Ki jan kalsyòm trete domaj nan ren loride-induit?

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Mo kle: Kalsyòm, ren, Apoptoz

REZIME

Alontèm konsomasyon twòp nan fliyò (F) ka lakòz domaj osye ak ki pa osez. Larense prensipal ògàn eskresyon fliyò nan kò a. Etid sa a te vize eksplore si wi ou non dyetetikkalsyòmsipleman ka soulajerendomaj ki te koze pa fluoroz ak plis envestige efè yo nanKalsyòmsou mekanis nan mitigasyon nanrenselilapoptozdeklanche pa F. Nou evalye estrikti istopatolojik la,renendikatè fonksyon, ak nivo ekspresyon jèn ak pwoteyin nan reseptè lanmò medyatèapoptozchemen nan rat Sprague Dawley (SD) trete ak fliyò sodyòm (NaF) ak/oswakalsyòmkabonat (CaCO3) pou 120 jou. Rezilta yo te montre ke 100 mg/L NaF pwovokerenblesi istopatolojik akapoptoz, ogmante konsantrasyon yo nan kreyatinin (CRE), asid urik (UA), azòt ure nan san (BUN), potasyòm (K), fosfò (P), ak F (p <{{0}}}.05) ,="" ak="" diminye="" nivo="" nan="" serom="" mayezyòm="" (mg)="" (p=""><0.05). anplis,="" naf="" ogmante="" nivo="" ekspresyon="" mrna="" ak="" pwoteyin="" nan="" reseptè="" lanmò="" sifas="" selil="" fas="" (fas),="" faktè="" necrosis="" timè="" (tnf),="" ki="" gen="" rapò="" ak="">apoptoz-inducing ligand (TRAIL), Caspase 8, Caspase 3, ak poly ADP-ribose polymerase (PARP) (p <0.01), ki="" finalman="" aktive="" chemen="" reseptè="" lanmò="" a.="">Kalsyòmsipleman ranvèse diminisyon nan CRE, BUN, UA, F, ak P nivo pwovoke pa F, soulaje domaj istopatolojik akapoptoz, ak redwi nivo ekspresyon jèn ak pwoteyin nan makè ki gen rapò ak chemen reseptè lanmò yo. An konklizyon, 1 pousanKalsyòmsoulaje F-induitrenapoptozatravè chemen siyal FAS/FASL, TNFR/TNF, DR5/TRAIL.

Larense prensipal ògàn ekskresyon fliyò nan kò a, lasistanchka pwoteje arenak amelyorerenfonksyon.

Entwodiksyon

Fliyò se lajman prezan nan tè a, dlo, ak manje. Sepandan, gen kèk faktè natirèl (degradasyon nan mineral ak wòch, fòmasyon nankalsyòmak sèl mayezyòm, enfiltrasyon dlo anba tè, elatriye) ak aktivite imen (dlo ize endistriyèl, agrochimik, pwodwi nan kay la, elatriye) lakòz polisyon fliyò nan anviwònman an (Daiwile et al., 2019). Kounye a, pi gwo faktè ekspoze a fliyò (F) se dlo pou bwè, epi konsantrasyon F rekòmande nan dlo pou bwè pa Òganizasyon Mondyal Lasante a mwens pase 1.5 mg/L (Gid pou Kalite Dlo Bwè, 2017). Prèv epidemyolojik sijere ke pi wo pase konsantrasyon sa a ogmante risk pou fliyòz dantè, ak konsantrasyon an ogmante ap ogmante risk pou fliyòz skelèt (Gid pou Kalite Dlo Potab, 2017; National Research Council, 2006). Ekspozisyon alontèm nan gwo konsantrasyon fliyò ka ogmante absòpsyon fliyò nan kò a atravè respiratwa a.

ak aparèy dijestif yo. Twòp konsomasyon nan F ka lakòz domaj nan ògàn zo ak ki pa zo nan kò a. Se domaj tisi mou deyò zo a jeneralman refere yo kòm domaj ki pa zo. Kounye a, li te jwenn ke domaj nan tisi ki pa zo ki te koze pa F enplike nan aparèy dijestif la, fwa,ren, sèvo, elatriye (Jha et al., 2011; Perumal et al., 2013).

Laren, prensipal ògàn ekskretè kò a, ki responsab metabolis sibstans toksik ak toksin ekzojèn nan kò a. Etid yo rapòte ke anviwon 50-80 pousan fliyò kò a enjere yo filtre ak reabsòbe pa kò a.ren, ak fliyò ki rete a akimile nan lòt tisi ak ògàn (Chen et al., 2013; Dharmaratne, 2019). Anpil kalite literati te demontre ke 50 ak 100 mg / LF ekspoze ka mennen nan elajisman nan kavite kapsil ren an, atrofi nanrentubules, aranjman iregilye nan selil papilè, rediksyon nan lumèn nan, sa ki lakòzapoptoznanrenselil ak deteryorasyon fonksyon byochimik tankou kreyatinin (CRE), asid urik (UA),kalsyòm(Ca), ak fosfò (P) (Song et al., 2014; HW Wang et al., 2020; Wei et al., 2018a).

