honey Bee Town Co., Ltd., No.77-2 Huaxi, 970 Hualien City, Taiwan.

Resevwa: 9 Mas 2017 Aksepte: 21 Jiyè 2017

Pibliye sou entènèt: 09 Out 2017

Referans

1. Chen C, Chen S. Chanjman nan konpozan pwoteyin ak estabilite depo nan Royal Jele nan divès kondisyon. Manje Chem. 1995;54:195–200.

2. Takenaka T. Konpozisyon chimik nan jele wa. Siwo myèl Sci. 1982;3:69–74.

3. Schmitzova J, Klaudiny J, Albert S, Schroder W, Schreckengost W, Hanes J, Judova J, Simuth J. Yon fanmi gwo pwoteyin jele wayal nan myèl siwo myèl Apis Mellifera L. Cell Mol Life Sci. 1998;54:1020–30.

4. Okamoto I, Taniguchi Y, Kunikita T, Kohno K, Iwaki K, Ikeda M. Gwo pwoteyin jele wayal 3 modul repons iminitè nan vitro ak nan vivo. Lavi Sci. 2003;1:2029–45.

5. Fujiwara S, Imai J, Fujiwara M, Yaeshima T, Kawashima T, Kobayashi K. Yon pwoteyin anti-bakteri ki pisan nan jele wayal. J Biol Chem. 1990;265:11333–7.

6. Bilikova J, Hanes J, Nordhoff E, Saenger W, Klaudiny J, Simuth J. Apisimin, yon nouvo serine-valine ki rich peptide soti nan myèl myèl (Apis Mellifera L.) wayal jele: pirifikasyon ak karakterizasyon molekilè. FEBS Lett. 2002;528:125–9.

7. Townsend GF, Brown WH, Felauer EE, Hazlett B. Etid sou aktivite antitumoral nan vitro asid gra. IV. Estè asid ki gen rapò ak 10- idwoksi-2-asid dekanoik ki soti nan jele wayal kont lesemi sourit transplantabl. Èske J Biochem Physiol. 1961;39:1765–70.

8. Blum MS, Novak AF, Taber S. 10-Idroksi-2Δ-decanoic asid, yon antibyotik yo jwenn nan jele wayal. Sci. 1959;130:452–3.

9. Vucevic D, Melliou E, Vasilijic S, Gasic S, Ivanovski P, Chinou I, Kolik M. Asid gra izole nan jele wayal modil repons iminitè dendritik nan vitro. Int Immunopharmacol. 2007;7:1211–20.

10. Weaver N, Lwa JH. Eterojenite asid gra soti nan jele wa. Lanati. 1960;188:938–9.

11. Antinelli JF, Zeggane S, Davico R, Rognone C, Faucon JP, Lizzani L. Evalyasyon (E)-10-idroksid-enoik asid kòm yon paramèt fraîcheur pou jele wayal. Manje Chem. 2003;80:85–9.

12. Takeshi N, Reiji I. Preparasyon ak pwopriyete fonksyonèl ekstrè dlo ak ekstrè alkalin jele wayal. Manje Chem. 2004;84:181–6.

13. Takeshi N, Mizuho S, Rriji I, Hachiro I, Nobutaka S. Aktivite antioksidan kèk siwo myèl komèsyal, jele wayal, ak propoli. Manje Chem. 2001;75: 237–40.

14. Martos MV, Navajas YR, López JF. Pwopriyete fonksyonèl nan siwo myèl, pwopoli, ak jele wayal. J Manje Sci. 2008;73:117–24.

15. Hiroshi I, Masamitsu S, Kazuhiro T, Yoko A, Satoshi M, Hideaki H. Bee pwodwi yo anpeche VEGF-induit angiogenesis nan venn lonbrit imen selil endothelial. BMC Complement Altern Med. 2009;9:1–10.

16. Tamura T, Fujii A, Kuboyama N. Efè antitumor nan jele wayal (RJ). Nippon Yakurigaku Zasshi. 1987;89:73–80.

17. Park HM, Cho MH, Cho Y, Kim SY. Royal jele ogmante pwodiksyon kolagen an nan po rat apre ovarectomy. J Med Food. 2012;15:568–75. doi:10.1089/jmf. 2011.1888.

18. Izuta H, Shimazawa M, Tsuruma K, Araki Y, Mishima S, Hara H. Bee pwodwi yo anpeche VEGF-induit anjyogenesis nan venn lonbrit imen selil endothelial. BMC Complement Altern Med. 2009;6:489–94.

19. Tseng JM, Huang JR, Huang HC, Tzen JTC, Chou WM, Peng CC. Pwodiksyon fasilite yon peptide-Royalisin antimikwòb ak antikò li atravè yon sistèm kò lwil atifisyèl. Biotechnol Prog. 2011;27:153–61.