Apoptoz, yon kalite lanmò selil kontwole pa jèn, ki se divize an andojènapoptozak ekzojènapoptoz. Rapò ki sot pase yo te endike saapoptozki te koze pa segondè F sitou gen ladan mitokondri-medyatè, retikul la andoplasmik se estrès-medyatè, ak lanmò reseptè-medyatè chemen (Wei et al., 2018a). Eksperyans anvan yo nan gwoup nou an te fè remake ke NaF pwovoke zo ak fwaapoptozatravè chemen an retikul endoplasmik entraselilè (ER) ak chemen mitokondriyo (Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019). Anplis de sa, etid yo te montre tou ke chemen an mitokondriyo enplike nan NaF-induitapoptoznan souritren(Wei et al., 2018b). Sepandan, pa gen okenn etid sistematik sou chemen an reseptè lanmò medyatè nan F-induitrenapoptoz. Chemen reseptè lanmò a domine chak etap nan ekzojènapoptoz, ki gen ladan wout reseptè lanmò sifas selil Fas (FAS), chemen faktè necrosis timè (TNF) ak chemen ki gen rapò ak TNF.apoptoz-inducing ligand (TRAIL) chemen (Grunert et al., 2012; Lu et al., 2017; Wang and Su, 2018). Chemen FAS se sistèm transdiksyon siyal primitif ki medyatèapoptoz. FAS gen karakteristik sa yo nan yon reseptè manbràn epi li fòme yon trimer apre obligatwa ak ligand FAS la (FAS-L). Lè sa a, domèn espesifik trimer la mare ak domèn lanmò (DD) nan molekil korespondan connexin FAS-asosye pwoteyin domèn lanmò (FADD) pou fòme yon konplèks siyal lanmò (DISC) (Wang and Su, 2018). Nan pwosesis transdiksyon siyal byolojik sa a, FADD ka aktive Caspase 8 ak fanmi Caspase an menm tan, epi evantyèlman mennen nanapoptozatravè patisipasyon Caspase 3 ak efè poly ADP-ribose polymerase (PARP) (Kischkel et al., 2000; Meynier and Rieux-Laucat, 2019). Dènye etid yo te montre ke chemen FAS la medyatèapoptoznan selil T ak pandanrenechèk pwovoke pa cisplatin (Djiadeu et al., 2017; Linkermann et al., 2011). Anplis de sa, yon etid te rapòte tou ke NaF pwovokeapoptoznan sourit atravè chemen FAS la (Sun et al., 2017). TRAIL se yon sitokin rekonèt nan superfami TNF. Li mare nan reseptè agonist omològ li yo, sètadi reseptè lanmò (DR4 ak DR5). Gen yon DD nan rejyon selilè li yo. DD a nesesè pou rekritman adaptive pwoteyin FADD. FADD nan vire pwovoke liberasyon Caspases nan sitoplasm la, aktive Caspase 3 fende PARP, epi anpeche potansyèl reparasyon ADN li yo, sa ki lakòzapoptoz(Bodmer et al., 2000; Michael, 2018). Li te enplike ke chemen an TRAIL/DR5 patisipe nan NaF-induitapoptoznan sourit (Song et al., 2021). Osteoprotegerin (OPG) se yon reseptè soluble gratis ki manke yon domèn transmembran. Li ka anpeche TRAIL-medyatèapoptozpa anpeche lyezon TRAIL ak lòt reseptè lanmò (Duiker et al., 2006; Kiraz et al., 2016; Micheau, 2018). Liaison TNF ak reseptè TNF (TNF-R1) ka aktive rekritman TNFR-asosye pwoteyin domèn lanmò (TRADD) atravè DD li yo. Apre sa, TRADD reyaji ak FADD, ki mennen ale nan rekritman nan pro-Caspase 8, ki se cleaved nan aktif Caspase 8 pa anzim proteolitik. Lè sa a, Caspase 8 aktive Caspase 3, ki responsab selil laapoptoz(Kiraz et al., 2016; Sedger ak McDermott, 2014). Yo rapòte ke NaF pwovoke epatositapoptoznan sourit atravè chemen siyal TNF-R1 (Lu et al., 2017)

Kalsyòmjwe divès wòl nan konpozisyon zo ak dan, epi li ka kontwole transmisyon nè ak lage materyèl (Cao et al., 2016), patisipe nan sistèm sistemik.kalsyòmomeyostaz (Carmeliet et al., 2003; Yang et al., 2016), chanje pèmeyabilite manbràn (Lappe et al., 2017), aktive sekresyon nan yon varyete de anzim ak òmòn (Kim et al., 2012), elatriye. Anpil etid anvan yo te jwenn ke F ak Ca gen yon efè antagonis nan byoloji (Dure-Smith et al., 1996; Nobrega et al., 2019). Yon fwa kò a absòbe F, li pral antre nan san an pou fòme presipitè CaF2 ki pa ka fonn. Si rezèv dyetetik Ca a pa ase epi san Ca pa rive nan nivo akòz, pral gen chanjman patolojik tankou ipokalsemi ak osteoliz, kidonk yon sipleman dyetetik Ca jwe yon wòl enpòtan nan anpeche ak amelyore fliyòz (Dure-Smith et al. al., 1996; Li et al., 2021; Yang et al., 2021). Gwoup nou an te konfime ke dyetetikkalsyòmka soulaje aapoptoznan zo ak fwa atravè chemen siyal PI3K-AKT, chemen ER, ak chemen mitokondriyo (Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019; Yang et al., 2021). Yo nan lòd yo plis pwouve si wi ou nonKalsyòmdiminye nefrotoksisite F nan reseptè lanmò medyatè aapoptozchemen, nou te etabli yon modèl rat nan rejim alimantè ki wo fliyòkalsyòmak evalye arenendèks aksidan, degre nanapoptoz, ak chanjman yo nan ekspresyon jèn makè ak pwoteyin nan reseptè lanmò a medyatèapoptozchemen.

Materyèl ak metòd

Pwodwi chimik ak enstriman

Dlo distile te prepare pa sistèm pirifikasyon dlo Heal Force (Shanghai, Lachin). Sigma-Aldrich (Shanghai, Lachin) te bay tanpon liz iminopresipasyon radyo (RIPA) ak fliyò sodyòm (NaF). 10 pousan formalin, Glycine, sodyòm dodecyl sulfat (SDS), TRIS, Phenylmethylsulfonyl fliyò (PMSF), CaCO3, nitrocellulose (NC) manbràn, Bicinchoninic Acid (BCA) Twous ak twous tach ematoksilin-eosin (H&E) yo te jwenn nan Solarbio Technology Co. ., Ltd (Beijing, Lachin). Trizol reyaktif te akeri nan Takara Byolojik Jeni Konpayi (Dalian, Lachin). CRE, UA, san urey azòt (BUN), mayezyòm (Mg), P, ak potasyòm (K) twous yo te achte nan Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, Lachin). Nan sitapoptoztwous deteksyon, FAS Rabbit Polyclonal antibody (BA0484), ak FAS-L Rabbit Polyclonal antibody (PB0042) te achte nan men Boster Biotechnology (Wuhan, Lachin). -actin Rabbit Polyclonal Antibody (20536-1-AP), FADD Rabbit Polyclonal Antibody ({14906-1-AP), Caspase 8 Rabbit Polyclonal Antibody ({13423-1-AP), Caspase 3 Rabbit Polyclonal Antibody ({{9}) }}AP), ak HRPconjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG (H plis L) (SA00001–2) yo te akeri nan Proteintech Group (Wuhan, Lachin). TRAL Rabbit Polyclonal Antibody (bs-1214R), TNF alpha Rabbit Polyclonal Antibody (bs2081R), PARP Rabbit Polyclonal Antibody (bs-55164R) te achte nan men Bioss (Beijing, Lachin). Elektwochimik luminesans (ECL) ak 3,3′-diaminobenzidine (DAB) te achte nan men KeyGen Biotech (Jiangsu, Lachin). Promega Biotechnology (Beijing, Lachin) te bay PrimeScript® RT Master Mix ak SYBR® Premix Ex Taq™ II Twous.

Bèt ak tretman

Yo te jwenn karant {{0}}semèn rat gason Sprague-Dawley (SD) ki an sante (120 ± 20 g) nan Sant Eksperimantal Animal nan Shanxi Medical University (Shanxi, Lachin). Rat yo te aklimate pou yon semèn, owaza divize an kat gwoup (10 rat pou chak gwoup): Gwoup kontwòl (C), gwoup NaF (F), NaF plis 0.5 pousan gwoup CaCO3 (F plis 0.5 pousan Ca), NaF plis 1 pousan. Gwoup CaCO3 (F plis 1 pousanKalsyòm) ak trete kòm Tablo 1. Tout rat yo te loje nan kaj plastik nan 22-25 ◦C (55 ± 5 pousan imidite, 12 h sik limyè / fè nwa), rejim alimantè ak dlo pou bwè yo lib aksesib.