20. Bílikova K, Huang SC, Lin IP, Šimuth J, Peng CC. Estrikti ak relasyon aktivite antimikwòb nan royalizing, yon peptide antimikwòb ki soti nan jele wa a nan Apis Mellifera. Peptides. 2015;68:190–6.

21. Okuda H, Kameda K, Morimoto C, Matsuura Y, Chikaki M, Jiang M. Etid sou sibstans ki tankou ensilin ak sibstans inhibitor nan direksyon anjyotansin-konvèti anzim nan jele wayal. Mitsubachi Kagaku. 1998;19:9–14.

22. Shinoda M, Nakajin S, Oikawa T, Sato K, Kamogawa A, Akiyama Y. Etid byochimik sou faktè vazodilatif nan jele wayal. Yakugaku Zasshi. 1978;98:139–45. 23. Vittek J. Efè jele wayal sou lipid serom nan bèt eksperimantal ak moun ki gen ateroskleroz. Eksperyans. 1995;51:927–35.

24. Ibrahim A, Eldaim MA, Abdel-Daim MM. Efè nefroprotektif nan siwo myèl myèl ak jele wayal kont toksisite sisplatin subchronic nan rat. Sitoteknoloji. 2016;68:1039–48.

25. Han SM, Yeo JH, Cho YH, Pak SC. Royal Jelly diminye sentèz Melanin atravè Regilasyon Down nan ekspresyon tirozinaz. Am J Chin Med. 2011; 39:1253–60.

26. Gilchrest BA, Eller MS. Fotodomaj ADN stimul melanogenesis ak lòt repons fotopwotektif. J Investig Dermatol Symp Proc. 1999;4:35–40.

27. D'Mello SAN, Finlay GJ, Baguley BC, Askarian-Amiri ME. Chemen siyal nan Melanogenesis. Int J Mol Sci. 2016;17:1144. doi:10.3390/ijms17071144.

28. Kobayashi T, Vieira WD, Potter B, Sakai C, Imokawa G, Tande VJ. Modulation nan ekspresyon pwoteyin melanogenic pandan switch la soti nan Inyon Ewopeyen an feomelanogenesis. J Cell Sci. 1995;108:2301–9.

29. Kim SS, Kim MJ, Choi YH, Kim BK, Kim KS, Park KJ, Park SM, Lee NH, Hyun G. Down-regulation of tyrosinase, TRP-1, TRP-2 and MITF ekspresyon pa Citrus peze-gato nan melanom murin B16 F10. Asian Pac J Trop Biomed. 2013;3: 617–22.

30. Tè EJ, Ito S, Wakamatsu K, Riley PA. Konstan pousantaj pou de premye etap chimik eumelanogenesis yo. Pigman selil Res. 2003;16:487–93.

31. Yen FL, Wang MC, Liang CJ, Ko HH, Lee CW. Melanogenesis inhibitor (yo) soti nan Phyla nodiflora ekstrè. Evid Based Complement Alternat Med 2012; ID: 867494. fè 10.1155/2012/867494.

32. Tachibana M. MITF: yon kouran k ap koule pou selil pigman yo. Pigman selil Res. 2000;3:230–40.

33. Jung SO, Kim DH, Pitit JH, Nam KC, Ahn DU, Jo CR. Pwopriyete fonksyonèl phosvitin jònze ze kòm yon inibitè melanogenesis. Manje Chem. 2012;135: 993–8.

34. Yeon HK, Youn OJ, Cho CW, Pitit DW, Park SJ, Rho JH, Sang YC. Efè inhibition asid Cinnamic sou biosentèz melanin nan po a. Biol Pharm ti towo bèf. 2008;31:946–8.

35. Liu JR, Yang YC, Shi LS, Peng CC. Pwopriyete antioksidan nan jele wa ki asosye ak laj lav ak lè rekòt. J Agri Food Chem. 2007;56: 11447–52.

36. Carmichael J, DeGraff WG, Gazdar AF, Minna JD, Mitchell JB. Evalyasyon yon tès kolorimetri semi-otomatik ki baze sou tetrazolyom: evalyasyon tès chemosensitivity. Kansè Res. 1987;47:936–42.

37. Bilodeau ML, Greulich JD, Hullinger RL, Bertolotto C, Ballotti R, Andrisani O. MP-2 stimul ekspresyon jèn tirozinaz ak melanogenesis nan melanosit diferansye. Pigman selil Res. 2001;14:328–36.

38. Martinez-Esparza M, Jimenez-Cervantes D, Solano F, Lonzano JA, JC CB. Mekanis anpèchman melanogenesis pa timè necrosis faktè-alfa nan selil melanom sourit B16/F10. Eur J Biochem. 1998;255:139–46.

39. Ding HY, Chang TS, Shen HC, Tai SK. Murine inibitè tirozinaz soti nan Cynanchum Bungei ak evalyasyon nan vitro ak nan vivo depigmenting aktivite. Ekspè dèrmatoloji. 2011;20:720–4.