Apre 17 semèn nan elve, rat yo te fè jèn pou 24 èdtan, epi dlo te gratis pou bwè. Lè sa a, rat yo te anestezi ak pentobarbital sodyòm ak sakrifye pa dislokasyon nan kòl matris apre yo fin kolekte san an nan glob je yo. Tib ki te gen sodyòm eparin antikoagulan te kolekte kèk san pou tès BUN la. Yo te mete yon pati nan san an nan tib tès komen, mete yo nan tanperati chanm pou 2 èdtan, ak Lè sa a, santrifuje nan 3000 rpm / min pou 10 min separe serom. Yo te separe serik la pou tès CRE, UA, Mg, P, K, ak F. Uit echantiyon nanrensoti nan chak gwoup yo te chwazi owaza epi byen vit jele nan nitwojèn likid, ak Lè sa a, estoke nan - 80 ◦C pou qRT-PCR ak eksperyans Western blotting. Lòt echantiyon yo genyen nanrenyo te fikse nan 10 pousan formalin pou egzamen istopatolojik ak tèminal deoxynucleotidyl transferase-medyatè dUTP nick end labeling (TUNEL) eksperyans. Tout operasyon eksperimantal ki gen rapò ak bèt yo te estrikteman aplike anba règleman yo nan Enstitisyon an Swen Animal ak Komite a Itilizasyon nan Shanxi Agricultural University, Shanxi, Lachin.

renkoefisyan

Yo te peze rat yo an premye; Lè sa a, larentisi yo te retire epi peze. Larenkoyefisyan yo te jwenn pa fòmil sa a.

renkoyefisyan=[renpwa mouye (g) / pwa kò (g)] ×100 pousan.

Egzamen istopatolojik

renespesimèn yo te entegre nan parafine. Seksyon (5 μm epesè) nan larente tache pa H&E. Lè sa a, yo te obsève glisad yo lè l sèvi avèk yon mikwoskòp limyè (Olympus, Tokyo, Japon). Gravite a nanrenblesi te jije pa nòt istopatolojik.renblesi Echafodaj ki defini kòm larencorpuscles ke yo te atrofye ak defòme, larenkavite kapsil elaji, larentubul ki fòme yon jete, ak selil epitelyal yo tonbe. Nan 200 fwa agrandisman, kritè sa yo te itilize pou evalye degre blesi fwa a. 1: 0-25 pousan domaj; 2: 25-50 pousan domaj; 3: 50-75 pousan domaj; 4: 75-100 pousan domaj (Baranova et al., 2016).

Detèminasyon nanren-endikatè ki gen rapò

Nivo F te mezire pa yon elektwòd F ion espesifik (Quadri et al., 2018). Nivo CRE, UA, BUN, Mg, P, ak K yo te mezire lè yo itilize twous ki disponib nan komès. Tout pwosedi ki gen rapò yo te fèt dapre enstriksyon manifakti a.

Deteksyon nanapoptoznivo pa TUNEL

Yo nan lòd yo quantifier laapoptoznanrenselil yo, yo te fè analiz eksperimantal lè l sèvi avèk yon situapoptoztwous deteksyon. Larenseksyon yo te deparafinize ak Lè sa a, sibi dijesyon lè l sèvi avèk Proteinase K. Tèminal Deoxynucleotidyl Transferase ka make dUTP ki make digoxin (DIG-dUTP) nan fen 3′-OH, ak DIG-dUTP mare nan pwen an ADN apre yo fin reyaji ak biomarker anti la. -fouye-Biotin. Konbine ak DAB te ajoute nan ekspozisyon. Pou vizyalize

tout nwayo yo, seksyon yo te counterstained ak ematoksilin. Siyal mawon nwa yo endike selil pozitif ak ble endike selil ki pa reponn. Laapoptozendèks yo te kalkile dapre fòmil sa a.

Pwopòsyon selil apoptotik=(kantite selil apoptotik pou chak ne / kantite total selil pou chak ne) ×100 pousan.

Quantitative PCR an tan reyèl (qRT-PCR)

RNA total soti nanrente ekstrè lè l sèvi avèk reyaktif Trizol. Nou itilize yon espektrofotomèt ND{{0}} (nano-gout, USA) ak elektwoforèz jèl agaroz pou tcheke bon jan kalite ak kantite RNA a. Transkripsyon ranvèse (RT) te fèt sou 500 ng total de RNA atravè itilizasyon PrimeScript® RT Master Mix. Primè espesifik pou -actin ak FAS, TRAIL, TNF, ak lòt jèn yo te fèt pa Primer Premier 7.0 lojisyèl (Tablo 2) ak sentèz pa Sangon Biotech (Shanghai, Lachin). Yo te itilize sistèm PCR an tan reyèl Quantstudio 7 flex (thermo-fisher, USA) ak SYBR® Premix Ex Taq™ II Twous pou RT-PCR. Volim reyaksyon PCR la te 20 μL, ak kondisyon RT-PCR yo te: 95 ◦C 10

min, 40 sik 95 ◦C 15 s, 55 ◦C 30 s, 72 ◦C 30 s, epi finalman yon sik 95 ◦C 15 s, 60 ◦C 15 s, 95 ◦C 15 s. Tout reyaksyon yo te repete twa fwa. Yo te itilize metòd relatif 2-ΔΔCt pou kalkile nivo ekspresyon mRNA relatif yo, epi yo te itilize -actin kòm yon kalibratè. Nan pwosesis la, diferans lan efikasite se mwens pase 5 pousan.