40. Takiwaki H, Serup J. Mezi paramèt koulè nan plak psoriasik pa etwat-band refleksyon spectrophotometry ak tristimulus kolorimetri. Po Pharmacol. 1994;7:145–50.

41. Montgomery DC. Eksperyans ak yon sèl faktè: analiz la nan divèjans. Nan konsepsyon ak analiz de eksperyans. Montgomery, DC, Eds., John Wiley and Sons, New York, 1991; 75–77.

42. Park HY, Wu C, Yonemoto L, Murphy-Smith M, Wu H, Stachur CM. MITF-medyatè ekspresyon cAMP-pwovoke pwoteyin kinaz Cb nan melanosit imen. Biochem J. 2006;395:571–8.

43. Goding CR. Mitf soti nan krèt neral la nan melanom: transdiksyon siyal ak transkripsyon nan liy melanosit la. Genes Dev. 2000;14:1712–28.

44. Kim DS, Park SH, Kwon SB, Li K, Youn SW, Park KC. (-)-Epigallocatechin-3- gallat ak hinokitiol diminye sentèz melanin atravè diminye pwodiksyon MITF. Arch Pharm Res. 2004;27:334–9.

45. Choi YK, RhoYK, Yoo KH, Lim YY, Li K, Kim BJ. Efè vitamin C vs multivitamin sou melanogenesis: etid konparatif nan vitro ak nan vivo. Entèn J Dermatol. 2011;49:218–26.

46. ​​Dynek JN, Chan SM, Liu J, Zha J, Fairbrother WJ, Vucic D. Faktè transcription ki asosye ak mikroftalmi se yon regilatè transkripsyon kritik nan inibitè melanom nan apoptoz nan melanom. Kansè Res. 2008;68:3124–32.

47. Curtin JA, Fridlyand J, Kageshita T, Patel HN, Busam KJ, Kutzner H, Cho KH, Aiba S, Bröcker EB, LeBoit PE, Pinkel D, Bastian BC. Ansanm diferan nan chanjman jenetik nan melanom. N Engl J Med. 2005;353(20):2135–47.

48. Chan SH, Lim WK, Scott T Michalski ST, Lim JQ, NDB, Met-Domestici M, Young CNC, Vikstrom K, Esplin ED, Fulbright J, Ang MK, Wee J, Sittampalam K, Farid M, Lincoln SE, Itahana K, Abdullah S, BT a, Ngeow J. Germline emizygous sipresyon nan CDKN2A–CDKN2B locus nan yon pasyan prezante ak sendwòm Li–Fraumeni. npj Medsin jenomik. 2016; doi:10.1038/ npjgenmed.2016.15

49. Hartman ML, Czyz M. MITF nan melanom: mekanis dèyè ekspresyon li yo ak aktivite. Cell Mol Life Sci. 2015;72:1249–60. doi:10.1007/s00018-014- 1791-0.

50. Antonescu CR, Busam KJ, Francone TD, Wong GC, Guo T, Agaram NP, Besmer P, Jungbluth A, Gimbel M, Chen CT, Veach D, Clarkson BD, Paty PB, Weiser MR. Mitasyon L576P KIT nan melanom nan dèyè korelasyon ak ekspresyon pwoteyin KIT epi li sansib a anpèchman kinaz espesifik. Int J Kansè. 2007;121:257–64.

51. Abdel-Daim M, Funasaka Y, Komoto M, Nakagawa Y, Yanagita E, et al. Pharmacogenomics nan metabotropic glutamate reseptè subtip 1 ak in vivo fòmasyon melanom malfezan. J Dermatol. 2010;37:635–46.

52. Ohtani Y, Harada T, Funasaka Y, Nakao K, Takahara C, et al. Subtip reseptè glutamat metabotropik-1 esansyèl pou kwasans melanom in vivo. Onkogene. 2008;27:7162–70.

53. Kim J, Kim Y, Yun H, Park H, Kim SY, Lee KG, Han SM, Cho Y. Royal jele amelyore migrasyon fibroblasts po imen ak chanje nivo kolestewòl ak sfinganin nan yon modèl geri blesi in vitro. Nutr Res Pract. 2010;4:362–8.

54. Fujii A, Kobayashi S, Kuboyama N, Furukawa Y, Kaneko Y, Ishihama S, Yamamoto H, Tamura T. Ogmantasyon gerizon blesi pa wayal jele (RJ) nan rat streptozotocin-dyabetik. Jpn J Pharmacol. 1990;53:331–7.

55. Koya-Miyata S, Okamoto I, Ushio S, Iwaki K, Ikeda M, Kurimoto M. Idantifikasyon yon faktè pwodiksyon kolagen an ki soti nan yon ekstrè jele wayal ak mekanis posib li yo. Biosci Biotechnol Biochem. 2004;68:767–73.

Pou plis enfòmasyon: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501