Ekstraksyon total de pwoteyin ak analiz Western blotting

Larentisi yo te lave ak PBS, seche ak papye filtre, epi dekonpoze nan RIPA lysis (ki gen PMSF), nan 12, 000 rpm / min, 4.^◦C pou 10 min. Konsantrasyon pwoteyin yo te detèmine lè w itilize Twous Bicinchoninic Acid (BCA) (Solarbio Science & Technology, Beijing, Lachin). Te echantiyon pwoteyin 35 ng avèk siksè ekstrè epi separe sou 8 pousan jèl SDS-polyacrylamid pa elektwoforèz. Pwoteyin sib la te transfere nan yon manbràn NC, epi manbràn NC a te bloke ak 5 pousan lèt ki pa gen anpil grès nan tanperati chanm pou 2 èdtan. Apre sa, yo te enkube manbràn NC a ak antikò prensipal -actin (1:1000), TRAIL (1:500), FAS (1:500), FAS-L (1:100), TNF (1:500), FADD (1:500), Caspase 8 (1:500), Caspase 3 (1:500) ak PARP (1:1000) nan 4 degre lannwit lan. Apre lave 3 fwa ak PBST, manbràn NC a te enkube ak HRP-konjige antikò kabrit segondè anti-lapen IgG (1:2000) nan tanperati chanm pou 2 èdtan. ECL te itilize pou visualiser bann protéines sib yo. Lojisyèl AlphaView (vèsyon: 3.2.2.0) te kalkile dansite optik sou sistèm FluorChem Q (Alpha Innotech, CA, USA).

Analiz estatistik

Yo te itilize lojisyèl GraphPadPrism{{0}} pou òganize ak analize done eksperimantal yo, epi chak done te reprezante pa mwayen ± SEM. Siyifikasyon diferans ki genyen ant mwayen yo te detèmine pa analiz divèjans (ANOVA) ki te swiv pa tès Tukey a ak P <0.05 konsidere="" kòm="">

Rezilta yo

Chanjman nanrenkoyefisyan ak endikatè fonksyon byochimik

Larenkoyefisyan ak nivo F, CRE, BUN, UA, Mg, P, K yo te montre nan Fig. 1. Nan konpare ak gwoup C a, la.renkoyefisyan te siyifikativman diminye nan gwoup F la (p < 0.05).="" sepandan,="" koyefisyan="" ren="" nan="" f="" a="" plis="" 1="">Kalsyòmgwoup la te montre yon ogmantasyon enpòtan an konparezon ak gwoup F a (p <{{0}}.05). nivo="" f="" nan="" gwoup="" f="" la="" te="" pi="" wo="" pase="" nan="" gwoup="" c="" a="" (p=""><0.001). enteresan,="" konpare="" ak="" gwoup="" f="" la,="" nivo="" f="" nan="" gwoup="" f="" plis="" 1="" pousan="" ca="" te="" siyifikativman="" diminye="" (p=""><>

CRE, BUN, ak UA yo te evalye pou reflete degre nanrendomaj ak chanjman fonksyonèl. Nivo CRE, BUN, ak UA yo te ogmante klèman nan gwoup F la konpare ak sa yo nan gwoup C a (p <{0}}.05), sepandan,="" parapò="" ak="" gwoup="" f="" a,="" twa="" endikatè="" ki="" anwo="" yo="" te="" miyò.="" diminye="" nan="" f="" a="" plis="" 1="">Kalsyòmgwoup (p < 0.05).="" mg,="" p="" ak="" k="" te="" endikatè="" elektwolit="" yo="" ki="" gen="" rapò="">renfonksyon. Konpare ak gwoup C a, nivo Mg nan sewòm te siyifikativman diminye, nivo P ak K yo te ogmante dramatikman nan gwoup F (p <{0}}.05). men,="" ajoute="" 1="">kalsyòmnan rejim alimantè a miyò ogmante nivo serik Mg yo pa 15.3 pousan (p < 0.0="" 5)="" ak="" ansibleman="" redwi="" nivo="" serik="" p="" yo="" pa="" 16.9="" pousan="" (p="">< 0.05).="" te="" kontni="" an="" nan="" serom="" k="" montre="" yon="" tandans="" anba="" ki="" pa="" gen="" okenn="" siyifikasyon="" apre="" sipleman="" 1="" pousan="" tretman="">

Chanjman nanrenmòfoloji

Chanjman mòfolojik yo nanrentisi yo te egzamine pa H & E (figi 2I-Ⅳ, ⅰ-ⅳ). Nan gwoup C a,renselil Echafodaj yo te ranje konpak, mòfoloji a te regilye, ak mòfoloji nan glomeruli te entak. Sepandan, limit ki genyen ant selil yo te klè, larencorpuscles yo te atrofie ak defòme, larenkavite kapsil elaji, larentubul yo te fòme yon jete, ak selil epitelyal yo te vin detache nan gwoup F la. An konparezon ak gwoup la F, ak ogmantasyon nanKalsyòmkonsantrasyon, aranjman nanrenselil piti piti vin pi òdone, mòfoloji a nanrencorpuscles piti piti refè, ak degre nan aksidan te piti piti soulaje. Anplis de sa, nou evalye domaj la lè l sèvi avèk larennòt (figi 2Ⅴ). Nòt gwoup F la te siyifikativman pi wo pase gwoup C a (p < 0.01);="" poutan,="" nòt="" nan="" f="" plis="" 1="">Kalsyòmgwoup la te diminye anpil lè yo konpare ak gwoup F la (p < 0.05).

TUNEL detekterenselilapoptoz

Nou te fè tès TUNEL la pou detekte ak analize si wi ou nonrenselil yo te sibiapoptoznan etid sa a (figi 3I-Ⅳ, ⅰ-ⅳ).rentisi nan gwoup C yo te byen ranje, ak mwens selil apoptotik (4.67 ± 1.15 pousan). Gwoup F la te montre yon gwo kantite TUNEL-pozitifrenselil epitelyal tubulaires (48.17 ± 3.94 pousan). Kontrèman, F a plis 1 pousanKalsyòmgwoup parèt yon diminisyon dramatik nan kantite selil TUNEL-pozitif (28.83 ± 4.81 pousan) (Fig. 3Ⅴ).

EfèKalsyòmsou chanjman F-pwovoke nan jèn ki gen rapò ak chemen reseptè lanmò

Nivo ekspresyon mRNA relatif yo nan faktè en ki gen rapò ak reseptè lanmò a medyatèapoptozchemen (TRAIL, DR5, TNF, TNFR1, TNF-R2, FAS, FAS-L, OPG) te revele nan Figi 4a. Parapò ak gwoup C a, nivo ekspresyon mRNA TRAIL, DR5, TNF, TNF-R1, TNFR2, FAS, ak FAS-L te miyò amelyore nan rat F-trete (p <0.01). kontrèman,="" ekspresyon="" mrna="" relatif="" trail,="" tnf,="" tnf-r2,="" fas,="" ak="" fas-l="" yo="" te="" redwi="" anpil="" nan="" f="" plis="" 1="">Kalsyòmgwoup konpare ak gwoup F la (p < {{0}}.05).="" an="" konparezon="" ak="" gwoup="" c="" a,="" yo="" te="" obsève="" yon="" diminisyon="" evidan="" nan="" nivo="" ekspresyon="" mrna="" opg="" nan="" gwoup="" f="" la="" (p=""><0.01). sepandan,="" relatif="" nan="" gwoup="" la="" f,="" opg="" nan="" f="" plis="">Kalsyòmgwoup yo te ogmante. Faktè en FADD, TRADD, Caspase 8, Caspase 3, ak PARP relatif nivo ekspresyon mRNA yo te montre nan Figi 4b. Ekspresyon pwoteyin FADD, TRADD, Caspase 8, Caspase 3, ak PARP te evidamman amelyore nan gwoup F la konpare ak gwoup C a (p < 0.01),="" men="" yo="" te="" evidamman="" redwi="" nan="" f="" plis="">Kalsyòmgwoup yo, an konparezon ak gwoup F (p < 0.05).

EfèKalsyòmsou chanjman F-induit nanapoptoz-pwoteyin ki gen rapò

Ekspresyon pwoteyin TRAIL, FAS, FAS-L, TNF, FADD, Caspase 8, Caspase 3, ak PARP te detekte pa Western blot (figi 5a, b). Konpare ak gwoup C a, ekspresyon pwoteyin TRAIL, FAS, FAS-L, TNF, FADD, Caspase 8, Caspase 3, ak PARP nan gwoup F yo te ansibleman elve (p < 0.01).="" ekspresyon="" pwoteyin="" yo="" nan="" tout="" faktè="" ki="" anwo="" yo="" te="" miyò="" diminye="" nan="" f="" plis="" 1="">Kalsyòmgwoup lè yo konpare ak gwoup F la (p < 0.05).

Diskisyon

Prèv ki pi resan yo pwouve ke F ka lakòz blesi nan tisi mou, ak degre nan domaj F depann sou konsantrasyon nan F, tan ekspoze, ak kalite ògàn (Wei et al., 2019). Nan etid sa a, yo te itilize 100 mg/L NaF pou 17 semèn pou etabli yon modèl bèt dlo pou bwè anba NaF ekspoze. Se dòz la nan NaF chwazi dapre degre nan polisyon nan F nan anviwònman an ak faktè yo ensèten nan diferan espès. Etandone ke konsantrasyon natirèl F- ki mezire nan dlo anba tè lokal yo se apeprè 4.5 mg/L, dlo distile ak 100 mg/L NaF yo itilize nan etid sa a (konsantrasyon F- se sou 45 mg/L) te kalkile dapre faktè ensèten pou ekstrapolasyon bèt-a-moun nan 10 (Gid pou Kalite Dlo Potab, 2017; Mukherjee and Singh, 2021; Wen et al., 2013; Zhang et al., 2020). Etid bonè yo te jwenn ke dyetetikkalsyòmka afekte absòpsyon fliyò, ankouraje eskresyon fliyò nan kò a, diminye pousantaj absòpsyon fliyò, epi konsa diminye toksisite F (Harrison et al., 1984; Larsen et al., 1981). Dènye etid eksperimantal nou yo te montre ke Ca soulaje zo ak blesi fwa F-pwovoke pa anpeche chemen intrinsèque nan.apoptoz(Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019). Sepandan, byen lwen tèlman, rechèch la sou efè pwoteksyon Ca sou nefrotoksisite F-induit ak mekanis ki gen rapò li yo san parèy. Isit la, nou rapòte ke Ca soulaje F-induitrendomaj. Anplis de sa, nou te jwenn tou ke Ca ranvèse F-induitrenselilapoptozatravè reseptè lanmò a medyatèapoptozchemen (FAS/FASL, TNFR/TNF, DR5/TRAIL chemen). Akimilasyon alontèm F nanrenka mennen nan estrikti tisi ak domaj fonksyonèl. Nan etid sa a, nou te jwenn ke ekspoze NaF ki te kozerenselilapoptoznan rat, akonpaye pa atrofi glomerulèr ak deformation,renelaji kavite kapsil,rentubul ki fòme jete, ak selil epitelyal yo tonbe. Sepandan,rendomaj te siyifikativman soulaje apre sipleman nan 1 pousan Ca. Rezilta sa yo te sanble ak rezilta yo te jwenn nan rapò anvan yo (Cao et al., 2015; HW Wang et al., 2020).

CRE se metabolit nan misk, UA se pwodwi final la nan metabolis purin, ak BUN se pwodwi prensipal la nan metabolis pwoteyin kò a, ki se elimine pa filtraj glomerulèr epi anjeneral yo itilize yo detekte.renfonksyon (Myers et al., 2006; HW Wang et al., 2020). Sondaj byochimik nan rejyon F segondè a te montre ke pousantaj filtraj glomerulè yo te siyifikativman redwi, ak F, UA, ak BUN chanje anpil (Malin et al., 2019). Tès bèt yo te montre ke serik CRE,Kalsyòm, ak konsantrasyon P yo te siyifikativman redwi nan sourit ekspoze a 100 mg / L NaF, sijere ke F detounen.renfonksyon osi byen ke Ca ak P metabolis (HW Wang et al., 2020). F-induced nephrotoxicity gen rapò akrenmalfonksyònman. Kilèrenfonksyon deteryore, eskresyon nan F nan kò a redwi, ki mennen nan akimilasyon twòp nan fliyò nan la.renak agrave toksisite F (Kido et al., 2017). Lè arenyo gen pwoblèm grav, la

eskresyon F nan pipi a diminye, epi konsantrasyon F nan serik ogmante plis (Dharmaratne, 2019). Nan etid sa a, nou te obsève ke nivo BUN ak serik CRE, UA, P, K nan rat trete ak 100 mg/L NaF te ogmante anpil, ki sijere ke gwo ekspoze F te lakòz chanjman nan etid sa a.renendikatè byochimik nan rat ak mennen nanrenensifizans. Anplis de sa, nou menm tou nou fè remake ke endikatè yo divès kalite larengen tandans nòmal apreKalsyòmsipleman. Li montre ke Ca (sitou 1 pousanKalsyòm) gen yon efè soulajman enpòtan sou F-induitrendomaj nan rat.

Cistancheka ede akrendomaj.

Apoptozse yon lanmò selil otonòm ak lòd kontwole pa jèn, ki karakterize pa degradasyon ADN san liz selil evidan. Etid sa a te obsève ke fluoroz ki te kozerenselilapoptoznan rat. FAS jwe yon gwo wòl nan ensidan an nanapoptozak divès maladi. Literati ki sot pase yo te revele ke FAS medyatèapoptoznanrenpwovoke pa ischemi-reperfusion ak lekosit imenapoptozpwovoke pa N-nitrosodimethylamine (Iwaniuk et al., 2019; Xu

et al., 2019). Lè FAS ak FAS-L konbine pou fòme yon trimer, siyal pro-apoptotik la deklanche. Yon etid resan montre ke F pwovoke selilapoptozatravè chemen FAS/FAS-L (Xu et al., 2011). Nan etid sa a, F siyifikativman ogmante mRNA ak ekspresyon pwoteyin nan FAS ak FAS-L nanren. Règleman nan nivo FAS ak FAS-L sijere ke chemen apoptotik ki gen rapò ak FAS/FAS-L ka patisipe nan F-induit.apoptoz. FAS/FAS-L rekritman trimer nan FADD mennen nan klivaj la nan Pro-Caspase 8 yo pwodwi aktif Caspase 8, ki an vire aktive Caspase 3 ak Lè sa a, mennen nanapoptoz(Li et al., 2011; Xu et al., 2011). Etid sa a verifye ke 100 mg/L NaF pwovokeapoptoznan ratrenatravè chemen FAS/FAS-L. Rezilta ki pi enpòtan an se ke sipleman Ca dyetetik atténue laapoptoz-inducing efè nan F, ki se atribiye a desann-règleman nan aktivasyon FAS / FAS-L ak aktivasyon segondè nan Caspases.

TNF se yon sitokin pleyotropik ki patisipe nan yon pakèt repons selilè, ki gen ladan diferansyasyon, pwopagasyon, enflamasyon, ak lanmò selil. Siyal TNF la deklanche tou deapoptozak chemen anti-apoptotik. Anpil kalite literati te rapòte ke TNF domine lipopolysaccharide-induitrendomaj ak cisplatin-induit egirenblesi (Lee et al., 2016; Li et al., 2018). TNF mare nan TNF-R1, DD li yo rekrite TRADD, ak Lè sa a, TRADD reyaji ak FADD, ki mennen nan fòmasyon nan DISK la (Kiraz et al., 2016; Sun et al., 2003). Etid yo te revele ke F ka pwovoke fwa, newòn, akrenlekositapoptozatravè chemen siyal TNF (Lu et al., 2017; Singh et al., 2017; Yan et al., 2016). Menm jan ak rezilta rapò sa yo, ekspresyon relatif TNF, TNF-R1, TNF-R2, ak TRADD nan gwoup F yo te ogmante anpil nan eksperyans sa a. Kontrèman, ekspresyon jèn sa yo diminye anpil apre 1 pousanKalsyòmsipleman, sijere entèvansyon an nanKalsyòmnan chemen TNF la.

TRAIL patisipe nan règleman an nanapoptoz, pwopagasyon, repons iminitè-enflamatwa, elatriye. Kounye a, yo kwè ke TRAIL gen rapò ak ensidan an ak pronostikrenmaladi (Candido, 2014). Plis ak plis literati te konfime ke TRAIL kontwole aapoptoznanrenselil epitelyal tubulaires nan glomerulonefrit ki asosye ak HBV akrenapoptoznan Uromodulin ki asosyerenmaladi (Johnson et al., 2017; Yang et al., 2018). Anplis de sa, yon etid rapòte ke ekspresyon TRAIL te jeneralman chanje pandan omeyostazi a ak divès kaliterenblesi (Devarapu et al., 2017). TRAIL tache ak reseptè lanmò DR5 a epi li rekrite FADD atravè entèraksyon DD a, epi answit mare ak pro-Caspase 8 atravè domèn efè lanmò ki egziste nan FADD pou fòme yon DISK (Yuan et al., 2018). Etid sa a te montre ke ekspresyon TRAIL ak DR5 te siyifikativman ogmante nan gwoup F la. Apre konplete akKalsyòm, ekspresyon TRAIL ak DR5 te anpeche. Li sijere keKalsyòmanpeche chemen TRAIL la pou diminye F-induitapoptoz.

Konklizyon

100 mg/L NaF ekspoze aktive lanmò reseptè-medyatèapoptozchemen (FAS/FASL, TNFR/TNF, DR5/TRAIL chemen) epi answit pwovokerenselilapoptoznan rat, sa ki lakòzrenmaladi metabolik akrenensifizans, sa ki lakòz larencorpuscles yo te atrofie ak defòme, larenkavite kapsil elaji, larentubules te fòme yon jete. Sepandan, adisyon a nan 1 pousanKalsyòmnan rejim alimantè a diminye kontni an fliyò san, plis soulaje larenmaladi metabolik akrenensifizans atravè reseptè a lanmò-medyatè chemen, ak siyifikativman redwi arenblesi (konpozan Fig. 6).

Referans

Sous la se pa Haojie Li, Kolèj Medsin Veterinè, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi, PR Lachin ak elatriye.